CC BY
18
УДК: 611.12-034:591.33-092.9
Шаторна В. Ф., Гарець В. /., Колосова I. /., Кононова I. /., Слесаренко О. Г.
М0РФ0ФУНКЦ10НАЛЫН1 ЗМ1НИ В яечНИКАХ ЩУР1В П1Д ВПЛИВОМ АЦЕТАТУ СВИНЦЮ В КОМБ1НАЦМ 3 ЦИТРАТОМ СР1БЛА
ДЗ «Днтропетровська медична акадел/пя МОЗ Укра'Гни» (м. Днтро)
Доогмдження виконано у рамках науково-дослщ-но! роботи кафедри медичноТбюлоги, фармакогнози та ботанки Державного закладу «Днтропетровська медична академ1я МОЗ Укра'ши» «Бюлопчнм осно-ви морфогенезу оргаыв та тканин пщ впливом на-нометал1в в експериментЬ» (№ державно! реестраци 011511004879).
Вступ. Останы десятир1ччя характеризуются зростанням депопуляци населения, що обумовле-но як соц1альними так \ еколопчними факторами [1,7,8,10]. Так, у промислово розвиненому Дыпро-петровському \ багатьох ¡нших репонах Укра'ши тиск антропогенних чинниюв навколишнього середови-ща досяг критичного р1вня [11,14,16]. У числ1 сполук, що е забруднювачами довктля, одне з чтьних мюць посщае свинець та його сполуки, яю е токсинами полггропно! та полтатогенетично! дм [2,4]. Висока токсичнють цих сполук визначаеться тим, що вони можуть депонуватись в оргаызм1 та призводити до дефщиту есенц1альних елеметтв, замщуючи 1х в металовмюних бтках [9]. Свинець та його сполуки вражають ендокринну, ¡мунну, сечовидтьну, травну, нервову, серцево-судинну, дихальну та репродук-тивну системи, генетичний апарат клггини, проявля-ють г"онадотоксичну \ ембрютоксичну дю [5,6].
Стан репродуктивного здоров'я населения е своерщним ¡ндикатором еколопчно! ситуаци мюця проживания, тому в умовах прогресування техногенного забруднення довктля одним з актуаль-них питань е вивчення особливостей впливу солей важких метал1в на репродуктивну систему людини \ тварин, осктьки вщомо, що д1я солей свинцю може призводити до мертвонароджень, викидыв, структурно* функцюнальних перебудов оргаыв ж1ночо! статево! системи [3,12,13,15]. Малодоогмдженим е вплив свинцю в концентрац1ях, як1 ран1ше вважалися безпечними, проте едаы, що вони збтьшують ризик пренатального \ постнатального ураження оргаыз-му, тому це потребуе пошуку ефективних засоб1в профтактики негативно! д11 ксеноб1отик1в, особливо в умовах промислових мют. Одним ¡з перспективних напрямк1в е досл1дження наноформ м1кроелеметтв, як1 застосовуються у фармацевтичнм та техн1чн1й промисловост1, стьському господарств1 та сучасн1й медицин!. Серед усього р!зноман1ття елемент1в най-б1льший ¡нтерес в практичнм медицин! викликають наночастинки ср!бла. Ср1бло мае широкий спектр антибактер!альних, антим!котичних та ¡муномоду-люючих ефекпв, широко використовуеться в х1рур-пчнм практиц! [13].
Враховуючи специф!ку демограф!чно! ситуац!! в сучасн!й Укра!'н1, несприятливу тенденцю до зб1ль-шення частоти безплщдя та захворювань репродук-
тивно! системи стае очевидною необх!дн!сть погли-бленого досл!дження морфофункц!онального стану яечниюв як кпючово! ланки uiei системи в умовах дм важких метал ¡в та виявлення !х антагон!ст!в. Цим визначаеться мета, актуальнють i перспективн!сть да-ного наукового дослщження.
Мета досл1дження: з'ясувати законом!рност! морфофункц!онального стану яечник!в щур1в та до-слщити !х ремоделювання з визначенням змш пере-6iry загального ембрюгенезу за умов ентерального введения ацетату свинцю ¡зольовано i в комплекс! з цитратом ср1бла, отриманого з використанням на-нотехнолог!й.
Об'ект i методи дослщжень. Експерименталь-Hi досл!дження проведен! на 120 бтих статевозр!лих щурах-самках лiнiV Wistar (розплщник «Дал!-2001» MicTO Ки!в, Укра!на). Утримання експериментальних тварин здмснювалося вщповщно до санггарно- ririe-н!чних норм BiBapiio ДЗ «Дн!пропетровська медична академ!я МОЗ Укра'ши» (температура повггря 22 ± 2 °С, св!тлий /темний цикл 12/12 годин, !жа та пиття ad libitum). Yci дослщи проводили у вщповщност! до законодавства Укра!ни (Закон Укра'ши № 3447-IV 2006), правил Свропейсько! Конвенци щодо захис-ту хребетних тварин, яю використовуються в експериментальних дослщженнях та з ¡ншою науковою метою (Council of Europe, Strasbourg, 1986). KoMici-ею з бюетики ДЗ «Дн!пропетровська медична ака-дем!я МОЗ Укра!ни» (протокол № 6 вщ 16.09.2016 р.) встановлено, що проведен! науков! досл!дження експериментальних тварин вщповщають етичним вимогам.
Щури е оптимальним об'ектом експерименталь-ного дослщження як пол!естричн! тварини з низьким р!внем спонтанних вад розвитку, численним послг дом, довжиною естрального циклу 4-5 д\б, мають под!бну до людини будову ж!ночих статевих залоз, процес фол!кулогенезу та законом!рност! овар!аль-ного циклу. Матер!алом для доогмдження стали 48 яечник!в та 190 плод!в (на 12 - ту, 16-ту, 20-ту доби пренатального розвитку), що були отриман! вщб!лих LuypiB- самок лiнiV Вютар.
yci щури були розд1лен1 на 3 групи: дослщна група № 1 - щури, яким ¡зольовано вводили розчин ацетату свинцю в доз! 0,05 мг/кг; дослщна група № 2 - щури, яким вводили розчин ацетату свинцю в доз! 0,05 мг/кг у комбшаци з розчином цитрату cpi-бла вдоз! 2 мкг/кгта контрольна група (№ 3) - щури, яким вводили дистильовану воду. Розчини вводили в шлунок самкам через зонд один раз на добу, в один i той же час, з першого дня BariTHOCTi та впро-довжуЫе! BariTHOCTi. В експериментальних моделях використовували розчин ацетату свинцю (виробник
- ЗАТ «Науково-дослщний центр фармакотерапи»), а також розчин цитрату ср1бла, отриманого ¡з за-стосуванням аквананотехнологи. Розчин цитрату ср1бла отримували в Науково-дослщному ¡нститул нанобютехнолопй та ресурсозбереження УкраТни (м. КиТв) згщно з договором про наукову ствпрацю. Використання методик макроскогпчних дослщжень яечниюв дозволило виявити органометричы змши при вплив1 дослщжуваних чинниюв та пщтвердити отримаы результати при м1кроскоп1чних доогмджен-нях. Отримаы результати оброблялись статистично.
Результати дослщження та Тх обговорення. Як показав анал1з отриманих результате експе-рименту ентеральне ¡зольоване введения ацетату свинцю на 12-ту, 16-ту, 20-ту доби ембрюгенезу призводить до зменшення маси плод1в на 16,7% (р < 0,001), 19,9% (р < 0,001), та 7,3% (р > 0,05), а також юлькост1 живих плод1в на 1 самку на 27,0% (р < 0,01), 25,3% (р < 0,01), 16,6% (р < 0,05) вщповщно термов спостереження, за рахунок високих показниюв ембрюлетальностг вдв1ч1 бтьших перед1мп-лантацмно!, посттмплантацмно! та загально! ембрг онально! смертности щур1в. У дослщнм груп1 тварин, яю отримували комбшац1ю ацетату свинцю та цитрату ср1бла, м1ж величинами загально!, до- та пост-¡мплантацмно! загибел1 ембрюыв, юлькост1 живих плод1в на 1 самку пор1вняно з контрольною групою не було достов1рно! р1зниц1, що засвщчило вщсут-нють виражених змш, до того ж зазначеы показни-ки, з урахуванням похибки, знаходилисьу межах фг зюлопчного р1вня, що характерний для даного виду лабораторнихтварин.
Важпивим показником токсичного ураження будь- якого органу е його вщносна маса та структуры змши, яю в подальшому вщображаються на його функци. Анал1з морфометричних показниюв яечниюв показав зменшення !х абсолютно! та вщносно! маси в дослщнм груп1 ¡зольованого впливу ацетатом свинцю на вс1х доогмджуваних термЫах гестаци вщ-носно до контрольно! групи. Максимальне знижен-ня зазначених показниюв вщзначено на 16-й рр6\ ваптностт. Так, сумарна абсолютна маса яечниюв зменшилася на 17,2% (р < 0,01), при цьому абсолютна маса правого яечника знижувалася на 14,4% (р < 0,05), л1вого - на 20,3% (р < 0,01), а сумарна вщносна маса яечниюв - на 11,7% (р < 0,05), при цьому вщносна маса правого яечника знижувалася на 9,0% (р > 0,05), л1вого - на 14,6% (р < 0,05). Таю по-казники можуть свщчити про дегенеративы процеси у тканинах органу. Об'ективним пщтвердженням негативно! дм ацетату свинцю були показники ¡ндексу впливу розчиыв метал1в (I) дослщжуваноТ сполуки на масометричы показники яечниюв нижче одиниц1 вщ (0,78 ± 0,033) у.о. до (0,93 ± 0,045) у.о., що свщ-чить про пригычення морфофункцюнального стану гонад. ¡стоты морфолопчы змши спостер1гали в яечниках щур1в групи свинцевого впливу на псто-лопчному р1внг Приморд1альы фол1кули розташо-вувалися переважно поодинц1, а не у вигляд1 груп, як у контрольна груп1, вщзначалося значне зни-ження загального вмюту фол ¡кул ¡в та переважання атретичних, жовт1 тта мали овальну \ неправильну форму. Таким чином, проведен! нами макроскотч-
ы досл1дження виявили особливост1 впливу низьких доз ацетату свинцю на масометричы параметри яечниюв, а саме: пригычення розвитку яечниюв за показниками абсолютно!, вщносно! маси, вагового ¡ндексу та певы змши на м1кроскоп1чному р1внг
У дослщнм груп1 комбшованого введения ацетату свинцю з цитратом ср1бла виявлено покращення масометричних показниюв яечниюв, на що вказува-ло збтьшення показниюв абсолютно! та вщносно! маси на вс¡х доел ¡джуваних термшах вагггностт щодо групи ¡зольованого введения ацетату свинцю. Введения ацетату свинцю з цитратом ср1бла в оргаызм ваптноТ самиц1 щура зменшуе токсичнють свинцю та позитивно впливае на масометричы показники яечниюв \ евщчить про наявнють компенсаторних реак-цм в оргаы, що пщтверджено середыми позитив-ними значениями показника I, який екпадае - 1,14 ± 0,062 у.о. Вивчення генеративних та стромальних елеметтв яечниюв щур1в у дослщнм грут комбшо-ваного введения ацетату свинцю з цитратом ср1бла не виявило суттевих вщмшностей вщ групи контролю, а пор1вняно з групою ¡зольованого введения ацетату свинцю вщм1чалося покращення доогмджу-ваних показниюв, а саме: збтьшення юлькост1 при-морд1альнихфолкугмв (+33,3%, (р < 0,01)) при змен-шены атретичних (- 63,8%, (р < 0,001), збтьшення юлькостг (+17,0%, (р < 0,05)) та вщносно! площ1 жов-тихтт (+62,8%, (р < 0,05)) на вЫх стад1ях гестаци.
Усе вищесказане евщчить про зменшення токсично! дм ацетату свинцю у комбшаци з цитратом ср1бла та про розвиток компенсаторно-пристосу-вальних реакцм у яечниках самок щур1в.
Висновки. Експериментально встановлено, що вплив ¡зольованого введения ацетату свинцю призводить до зменшення масометричних показниюв яечниюв, прискорено! та активно! атрези фол1кул1в, що проявляеться у знижены загально! юлькост1 при-морд1альних фол1кул1в при зб1льшенн1 атретичних в яечнику щур1в, зменшенн1 розм1р1в жовтих тт та !х передчасному регреЫ, розростанн1 строми органу, гемодинам1чних порушеннях, що призводить до по-глиблення альтеруючого ефекту ацетату свинцю.
Анал1з отриманих результат1в визначив моди-ф1куючу д1ю цитрату ср1бла на ембрю- та гонадо-токсичн1сть ацетату свинцю, що проявлялося по-кращенням морфофункцюнального стану яечник1в досл1дних тварин при комбшованому введенн1 з ацетатом свинцю.
Перспективним напрямком подальших до-сл1джень е вивчення впливу наднизьких доз ацетату свинцю в комбЫаци з цитратом золота на морфо-функцюнальний стан яечник1вдосл1днихтварин.
Лп~ература
1. Aylamazyan Е.К. Vliyaniye ekologicheskoy obstanovki na reproduktivnoye zdorov'ye zhenshchiny. Novyy vzglyad na problemu / E.K. Aylamazyan, T.V. Belyayeva, Ye.G. Vinogradova // Vestnik Rossiysk. assots. akusherov-ginekologov. - 1996. - № 2. -S. 13-16.
2. Global'naya strategiya VOZ po pitaniyu, fizicheskoy aktivnosti i zdorov'yu: Rukovodstvo dlya stran po monitoringu i otsenke osushchestvleniya. - Vsemirnaya organizatsiya zdravookhraneniya, 2009. -47 s. [Elektronnyy resurs], - Rezhim dostupa: http // www.euro.who.int/document/E81507r.pdf.
3. Dudenkova N.A. Vliyaniye atsetata svintsa na strukturnyye izmeneniya yaichnikov samok belykh krys v period postnatal'nogo ontogeneza / N.A. Dudenkova, O.S. Shubina // Sovremennyye problemy nauki i obrazovaniya. - 2015. - № 2. - S. 542.
4. Ivanitskaya N.F. Sochetannoye vozdeystviye svintsa i radiatsii na potomstvo v period predimplantatsii / N.F Ivanitskaya, YU.N. Talakin, T.YU. Babich //Sovremennyye problemy toksikologii. - 2001. - № 3. -S. 10-18.
5. Morfofunktsional'naya kharakteristika reaktsii nekotorykh organov reproduktivnoy i simpato-adrenalovoy sistem na deystviye atsetata svintsa / T.A. Vylegzhanina, T.Ye. Kuznetsova, Ye.L. Ryzhkovskaya//Ksenobiotiki i zhivyye sistemy: mater. Ill mezhdunar. nauchn. konf., Minsk, 22-24oktyabrya 2008 g. - Minsk: Izd. Tsentr BGU, 2008. -S. 25-27.
6. Nef'odova O.O. Viznachennya vplivu atsetatu svintsyu na khHd kardHogenezu shchura vyeksperimentH /О.О. Nef'odova //VHsnik problem bHologHH'H meditsini. - 2014. -Vip. 4, T. 2 (114). - S. 243-246.
7. Paran'ko N.M. Rol' tyazhelykh metallov v vozniknovenii reproduktivnykh narusheniy / N.M. Paran'ko, N.I. Rublevskaya, E.N. Belitskaya, T.A. Golovkova, T.D. Zemlyakova, L.Ye. Chub, G.G. Shmatkov//Gigiyena i sanitariya. - 2002. - № 1. - S. 28-30.
8. Skal'nyy A.V. «Khimicheskiye elementy vfiziologii i ekologii cheloveka»/A.V. Skal'nyy // [Elektronnyy resurs], - Rezhim dostupa: http://www.m-kat.ru/ebook.php?file=skalny.djvu&page=31.
9. Skal'nyy A.V. Diagnostika, profilaktika i lecheniye otravleniy svintsom / A.V. Skal'nyy, A.T. Bykov, B.V. Limin. - M.: VTSMK «Zashchita», 2002. -52 s.
10. Trakhtenberg H.M. Svintseva nebezpeka v икган'пн / H.M. Trakhtenberg // Naukoviy zhurnal MOZ Ukrarini. - 2013. - № 3. -S. 50-60.
11. Tyazhelyye metally vneshney sredy i ikh vliyaniye na reproduktivnuyu funktsiyu zhenshchin / A.M. Serdyuk, E.N. Belitskaya, N.M. Paran'ko, G.G. Shmatkov. - Dnepropetrovsk: ART-PRESS, 2004. - 148 s.
12. Khvan PA. Strukturno-funktsional'noye sostoyaniye gonad krys pri vozdeystvii svinetssoderzhashchey pyli / PA. Khvan // II Vseros. konf. «Endokrinnyye sistemy i organy i vrednyye faktory vneshney sredy». Tez. dokl. - L, 1983. - S. 163.
13. Shatorna V.F. Yeksperimental'ne doslHdzhennya yembmotoksichnostH atsetatu svintsyu ta nanozolota / V.F. Shatorna // VHsnik problem bHologHH'H meditsini. - 2013. - Vip. 2, T. 2. -S. 154-159.
14. Abdel Rahim A.G. Effects of dietary copper, cadmium, iron, molybdenum and manganese on selenium utilization by the rat / A.G. Abdel Rahim, J.R. Arthur, C.F Mills//Nutr. - 1986. - Vol. 116, № 3. - P. 403-411.
15. Erickson J.R. A dynamic pathway for calciumindependent activation of CaMKII by methionine oxidation / J.R. Erickson, M.L. Joiner, X. Guan, W. Kutschke//Cell. - 2008. - Vol. 133, № 3. - P. 462-474.
16. Kazi T.G. Copper, chromium, manganese, iron, nickel, and zinc levels in biological samples of diabetes mellitus patients /T.G. Kazi, H.I. Afridi, N. Kazi [et al.]//Biol. Trace Elem. Res. -2008. - Vol. 122, № 1. - P. 1-18.
УДК: 611.12-034:591.33-092.9
M О РФОФУ H КЦ10 H А Л ЬНI ЗМ1НИ В ЯеЧНИКАХ ЩУР1В П1Д ВПЛИВОМ АЦЕТАТУ СВИНЦЮ В КОМБ1-НАЦП 3 ЦИТРАТОМ СР1БЛА
Шаторна В. Ф., Гарець В. I., Колосова I. I., Кононова I. I., Слесаренко О. Г.
Резюме. Однмею з актуальних проблем сучасно! бюлоги i медицини е поглиблення вивчення зм1н органпв репродуктивно! системи пщ впливом екотоксикантв. Репродуктивне здоров'я населения - один ¡з найбтьш чутливих бюлопчних показниюв, який вщдзеркалюе ступЫь забруднення довктля, особливо в промислово розвинених perioHax.
Проведено комплексне наукове експериментальне досл1дження з використанням ацетату свинцю та цитрату ср1бла, отриманого за наноакватехнолопею на морфофункцюнальний стан яечниюв та загальний хщ ембрюгенезу щур1в на 12 - ту, 16-ту, 20-тудоби гестаци. Виявлена в експериметч на щурах антагонютична д1я цитрату ср1бла на токсичнють ацетату свинцю. Ствставлеы результати впливу на морфофункцюнальний стан яечниюв та загальний хщ ембрюгенезу щур1в на доогмджуваних термшах. Експериментально визначе-но, що введения цитрату ср1бла на фоы впливу ацетату свинцю сприяе розвитку компенсаторно- пристосу-вальних реакцм в яечниках щур1в, про що свщчить бтьший фол1кулярний резерв i повтьнший процес атре-зiV та призводить до зменшення негативного впливу ацетату свинцю на процеси ембрюнального розвитку, що пщтверджуеться зниженням смертност1 i збтьшенням маси плод1в.
Ключов1 слова: ацетат свинцю, цитрат ср1бла, нанометали, яечники, ембрюгенез.
УДК: 611.12-034:591.33-092.9
МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ В ЯИЧНИКАХ КРЫС ПОД ВЛИЯНИЕМ АЦЕТАТА СВИНЦА В КОМБИНАЦИИ С ЦИТРАТОМ СЕРЕБРА
Шаторная В. Ф., Гарец В. И., Колосова И. И., Кононова И. И., Слесаренко Е. Г. Резюме. Одной из актуальных проблем современной биологии и медицины является углубление изучения изменений органов репродуктивной системы под влиянием экотоксикантов. Репродуктивное здоровье населения - один из самых чувствительных биологических показателей, который отражает степень загрязнения окружающей среды, особенно в промышленно развитых регионах.
Проведено комплексное научное экспериментальное исследование с использованием ацетата свинца и цитрата серебра, полученного по наноакватехнологии на морфофункциональное состояние яичников и общий ход эмбриогенеза крыс на 12-е, 16-е, 20-е сутки гестации. Обнаружено в эксперименте на крысах антагонистическое действие цитрата серебра на токсичность ацетата свинца. Сопоставлены результаты влияния на морфофункциональное состояние яичников и общий ход эмбриогенеза крыс на исследуемых сроках. Экспериментально установлено, что введение цитрата серебра на фоне влияния ацетата свинца способствует развитию компенсаторно-приспособительных реакций в яичниках крыс, о чем свидетельствует больший фолликулярный резерв и медленнее процесс атрезии и приводит к уменьшению негативного воздействия ацетата свинца на процессы эмбрионального развития, что подтверждается снижением смертности и увеличением массы плодов.
Ключевые слова: ацетат свинца, цитрат серебра, нанометаллы, яичники, эмбриогенез.
UDC: 611.12-034:591.33-092.9
MORPHOFUNCTIONAL CHANGES IN OVARIES OF THE RATS UNDER THE INFLUENCE OF THE LEAD ACETATE IN COMBINATION WITH SILVER CITRATE
Shatornaya V. F., Garets V. I., Kolosova I. I., Kononova I. I., Slesarenko E. G.
Abstract. The high toxicity of lead compounds is determined by the fact that they can be deposited in the body and lead to a deficiency of essential elements, replacing them in metal-containing proteins. Lead and its compounds affect endocrine, immune, urinary, digestive, nervous, cardiovascular, respiratory and reproductive systems, genetic apparatus of cells, have gonadotoxic and embryotoxic activity.
One of the actual problems of modern biology and medicine is the deepening of the study of changes in organs of the reproductive system under the influence of ecotoxicants. Reproductive health of the population is one of the most sensitive biological indicators that reflects the degree of environmental pollution, especially in industrialized regions.
A complex scientific experimental study with the using of lead acetate in a dose of 0.05 mg/kg and silver citrate in a dose of 2 |-ig/kg, obtained by nanoaquatechnology, on the morphofunctional state of the ovaries and the general course of embryogenesis of rats was conducted. The introduction was performed intragastrically, during the entire period of pregnancy of the rats' females. The study material was collected on the 12th, 16th, 20th days of gestation.
As was shown by the analysis of the results of the experiment, the enteric isolated introduction of lead acetate leads to a decrease in the weight of fetus by 16.7% - 19.9%, and also leads to a decrease of the number of alive fetus per 1 female by 16.6% - 27.0%, according to the terms of observation. This situation is caused due to high embryomortality indices, which were twice more than in the control group of the experimental animals (preimplantation, post-implantation and embryonic mortality of rats). In the experimental group of animals, which received a combination of lead acetate and silver citrate, between the values of total, pre- and postimplantation deaths of embryos, the number of alive fetuses per 1 female, as compared with the control group, did not show the significant difference, which indicated no significant changes. And also these indicators, taking into account the error, were within the physiological level, which is typical for this specie of laboratory animals.
The separate introduction of lead acetate determined range of the changes of the macroscopic, histologic and morphometric characteristics of rat ovary: a significant (p <0.05) decrease in absolute and relative weight of the ovary, weight index of the organ, fast and active follicle atresia. Morphological changes in the ovaries by the impact of lead are associated with significant decrease in the total number of primordial follicles and increasing in the number of atresial follicles, with a decrease in the number and size of corpora lutea, their premature regression, degeneration and reduction of the luteocytes and their content, hemodynamic disturbances, that shows a violation of the structure and functions of the ovaries of the rats.
The antagonistic effect of silver citrate on the toxicity of lead acetate has been detected in the experiment on the rats. It has been experimentally determined that the introduction of silver citrate against the background of lead acetate contributes to the development of compensatory and adaptive reactions in rat ovaries, as evidenced by a greater follicular reserve and a slower process of atresia and leads to a decrease in the negative effects of lead acetate on embryonic development, which is confirmed by a decrease in mortality and an increase in the mass of fetuses.
The analysis of the obtained results determined the modifying effect of silver citrate on the embryo and gonadotoxicity of lead acetate, which was manifested by the improvement of the morphofunctional state of the ovaries of the experimental animals in the combined lead introduction.
Keywords: lead acetate, silver citrate, nanometals, ovaries, embryogenesis.
Рецензент - проф. Бшаш С. М.
Стаття надшшла 11.08.2017 року
