CC BY
7
механизма регуляции полового размножения. Механизм же регуляции бесполого размножения животных неизвестен. Его не изучали. Не изучали его потому, что губки, стрекающие, колониальные асцидии и другие размножающиеся бесполо примитивные беспозвоночные не представляют значительного практического интереса. Незнание механизма регуляции бесполого размножения не дает возможности что-либо сказать о том, как регулируется образование опухоли, а значит и о том, как воздействовать на ее образование, то есть как не допускать пробуждения спящего механизма бесполого размножения. Чтобы найти средство, предотвращающее рак, нужно прежде понять, как регулируется бесполое размножение у беспозвоночных.
Но накоплены обширные сведения о регуляции бесполого размножения у растений. Очень вероятно, что механизм регуляции бесполого размножения у них схож с механизмом регуляции бесполого размножения у животных. Поэтому для понимания механизма регуляции бесполого размножения животных (и для понимания механизма возникновения опухоли) важно знать результаты исследований бесполого размножения растений.
Литература:
1. Макрушин А.В. Как и почему возник механизм старения и онкогенеза: гипотеза. Ж. общ. биологии. 2008.Т. 69. № 1. С. 19-24.
2. Иванова-Казас О.М. Бесполое размножение животных. 1977. Л. Изд. ЛГУ. 239 с.
РЕПАРАТИВНЫЙ ПОТЕНЦИАЛ М2 МАКРОФАГОВ, ПОЛЯРИЗОВАННЫХ В РЕЗУЛЬТАТЕ ЭФФЕРОЦИТОЗА
А.А. Максимова, Е.Я. Шевела, Л.В. Сахно, А.А. Останин, Е.Р. Черных
НИИ фундаментальной и клинической иммунологии, Новосибирск, Россия
e-mail: parkinson.dses@gmail.com
Ключевые слова: макрофаги, эффероцитоз, фибробласты, клеточная терапия, заживление ран.
Длительно незаживающие раны и нарушение регенерации являются актуальной медицинской проблемой. Одно из перспективных направлений терапии в настоящий момент связано с использованием макрофагов [1]. Данные клетки представляют собой гетерогенную пластичную популяцию, внутри которой выделяют фенотипы М1 (провоспалительный) и М2 (противовоспалительный). При этом макрофаги могут быть поляризованы в М2 направлении различными стимулами [2]. Показано, что М2 макрофаги способны оказывать положительное воздействие на заживление ран [3].
Нами был разработан протокол получения макрофагов с М2 фенотипом, в котором ключевым механизмом поляризации является распознавание и поглощение моноцитами апоптотических клеток неадгезивной фракции [4]; клетки были обозначены как M2(LS, Low Serum). Репаративный потенциал данных клеток оценивали по способности модулировать функциональную активность фибробластов дермы (пролиферацию, экспрессию a-SMA, продукцию коллагена I типа) в сравнении с М1 и М2. Содержание растворимых факторов (ангиогенин, TGF-ß, VEGF) определяли при помощи иммуноферментного анализа.
По сравнению с М1, M2(LS) характеризовались более выраженным стимулирующим
влиянием на пролиферацию (увеличение в 3,55 раза vs 2,4) и дифференцировку фибробластов дермы (a-SMA-экспрессирующих клеток в культуре 69,5% vs 48%; содержание коллагена 107,3 нг/мл vs 77,3 нг/ мл). Более того, M2(LS) активнее стимулировали дифференцировку фибробластов по сравнению с клетками, поляризованными в М2 фенотип интерлейкином 4 или дексаметазоном.
Мы предположили, что выраженный стимулирующий эффект M2(LS) связан с продукцией профиброгенных и ангиогенных факторов. Действительно, M2(LS) практически двукратно превышали макрофаги других фенотипов по продукции TGF-pi и более чем в 2,7 раза — ан-гиогенина, а также характеризовались более высоким уровнем VEGF (2870 пг/мл, pW=0,07 по сравнению с другими подтипами).
Таким образом, М2 макрофаги, поляризованные в результате эффероцитоза, представляют собой перспективный материал для разработки новых подходов к лечению ран, ассоциированных с нарушением процессов репарации.
Благодарим ЦКП «Коллекция плюрипотентных культур клеток человека и млекопитающих общебиологического и биомедицинского направления» ФИЦ ИЦиГ СО РАН за предоставление линии дермальных фибробластов NAF1.
Литература:
1. Spiller KL, Koh TJ. Adv. Drug. Deliv. Rev. 2017. V. 122. P.
74-83.
2. Hume D.A. Front. Immunol. 2015. V. 6. Р. 370.
3. Li M., Hou Q., Zhong L., Zhao Y., Fu X. Front. Immunol. 2021. V.
12. Р. 681710.
4. Sakhno L.V., Shevela E.Ya., Tikhonova M.A., Ostanin A.A.,
Chernykh E.R. Scand. J. Immunol. 2016. V. 83. № 2.
P.151-159.
МОЛЕКУЛЯРНЫЕ МЕХАНИЗМЫ ОНКОТРАНСФОРМАЦИИ ТИРЕОИДНОГО ЭПИТЕЛИЯ
П.Е. Максимова, Е.А. Непритимова, Д.В. Зима
ФГАОУ ВО Крымский федеральный университет им. В.И. Вернадского, Симферополь, Россия
e-mail: evgu79@mail.ru
Ключевые слова: онкотрансформация клеток, тироциты, апоптоз, молекулярная диагностика, папиллярный рак, щитовидная железа, патогенез.
Высокая заболеваемость и динамика патоморфоза рака щитовидной железы, требуют совершенствования диагностических подходов и новых данных для персонализированной диагностики, профилактики и лечения [1]. В литературе имеются данные о роли очень распространенного триггера — стресса в развитии патологии щитовидной железы, а также в нарушении сигнальных путей апоптоза и онкотрансформации клеток [2]. Цель нашего исследования — разработать методический подход выявления значимых для практики молекулярно-генетических закономерностей онкотрансформации тиреоидного эпителия с целью выделения разных групп пациентов с точки зрения диагностики и патогенетической терапии.
Материал и методы исследования. Выполнено комплексное экспериментально-клиническое исследование на лабораторных животных (самцы и самки белых крыс зрелого возраста с моделью острого и хронического
иммобилизационного стресса, n=40] и фрагментов ткани щитовидной железы и пунктатов клеток пациентов с узловыми образованиями щитовидной железы из популяции жителей Республики Крым. Выполнены морфологические (световая и электронная микроскопия] и молекулярные исследования (иммуногистохими и им-муноцитохимя с маркерами FAS-R, bcl-2, Ki-67].
Наши эксперименты in vivo и изучение материала пациентов дали сопоставимые результаты. Стресс является пусковым фактором дисрегуляции клеточного цикла. Трансформация тироцитов тесно связана с активацией внешнего и внутреннего пути апоптоза и ингибировна-ием антиапоптотичесокго фактора. Морфология трансформации тиреоидного эпителия — это часто феномен исключений и уникальности, что затрудняет попытки морфологов удовлетворить запрос хирургов на адекватную предоперационную диагностику и выработать оптимальную тактику. Молекулярные маркеры в сложных диагностических случаях на предоперационном этапе могут решить эти задачи при расчете индекса злокачественности как производного из количественных результатов иммуноцитохимического исследования.
Это позволило выявить патогенетическую основу и выработать методический подход для выявления клинически значимых молекулярных закономерностей онко-трансформации тиреоидного эпителия. Это способствует оптимизации алгоритма работы с такими больными с точки зрения пациент-ориентированного мультидис-циплинарного подхода. Работа получила поддержку из госзадания No FZEG-2020-0060 «Алгоритмы молеку-лярно-генетической диагностики злокачественных новообразований и подходы к их таргетной терапии с применением клеточных и генетических технологий».
Литература:
1. Воробьев С.Л. Морфологическая диагностика заболеваний щитовидной железы. СПб.: Издательско-полиграфическая-компания «КОСТА»; 2014, 158 с.
2. Feldkamp J., Führer D., Luster M., Musholt T. J., Spitzweg C., Schott M. Fine Needle Aspiration in the Investigation of Thyroid Nodules Dtsch Arztebl 2016 V 113(20]. Р. 353-359.
ВЛИЯНИЕ СПОСОБА ЭЛЕКТРОФОРМОВАНИЯ НЕТКАНЫХ МАТЕРИАЛОВ ИЗ ПОЛИАМИДА-6 НА АДГЕЗИЮ И ПРОЛИФЕРАЦИЮ КЛЕТОЧНЫХ КУЛЬТУР
С.Н. Малахов1, М.А. Евтеева1, А.В. Родина1, М.М. Алексанян2, А.Г. Аганесов2, С.Н. Чвалун1
1 НИЦ Курчатовский институт, Москва, Россия
2 ФГБНУ Российский научный центр хирургии им. акад. Б.В. Петровского, Москва, Россия
e-mail: s.malakhov@mail.ru
Ключевые слова: электроформование, нетканые материалы, полиамид-6, фибробласты.
На сегодняшний день одной из наиболее перспективных и стремительно развивающихся групп материалов составляют синтетические полимерные носители, используемые в тканевой инженерии для трансплантации клеток и регенерации поврежденных тканей. Метод электроформования, используемый для изготовления волокнистых трехмерных матриксов, позволяет точно контролировать внутреннюю архитектуру матрикса. Высокая пористость делает такие матриксы очень привлекательными для тканевой инженерии, т. к. от пористости
матрикса зависит васкуляризация и восстановление тканей за счет диффузии газов и поступления питательных веществ. Один из наиболее широко используемых полимеров в электроформовании — полиамид-6. Нетканые материалы из полиамида-6 могут быть применены в широком спектре отраслей — от фильтрации аэрозолей [1] и сорбции нефти [2] до тканевой инженерии [3]. При этом, полиамид может быть переработан в волокна как из раствора, так и расплава.
В данной работе исследовано влияние структуры нетканых материалов из полиамида-6, полученных различными способами (из раствора или расплава, с отжигом и без), на адгезию и пролиферативную активность легочных эмбриональных фибробластов человека линии LECH. Нетканый материал, полученный электроформованием расплава полиамида-6, характеризуется волокнами со средним диаметром 2,2 мкм, а плотность упаковки волокон в полотне составила 4,6%. Материалы, полученные из раствора, имели средний диаметр волокна 3,5 мкм и плотность упаковки 6,0%. После отжига матриц плотность упаковки возросла до 6,2% (расплав) и 7,2% (раствор).
Исследование скорости адгезии клеток на волокнистые матриксы показало, что клетки более эффективно прикреплялись к матриксам, полученным из расплавов. Количество клеток через 168 часов культивирования также было значительно выше на матриксах, полученных из расплава по сравнению с матриксами из раствора. Стоит отметить, что скорость пролиферации клеток на матриксах, полученных после отжига, была ниже как в случае их получения из раствора, так и из расплава, что связано с увеличением плотности упаковки волокон в материалах в процессе отжига.
Литература:
1. Malakhov S.N., Belousov S.I., Shcherbina M.A. et al. Polymer Science, Series A. 2016. V. 58. P. 236.
2. Malakhov S.N., Chvalun S.N. Nanotechnologies in Russia. 2020. V. 15. P. 451.
3. Zhuravleva M., Gilazieva Z., Grigoriev T.E. et al. Journal of Biomedical Materials Research Part B. 2018. V. 107. P. 253.
ПОДХОД К ИЗУЧЕНИЮ ПРОТЕИНОПАТИЙ, ВЫЗВАННЫХ ЭКСПРЕССИЕЙ МУТАНТНОГО БЕЛКА ХАНТИНГТИН
А.А. Малахова1, В.С. Макеева1, С.П. Медведев1, С.М. Закиян1
ФГБНУ ФИЦ Институт цитологии и генетики Сибирского отделения РАН, Новосибирск, Россия
e-mail: amal@bionet.nsc.ru
Ключевые слова: ИПСК, клеточные модели, мутантный хан-тингтин, белки семейства 14-3-3
Болезнь Хантингтона — наследственное аутосомно-доминантное нейродегенеративное заболевание, причиной которого является экспансия кодона CAG, кодирующего аминокислоту глутамин (Q), в первом экзоне гена Huntingtin (HTT). Мутантный белок хантингтин, содержащий удлиненный полиглутаминовый тракт (polyQ), теряет нативную конформацию, что ведет к нарушению выполнения им своих функций, и вызывает формирование белковых агрегатов в клетках. Агрегация аномального белка в срединных шипиковых нейронах полосатого тела оказывает негативный эффект на функционирование клеток головного мозга и приводит к их гибели. На более
