CC BY
38
Профессор В.И. Циркин, доцентС.В. Хлыбова, доцент Е.Н. Сизова МИОЦИТСТИМУЛИРУЮЩАЯ АКТИВНОСТЬ СЫВОРОТКИ КРОВИ И ЕЕ ИЗМЕНЕНИЕ ПРИ БЕРЕМЕННОСТИ И В РОДАХ Кировская государственная медицинская академия, Вятский социально-экономический институт
Сокращения: ГБ - гипертоническая болезнь; ГМ
- гладкие мышцы; СА - сократительная активность; СДМ - сократительная деятельность матки; СРД -слабость родовой деятельности; ССА - спонтанная сократительная активность; УПР - угроза преждевременных родов; ЭАСМ - эндогенный активатор сократимости миоцитов; ЭАСМ-акгивность -миоцит-стимулирующая активность, обусловленная наличием в крови ЭАСМ.
Введение
Поиск эндогенных факторов, содержащихся в крови человека и влияющих на сократимость гладких мышц, в том числе матки беременных женщин и рожениц проводится давно, начиная с прошлого века
[23,28]. Уже в первых работах было установлено, что сыворотка крови женщин может повышать спонтанные или вызванные сокращения изолированной матки женщин [33], кролика [33] и морской свинки [3]. Однако и до настоящего времени природа этого феномена не ясна, а его наличие нельзя объяснить присутствием в сыворотке крови известных на сегодняшний день гормонов и биологически активных веществ. Вместе с тем, этот феномен наблюдается достаточно часто в опытах, проводимых на изолированных мышечных объектах при изучении способности сыворотки крови модулировать процессы взаимодействия гормонов и медиаторов со специфическими клеточными рецепторами, а его выраженность зависит от многих факторов, в том числе у женщин - от этапа репродуктивного процесса [2,11,12,14,15,16,21, 22,25,26,28]. Первоначально данный феномен был обозначен как «утеростимулирующая активность» и объяснялся наличием в сыворотке крови фактора, названного эндогенным утеростимулятором, или ЭУС [2,7,16,20,21,26,28,29]. В связи с тем, что сыворотка крови повышает сократимость гладких мышц различных органов и изолированного сердца, было предложено ЭУС называть эндогенным активатором сократимости миоцитов, или ЭАСМ, а сам феномен трактовать как миоцитстимулирующую активность, или ЭАСМ-активность [11,12,14,15,22, 23, 25,30,31]. Считается, что ЭАСМ - это многокомпонентный фактор, в основе действия которого лежит способность ЭАСМ повышать проницаемость Са-каналов плазматической мембраны миоцитов или кардиомиоцитов, т.е. ЭАСМ рассматривается как эндогенный активатор Са-проницаемости [11,12,14,15, 22,23,25,30,31]. Ниже представлены данные литературы,
доказывающие на основе результатов опытов с различными тест-объектами наличие у сыворотки крови и других жидких сред организма человека ЭАСМ-активности. При этом основной акцент сделан в отношении ЭАСМ-активности сыворотки крови небеременных, беременных и рожающих женщин, проявляющейся в опытах с изолированным миометрием крысы.
1. Феноменология ЭАСМ - активности
сыворотки крови
Гладкие мышцы пищеварительного тракта.
Установлено [41], что сыворотка (и в меньшей степени
- плазма) крови человека и животных (быка, лошади, кролика) повышает тонус ГМ подвздошной китнки морской свинки, особенно, если сыворотку выдержать в течение нескольких часов при 20-22°С. Показано [39], что сыворотка крови беременных собак повышает СА ГМ желудка крысы, кишечника крысы, кошки и цыпленка. Куншин А.А. [12] установил, что 1000-, 500-, 100- и 50-кратные разведения сыворотки крови новорожденных и крови взрослых людей дозозависимо повышают базальный тонус ГМ желудка крысы, а также способствует дополнительному росту тонуса этих мышц, вызванного гиперкалиевым (60 мМ КС1) раствором Кребса.
Гладкие мышцы сосудов. Сыворотка крови здоровых людей, согласно одним данным [60], повышает тонус ГМ воротной вены крысы, но по другим данным [36,68], в опытах с полосками аорты крысы сыворотка крови здоровых, в отличие от сыворотки крови людей, страдающих гипертонической болезнью (ГБ), не обладает ЭАСМ-активностью. В то же время, проявление ЭАСМ-активности на ГМ сосудов, вероятно, зависит от вида сосуда. Так, на полосках аорты крысы сыворотка крови больных ГБ проявляла ЭАСМ-активность, а на полосках брыжеечной артерии крысы - не проявляла ее [36].
Показано, что сыворотка крови новорожденных не влияет на базальный тонус циркулярных сегментов артерий и вены пуповины [21], а сыворотка крови взрослых людей не проявляет ЭАСМ-активность на фоне вызванного гиперкалиевым (30 мМ КС1) раствором Кребса тонуса коронарной артерии свиньи [22,27]. Ликвор человека не влияет на тонус полосок базилярной артерии кролика [45].
Данные литературы о вазоконстрикторном действии сыворотки крови [36,60,68] подтверждаются результатами исследований, проведенных в условиях in vivo [35,66] - введение животным сыворотки или плазмы крови человека и животных, которую предварительно инкубировали при 37°С или в течение нескольких недель хранили при 4°С, вызывает подъем артериального давления. Авторы объяснили этот результат образованием в сыворотке или плазме крови так называемого фактора Арнейла или вазопрессор-ного альбумина. Доказано [66], что этот фактор не является катехоламинами, ренином или ангиотен-
зинном II. У беременных женщин фактор Арнейла образуется в более высоких количествах, чем у небеременных [50]. Мы не исключаем, что фактор Арнейла является одним из компонентов ЭАСМ
Гладкие мышцы трахеи. Сыворотка крови не влияет на базальный и вызванный тонус ГМ мышц трахеи коровы [11,22,31]. Но это не исключает возможность ЭАСМ повышать базальный тонус ГМ воздухопроводящих путей.
Изолированный миокард. Сыворотка крови здорового человека повышает силу сокращений изолированного сердца лягушки [22,25,48], кролика [4] и крысы [57]. Сыворотка крови людей, страдающих ГБ, оказывает более выраженный положительный инотропный эффект, чем сыворотка здоровых людей [57].
Миометрий женщин. Сыворотка крови беременных женщин и пуповинной крови новорожденных повышает ССА изолированного миометрия женщин [33]. Аналогичную активность проявляет сыворотка и плазма крови мужчин, небеременных и беременных женщин в отношении миометрия беременных женщин [20]. Моча рожениц при ее ректальном введении повышает сократительную деятельность матки (СДМ) женщин со слабостью родовой деятельности, или СРД [8].
Миометрий морской свинки. Сыворотка крови мужчин и небеременных женщин, а также беременных и рожениц (I, II и III периоды родов) повышает ССА изолированной матки морских свинок; у беременных женщин (максимум - перед родами) и особенно у рожениц ЭАСМ-активность сыворотки крови была выше, чем у небеременных женщин [3,6]. У женщин с гестозом ЭАСМ-активность сыворотки крови была выше, чем у здоровых [3], а у женщин с СРД - ниже [19]. Однако поданным Николаева А.П. [17], сыворотка крови небеременных, беременных и рожающих женщин не повышает ССА матки морской свинки, а, наоборот, угнетает ее.
Дроздовской З.П. [8] показано, что 100-, 200- и 500-кратные разведения мочи небеременных, беременных и рожающих женщин повышают ССА изолированной матки морской свинки. При этом у беременных и рожениц выраженность ЭАСМ-активности 100-кратного разведения мочи зависела от срока гестации: моча, полученная в первые 15 недель беременности, преимущественно угнетала ССА матки, полученная на 16-20 неделях - не влияла на нее, а полученная во второй половине беременности, а также в родах и первые сутки после родов - повышала ее; ЭАСМ-активность мочи была наиболее выражена у женщин, вступающих в роды и у рожениц. Автором установлено, что ЭАСМ-активность мочи повышена при угрозе преждевременных родов, или УПР (32-34 нед.) и снижена при переношенной беременности и, особенно, при СРД.
Миометрий небеременных крольчих. Сыворотка небеременных, беременных и рожающих женщин повышает ССА изолированных сегментов матки
небеременных крольчих, при этом ЭАСМ-активность сыворотки была выше у беременных и особенно у рожениц в I периоде родов [1,6,33]. ЭАСМ-активность сыворотки была характерна для 100-, 200-, 500- и даже 1000-кратных ее разведений [1]. У сыворотки пуповинной крови новорожденных ЭАСМ-активность была выше, чем у матери [33]. Моча небеременных, беременных и рожающих женщин повышает ССА сегментов матки небеременных крольчих [8].
Миометрий небеременных крыс. На этом тест-объекте выполнено большое число работ, в том числе по изучению природы ЭАСМ. Было показано, что сыворотка крови мужчин, небеременных женщин, беременных, рожениц и родильниц способна повышать ССА миометрия крысы [2,5,7,11,12,14,15, 16,20,21,22,25,26,28-31,61,65].
В частности, Sapak К. [61] отметил, что у женщин ЭАСМ-активность в I периоде родов повышается, а во П и III периодах-уменьшается. Поданным Помаскина И.Н. [20], у мужчин сыворотка крови проявляла ЭАСМ-активность в разведениях 1:25, 1:50,1:100,1:250 и 1:500 (плазма - 1:25, и 1:50), у небеременных женщин - в разведениях 1:50,1:100,1:250 (плазма- 1:25 и 1:50), у беременных (25-36 нед.) женщин она не оказывала этот эффект (плазма - 1:25), у рожениц (1 период) - в разведениях 1:25 и 1:50 (плазма-не оказывала эффект). Таким образом, по его данным, ЭАСМ-активность сыворотки крови у молодых женщин была ниже (в 2 раза), чем у молодых мужчин; при беременности она снижается и частично восстанавливается в родах. По данным Джергения C.JI.[7], у мужчин и небеременных женщин сыворотка проявляла ЭАСМ-активность в разведениях 1:10, 1:50, 1:100, 1:250, 1:500, 1:1000, у беременных на сроке 6-10 нед. - в разведениях 1:10,1:50 и 1:100, на сроке 20-26,36-39 нед. и у рожениц (I период) -вразведениях 1:10,1:50,1:100 и 1:500,уроженицво11 периоде-в разведениях 1:10,1:50и 1:100, ауродильниц
- в разведениях 1:10, 1:50, 1:100 и 1:250. Эти данные указывают: 1) на отсутствие половых различий; 2) на 2-кратное снижение ЭАСМ-активности при беременности, что, однако, не связано с ростом содержания в крови агонистов /3-адренорецепторов, так как стимулирующая активность сыворотки крови не возрастала при воздействии обзидана (10‘6 г/мл); 3) на повышение ЭАСМ-активности в I периоде и ее снижение во II периоде и частичном восстановление в послеродовом периоде.
В более поздних исследованиях, касающихся изучения влияния сыворотки крови на хемореактивность продольных полосок рога матки небеременных крыс, было показано [2,11,12,14-16,21,22,25,26,28-31 ], что сыворотка крови мужчин и небеременных женщин проявляет ЭАСМ-активность (табл.) Показано, что выраженность проявления ЭАСМ-активности сыворотки крови с увеличением кратности ее разведения снижается. Как правило, ЭАСМ-активность сыворотки крови проявляется в повышении частоты спонтанных сокращений, их амплитуды и базального
тонуса, но выраженность этих изменений по мере воздействия сыворотки частично снижаются. Сизовой Е.Н. [22] показано, что ЭАСМ-активность сыворотки крови у молодых женщин была такой же, как у молодых мужчин, что согласуется и с данными Джергения С.Л.) [7]. В то же время Сизовой Е.Н.[22] выявлено, что ЭАСМ-активность сыворотки крови в период пубертата возрастает (у 7-9- летних детей она была ниже, чем у 18-22 летних мужчин и женщин), а в последующем не меняется (у 40-55-летних она была такой же, как у 18-22-летних).
Нами показано [2,22], что у женщин ЭАСМ-активность зависит от этапа репродуктивного процесса (табл.) - при беременности она снижается (уже в I триместре), частично восстанавливается накануне родов, возрастает в родах (I период) и вновь снижается в послеродовом периоде. Действительно, у небеременных женщин сыворотка крови проявляет ЭАСМ-активность в разведениях 1:50, 1:100, 1:500 (суммарная СА полосок матки крысы возрастала соответственно до 221%, 161% и 146% от фонового уровня; табл.); в I и II триместрах ни одно из разведений (1:50, 1:100, 1:500 и 1:1000) не проявляло ЭАСМ-активность, в III триместре ее проявляло только разведение 1:10 (рост суммарной СА до 209%), в I периоде срочных неосложненных родов ее проявляли разведения 1:10 и 1:50 (суммарная СА возрастала до 273% и 225% от фонового уровня); в 1-е сутки после родов ни одно из разведений (1:50,1:100,1:500 и 1:1000) не проявляло ЭАСМ-активность.
Таким образом, судя по результатам тестирования сыворотки крови в опытах с продольными полосками рога матки небеременных крыс, можно считать установленным фактом выраженное снижение ЭАСМ-активности сыворотки крови при беременности, что наблюдается уже в I триместре и сохраняется почти до начала родов, в I периоде которых ЭАСМ-активность частично восстанавливается до уровня, характерного для небеременных [2,7,20,22]. Во II и III периодах родов ЭАСМ-активность в сравнении с I периодом родов, скорее всего, снижается [7,61] и сохраняется на этом уровне в раннем послеродовом периоде [2,7,22].
Сыворотка пуповинной крови также обладает ЭАСМ-активностью [2,7,22,22]. По данным Джергения С.Л. [7], сыворотка, полученная до начала родов, проявляла ЭАСМ-активность в разведениях 1:50 и 1:100 (это в 5 раз ниже, чем у матери), а полученная при нормальных срочных родах - в разведениях 1:10,1:50, 1:250,1:500 и 1:1000 (это выше, чем у матери в 10 раз). Более поздние исследования показали [2,21,22], что сыворотка пуповиной крови детей, рожденных женщинами с неосложненным течением беременности и родов (табл.), проявляет ЭАСМ-активность в разведениях 1:10,1:50и1:100(ониповышалисуммарную СА полосок соответственно до 164%, 168% и 163% от фона); эта активность была не меньше, чем у матери, если судить по ЭАСМ - активности в I периоде родов, или даже выше, если сравнивать с родильницами.
При изучении ЭАСМ-активности сыворотки крови с осложненным течением беременности или родов Гординой В.З [5] и нами [18,28] установлено, что при УПР она не меняется (табл.), хотя ЭАСМ-активность мочи, судя результатам опытов на матке морской свинки и кролика [8], при УПР повышена (усилена экскреция ЭАСМ?). Однако с нашей точки зрения, ЭАСМ, скорее всего, не участвует в повышении СДМ при УПР. В то же время дефицит ЭАСМ может быть причастен к формированию СРД, так как ЭАСМ-активность сыворотки крови при СРД снижена. Это показано на матке морской свинки [19] и в наших опытах
[2,28], проведенных на полосках рога матки крысы (табл.). Эти данные согласуются и с наблюдениями Дроздовской З.П. [8] - в опытах с маткой морской свинки она выявила снижение ЭАСМ-активности мочи рожениц при СРД. При исследовании ЭАСМ-активности сыворотки у беременных с экстрагениталь-ной патологией, в частности, с ГБ или с синдромом вегетативной дисфункцией по гипертоническому типу, нам не удалось выявить ее изменения.
При исследовании сыворотки пуповинной крови новорожденных нами не выявлено изменение ее ЭАСМ-активности при наличии у матери гестоза легкой степени тяжести (табл.). Однако мы не исключаем, что при более тяжелых формах гестоза эта активность будет повышена, так как еще Буханов Я.Г. [3] в опытах с изолированной маткой морской свинки выявил повышение ЭАСМ-активности сыворотки венозной крови беременных женщин с гестозом, что дает основание рассматривать повышение содержания ЭАСМ как одну из причин формирования гестоза. Нами показано, что ЭАСМ-активность сыворотки пуповинной крови не изменена при наличии плацентарной недостаточности (табл.). Вероятно, дифференцированный подход к изучению содержания ЭАСМ при различных формах плацентарной недостаточности позволит выявить те формы патологии, к развитию которых ЭАСМ имеет непосредственное отношение как вазоконстриктор.
Опыты на продольных полосках рога матки крысы с сывороткой крови детей, мужчин и женщин, имеющих соматическую патологию, выявили, что ЭАСМ-активность не меняется при остром инфаркте миокарда [14,15,22], но возрастет при бронхиальной астме, что особенно характерно для детей [11,22,31] и при артериальной гипертензии, что более типично для мужчин [22,24].
При исследовании плазмы крови и слюны беременных (36-39 нед.) женщин, ликвора мужчин и небеременных женщин, а также сыворотки крови коров в опытах с миометрием крысы были выявлены следующие закономерности [22,28]. У плазмы крови ЭАСМ-активность ниже, чем у сыворотки; это согласуется и с данными [20],полученными при исследовании крови мужчин, небеременных женщин и рожениц. Ликвор мужчин и женщин, а также слюна беременных женщин не проявляют ЭАСМ-активность.
Сыворотка крови быков и коров также обладает ЭАСМ-активностью, которая не меняется при беременности, но существенно снижается при стрессе, в частности, у животных, подвергнутых убою.
Выявлено, что моча человека обладает ЭАСМ-активностью [7,11,22,28]. Это показано для мочи 5-10-летних детей [7,11], мужчин и небеременных женщин, беременных (1, 2 и 3 триместры), рожениц (1 и 2 периоды) и родильниц [7]. Показано, что при беременности ЭАСМ-активность мочи возрастает [7], но при этом она оставалась ниже (в 2 раза), чем у сыворотки крови [22]. Не исключено, что снижение ЭАСМ-активности сыворотки крови при беременности обусловлено повышением экскреции ЭАСМ с мочой.
Исследование мочи 7-8-летних девочек и мальчиков показало [11], что ее ЭАСМ-активность не зависит от пола, гармоничности развития, уровня развития речи. В то же время для нее характерен циркадный ритм (в дневные часы ЭАСМ-активность выше, чем в у тренние или вечерние) и зависимость от конституции (при мезосоматическом типе она выше, чем при микро- или макросоматическом типах), уровня соматического здоровья (выше у детей со II группой здоровья, чем у детей с I группой), уровня визуально-структурного мышления и зрительно восприятия (при высоких уровнях ЭАСМ-активность выше, чем при низких).
Влияние околоплодных вод человека на сократительную активность изолированного миометрия человека и животных. Этот вопрос исследовался рядом авторов [2,3,7,42,46,47, 49,51,59,58,62], но однозначных результатов они не получили.
На полосках миометрия небеременных женщин воды беременных женщин (14-22 нед.) угнетали их ССА, а воды рожениц повышали ССА [51,59]. На полосках миометрия беременных женщин воды беременных женщин и рожениц, согласно [46,47], повышали ССА (при разведении не более, чем в 10 раз), однако авторы считают, что этот эффект не связан с наличием в водах специфического утеростимулятора, а обусловлен более низким содержанием в водах ионов К, Са и Na.
В опытах с изолированной маткой морских свинок также получены противоречивые результаты. По данным БухановаЯ.Г. [3], воды беременных и рожениц повышали ССА матки, однако по данным других авторов [42,62], воды беременных женщин угнетали ССА миометрия, а воды рожениц - повышали ее.
Аналогично, в опытах с изолированным миометрием крысы, по одним данным, воды беременных и рожениц повышают ССА [42,58], по другим - воды беременных женщин угнетают ССА миометрия, а воды рожениц - повышают ее [42,59,62]. По данным нашей лаборатории [2,7,22,28], околоплодные воды, полученные до родов и во время родовой деятельности и разведенные в 10,50,100,500, 1000 и 10000 раз, не влияют на ССА миометрия крысы (табл.). Все это дает основание утверждать, что
околоплодные воды, независимо от этапа беременности и родов, не содержат ЭАСМ. По нашему мнению, ЭАСМ, содержащийся в крови плода, попадает с мочой в околоплодные воды, где он подвергается гидролизу и разведению, в связи с чем его содержание становится ниже порогового, т.е. доступного для детекции методом биотестирования. Очевидно, что участие околоплодных вод в торможении СДМ беременных женщин, как это предполагается нами [2,28], осуществляется не только благодаря высокому содержанию в них эндогенного сенсибилизатора ¡д -адренорецепторов, но и отсутствию ЭАСМ.
2. Возможный механизм действия ЭАСМ
Согласно данным иБгутЫ М. [65], полученным на полосках матки крысы, миоцитстимулирующий эффект 0,5 мл сыворотки эквивалентен действшо 0,01 МЕ окситоцина. При этом эффект максимален в первые 3 минуты, после чего постепенно снижается, хотя и сохраняется еще 30-60 минут. Это означает, что для ЭАСМ-активности сыворотки крови характерно явление десенситизации. Это подтверждают и наши исследования сыворотки крови [2,7,11,12,14-16,20,21,
22, 25,26,28-31] и мочи [7,11,22]. Явление десенситизации с совокупности с данными об избирательном проявлении ЭАСМ-активности, которая, например, реализуется на ГМ аорты крысы и не проявляется на ГМ брыжеечной артерии крысы [36] и ГМ сосудов пуповины человека [21], реализуется на ГМ матки, желудка, кишечника, но не наблюдается на ГМ трахеи [11,22], указывает на то, что ЭАСМ воздействует на миоциты и кардиомиоциты за счет активации специфических клеточных рецепторов, Наиболее вероятно, что результатом активации этих рецепторов является увеличение Са-проницаемости мембраны клетки, что приводит к деполяризации (следствие этого - рост степени автоматии) и к повышению силы сокращения. Представление о том, что сыворотка крови повышает проницаемость мембраны для ионов Са2+, высказано рядом авторов в отношении миоцитов матки крысы [11,12,22,26,68] и кардиомиоцитов крысы [57]. Экспериментальное подтверждение этому было получено в наших опытах с миометрием крысы [22], в которых ЭАСМ-активность сыворотки крови человека существенно снижалась под влиянием блокаторов Са-проницаемости дилтиазема ( К)'6 г/мл) и верапамила (10'6 г/мл). Кроме того, об этом свидетельствуют и данные литературы о влиянии сыворотки крови на состояние тромбоцитов [32,55] и нейтрофилов человека [67]. В частности, в опытах с тромбоцитами человека, механизмы регуляции Са-проницаемости которых, по мнению Чазова Е.И. и соавт. [32], такие же, как и в ГМ сосудов, сыворотка крови больных ГБ повышает Са-проницаемость тромбоцитов нормотензивных доноров [32,55]. В опытах с нейтрофилами человека установлено [67], что фракция плазмы крови (с молекулярной массой 1,0-
1,5кД) здоровых людей повышает поглощение ионов Са из среды нейтрофилами человека на 218% от исходного уровня, а плазма крови больных с ГБ - на 856%. Эти данные указывают на наличие в плазме крови фактора, повышающего вход ионов Са2+в клетку. Весьма вероятно, что этим фактором и является ЭАСМ. Таким образом, можно заключить, что ЭАСМ является эндогенным активатором Са-проницеамости плазматической мембраны.
3. Природа ЭАСМ
Так как сыворотка крови человека проявляет миоцитстимулирующую активность на различных гладкомышечных объектах, которые, как известно
[23,28], существенно различаются между собой, по а-и (3-адрено-, М-холино-, окситоцино-, серотонино-, брадикинино-, простагландино-, эндотелино- и гистаминореактивности, то это означает, что ЭАСМ не является адреналином, норадреналином, дофамином, ацетилхолином, брадикинином, серотонином, окситоцином, простагландинами, эндотелином, ангиотензинном И, гистамином.
С нашей точки зрения, ЭАСМ состоит из нескольких компонентов. Основными компонентами ЭАСМ, вероятнее всего, являются фибринопептиды А и В и продукты деградации фибрина, образующиеся в процессе свертывания крови [7, 14,15,20,22,28]. Это подтверждается приводимыми ниже наблюдениями, которые коррелируют с данными о динамике ЭАСМ-активности сыворотки крови.
1) ЭАСМ-активность у сыворотки крови выше, чем у плазмы крови [20,22,41].
2) ЭАСМ-активность не характерна для ликвора [22,45], слюны [22] и околоплодных вод [2,7], т.е. для жидкостей, в которых фибриноген отсутствует или находится в малых количествах.
3) Моча, которая, очевидно, содержит фибринопептиды А и В и продукты деградации фибрина как вещества, предназначенные для выведения из организма, обладает ЭАСМ-активностью [7,8,11,22], хотя и более низкой (в 2 раза), чем у сыворотки крови [7,22]. При этом циркадный ритм ЭАСМ-активности (максимум - в дневное время) совпадает с циркадным ритмом содержания в крови фибриногена [10].
4) Фибринопептиды А и В повышают ССА миометрия крысы [54,59].
5) Согласно теории непрерывного свертывания крови [9], в крови постоянно присутствуют отщепляющиеся от фибриногена фибринопептид А (состоит из 16 аминокислотных остатков), фибринопептид В, а также 27 пептидов, являющихся продуктами деградации фибрина, среди которых различают ранние фрагменты - X (247 кД), и У (150 кД )
- и поздние - фрагменты Д (95 кД) и Е (50 кД), т.е. низкомолекулярные вещества. У здоровых людей концентрация фибринопептида А в крови колеблется от 0,1 до 1,5x1012 М; при этом период полужизни фибринопептида А в циркулирующей крови
составляет около 3 минут, а в стабилизированной крови
- до 4 часов; содержание фибринопептида В в крови не установлено [9,34].
6) По данным Шехтмана М.М. [34], при беременности концентрация фибриногена не меняется (возрастает лишь перед родами), интенсивность же фибринолиза при беременности снижается, а его восстановление происходит перед родами. Об этом свидетельствует низкий уровень продуктов деградации фибрина при беременности (2,0 мкг/мл) и его повышение перед родами (до 5,7 мкг/мл). Однако по данным других исследователей, при неосложненном течении беременности содержание общего фибриногена в крови прогрессивно возрастает [56,64], хотя доля фибриногена высокой молекулярной массы не увеличивается [56]. Содержание Д-димера в крови как маркера фибринолиза при беременности прогрес-
сивно растет [40,43,53], но это увеличение не коррелирует с уровнем фибриногена [53].
7) Согласно данным Макацария АД. и соавт. [13], в родах возрастет содержание растворимых комплексов мономеров фибрина и продуктов деградации фибрина и фибриногена (ПДФ), например, содержание фрагментов Д и Е увеличивается в 2 раза, а через сутки оно вновь снижается. В родах нарастает интенсивность фибринолиза, о чем свидетельствует повышение содержания в крови Д-димера [40,44]. В первые 3 дня после родов снижается содержание в крови общего фибриногена [56] и Д- димера [40,44], хотя полное восстановление содержания Д-димера в крови происходит через 4 недели после родов [40].
8) По данным Bang P., Fielder Р. [38], при беременности, помимо имеющихся у небеременных протеаз (70-90 кД), в крови появляются новые протеазы
Таблица 1
Суммарная сократительная активность (в % к фоновому уровню, М+т) продольных полосок рога матки небеременных крыс при тестировании сывороткой венозной крови матери, пуповинной крови новорожденных и околоплодными водами (по данным собственных исследований).
№ Группы п Кратность разведений биологических жидкостей
1:10 1:50 1:100 1:500 1:10і 1:10
Здоровые женщины (сыворотка венозной крови)
1 Небеременные (18-22 лет) 50 Z 221+24* 161+24* 146+20* 108+10 105+10
2 Беременные (4-11 нед.) 10 Z 100+19 132+17 88,3+7 80,2+9 65,0+11*
3 Беременные (27-33 нед.) 10 135±19 109+16 118+13 98,6+10 86,5+12 75,6+10*
4 Беременные (38-40 нед.) 11 209+24* 157±34 168+36 126+19 120+10 87,4+10
5 Роженицы, I период родов 18 273+94* 225+32* 156+31 110+5 104+8 90,4+9
6 Родильницы, 1-е сутки 26 Z 120+13 121+29 97,4+9 87,8+8 102+8
Различия достоверны, р<0,05 3 -4 1-2,3,4; 5-2,3,6 Нет 1-2,3,6; 2-4 2-4 Нет
Беременные с экстрагенитальной патологией (сыворотка венозной крови)
7 Здоровые (21-40 нед.) 22 Z Z 137+13 106+12 90,9+8 87,3+7
8 Беременные с СВД (21-40 нед.) 19 Z Z 120+12 103+12 96,9+10 88,0+7
9 Беременные с ГБ (21-40 нед.) 10 Z Z 175+56 81,3+13 103,5+6 99,8+5
Различия достоверны, р<0,05 - - Нет Нет Нет Нет
Новорожденные при физиологических или осложненных родах (сыворотка пуповинной крови)
10 Здоровые 27 164+14* 168+18* 163+12* 100+4 92,2+9 78,4+6*
11 СРД 22 183+21* 179+18* 145+24* 103+9 87,7+9 72,4+6*
12 Г естоз 21 200+22* 158+15* 137+14* 122+12 90,3+6 88,3+7
13 Плацентарная недостаточность 20 179±13* 208+37* 210+44* 126+12* 105+15 76,6+7*
Межгрупповые различия недостоверны, р>0,1
Роженицы, I период срочных физиологических родов (околоплодные воды)
14 Околоплодные воды 23 113±20 90,6+15 92,5+13 81,5+13 85,8+9 71,4+8
Различия достоверны, р<0,05 14-4,10 14-10 14-10 Нет Нет Нет
Примечание: * - различие с фоновой суммарной СА достоверно, р <0,05; ВСД- вегето-сосудистая дистония, ГБ- гипертоническая болезнь; Ъ - не исследовано.
(150 кД.), разрушающие фибринопешиды А и В, а также ПДФ, что коррелирует со снижением ЭАСМ-активности сыворотки крови при беременности.
9). У женщин при гестозе в крови матери повышается содержание фибриногена, плазменных факторов свертывания и продуктов деградации фибрина [13,56] и это повышение тем больше, чем выше тяжесть гестоза [13]. Это коррелирует с данными о повышении ЭАСМ-активности сыворотки крови при гестозе, выявленном в опытах с маткой морской свинки [3]. В литературе сообщается о том, что содержании фибриногена в пуповинной крови новорожденных от матерей с преэклампсией такое же, как у новорожденных от здоровых матерей [63]. Это согласуется и с нашими данными об отсутствии различий между ними в отношении ЭАСМ-активности.
10). По нашим данным, ЭАСМ-активность сыворотки крови беременных женщин с ГБ такая же, как и у здоровых беременных. Эти данные, в определенной степени, согласуются с сообщениями о том, что у таких женщин коагуляционный потенциал и фибринолиз не повышен, а даже снижен, о чем свидетельствует уменьшение содержания ПДФ и Д-димеров [52].
11). На полосках аорты крысы ЭАСМ-активность проявляет фракция плазмы крови человека, содержащая вещества с небольшой молекулярной массой (0,5 - 3,5 кД) и не содержащей эндотелии [68]. Повышение входа ионов Са2+ в нейтрофилы вызывает фракция плазмы крови с молекулярной массой от 1,0 до 1,5кД [67]. ЭАСМ-активность в отношении миометрия крысы проявляет фракция сыворотки крови человека с молекулярной массой до 1 кД, но ее не проявляет ни одна из 20 аминокислот [22,26]. По мнению С^еа М. [41], фактор, повышающий СА гладких мышц желудка и кишечника, является полипептидом с высокой молекулярной массой.
12) Трипсин (но ±-химотрипсин) частично снижает миоцит-стимулирующую активность сыворотки крови в отношении гладких мышц подвздошной кишки морской свинки [41].
В то же время в литературе имеются данные, указывающие на то, что помимо фибринопептидов А и В и продуктов деградации фибрина в состав ЭАСМ могут входить и другие вещества, в том числе, белковой природы. В частности, это:
1) Сообщение о повышении сократимости кардиомиоцитов крысы под воздействием фактора сыворотки крови с молекулярной массой до 50 кД [4].
2) Данные о повышении СА гладких мышц желудка и кишечника под влиянием фактора сыворотки крови с массой более 50 кД [41,48], который состоит из 5 белков [48].
3) Данные о способности альбумина, ¿-глобулина, иммуноглобулина 1§ в, гемоглобина и оксиге-моглобина проявлять миоцитстимулирующую активность в опытах с ГМ сосудов [60] и желудка [37].
4) Сведения о способности альбумина оказывать вазоконстрикторное действие [35,66].
Кроме того, результаты исследования влияния длительного хранения и температурного воздействия на миоцитстимулирующие свойства сыворотки крови не противоречат представлению о том, что ЭАСМ состоит из нескольких компонентов, среди которых имеются пептиды, полипептиды и белки. Действительно:
1) Хранение сыворотки крови в течение нескольких часов при 20-22°С повышает ее ЭАСМ-активность в отношении гладких мышц подвздошной кишки морской свинки [41], а инкубация сыворотки (плазмы) при 37°С в течении нескольких часов или при 4°С в течение нескольких недель повышает ее вазоконстрикторный эффект [35,66]. Однако в литературе отмечено, что ЭАСМ-активность сыворотки крови [1,33] и мочи [8] по мере их хранения при 4°С быстро снижается и через 72 ч уже не проявляется. Туманова Т.В. [26] также показала, что ЭАСМ-активность сыворотки крови при ее хранении не возрастает, а снижается, но это снижение происходит на 7-е сутки хранения, что говорит о низкой скорости спонтанного разрушения ЭАСМ. В целом представленные данные подтверждают гипотезу о многокомпонентности ЭАСМ.
2) Согласно одним данным литературы, кипячение не влияет на ЭАСМ-акт ивность сыворотки крови [3] и мочи [7,8], но по другим данным [26], 60-минутное кипячение сыворотки и мочи беременных женщин снижает (в 2 раза) их ЭАСМ-активность. Это говорит о том, что в составе ЭАСМ имеется термолабильные (среднемолекулярный пептид, белок?) и термоустойчивые компоненты (низкомолекулярный пептид?)
Резюмируя представленные данные, можно утверждать, что в сыворотке крови человека и животных содержится ЭАСМ. Наиболее вероятно, что он состоит из многих компонентов. Среди них - фибринопептиды А и В и поздние продукты деградации фибрина (фрагменты Д и Е,). Воздействуя на специфические рецепторы миоцитов гладких мышц и кардиомиоцитов, ЭАСМ повышает вход в клетку Са2+ и тем самым увеличивает их сократительную активность.
4. Физиологическая роль ЭАСМ и его участие
в формировании акушерской патологии
Представленные в статье данные, в том числе полученные в нашей лаборатории, позволяют считать, что ЭАСМ наряду с паратгормоном, тирокальцито-нином и 1,25-дигидроксикальциферолом участвует в поддержании кальциевого гомеостаза в организме человека и животных на всех этапах онтогенеза. В этом отношении ЭАСМ можно рассматривать как синергист тирокалыщтонина, так как под его влиянием уровень ионов Са2+ в крови должен снижаться вследствие их поступления в ГМ и кардиомиоциты. Кроме того, ЭАСМ может способствовать реализации сосудистого гемостаза, так как является вазоконстрик-
тором. Одновременно ЭАСМ может выполнять функцию вторичного антикоагулянта как фактор, снижающий уровень ионов Са2+ в крови. Очевидно, что ЭАСМ можно рассматривать как фактор, повышающий сократительную деятельность желудка и кишечника. Не исключено, что повышенное содержание ЭАСМ может иметь прямое отношение к патогенезу бронхиальной астмы и ГБ.
Имеются весьма убедительные доказательства, позволяющие рассматривать ЭАСМ в качестве фактора, повышающего СДМ у небеременных женщин и рожениц. С этих позиций снижение содержания ЭАСМ в крови при беременности, которое установлено нами и другими авторами, следует расценивать как один из механизмов, предназначенных для торможения СДМ при беременности. Недостаточное повышение содержание ЭАСМ перед родами и в родах может приводить к развитию СРД, а избыточное содержание ЭАСМ во время беременности может способствовать формированию гестоза.
Все это указывает на перспективность дальнейшего изучения природы и механизма действия ЭАСМ.
Список литературы:
1. Аминева Л.А. // Акушерство и гинекология,-1968,-Т.44,№1.-С.29-31.
2. Братухина С.В. Адренергический механизм при беременности и в родах, его роль в патогенезе слабости родовой деятельности. Автореф. дисс....к. м. н.-М., 1997.-22 с.
3. Буханов Я.Г. // Акушерство и гинекология.-1936,-№2.-С. 123-133.
4. Ворновицкий Е.Г., Ленькова H.A., Василец Л.А., Ходоров Б.И. //Бюл. эксп. биологии имедицины,-1982,- Т.49, №10.-С.10-13.
5. Гордина В.З. // Акушерство и гинекология 1991,-№4.-0.11-13.
6. Грищенко В .И // Акушерство и гинекология 1955,-№5.-0.10-14.
7. Джергения С.Л. Гуморальные компоненты систем регуляции сократительной деятельности матки беременных женщин // Автореф. дис. ... к. б. н,- М., 1995,-19 с.
8. Дроздовская З.П. Экспериментальные и клинические данные по изучению влияния мочи беременных женщин на сократительную деятельность матки//Автореф.дис....к.м.н.- Караганда, 1966,- 18с.
9. Зубаиров Д.М. Молекулярные основы свертывания крови и тромбообразования. - Казань: Фэн, 2000,-364 с.
10. Комаров Ф.И., Рапопорт С.И. Хронобиология и хрономедицина, М.:Триада-Х-2000, -488 с
11. Кононова Т.Н. Роль эндогенных I-адрено и М-холиномодуляторов в регуляции деятельности систем организма человека // Автореф. дис...к.б.н. - Киров, 2004,-20 с
12. Куншин A.A. Влияние сыворотки крови человека на М-холино- и ±-, I- адренореактивность
гладких мышц желудка крысы // Автореф.. .дис. к.б.н., -Киров, 2006.-23 с.
13. Макацария А.Д., Мищенко А.Л., Бицадзе В.О., Маров С.В. Синдром диссеминированного свертывания крови в акушерской практике,- М.: Триада -X, 2002.-496 с.
14. Мальчикова С.В., Сизова Е.Н., Циркин В.И., Гуляева С.Ф., Трухин А.Н. // Рос. физиол. журн. им. И.М. Сеченова.-2003а.-Т. 89,№5.-С. 556-563.
15. Мальчикова С.В., Сизова Е.Н., Циркин В.И., Гуляева С.Ф., Трухин А.Н., Ведерников В.А. // Рос. кардиол. журн.-20036.-№ 3 (41).-С. 33-39.
16. Морозова М. А. Роль нервных и гуморальных факторов в срочной регуляции 1-адренореактивности миометрия человека и животных // Автореф. дис.... к.. б.. н.-М, 2000,- 18с.
17. Николаев А.П. Нервно-гуморальные факторы регуляции родовой деятельности женщины.- Донецк, 1940,-198 с.
18. Осокина A.A. Клинико-лабораторная характеристика ß-адренергического механизма при угрозе преждевременных родов//Автореф.... дис. к., м.. н.-Казань, 1998.-20 с.
19. Пащенко В.В. // Регуляция родовой деятельности: Сб. науч. трудов.- Киев, 1966.- С. 48-55.
20. Помаскин И.Н. Клинико-экспериментальная характеристика I-адренорецепторного ингибирующего механизма у беременных и рожениц. / Автореф. дисс. ... к. м. н,- Омск, 1990. -17 с.
21. Сазанова М.Л. Влияние сыворотки пуповинной крови человека на гладкие мышцы матки и сосудов пуповины // Автореф.... к. б. н.- Киров, 2002.-17с.
22. Сизова Е.Н. Физиологическая характеристика
эндогенных модуляторов I-адрено- и М-холино-реактивности и их участие в регуляции деятельности различных систем организма человека и животных // Автореф. дисс.д.б л..- М: РУДН, 2005. -32 с.
23. Сизова Е.Н., Циркин В.И. Физиологическая характеристика эндогенных модуляторов I-адрено- и М-холинореактивности. -Киров; ВСЭИ, 2006. -183 с.
24. Снигирева Н.Л., Тарловская Е.И., Циркин В.И. //Проблемы адаптации человека к экологическим и социальным условиям Севера: Тезисы докладов II симпозиума с международным участием.- Сыктывкар, 2004.-С. 98-99.
25. Трухин А.Н. Влияние эндогенных модуляторов I-адрено- и М-холинорецепторов на хемореактивность миометрия, миокарда и на вариабельность сердечного ритма//Автореф ...к. б. н.-Киров.-2003.-20с
26. Туманова Т.В. Изучение природы эндогенного сенсибилизатора I-адренорецепторов и других факторов, регулирующих сократимость и адренореактивность гладкой мускулатуры //Автореф.... дис. к.б.н.. М.-1998,- 17с.
27. Циркин В.И., Дворянский С.А., Ноздрачев А. Д., Заугольников B.C., Сизова Е.Н. //Доклады РАН.-19966,- Т.351, №4,- С. 565-566.
28. Циркин В.И., Дворянский С.А. Сократительная деятельность матки (механизмы регуляшш).-Киров., 1997,-270 с.
29. Циркин В.И., Дворянский С.А., Ноздрачев А.Д., Братухина С.В., Морозова М.А., Сизова Е.Н., Осокина А.А., Туманова Т.В., ШушкановаЕ.Г., Видякина ГЛ.//Доклады РАН.- 1997.-Т.352,№1.-С. 124-126.
30. Циркин В.И., Ноздрачев А. Д., Сазанова М.Л., Дворянский С.А., Хлыбова СВ. II Доклады РАН. -2003. -Т. 388, №5. -С. 704-707.
31. Циркин В.И., Кононова Т.Н., Сизова Е.Н., Попова И.В., Вахрушева A.C., Костяев A.A., Кушиин A.A., Пенкина Ю.А. // Вятский мед. вестник.- 2006,- № 1.-С. 53-65.
32. Чазов Е.И., Меньшиков М.Ю., Ткачук В.А. // Успехи физиологических наук.-2000,- Т 31,№1,- С.3-17.
33. Черепахин Г.К. // Труды VII Всес. съезда гин. и акушеров-М.,1927.-С. 702-705.
34. Шехтман М.М, Руководство по экстраге-нитальной патологии у беременных - М.: Триада-Х, 2004,-815 с.
35. AmeilG., Dekanski J. //Lancet.-1954.-№ 11.-P. 1204-1207.
36. Bachman J., Schlüter H., Storkebaum W. et al. // Life Sei.-1990.-Vol.47, №15,-P.1365-1374.
37. Bali J., Magous R.,Anmor S. //Eur. J. Pharmacol. -I990.-Vol. 183.-P.2186.
38. Bang P., Fielder P. // Endocrinology. - 1997. -Vol. 138,№9.-P. 3912-3917.
39. BellCh.//Am.J. Obst.Gynecol.- 1973,-Vol.l 17, №8,-P. 1088-1092.
40. Boehlen F., Epiney M., Boulvain M., Irion O., de MoerlooseP.//Rev. Med. Suisse.-2005.- Vol. 1,№4.-P. 296-298.
41. Cirstea M. // Rev. roum. Physiol. -1973. - Vol. 10, №4,-P. 309-315.
42. Cuparencu В., Birsan E., Idu V. et al. // Zbl. Gynak.-I960.-Vol.5.-P.192-198.
43. Eichinger S. //Semin. Vase. Med. -2005. - Vol. 5, №4.-P. 375-378.
44. Epiney M., Boehlen F., Boulvain M., Reber G., Antonelli E., Morales M., Irion O., De Moerloose P. // J. Thromb. Haemost. -2005. - Vol. 3, № 2. -P. 268-271.
45. Fernandez E., Maira G., Pallini R., Риса A. // Neurochirurgia.- 1987.- Vol.30, № 6.- P. 168-171.
46. Fuchs A.-R., Wagner G. // J.Obstet. Ginecol. Br. Common.-1963.-Vol.30, №4.- P.665-668.
47. Gabor M. //Zbl. Cynac.- 1964.-Bd.86,№24.-S. 851-853
48. Hajde S., Leonard E. //J. Cell. Physiol.-1978,- Vol. 96, №3 .-P.279-290.
49. Hanon F., Coquion-Camot M, Lignard P. Masson, Paris, 1955- P.
50. Hertlein E., Kenner Т., Dordelmann P. // Z. Kreislauf-forshg.-1969. - Bd. 58,- S. 755-758.
51. Karim S., Delvin I. // J. Obstet. Ginecol. Br. Common.-1967,-Vol.74.- P. 230-234.
52. Karowicz-BilinskaA., Kowalska-KoprekU., Suzin J., SieroszewskiP. //Ginekol. Pol. -2003.-Vol. 74, № l.-P. 55-60.
53. Kline J., Williams G., Hemandez-Nino J. // Clin. Chem. - 2005. - Vol. 51, № 5. - P. 825-829.
54. Laki K. Fibrinogen. - NewYork.- 1968.
55. Lindner A., Kenny М., Meacham A. // N. Engl. J. Med.- 1987,-Vol.316.-P. 509-513.
56. Manten G., Franx A., Sikkema J., Hameeteman Т., Visser G., de Groot P., Voorbij H. // Thromb. Res. -2004. -Vol. 114,№ l.-P. 19-23.
57. Mocanu М., Botea S., Dragomir С //Rev. Roum. Morphol. et embtiol -1991 -Vol. 37.-P. 1 -2
58. Ogier E. //Arch. Int. Pharmacodyn- 1955.- Vol 103,№ 1..-P.34*
59. PajorA., GrofJ., Menuhart J. // Kiserl. Orvostud.-1984- Vol .36, №5.- P.508-513.
60. Pillai G., Sutter M. // Can. J. Physiol. And Pharmacol.-1989,- Vol.67, №10,- P. 1272-1277.
61. SapakK. // Cs. Ginec. Pol.-1966.-Vol.31, №2.-P.326-331.
62. Stamm O.//Gynecology (Basel).- 1953,-V. 136.-P.377* (см. католог ЦВ).
63. Tanjung М., Siddik H., Hariman H., Koh S. // Clin. Appl. Thromb. Hemost. - 2005. - Vol. 11, № 4. - P. 467-473.
64. Uchikova E., Ledjev I. // Eur. J. Obstet. Gynecol. Reprod..Biol.—2005.-Vol. 119,№2.-P. 185-188.
65. Uszynski M. // Ginec. Pol.- 1968.- Vol.39, №2,-P. 187-192.
66. WurmH.,KennerT//BasicRes. Cardiol- 1978.-Vol.73,№l.-P. 1-9.
67. Zidek W’., Sachinidis A, Spiecer C. et al. // Atherosclerosis -1988. - Vol. 69, № 2-3.- P. 185-190.
68. Zidek W., Bacbmann I. Schluter H. et al. // Clin, and Exp. Hypertens. A.-1990,- Vol. 12, №3.- P. 365-381.
Summary
MYOCITES STYMULATING ACTIVITY OF BLOOD SERUM AND ITS CHANGE AT PREGNANCY AND IN PARTUM (REVIEW)
V.I.Tsirkin, S.V.Hlybova, E.N.Sizova Kirov state medical academy,
Vjatka social and economic institute
The review includes known and also obtained by the authors of this article data concerning ability of human and animals blood serum to raise contractive activity of isolated smooth muscles from uterus and other organs. Myocyte stimulating activity of blood serum is caused by endogenous activator of myocytes contractility (EAMC). The components of this factor probably are fibrinopeptides A and В and products of fibrin degradation. The article presents data of changes of myocytes stimulating activity of blood serum in pregnancy and in labour and also at obstetric and somatic complications. The decrease of EAMC at pregnancy and restoration before labour allows to consider this factor as the participant of contractile activity regulation of human uterus The question of EAMC participation in formation of uterine weakness in labour and gestosis is discussed.
