CC BY
0
| ГЕМАТОЛОГИЯ И ТРАНСФУЗИОЛОГИЯ | RUSSIAN JOURNAL OF HEMATOLOGY AND TRANSFUSIOLOGY (GEMATOLOGIYA I TRANSFUSIOLOGIYA) | 2023; ТОМ 68; №2 |
Таблица. Чувствительность Candida auris (критерии Centers for Disease Control
and Prevention - CDC, 2020)
Антимикотик Чувствительные, п(%) Резистентные, п (%) мпк50, мкг/мл мпк90, мкг/мл
Флуконазол 0 23 (100%) 128 128
Вориконазол 0 23 (100%) 64 64
Каспофунгин 23 (100%) 0 0,032 2
Анидулафунгин 23(100%) 0 0,032 2
Амфотерицин В 16 (69,6%) 7 (30,4%) 1 4
штаммов. У всех штаммов C. auris была детектирована способность к формированию биопленок. При анализе нуклеотидных последовательностей регионов ITS, D1-D2 рДНК 100% C. auris были отнесены к южноазиатскому кладу (Clade I). У всех изолятов была выявлена мутация K143R в гене ERG11, которая ведет к формированию устойчивости к азолам.
Заключение. Все штаммы C. auris были выделены из гемокульту-ры от больных в ОРИТ. Эхинокандины проявляли активность in vitro в отношении всех C. auris, в то время азолы были резистентными. Все азолрезистентные штаммы несли мутацию K143 R в гене ERG11. C. auris принадлежали к одной генетической линии —— южноазиатскому кладу (Clade I), широко распространенному по всему миру и характеризующемуся высокой долей содержания изолятов с множественной резистентностью. Продукция биопленок была детектирована у всех C. auris.
Мальчикова А.О., Фролова И.Н., Клясова Г.А. МИКОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ИНВАЗИВНОГО АСПЕРГИЛЛЕЗА ЛЕГКИХ У БОЛЬНЫХ ГЕМОБЛАСТОЗАМИ
ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Минздрава России, г. Москва
Введение. Микологическая диагностика инвазивного аспергил-леза легких (ИАЛ) включает люминесцентную микроскопию, определение антигена галактоманнан (ГМ) и культуральное исследование.
Цель. Оценить чувствительность разных методов в диагностике ИАЛ у больных с гематологическими заболеваниями.
Материалы и методы. В проспективное исследование были включены больные ФГБУ «НМИЦ гематологии» с гематологическими заболеваниями и ИАЛ (2000—2022 гг.) Все случаи ИАЛ были микологически подтвержденными и включали варианты «доказанный» и «вероятный» (критерии EORTC/MSG, 2020 г.). Индекс оптической плотности (ИОП) ГМ считали положительным при значениях в жидкости бронхоальвеолярного лаважа (БАЛ) >1,0, в сыворотке крови >0,5, в биоптате легкого >0,5. Культуру Aspergillus spp. получали на среде Чапека или Сабуро с декстрозой. Идентификацию грибов проводили на основании морфологии (de Hoog G.S. et al., 2021) и методом масс-спектрометрии.
Результаты. В течение 23 лет в исследование включили 445 больных с ИАЛ, из них у 434 (97,5%) — «вероятный» ИАЛ, у 11 (2,5%) — «доказанный». Больные ИАЛ имели острый миелоидный лейкоз (n=170, 37,4%), острый лимфобластный лейкоз (n=90, 19,8%), неходж-кинские лимфомы (n=74, 16,3%), апластическую анемию (n=34, 7,5%), множественную миелому (n=28, 6,1%), миелодиспластический синдром (n=20, 4,4%), острый промиелоцитарный лейкоз (n=15, 3,3%), хро -нический миелолейкоз (n=8, 1,8%), другие (n=11, 2,4%). Исследуемыми образцами были: БАЛ у 377 (84,7%) больных, биоптаты легкого —— у 11 (2,5%), мокрота — у 25 (5,6%), сыворотка крови — у 369 (82,9%). Положительные значения ИОП ГМ были определены у 321 (76,2%) из 421 больных ИАЛ, культура Aspergillus spp. — у 221 (53,5%) из 413, септированный мицелий при микроскопии —— у 72 (30,4%) из 237 (таблица 1). Положительный ИОП ГМ определяли достоверно чаще в сравнении с выделением Aspergillus spp. (76,2% против 53,5%, ур<0,001)
Таблица 1. Частота положительных знамений лабораторных тестов длн диагностики ИАЛ у больных с гематологическими заболеваниями
Диагностика ИАЛ Всего
n/N (%)
Положительный ИОП ГМ 321/421 (76,2)*
• Кровь 172/369 (46,6)*
• БАЛ 96/377 (25,5)
• БАЛ+кровь 50/245 (20,4)
• Биоптат легкого 3/11 (27,3)
Культура Aspergillus spp. 221/413 (53,5)*
• БАЛ 186/377 (49,3)
• Биоптат 10/11 (90,9)
• Мокрота 25/25
• Монокультура 209/221 (94,6)
• Сочетание 12/221 (5,4)
Септированный мицелий при микроскопии 72/237(30,4)
и микроскопией (76,2% против 30,4%, ^<0,001). Преобладало выделение Aspergillus spp. из образцов в сравнении с выявлением септиро-ванного мицелия при микроскопии (53,5% против 30,4%, ур<0,001). Aspergillus spp. были получены из жидкости БАЛ у 186 (49,3%) из 377 больных, из биоптатов у 10 (90,9%) из 11 (у 1 больного ИОП ГМ — 1,653). У 12 (5,4%) больных были сочетания Aspergillus spp. У 9 (3,8%) из 237 больных при микроскопии был выявлен септированный мицелий без позитивной культуры, но определен положительный ИОП ГМ. В структуре возбудителей ИАЛ доминировали A. fumigatus (40,5%) и A. flavus (22,4%), реже был A. niger (16,4%), таблица 2. Доля редких видов Aspergillus составила 20,7%. Природную резистентностью к азолам имели 2,2% Aspergillus spp. (5 A. calidoustus), к амфотерицину В — 6,5% (7A. nidulans, 4 A. terreus, 3 A. alliaceus, 1 A. ochraceus). Положительные значения ИОП ГМ одновременно в крови и в БАЛ были только у 50 (20,4%) из 245 больных. Частота детекции положительного ИОП ГМ была значимо выше в сыворотке крови (46,6%) в сравнении с жидкостью БАЛ (25,5%), исследованиями одновременно из крови и БАЛ (20,4%) и биоптатом легкого (27,3%), ^<0,001.
Заключение. Для микологической диагностики ИАЛ следует использовать все лабораторные методы, включая микроскопию,
Таблица 2. Этиология ИАЛ
Примечание: n/N - число положительных образцов/всего исследуемых образцов, * - р<0,001.
Вид Aspergillus Всего 232
N(%)
Aspegillus fumigatus 94 (40,5)
Aspegillus flavus 52 (22,4)
Aspegilius niger 38 (16,4)
Aspegillus versicolor 12 (5,2)
Aspergillus sydowii 7(3)
Aspergillus nidulans 7(3)
Aspergillus calidoustus 5 (2,2)
Aspergillus terreus 4(1,7)
Aspergillus alliaceus 3 (1,3)
Aspergillus niveus 2 (0,9)
Aspergillus oryzae 2 (0,9)
Aspergillus spp. 2 (0,9)
Aspergillus ochraceus 1 (0,4)
Aspergillus ornatii 1 (0,4)
Aspergillus Candidus 1 (0,4)
Aspergillus flavipes 1 (0,4)
ПРИЛОЖЕНИЕ 1
культуру и определение ИОП ГМ. Основными образцами являются БАЛ (84,7%) и сыворотка крови (82,9%). Наиболее высокой чувствительностью обладает тест по детекции антигена ГМ (76,2%).
Отмечена высокая частота выделения Aspergillus spp. из БАЛ (49,3%). Выявлено разнообразие Aspergillus spp, часть из них была с природной резистентностью к амфотерицину В (6,5%) и к вориконазолу (2,2%).
Мальчикова А.О., Клясова Г.А.
ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА МУКОРМИКОЗА И ИНВАЗИВНЫХ МИКОЗОВ, ВЫЗВАННЫХ МИЦЕЛИАЛЬНЫМИ ГРИБАМИ
тъ-лзреяошт, у больных гемобластозами
ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Москва
Введение. Согласно Международным рекомендациям (EORTC/ MSG, 2020 г.) микологическое подтверждение инвазивных микозов (ИМ), вызванных грибами non-Aspergillus, заключается в люминесцентной микроскопии с окраской калькофлуором и выделении культуры грибов из биологических образцов, вовлеченных в патологический процесс.
Цель. Провести сравнительное изучение чувствительности используемых методов в диагностике мукормикоза и других ИМ, вызванных мицелиальными грибами non-Aspergillus, у больных с гемато-логическими заболеваниями и ИМ.
Материалы и методы. В проспективное исследование (2005— 2022 гг.) было включено 70 больных с гематологическими заболеваниями и ИМ, вызванным мицелиальными грибами non-Aspergillus. Диагностика включала микроскопию образцов (69 —— люминесцентная микроскопия с окраской калькофлуором белым, 1 (Fusarium spp. из гемокультуры) —— световая микроскопия с окраской по Граму) и культуральное исследование. Культуру грибов получали на агари-зованной среде Чапека или Сабуро с декстрозой, инкубируя чашки Петри в течение 5 дней при температуре 30 и 37 °C. Все штаммы грибов были идентифицированы на основании морфлологии (de
Hoog G.S. et al., 2021) и методом MALDI-TOF MS.
Результаты. За 18 лет ИМ, вызванные грибами non-Aspergillus, были диагностированы у 70 больных, из них мукормикоз — у 48 (68,6%) больных, другие ИМ — у 22 (31,4%). В структуре больных ИМ преобладали больные острыми лейкозами (64,3%). При диагностике мукормикоза бронхоальвеоляр-ный лаваж (БАЛ) исследовали у 52,1% больных, биоптаты — у 41,7%, таблица. Культура Mucorales из жидкости БАЛ была получена у 21 (84%) больного, из биоптата — у 15 (75%). Микроскопия была положительна у 88,9% больных. У 9 (20%) больных мукормикоз был верифицирован только на основании микроскопии. Основные возбудители мукормикоза — Mucor spp. (35,8%), Rhizomycor spp. (25,6%), Rhizopus spp. (23,1%), Lichtheimia corymbifera (10,3%), Cunninghamella spp. (5%). При диагностике ИМ, вызванных другими мицелиальными грибами non-Aspergillus, бронхоальвеолярный лаваж выполняли у 63,6% больных, биопсию — у 27,3%
соответственно. Культура грибов была детектирована из всех биологических образцов, септированный мицелий —— из 11 (52,4%). Спектр возбудителей ИМ: Fusarium spp. (13,1%), Acremonium spp. (9,8%), далее Altarnaria altarnata (3,3%), Paecilomyces variotii (3,3%), Purpureocillium li-lacinum (1,6%), Bipolaris spp. (1,6%), Scedosporium spp. (1,6%), Trichophyton rubrum (1,6%). Мукормикоз в сравнении с ИМ, вызванными другими мицелиальными грибами non-Aspergillus, статистически значимо чаще был диагностирован с помощью микроскопии (20% против 0%, р=0,048), при этом в группе сравнения чаще получали культуру грибов (50% против 16,7%, р=007).
Заключение. При подозрении на мукормикоз практически в половине случаев использовали биоптаты тканей и органов. При диагно -стике мукормикоза во всех случаях следует проводить флуоресцентную микроскопию, поскольку в части случаев не удается получить культуру грибов. Все возбудители ИМ, вызванные другими мицелиальными грибами non-Aspergillus, были выявлены с помощью культу-рального метода.
Таблица. Микологическая диагностика ИМ, вызванными мицелиальными грибами поп-Aspergillus, у больных с гематологическими заболеваниями
Показатель Мукормикоз Другие ИМ, вызванные
N (%) мицелиальными грибами
non-Aspergillus, N (%) Р
Всего 48 Всего 22
Исследуемые образцы
БАЛ 25 (52,1) 14 (63,6) 0,4
Биопсия 20 (41,7) 6 (27,3) 0,3
Мокрота 3 (6,3) 1 (4,5) 1,0
Кровь 0 1 (4,5) 1,0
Диагностика ИМ
Микроскопия 40/45 (88,9) 11/21 (52,4) 0,003
• БАЛ 20/25 (80) 5/14 (35,7) 0,01
• Биопсия 20/20(100) 5/6 (83,3) 0,2
• Кровь 0 1/1 1,0
Культуральное исследование 39/48 (81,3) 22/22 (100) 0,048
• БАЛ 21/25 (84) 14/14 0,2
• Биопсия 15/20 (75) 6/6 0,3
• Кровь 0 1/1 1,0
Культура+микроскопия 31/45 (68,9) 11/21 (52,4) 0,3
Только культура 8/48(16,7) 11/22 (50) 0,007
Только микроскопия 9/45 (20,0) 0/21 0,048
Миронова Д.А., Клясова Г.А., Кузьмина Л.А., Дроков М.Ю., Паровичникова Е.Н.
ПРОФИЛАКТИКА ИНВАЗИВНЫХ МИКОЗОВ У ПАЦИЕНТОВ ПОСЛЕ ПЕРВОЙ ТРАНСПЛАНТАЦИИ АЛЛОГЕННЫХ ГЕМОПОЭТИЧЕСКИХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК В ПЕРИОД НЕЙТРОПЕНИИ
ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр гематологи
Введение. Профилактика инвазивных микозов (ИМ) в период нейтропении у пациентов после трансплантации аллогенных гемо-поэтических стволовых клеток (алло-ТГСК) является необходимой. Выделяют первичную и вторичную профилактику антимикотиками.
Цель. Изучить эффективность антимикотиков в режиме первичной и вторичной профилактики в период нейтропении у пациентов после первой алло-ТГСК.
Материалы и методы. В исследование были включены пациенты, находившиеся на лечении в НМИЦ гематологии (2021—2022 гг.) после первой алло-ТГСК. Все пациенты были в одноместных палатах, оснащенных НЕРА-фильтрами. В период лейкопении (лейкоцитов менее 1,0х109/л) первичную профилактику проводили флуконазолом
и» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Москва
400 мг/сут, при наличии остаточных изменений в легких, не связанных с ИМ, —— вориконазолом (по 200 мг 2 раза) или эхинокандином (микафунгин 50 мг или каспофунгин 50 мг), при повышении печеночных показателей —— эхинокандином. Для вторичной профилактики назначали антимикотик согласно варианту перенесенного ИМ.
Результаты. Всего было выполнено 179 алло-ТГСК. Характеристика пациентов представлена в таблице 1. Медиана длительности нейтропении составила 20 (7—90) дней. Первичную противогрибковую профилактику проводили 166 (93%) пациентам, вторичную —— 13 (7%). Для первичной профилактики назначали флуконазол 154 (93%) пациентам, вориконазол — 7 (4%), эхинокан-дин —— 5 (3%, из них каспофунгин я=3, микафунгин п=2). Вторичную
