CC BY
28
ENDOCRINOLOGY 3.1.19.
O. B. Glavnova, N. V. Vorokhobina, L. I. Velikanova, M. I. Yarmolinskaya, E. V. Malevanaya, E. G. Strelnikova, K. A. Balandina GAS CHROMATOGRAPHY-MASS SPECTROMETRY BASED STEROID METABOLOMICS IN WOMEN WITH DIFFERENT PHENOTYPES OF POLYCYSTIC OVARIAN SYNDROME
AND NORMAL BODY WEIGHT
Оригинальная статья
УДК: 618.11-006.2-031.14:612.018]-07
https://doi.org/10.21886/2219-8075-2022-13-3-107-117
Метаболомика стероидных гормонов по данным газовой хромато-масс-спектрометрии у женщин с различными фенотипами синдрома поликистозных яичников с нормальной массой тела
О. Б. Главнова2, Н. В. Ворохобина1, Л. И. Великанова1, М. И. Ярмолинская12, Е. В. Малеваная1,
Е. Г. Стрельникова1, К. А. Баландина1
1Северо-Западный государственный медицинский университет им. И. И. Мечникова, Санкт-Петербург, Россия 2Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта, Санкт-Петербург, Россия
Автор, ответственный за переписку: Главнова Ольга Борисовна, o.glavnova@mail.ru
Аннотация. Цель: изучить метаболомику стероидных гормоновпо данным газовой хромато-масс-спектрометрии (ГХ-МС)у женщин с различными фенотипами синдрома поликистозных яичников (СПЯ)и нормальной массой тела. Материалы и методы: в исследование вошли 48женщин с СПЯ в возрасте25±0,3 летс ИМТ,находящимся в референтом интервале 18,5-24,9 кг/м2. Группу контроля составили 25 здоровых женщин в возрасте 26±0,6 летс ИМТ23 (21-24)кг/ м2. Гормоны определяли методами иммуноанализа в сыворотке крови. Исследовали стероидные профили мочи (СПМ) методом ГХ-МС. Статистическая обработка данных осуществлялась с использованием программной системы STATIS-TICAforWINDOWS (версия 10). Результаты: в статье приведён анализ метаболомики андрогенов, глюкокортикоидных гормонов и прогестагенов, полученных методом ГХ-МСу женщин с различными фенотипами СПЯ. Заключение: экскреция с мочой метаболитов андростендиона была увеличена у больных СПЯ с гиперандрогенией и с ановуляцией (с фенотипами А и В), метаболитов дегидроэпиандростерона— у больных СПЯ с гиперандрогенией (с фенотипами А, В и С). Повышение экскреции с мочой 11-охо-прегнантриола, прегнантриола и 17-гидроксипрегнанолона, снижение соотношений суммы тетрагидропроизводных кортизола и кортизона к данным стероидам, определение 21-дезокситетрагидрокортизола и неклассических 5-епе-прегненов получены у больных СПЯ с фенотипом С, что указывает на недостаточность фермента 21-гидроксилазы. У больных СПЯ с гиперандрогенией(с фенотипами А, В и С) полученыпризнаки недостаточности 3^-гидроксистероиддегидрогеназы. Только у больных СПЯ с фенотипом А выявлены признакинедостаточности 11^-гидроксистероиддегидрогеназы 1 типа.
Ключевые слова: синдром поликистозных яичников, фенотипы,газовая хромато-масс-спектрометрия, гиперандрогения
Финансирование. Исследование не имело спонсорской поддержки.
Для цитирования: Главнова О. Б., Ворохобина Н. В., Великанова Л. И., Ярмолинская М. И., Малеваная Е. В., Стрельникова Е. Г., Баландина К. А. Метаболомика стероидных гормонов по данным газовой хромато-масс-спектрометрии у женщин с различными фенотипами синдрома поликистозных яичников с нормальной массой тела. МедицинскийвестникЮгаРоссии. 2022;13(3):107-117. DOI 10.21886/2219-8075-2022-13-3-107-117
Gas chromatography-mass spectrometry based steroid metabolomics in women with different phenotypes of polycystic ovarian syndrome
and normal body weight
O. B. Glavnova2, N. V. Vorokhobina1, L. I. Velikanova1, M. I. Yarmolinskaya12, E. V. Malevanaya1,
E. G. Strelnikova1, K. A. Balandina 1
1I. I. Mechnikov North-Western State Medical University, St. Petersburg, Russia
2D. O. Ott Research Institute of Obstetrics, Gynecology and Reproductology, St. Petersburg, Russia
Corresponding author: Glavnova B. Olga, o.glavnova@mail.ru
Abstract. Objective: to study the steroid metabolomics in women with normal body weight and various PCOS phenotypes by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). Materials and methods: forty-eight(48) women with PCOS aged 25±0,3 years with a BMI less than 25 kg/m2 were examined. The control group (CG) consisted of twenty-five (25) healthy women aged 26±0,6 years with a BMI of 23 (21-24) kg/m2. Immunoassays were used to determine the levels of hormones in serum. Urinary steroid profiles (USP) were studied by GC-MS method. Statistical data processing was performed using the software system
© О. Б. Главнова, H. В. Ворохобина, Л. И. Великанова, М. И. Ярмолинская, Е. В. Малеваная, Е. Г. Стрельникова, К. А. Баландина, 2022
Е. Г. Стрельникова, К. А. Баландина ЭНДОКРИНОЛОГИЯ
МЕТАБОЛОМИКА СТЕРОИДНЫХ ГОРМОНОВ ПО ДАННЫМ ГАЗОВОЙ
ХРОМАТО-МАСС-СПЕКТРОМЕТРИИ У ЖЕНЩИН С РАЗЛИЧНЫМИ ФЕНОТИПАМИ И19.
СИНДРОМА ПОЛИКИСТОЗНЫХ ЯИЧНИКОВ С НОРМАЛЬНОЙ МАССОЙ ТЕЛА
STATISTICA for WINDOWS (ver. 10). Results: the article provides an analysis of the metabolism of androgens, glucocorticoids and progestogens in women with different phenotypes of polycystic ovary syndromeaccording to gas chromatography-mass spectrometry. Summary: the urinary excretion of androstenedione metabolites was increased in PCOS patients with androgen excess and anovulation (A and B phenotypes), dehydroepiandrosterone metabolites - in PCOS patients with androgen excess (A, B and C phenotypes). PCOS women with phenotype C showed raised urinary excretion of 11-oxo-pregnanetriol, pregnane-triol and 17-hydroxypregnanolone, a decrease in the ratios of the sum of tetrahydro derivatives of cortisol and cortisone to these progestogens, as well as determination of tetrahydro-21-deoxycorticol and nonclassical 5-ene-pregnenes according to GC-MS data. In fact, it indicated to deficiency of the 21-hydroxylase enzyme in these patients. It was found PCOS patients with androgen excess (A, B and C phenotypes) had the signs of insufficient 3^-hydroxysteroid dehydrogenase activity. PCOS women with phenotype A were revealed deficiency of 11^-hydroxysteroid dehydrogenase (type 1).
Keywords: polycystic ovary syndrome,phenotypes, gas chromatography-mass spectrometry, hyperandrogenism
Finansing. The study did not have sponsorship.
For citation: Glavnova O. B., Vorokhobina N. V., Velikanova L. I., Yarmolinskaya M. I., Malevanaya E. V., Strelnikova E. G., Balandina K. A. Gas chromatography-mass spectrometry based steroid metabolomics in women with different phenotypes of polycystic ovarian syndrome and normal body weight. Medical Herald of the South of Russia. 2022;13(3):107-117. DOI 10.21886/2219-8075-2022-13-3-107-117
Введение
До настоящего времени единой классификации гипе-рандрогении (ГА) нет. Большинство исследователей выделяют две основные формы — опухолевую и неопухолевую, или функциональную, которую в зависимости от генеза нарушений подразделяют на яичниковую, надпо-чечниковую и смешанную. Кроме того, различают ГА истинную, рецепторную и транспортную [1]. Наиболее частыми причинами ГА являются синдром поликистозных яичников (СПЯ) и неклассическая форма врожденной дисфункции коры надпочечников (НФ ВДКН), большинство случаев которой обусловлено недостаточностью фермента 21-гидроксилазы [2,3].Клиническая картина СПЯ и НФ ВДКН может быть схожей и требует проведения дифференциальной диагностики[4]. Для выявления источника ГА используют определение различных гормонов, проводят функциональные пробы на стимуляцию и подавление функции яичников и надпочечников. Определение локализации источника ГА представляет значительные трудности, так как спектр синтезируемых гормонов и ключевых ферментных систем синтеза андрогенов в яичниках и надпочечниках сходны[5].
Широкое применение в определении гормонов нашли методы иммунохимического анализа из-за их высокой чувствительности. Однако низкая специфичность этих методов, наличие перекрестных реакций приводят к возрастанию числа ложноположительных результатов и, таким образом, к гипердиагностике [6]. Так, содержание 17-гидроксипрогестерона (17-ОНП) может быть в пределах нормальных значений у женщин с НФ ВДКН [7]. При СПЯ в половине случаев выявляется повышенный уровень 17-ОНП, а у 20-30% пациентов наблюдается увеличение надпочечниковых андрогенов, таких как дегидроэпиан-достерон-сульфат (ДЭА-С).У пациенток с клиническими признаками ГА при базальном уровне 17-ОНП в пределах нормальных значений для выявления источника ГА проводится стимулирующий тест с синтетическим аналогом кортикотропина (тетракозактидом), который является «золотым стандартом» для диагностики НФ ВДКН [8,9] .В настоящий момент в России отсутствуют зарегистрированные препараты тетракозактида. У некоторых гетерозиготных носителей мутаций в гене 21-гидроксилазы уровни 17-ОНП могут быть такими же, как у пациентов с
НФ ВДКН. В использовании генетического тестирования главным препятствием является сложность молекулярно-генетического анализа, а также то, что большинство доступных панелей скрининг-тестов исследуют 10-12 наиболее распространённых мутаций и могут не обнаружить все мутации, которые на сегодняшний день известны[10]. Методы хроматографии позволяют получить стероидные профили крови и мочи, являющиеся наиболее ценными диагностическими тестами для заболеваний, связанных с нарушением синтеза и метаболизма стероидных гормонов [11]. По мнению ряда авторов, оценка стероидных гормонов методом тандемной хромато-масс-спектрометрии является надежным методом диагностики НФ ВДКН, позволяющим существенно снизить число ложноположи-тельных результатов [12]. Другие исследователи придают особое значение определению стероидного профиля мочи (СПМ) методом газовой хромато-масс-спектрометрии(ГХ-МС), дающим возможность идентифицировать большое число андрогенов, глюкокортикоидов, их предшественников и метаболитов [13,14,15]. Имеются единичные исследования по метаболомике стероидов у больных СПЯ с ожирением. Обнаружено повышение экскреции с мочой прегненов, дегидроэпиандростерона и его метаболитов, метаболитов андростендиона, биологически активных 5а- и 5^-тетрагидрометаболитовглюкокортикоидов, снижение активности фермента 11^-гидроксистероиддеги дрогеназы (11^-ГСДГ) 1 типа, что приводит к накоплению неактивных глюкокортикоидов [16,17].YuyingD.иYifeiZ. обследовали женщин с СПЯ с нормальной массой тела, с избыточной массой тела и с ожирением. Сравнительный анализ показал, что женщины с нормальной массой тела имели признаки недостаточности фермента 21-гидрокси-лазы при отсутствии мутации в гене в отличие от женщин с избыточной массой тела и ожирением, что также подтверждает разные варианты стероидогенеза[18]. В результате влияния избытка андрогенов у женщин могут проявляться различные по степени выраженности клинические проявления, такие как акне, гирсутизм, алопеция. За проявление адрогеннойалопеции и акне, как правило, отвечает 5а-редуктаза, которая превращает тестостерон в более активный андроген дигидротестостерон [16]. Существует две изоформы 5а-редуктазы: 5а-редуктаза 1 и 2 (SRD5A1, SRD5A2). 5а-редуктаза 1 экспрессируется в волосистой
O. B. Glavnova, N. V. Vorokhobina, L. I. Velikanova, ENDOCRINOLOGY M. I. Yarmolinskaya, E. V. Malevanaya, E. G. Strelnikova, K. A. Balandina
GAS CHROMATOGRAPHY-MASS SPECTROMETRY BASED STEROID METABOLOMICS 3.1.19. IN WOMEN WITH DIFFERENT PHENOTYPES OF POLYCYSTIC OVARIAN SYNDROME
AND NORMAL BODY WEIGHT
части головы, в печени, в яичниках, в матке, в почках и головном мозге, 5а-редуктаза-2 экспрессируется в печени и в меньшей степени, в волосистой части головы и коже [19]. При высокой активности фермента 5а-редуктазы I типа у женщин наблюдают выраженные признаки андрогензави-симой дермопатии без других проявлений. В настоящее время имеется немало данных об увеличении активности 5а-редуктазы при СПЯ.
Выделяют 4 фенотипа СПЯ (А,В,С и Б) [20]. Фенотип А — классическое сочетание трёх диагностических критериев, а именно гиперандрогении (клинической,биохимической или сочетанной), олиго- и/ или ановуляции и поликистозных изменений в яичниках (на основании результатов УЗ исследования). Фенотип В представляет собой комбинацию синдрома гипе-рандрогении и олиго-ановуляции без эхографических признаков поликистоза в яичниках. Фенотип С включает синдром гиперандрогении и поликистозноизменен-ные яичники по данным ультразвукового исследования при отсутствии олиго/ановуляции (овуляторный СПЯ). Фенотип Б представляет собой комбинацию олигоанову-ляции и поликистоза яичников по данным эхографиибез проявлений синдрома гиперандрогении (неандрогенный СПЯ).По данным различных исследований, посвящён-ных изучению распространенности фенотипов СПЯ у женщин репродуктивного возраста, установлено, что фенотип А встречается у 44-65 % женщин, фенотип В — у 8-33 %, фенотип С — у 3-29 %, а фенотип Б — у 23 % [21,22]. Представляется актуальным поиск дополнительных биохимических маркеров дифференциальной диагностики различных фенотипов СПЯ с использованием методов хроматографии.
Материалы и методы
Обследовано 48 женщин с СПЯ в возрасте от 24 до 29 лет (средний возраст 25±0,3 лет) с индексом массы тела (ИМТ), находящимся в референтом интервале 18,5-24,9 кг. Группу контроля (ГК) составили 25 здоровых женщин в возрасте 26 (23-30)лет с нормальным ИМТ. Диагноз СПЯ был диагностирован согласно А8ИМ/Е8ЫИЕ (2003), InternationalPCOSNetwork (2018),согласно которым наличие двух из трёх основных критериев определяет наличие определенного вида (фенотипа) СПЯ. Больные СПЯ были разделены на четыре группы:15 пациентов с клиническими и биохимическими признаками ГА, ановуляцией и признаками поликистозных изменений яичников (ПКЯ), по данным ультразвукового исследования (фенотип А),11 больных СПЯ без ПКЯ с ановуляцией и ГА (фенотип В), 9 больных СПЯ с овуляцией, ГА, ПКЯ (фенотип С), 13 пациентов с ановуляцией и признаками ПКЯ, но без ГА составили группу с фенотипом Б. Методами иммуноанали-за определяли уровни лютеинизирующего гормона (ЛГ), фолликулостимулирующего гормона (ФСГ), свободного тестостерона, 17-ОН прогестерона (17-ОНП), дегидроэ-пиандростерона сульфат (ДЭА-С), Д-4-андростендиона, глобулина, связывающего половые гормоны (ГСПГ) в сыворотке крови. Исследовали СПМ методом ГХ-МС с оптимизацией регламента пробоподготовки, для которой выбран вариант жидкостной экстракции.Установ-лены оптимальные количества дериватизирующих агентов (метоксиамина и триметилсилилимидазола), а также
подобраны условия хроматографического анализа[17, 23, 24].Всего идентифицировано 69 стероидов. СПМ получены на газовом хромато-масс-спектрометре SHIMADZU GCMS-QP2020. Статистическая обработка данных осуществлялась с использованием программной системы STATISTICA for WINDOWS (версия 10).0сновные количественные характеристики больных представлены в виде медианы (Me), 25-го перцентиля и 75-го перценти-ля (Q25-Q75). Для сравнения результатов, полученных в исследуемых группах, использовался непараметрический критерий Манна-Уитни. Статистически значимым считался критерий достоверности р<0,05.
Исследование проведено в соответствии с международными стандартами GCP (GoodClinicalPractice).
Результаты
Методом иммуноанализа обнаружено снижение уровня ГСПГ и увеличение уровня свободного тестостерона в сыворотке крови у больных СПЯ с фенотипами А, В и D, общим признаком которых была ановуляция. Увеличение уровня ЛГ и соотношения ЛГ/ФСГ более, чем в 2 раза, в сыворотке крови в сравнении с ГК получены только у больных СПЯ с фенотипами А и В (табл.1).У больных СПЯ с фенотипами А, B, С и D были повышены уровни 17-ОНП и андростендионав сыворотке крови, а уровень ДЭА-С был увеличен только у больных СПЯ с фенотипом В в сравнении с ГК (табл. 1).
Методом ГХ-МС были получены различные СПМ у больных СПЯ с фенотипами А, В, С и D.
Экскреции с мочой (ЭМ) дегидроэпиандростеро-на (ДЭА) была увеличена у всех обследованных больных СПЯ в сравнении с ГК (табл. 2). Следует отметить, что ЭМDЭА была выше у больных СПЯ с фенотипом В (р=0,017) и СПЯ с фенотипом С (р=0,028) в сравнении с СПЯ с фенотипом D. ЭМ метаболитов DHEA— андростендиола-17в (dA2-17^), 16a-0H-DHEA-2— повышена у больных СПЯ с фенотипами А, В и С. Увеличение ЭМ андростентриола (dA3) выявлено только у больных с фенотипами А и В (табл. 2).
У больных СПЯ с фенотипом А была увеличена ЭМ метаболитов андростендиона — андросте-рона (An), этиохоланолона (Et) и 11-OH-An. У пациентов, имеющих фенотип B, была увеличена ЭМ 5а-метаболитовандростендиона An и 11-OH-An в сравнении с ГК. Увеличение соотношения 11-0H-An/11-0H-Et получено у больных СПЯ с фенотипами А, В, С, что является одним из признаков повышения активности фермента 5а-редуктазы (табл. 3).
У больных СПЯ с фенотипами А, В и С получено увеличение ЭМ тетрагидрометаболитовкортикостерона (5Р-ТЖ и 5а-ТЖ) и 11-дезоксикортизола (THS). У больных СПЯ с фенотипами А и В повышена ЭМ 5а-тетрагидрокортизона (5а-ТЖ) и кортолонов, а у больных СПЯ с фенотипом D— ЭМ только 5а-ТЖ (табл. 2).
Снижение соотношений 5^-THF/5p-THE и (5^-THF+ 5a-THF+кортолы)/(5p-THE+5a-THE+кортолоны) у больных СПЯ с фенотипом А указывало на уменьшение активности 11^-гидроксистероиддегидрогеназы (11^-ГСДГ)1 типа, что способствует увеличению ЭМ неактивных глю-кокортикоидов (табл. 3). Функциональный гиперкор-тизолизм за счёт активации гипоталамо-гипофизарной
Е. Г. Стрельникова, К. А. Баландина ЭНДОКРИНОЛОГИЯ
МЕТАБОЛОМИКА СТЕРОИДНЫХ ГОРМОНОВ ПО ДАННЫМ ГАЗОВОЙ
ХРОМАТО-МАСС-СПЕКТРОМЕТРИИ У ЖЕНЩИН С РАЗЛИЧНЫМИ ФЕНОТИПАМИ И19.
СИНДРОМА ПОЛИКИСТОЗНЫХ ЯИЧНИКОВ С НОРМАЛЬНОЙ МАССОЙ ТЕЛА
надпочечниковой системы приводит к синтезу надпочеч-никовых андрогенов, тем самым дополнительно нарушая процесс фолликулогенеза. Кроме того, снижение активности 11^-ГСДГ 1 типа усиливает метаболизм кортизола, что приводит к компенсаторному увеличению секреции АКТГ и стимуляции стероидогенеза надпочечников, что также подтверждает смешанный характер гиперандроге-немии у женщин с СПЯ.
Признаки увеличения активности 5а-редуктазы различной степени получены у всех обследованных больных СПЯ. Три признака увеличения активности 5а-редуктазы получены у больных СПЯ с фенотипами А и В: повышение соотношений 11-ОН-Ап/11-ОН-И, 5а-ТНВ/5^-ТНВ и 5а-ТНР/5в-ТНР. Два признака — у больных СПЯ с фенотипом С: увеличение соотношений 11-ОН-Ап /11-ОН-& и 5а-ТНР/5в-ТНР. Один признак — у больных СПЯ с фенотипом Б: повышение ЭМ 5а-ТНВ и соотношения 5а-ТНВ/5^-ТНВ (табл. 3).Клинические признаки андрогенной дермопа-тии были более выражены у женщин с СПЯ и фенотипами А и В, что выражалось в более выраженном гирсутизме и акне, располагающимся на лице, спине и груди.
Увеличение ЭМ прегнантриола (Р3) и прегнентриола ^Р3) были общими признаками нарушений метаболомики
прогестагенов у больных СПЯ с фенотипами А, В и С. У больных СПЯ с фенотипом С была дополнительно повышена ЭМ 17-ОН-прегнанолона (17-ОНР), 11-охо-Р3, 6-ОН-прегнанолона (6-ОН-Р), а у больных СПЯ с фенотипами А и В — ЭМ 17-ОНР. У больных СПЯ с фенотипом Б была увеличена ЭМ только Р3 в сравнении с ГК (табл. 2). Соотношения (5в-ТНР+5а-ТНР+ТНЕ)/Р3 меньше 3,0, (5в-ТНР+5а-ТНР+ТНЕ)/17-ОНР —меньше 12 и (5в-ТНР+5а-ТНР+ТНЕ)/11-охо-Р3 —меньше 20 в сочетании с увеличением ЭМ Р3, 11-охо-Р3 и 17-ОНР могут указывать на недостаточность 21-гидроксилазы у больных СПЯ с ГА, овуляцией и ПКЯ (фенотип С) (табл. 2). У больных СПЯ с фенотипом С были определены 21^еоху-ТНР 108 (75-218) мкг/24 ч и 5-епе-прегнены: 21-ОН-прегненолон 40 (30-42) мкг/24 ч, 11-ОН-прегнентриол 66 (37-104)мкг/24 ч., не детектируемые у здоровых лиц, что также может указывать на недостаточность фермента 21-гидроксилазы.
Кроме того, выявлено два признака снижения активности 3в-гидроксистероиддегидрогеназы-2 (3Р-Н8Б2) у больных СПЯ с фенотипами А, В и С: уменьшение соотношений (5в-ТНР+5а-ТНР+ТНЕ)/БНЕАи (5^-ТНР+5а-ТНР+ТНЕ)МР3, что подтверждает смешанный характер ГАу данной группы женщин (табл. 3).
Таблица / Table 1
Содержание гормонов в сыворотке крови у больных с различными фенотипами СПЯ, по данным методов иммуноанализа Serum hormone levels in patients with different forms of PCOS assessed by immunoassay
noKa3aTe^b Indicator ME (Q25-Q75)
Группа контроля Control group n=25 Больные синдромом поликистозных яичников Patients with polycystic ovary syndrome
фенотип A n=15 phenotype A фенотип В n=11 phenotype В фенотип С n=9 phenotype С фенотипD n=13 phenotype D
nroTeMHM3Mpyro^MM ropMOH (HT), ME/H luteinizing hormone (LG) 5,6 4,8 - 7,3 14,1C 11,4-16,5 10,2B 6,9-16,3 8,5 5,2-10,7 8,7 4,7-13,7
$o.raMKyrocTMMy.TO-pyro^MM ropMOH ($CT), Me/H Follicle stimulating hormone (FSG) 5,8 3,6 - 6,4 5,5 4,3-7,2 6,5 6,1-6,7 6,9 6,2-9,0 5,9 5,2-6,5
CooTHomeHMe LH/FSH ratio 1,1 0,9 - 1,3 2,7C 2,1-3,6 2,3A 1,3-2,5 1,2 0,7-1,8 1,6 0,7-2,4
17-mflpoKCMnporecTepoH, Hr/MH 17-hydroxyprogesterone, ng/ml 0,7 0,4 - 0,8 1,9D 1,4-2,5 1,8C 1,5-2,9 1,5A 1,0-2,5 1,6A 0,8-2,4
flerMflpoanMaHflpocTepoH-cym^aT, MKr/MH Dehydroepiandrosterone sulfate, mkg/ml 1,5 1,4-1,7 1,6 1,2-2,2 2,8B 1,9-2,9 1,4 1,4-3,5 1,9 1,7-2,9
AHflpocTeHflMoH, Hr/MH Androstenedione, ng/ml 1,7 1,3-2,0 6,8D 3,6-10,0 4,9C 3,5-5,8 2,5A 2,4-3,8 2,9B 2,5-4,7
Cboöoahhm TecTocTepoH, nr/MH Free testosterone, pg/ml 1,1 0,7 - 2,0 2,8C 2,6-8,0 3,0B 2,5-3,1 2,3 1,4-2,8 3,1A 1,5-4,0
TCnr, hmoWH SHBG, nmol/l 66 50 - 86 30,9D 17,4-35,0 38,8B 31,7-50,5 84,4 65,0-111,0 49,2A 45,0-61,6
Примечание: A —p<0,05, B — p<0,01, С — p<0,001, D — p<0,0001; достоверность различий показателей больных синдромом поликистозных яичников с фенотипами А, В, С и D в сравнении с показателями группы контроля.
Notes: A — p<0.05, B — p<0.01, C — p<0.001, D — p<0.0001; high probability of indicators of patients with polycystic ovary syndrome with phenotypes A, B, C and D, depending on the indicators of the control group.
O. B. Glavnova, N. V. Vorokhobina, L. I. Velikanova, ENDOCRINOLOGY M. I. Yarmolinskaya, E. V. Malevanaya, E. G. Strelnikova, K. A. Balandina
GAS CHROMATOGRAPHY-MASS SPECTROMETRY BASED STEROID METABOLOMICS 3.1.19. IN WOMEN WITH DIFFERENT PHENOTYPES OF POLYCYSTIC OVARIAN SYNDROME
AND NORMAL BODY WEIGHT
Таблица / Table 2
Экскреция с мочой стероидов у больных с различными фенотипами СПЯ, по данным газовой хромато-масс-спектрометрии The urinary excretion of steroids in patients with different forms of PCOS assessed by GC-MS
Название стероидов Name of steroids Me (Q25-Q75), мкг/24 ч
Гpyппa кoнтpoля n=25 Group control Больные синдромом поликистозных яичников Patients with polycystic ovary syndrome
фенотип А n=l5 phenotype A фенотип В n=ll phenotype В фенотип С n=9 phenotype С фeнomunD n=l3 phenotype D
Андрогены Androgens
Aндpocтepoн (An) Androsterone (An) 791 486-1162 1760в 1139-3477 1290a 1007-2515 1136 797-1769 1203 935-1355
Этиoxoлaнoлoн (Et) Etiocholanolone (Et) 1018 545-1300 1743в 1100-2407 1182 800-2032 920 836-1689 1222 721-1549
Aндpocтeндиoл-17ß (dA2-17ß) Androstenediol-l7ß (dA2-l7ß) 97 70-108 151 123-257 330в 128-504 201в 163-280 110 80-116
Дeгидpoэпиaндpocтepoн (ДЭA) Dehydroepiandrosterone 123 55-225 282B 127-681 639c 348-1800 550c 449-656 261a 184-455
16a-DHEA-2 117 100-217 559в 493-734 724в 440-1175 928 409-1461 420c 181-628
11-OH- An 359 254-431 668a 606-741 841в 700-1016 711 388-904 681 488-999
11-OH- Et 253 195-459 315 243-431 475 231-522 331 156-476 289 250-502
Aндpocтeнтpиoл (dA3) Androstentriol(dA3) 201 154-431 526a 293-682 520a 281-879 523 236-668 264 227-550
Прогестагены Progestogens
17-гидроксипрегнанолон (17-OHP) 17-hydroxypregnenolone (17-OHP) 55 52-182 292a 168-327 282a 156-437 299a 187-412 160 142-200
6-гидроксипрегнанолон (6-OHP) 6-hydroxypregnenolone (6-OHP) 13 11-16 61 35-123 40 26-67 85a 32-251 14 10-19
Прегнандиол (P2) Pregnandiol (P2) 591 383-815 800 646-923 1203 484-1608 1350a 678-1595 497 303-771
Прегнантриол (P3) Pregnandiol (P3) 415 350-467 932в 731-1124 1134в 772-2385 1151c 844-1296 824c 663-1015
11-oxo-P3 14 10-19 21 11-42 35 10-46 56в 18-89 15 11-26
Прегнендиол (dP2) Pregnandiol (dP2) 243 200-384 330 232-393 549a 230-1272 521в 500-569 378 313-421
3а,16,20-прегнентриол (16-OH-dP2) 3a,16,20-pregnentriol (16-OH-Dp2) 162 125-173 205в 165-252 202в 187-311 280c 251-409 140 102-158
3а,17,20-прегнентриол (dP3) 3a,17,20-pregnentriol (Dp3) 204 170-277 358a 248-533 502c 312-1039 405в 283-657 260 215-355
Е. Г. Стрельникова, К. А. Баландина ЭНДОКРИНОЛОГИЯ
МЕТАБОЛОМИКА СТЕРОИДНЫХ ГОРМОНОВ ПО ДАННЫМ ГАЗОВОЙ
ХРОМАТО-МАСС-СПЕКТРОМЕТРИИ У ЖЕНЩИН С РАЗЛИЧНЫМИ ФЕНОТИПАМИ И19.
СИНДРОМА ПОЛИКИСТОЗНЫХ ЯИЧНИКОВ С НОРМАЛЬНОЙ МАССОЙ ТЕЛА
Таблица / Table 2 (Продолжение)
Название стероидов Name of steroids Ме (Q25-Q75), мкг/24 ч
Группа контроля n=25 Group control Больные синдромом поликистозных яичников Patients with polycystic ovary syndrome
фенотип A n=15 phenotype A фенотип В n=11 phenotype В фенотип С n=9 phenotype С фенотипD n=13 phenotype D
Глюкокортикоиды Glucocorticoids
Тетрагидро-11-дезоксикортизол (THS) Tetrahydro-11-deoxycortisol (THS) 15 12-38 37А 28-63 69А 51-103 60А 44-68 52 28-98
Тетрагидрокортизон (THE) Tetrahydrocortisone (THE) 1329 1192-1595 1475 1150-2280 1492 1212-2470 1101 867-1894 1346 952-1897
Тетрагидрокортикостерон (THB) Tetrahydrocorticosterone (THB) 54 32-80 137В 75-230 131С 98-168 129С 90-221 75 57-161
5а-ТНВ 50 20-106 233С 172-366 275С 225-393 282В 145-292 280В 160-355
Тетрагидро-11-дегидрокортикостерон (ТНА) Tetrahydro-11-dehydrocorticosterone(THA) 43 24-85 55 50-79 69 49-87 50 31-62
Тетрагидрокортизол (THF) Tetrahydrocortisol (THF) 508 404-602 446 350-601 595 357-660 327 217-788 425 263-550
5а -THF 316 270-394 510 276-965 463А 360-1120 356 295-733 653 133-972
5а -THE 65 45-94 101А 82-166 139А 100-270 110 82-136 55 49-91
а-кортолон a-cortolon 232 216-267 348А 256-448 485А 391-586 382 143-553 395 309-560
в-кортолон в-cortolon 150 115-173 228В 170-334 254В 238-484 243 133-309 175 119-316
а-кортол+ в-кортол a-cortol + в-cortol 25 25-50 16 10-25 15 10-30 11А 10-25 10 8-35
Примечание: A —р<0,05, B — р<0,01, C — р<0,001, D — р<0,0001; достоверность различий показателей больных синдромом поликистозных яичников с фенотипами А, В, С, D в сравнении с показателями группы контроля Notes: A — p<0.05, B — p<0.01, C — p<0.001, D — p<0.0001; reliability of indicators of patients with polycystic ovary syndrome with phenotypes A, B, C, D, depending on the indicators of the control group
Обсуждение
Гиперандрогения — синдром, обусловленный нарушением секреции и метаболизма андрогенов. Кроме высокой распространённости в популяции,ГА ассоциирована с метаболическими расстройствами, сахарным диабетом 2 типа, сердечно-сосудистыми заболеваниями и нарушением репродуктивной функции. Хотя синдром ГА включает в себя заболевания с разной этиологией, но его клинические проявления в большинстве случаев одинаковы: акне, гирсутизм, нарушение менструального цикла, ан-дрогензависимая алопеция. Проблема диагностики и лечения заболеваний, сопровождающихся ГА, в настоящее время является одной из наиболее актуальных в гинекологической эндокринологии[25, 26]. СПЯ является самой распространённой причиной синдрома ГА, распространённость которого среди женщин репродуктивного
возраста колеблется от 8 до 21%[27].У больных СПЯ с ГА (с фенотипами А и В) выявлено повышение экскреции с мочой андростерона (5а-метаболита андростендиона), что приводит к увеличению уровня 5а-дигидротестостерона (ДГТ) в крови, который обладает более высокой биологической активностью, чем тестостерон. Уровень ДГТ в крови зависит от содержания циркулирующих в крови андрогенов и активности клеточной5а-редуктазы, отвечает за развитие андрогенной дермопатии. Признаки увеличения активности 5а-редуктазы в различной степени, по данным ГХ-МС, получены при всех фенотипах СПЯ у женщин с нормальным весом: три призна-кау больных с ГА и ановуляцией (фенотипы А и В), два признака у больных СПЯ с фенотипом С, один признак у женщин с поликистозными яичниками без ГА (фенотип D).Клинические признаки андрогенной дермопатии
O. B. Glavnova, N. V. Vorokhobina, L. I. Velikanova, ENDOCRINOLOGY M. I. Yarmolinskaya, E. V. Malevanaya, E. G. Strelnikova, K. A. Balandina
GAS CHROMATOGRAPHY-MASS SPECTROMETRY BASED STEROID METABOLOMICS 3.1.19. IN WOMEN WITH DIFFERENT PHENOTYPES OF POLYCYSTIC OVARIAN SYNDROME
AND NORMAL BODY WEIGHT
Таблица /Table 3
Признаки активности 21-гидроксилазы, Зв-гидроксистероиддегидрогеназы, 5а-редуктазы и 11 в-гидроксистероиддегидрогеназы у больных с различными фенотипами СПЯ по данным газовой
хромато-масс-спектрометрии Features of 21-hydroxylase, 3fi-hydroxysteroid dehydrogenase, 5a-reductase, 11fi-hydroxysteroid dehydrogenaseactivities
identified by GC-MSin patients with different forms of PCOS
Соотношения продукт/субстрат Ratios product/substrate ME(Q25-Q75)
Группа контроля n=25 Group control Больные СПЯ Patients with PCOS
фенотип A n=15 phenotype A фенотип В n=11 phenotype B фенотип С n=9 phenotype C Фенотип D n=13 phenotype D
Признаки активности 21-гидроксилазы Signs of 21-hydroxylase activity
(THE+5p-THF+5a-THF) / P3 5,3 3,6 - 7,4 2,7C 2,2 - 3,1 2,3C 1,8 - 3,0 2,2C 1,4 - 3,0 2,3B 1,7 - 3,7
(THE+5e-THF+5a-THF)/ 11-oxo-P3 162 129-203 79 56-279 63 38-114 46B 23-75 101 64-133
(THE+5li-THF+5a-THF) / 17-OHP 29,6 12,4-59,1 10,7A 8,0-13,7 11,6 8,0-15,1 11,5A 4,6-11,7 13,9 9,6 - 22,4
Признаки активности 3^-гидроксистероиддегидрогеназы-2 Signs of 3fi-hydroxysteroid dehydrogenase-2 activity
(THE+5li-THF+5a-THF) /dP3 10,9 8,5 - 13,1 6,4B 5,2-8,6 5,4D 4,9-6,0 6,2C 4,3-6,6 10,1 2,9 - 69,8
(THE+5li-THF+5a-THF) /DHEA 17,7 14,5 - 34,8 6,7B 3,2-15,4 3,8C 2,2-5,8 4,3B 2,2-7,7 8,6 5,2 - 9,5
Признаки активности 5а-редуктазы Signs of 5a-reductase activity
11-OH-An / 11-OH-Et 1,4 1,2 - 1,5 2,3A 1,6- 3,2 2,0B 1,7 - 3,0 1,9B 1,7-2,8 2,6 1,3 - 3,5
5a-THF / 5P-THF 0,7 0,5 - 1,0 1,3A 0,7- 1,6 1,3A 0,9 - 1,5 1,0B 0,9 - 1,4 1,1 0,9 - 1,5
5a-THB / 5P-THB 1,0 0,7 - 1,5 2,2B 1,2 - 3,1 2,4C 1,8 - 3,1 1,4 1,2 - 2,0 2,6B 2,3 - 3,2
Признаки активности 11 в-гидроксистероиддегидрогеназы Signs of 11 в-hydroxysteroid dehydrogenase activity
(5р-ТОТ+5а-ТОТ+кортолы)/ (5р-ТНЕ+5а-ТНЕ+кортолоны) 0,51 0,48 - 0,60 0,43A 0,37 - 0,49 0,50 0,43 - 0,55 0,50 0,34- 0,57 0,49 0,31 - 0,59
5в -THF / 5P-THE 0,36 0,34 - 0,45 0,29A 0,19 - 0,33 0,29 0,28 - 0,40 0,33 0,22 - 0,42 0,27 0,19 - 0,32
Примечание: A — р<0,05, B — р<0,01, C — р<0,001, D — р<0,0001; достоверность различий показателей больных синдромом поликистозных яичников с фенотипами А, В, С и D в сравнении с показателями группы контроля ТНЕ — тетра-гидрокортизон, THF — тетрагидрокортизол, ТНВ — тетрагидрокортикостерон, Р3 — прегнантриол, 17-ОНР — 17-ги-дроксипрегнанолон, DHEA— дегидроэпиандростерон, dP3 — прегнентриол, An— андростерон, Et— этиохоланолон. Notes: A — p<0.05, B — p<0.01, C — p<0.001, D — p<0.0001; high probability of indicators of patients with polycystic ovary syndrome with phenotypes A, B, C and D, depending on the indicators of the control group. TNE — tetrahydrocortisone, THF — tetrahydrocortisol, THB — tetrahydrocorticosterone, P3 — pregnentriol, 17-OHP — 17-hydroxypregnanolone, DHEA — dehydroepiandrosterone, dP3 — pregnenetriol, An — androsterone, Et — etiocholanolone.
Е. Г. Стрельникова, К. А. Баландина ЭНДОКРИНОЛОГИЯ
МЕТАБОЛОМИКА СТЕРОИДНЫХ ГОРМОНОВ ПО ДАННЫМ ГАЗОВОЙ
ХРОМАТО-МАСС-СПЕКТРОМЕТРИИ У ЖЕНЩИН С РАЗЛИЧНЫМИ ФЕНОТИПАМИ HW.
СИНДРОМА ПОЛИКИСТОЗНЫХ ЯИЧНИКОВ С НОРМАЛЬНОЙ МАССОЙ ТЕЛА
были более выражены у женщин с СПЯ и фенотипами А и В. По данным ГХ-МС, у больных СПЯ с фенотипами А, В и С получено увеличение экскреции с мочой ДЭА и P3, снижение соотношений суммы тетрагидропроизводных кортизола и кортизона к данным стероидам в сравнении с группой контроля, что является признаками недостаточности 3ß-RSD2. Фермент 3ß-RSD2 необходим для превращения Д5-стероидов (прегненолона, 17-гидрокси-прегненолона и дегидроэпиандростерона) в соответствующие им Д4-стероиды (прогестерон, 17-гидроксипроге-стерон и андростендион) [28].Полученные результаты подтверждают нарушение стероидогенеза как яичникового, так и надпочечникового генезау данной группы женщин. Чтобы оценить внутриклеточную концентрацию глюкокортикоидов, необходимо определять не только их содержание в плазме, но и активность ферментов, которые участвуют в их метаболизме, например активность llß-ГСДГ. llß-ГСДГ 1 типа — это фермент, катализирующий превращение функционально малоактивного кортизона в самый активный глюкокортикоидный гормон кортизол. Признаки недостаточности llß-ГСДГ 1 типа,по данным ГХ-МС, получены у больных СПЯ с фенотипом А, что совпадает с данными других исследователей, которыми показано наличие снижения активности llß-ГСДГ 1 типа у женщин с ожирением с классическим фенотипом СПЯ. Фенотип С у больных СПЯ (овулятор-ный)наименее изучен и сложен в постановке диагноза в отличие от классического фенотипа. В исследовании выявлено повышение экскреции с мочой метаболитов 17-ОН-прогестерона:11-охо-прегнантриола, прегнантри-ола и 17-гидроксипрегнанолона, снижение соотношений суммы тетрагидропроизводных кортизола и кортизона к данным стероидам. Кроме того, у пациентов с фенотипом Сбыли определены 21-дезокситетрагидрокортизол и неклассические 5-епе-прегнены, что указывает на недостаточность фермента 21-гидроксилазы и требует дальнейшего изучения. Представленные данные указывают на избыточную выработку андрогенов у многих женщин с СПЯ как в яичниках, так и в коре надпочечников. Исследования СПМ методом ГХ-МС позволяют изучить
метаболомику стероидных гормонов и определить отличия в их метаболизме при разных фенотипах СПЯ.
Выводы
1. Экскреция с мочой метаболитов андростендиона увеличена у больных синдромом поликистозных яичников с гиперандрогенией и с ановуляцией (с фенотипом А и В), а метаболитов дегидроэпиандростерона— у больных синдромом поликистозных яичников с гиперандро-генией (фенотипы А, В и С).
2. Повышение экскреции с мочой 11-охо-прегнантри-ола, прегнантриола и 17-гидроксипрегнанолона, снижение соотношений суммы тетрагидропроизводных кор-тизола и кортизона к данным стероидам, определение 21-дезокситетрагидрокортизола и неклассических 5-епе-прегненову больных синдромом поликистозных яичников с фенотипом С указывают на недостаточность фермента 21-гидроксилазы.
3. Недостаточность llß-гидроксистероиддегидрогена зы 1 типа выявлена у больных с поликистозными яичниками, гиперандрогенией и ановуляцией (фенотип А),что свидетельствует о наличии функционального гиперкор-тизолизма в результате избытка биологически низкоактивных глюкокортикоидов.
4. У больных синдромом поликистозных яичников с гиперандрогенией (с фенотипами А, В и С) получено увеличение экскреции с мочой дегидроэпиандростерона и прегнентриола, снижение соотношений суммы тетраги-дропроизводных кортизола и кортизона к дегидроэпиан-дростерону и прегнетриолу в сравнении с группой контроля, что является признаками недостаточности 3ß-i^ роксистероиддегидрогеназы-2.
5. Признаки увеличения активности 5а-редуктазы по данным газовой хромато-масс-спектрометрии получены при всех фенотипах синдрома поликистозных яичников: три признака у больных с гиперандрогенией и ано-вуляцией, с поликистозноизмененными яичниками и без поликистозных яичников (фенотипы А и В), два признака у больных с фенотипом С, один признак у женщин споли-кистозными яичниками без гиперандрогении (фенотип D).
ЛИТЕРАТУРА REFERENCES
1. Доброхотова Ю.Э., Рагимова З.Э., Ильина И.Ю., 1. Dobrokhotova Yu.E., Ragimova Z.E., Ilyinal.Yu., Ibragimova Ибрагимова Д.М. Гиперандрогения и репродуктивное D.M. Hyperandrogenism and reproductive health of women. здоровье женщины. М.: ГЭОТАР-Медиа; 2015. Moscow: GEOTAR-Media; 2015. (In Russ.)
2. Волкова Н.И, Давиденко И.Ю, Канаева С.А., Шемя- 2. Volkova N.I., Davidenko I.U., Kanaeva S.A., Shemyakina K.D. кина К.Д. Диагностика синдрома гиперандрогении: Diagnosis ofhyperandrogenism: difficulty and the consequences. трудности и последствия. Медицинский Medical Herald of the South of Russia. 2017;(1):44-50. (In Russ.) вестник Юга России.2017;(1):44-50. DOI: DOI: 10.21886/2219-8075-2017-1-44-50 10.21886/2219-8075-2017-1-44-50
3. Российская ассоциация эндокринологов. 3. Российское общество акушер-гинекологов. Синдром поликистозных яичников. Клинические рекомендации.2021.
4. Мокрышева Н.Г., Мельниченко Г.А., Адамян Л.В., Тро- 4. шина Е.А., Молашенко Н.В., и др. Клинические рекомендации «врожденная дисфункция коры надпочечников (адреногенитальный синдром)». Ожирение
и метаболизм. 2021;18(3):345-382. DOI: 10.14341/ omet12787
Russian Association of Endocrinologists Russian Society of Obstetricians and Gynecologists.Clinical recommendations: Polycystic ovary syndrome. 2021. (In Russ.).
MokryshevaN.G., MelnichenkoG.A., AdamyanL.V., TroshinaE.A., MolashenkoN.V., etal. Russian clinical practice guidelines «congenital adrenal hyperplasia». Obesity and metabolism. 2021;18(3):345-382. (In Russ.) DOI: 10.14341/omet12787
O. B. Glavnova, N. V. Vorokhobina, L. I. Velikanova, ENDOCRINOLOGY M. I. Yarmolinskaya, E. V. Malevanaya, E. G. Strelnikova, K. A. Balandina
GAS CHROMATOGRAPHY-MASS SPECTROMETRY BASED STEROID METABOLOMICS 3.1.19. IN WOMEN WITH DIFFERENT PHENOTYPES OF POLYCYSTIC OVARIAN SYNDROME
AND NORMAL BODY WEIGHT
5. Shackleton C, Pozo OJ, Marcos J. GC/MS in Recent Years 5. Has Defined the Normal and Clinically Disordered Ste-roidome: Will It Soon Be Surpassed by LC/Tandem MS in This Role? JEndocr Soc. 2018;2(8):974-996. DOI: 10.1210/ js.2018-00135.
6. Великанова Л.И., Ворохобина Н.В, Татаринова М.В. 6. Исследование стероидного профиля мочи методом газовой хромато-масс-спектрометрии у больных с гиперандрогенией. Лечащий врач. 2015;(3):34-37. eLI-BRARYID: 23026138
7. Wudy SA, Schuler G, Sánchez-Guijo A, Hartmann MF. 7. The art of measuring steroids: Principles and practice of current hormonal steroid analysis. J Steroid Biochem Mol Biol. 2018;179:88-103. DOI: 10.1016/j.jsbmb.2017.09.003.
8. Krone N, Hughes BA, Lavery GG, Stewart PM, Arlt W, 8. Shackleton CH. Gas chromatography/mass spectrometry (GC/MS) remains a pre-eminent discovery tool in clinical steroid investigations even in the era of fast liquid chromatography tandem mass spectrometry (LC/MS/ MS). J Steroid Biochem Mol Biol. 2010;121(3-5):496-504. DOI: 10.1016/j.jsbmb.2010.04.010.
9. Taylor AE, Keevil B, Huhtaniemi IT. Mass spectrometry 9. and immunoassay: how to measure steroid hormones today and tomorrow. Eur J Endocrinol. 2015;173(2):D1-
12. DOI: 10.1530/EJE-15-0338.
10. Dammann C, Stapelfeld C, Maser E. Expression and activity 10. of the cortisol-activating enzyme 11p-hydroxysteroid dehydrogenase type 1 is tissue and species-specific. Chem Biol Interact. 2019;303:57-61. DOI: 10.1016/j. cbi.2019.02.018.
11. Blumenfeld Z, Kaidar G, Zuckerman-Levin N, Dumin E, 11. Knopf C, Hochberg Z. Cortisol-Metabolizing Enzymes
in Polycystic Ovary Syndrome. Clin Med Insights Reprod Health. 2016;10:9-13. DOI: 10.4137/CMRH.S35567
12. Caulfield MP, Lynn T, Gottschalk ME, Jones KL, Taylor NF, 12. et al. The diagnosis of congenital adrenal hyperplasia in
the newborn by gas chromatography/mass spectrometry analysis of random urine specimens. J Clin Endocrinol Metab. 2002;87(8):3682-90. DOI: 10.1210/jcem.87.8.8712.
13. Соколова Л.С.,Ефремов A.A. Применение хромато- 13. масс-спектрометрии в исследовании гормонов. Сорбционные ихроматографические процессы. 2012;12(6):1033-1041. eLIBRARY ID: 18259070
14. Torchen LC, Idkowiak J, Fogel NR, O'Neil DM, Shackle- 14. ton CH, et al. Evidence for Increased 5a-Reductase Activity During Early Childhood in Daughters of Women With Polycystic Ovary Syndrome. J Clin Endocrinol Metab. 2016;101(5):2069-75. DOI: 10.1210/jc.2015-3926.
15. Карпова A.A., Великанова Л.И., Павлова Е.Г., Бессо- 15. нова Е.А. Изучение особенностей стероидогенеза
у больных с различными заболеваниями коры надпочечников методом обращено- фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии. Журнал аналитической химии. 2004;59(10):1081-1087. eLIBRARY ID: 17371606
16. Srivilai J, Minale G, Scholfield CN, Ingkaninan K. 16. Discovery ofNatural Steroid 5 Alpha-Reductase Inhibitors. Assay Drug Dev Technol. 2019;17(2):44-57. DOI: 10.1089/ adt.2018.870.
17. Storbeck KH, Schiffer L, Baranowski ES, Chortis V, Prete 17. A, et al. Steroid Metabolome Analysis in Disorders of Adrenal Steroid Biosynthesis and Metabolism. Endocr Rev. 2019;40(6):1605-1625. DOI: 10.1210/er.2018-00262.
Shackleton C, Pozo OJ, Marcos J. GC/MS in Recent Years Has Defined the Normal and Clinically Disordered Steroidome: Will It Soon Be Surpassed by LC/Tandem MS in This Role? J Endocr Soc. 2018;2(8):974-996. DOI: 10.1210/js.2018-00135.
Velikanova L.I., Vorokhobina N.V., Tatarinova M.V. Investigation of the steroid profile of urine by gas chromatography-mass spectrometry in patients with hyperandrogenism.Lechas-chi vrach. 2015;(3):34-37. (In Russ.). eLIBRARYID: 23026138
Wudy SA, Schuler G, Sánchez-Guijo A, Hartmann MF. The art of measuring steroids: Principles and practice of current hormonal steroid analysis. J Steroid Biochem Mol Biol. 2018;179:88-103. DOI: 10.1016/j.jsbmb.2017.09.003.
Krone N, Hughes BA, Lavery GG, Stewart PM, Arlt W, Shackleton CH. Gas chromatography/mass spectrometry (GC/ MS) remains a pre-eminent discovery tool in clinical steroid investigations even in the era of fast liquid chromatography tandem mass spectrometry (LC/MS/MS). J Steroid Biochem Mol Biol. 2010;121(3-5):496-504. DOI: 10.1016/j.jsbmb.2010.04.010.
Taylor AE, Keevil B, Huhtaniemi IT. Mass spectrometry and immunoassay: how to measure steroid hormones today and tomorrow. Eur J Endocrinol. 2015;173(2):D1-12. DOI: 10.1530/ EJE-15-0338.
Dammann C, Stapelfeld C, Maser E. Expression and activity of the cortisol-activating enzyme 11p-hydroxysteroid dehydrogenase type 1 is tissue and species-specific. Chem Biol Interact. 2019;303:57-61. DOI: 10.1016/j.cbi.2019.02.018.
Blumenfeld Z, Kaidar G, Zuckerman-Levin N, Dumin E, Knopf C, Hochberg Z. Cortisol-Metabolizing Enzymes in Polycystic Ovary Syndrome. Clin Med Insights Reprod Health. 2016;10:9-13. DOI: 10.4137/CMRH.S35567
Caulfield MP, Lynn T, Gottschalk ME, Jones KL, Taylor NF, et al. The diagnosis of congenital adrenal hyperplasia in the newborn by gas chromatography/mass spectrometry analysis of random urine specimens. J Clin Endocrinol Metab. 2002;87(8):3682-90. DOI: 10.1210/jcem.87.8.8712.
Sokolova L.S., Efremov A.A.Application of chromato-mass-spectrometry in study of hormones. Sorption and chromatography processes. 2012;12(6):1033-1041. (In Russ.). eLIBRARY ID: 18259070
Torchen LC, Idkowiak J, Fogel NR, O'Neil DM, Shackleton CH, et al. Evidence for Increased 5a-Reductase Activity During Early Childhood in Daughters of Women With Polycystic Ovary Syndrome. J Clin Endocrinol Metab. 2016;101(5):2069-75. DOI: 10.1210/jc.2015-3926.
Kartsova A.A., Pavlova E.G., Bessonova E.A., Velikanova L.I.Steroidogenesis in patients with various adrenal cortex diseases as studied by reversed-phase high-performance liquid chromatography. Journal of Analytical Chemistry. 2004;59(10):976-982.eLIBRARY ID: 17371606
Srivilai J, Minale G, Scholfield CN, Ingkaninan K. Discovery of Natural Steroid 5 Alpha-Reductase Inhibitors. Assay Drug Dev Technol. 2019;17(2):44-57. DOI: 10.1089/adt.2018.870.
Storbeck KH, Schiffer L, Baranowski ES, Chortis V, Prete A, et al. Steroid Metabolome Analysis in Disorders of Adrenal Steroid Biosynthesis and Metabolism. Endocr Rev. 2019;40(6):1605-1625. DOI: 10.1210/er.2018-00262.
E. Г. ^^ельни^в^ K. А. Бaлaндинa ЭНДОКРИНОЛОГИЯ
METAБOЛOMИKA CTEPOИДHЫX ГОРМОНОВ ПО ДАННЫМ ГАЗОВОЙ
XPOMATO-MACC-CПEKTPOMETPИИ У ЖEHЩИH C РАЗЛИЧНЫМИ ФEHOTИПAMИ HW.
^НДРОМА ПOЛИKИCTOЗHЫX ЯИЧHИKOB C НОРМАЛЬНОЙ МА^ОЙ TEЛA
18. Deng Y, Zhang Y, Li S, Zhou W, Ye L, et al. Steroid hormone 18. profiling in obese and nonobese women with polycystic ovary syndrome. Sci Rep. 2017;7(1):14156. DOI: 10.1038/ s41598-017-14534-2.
19. Rodriguez Paris V, Bertoldo MJ. The Mechanism of 19. Androgen Actions in PCOS Etiology. Med Sci (Basel). 2019;7(9):89. DOI: 10.3390/medsci7090089.
20. Azziz R, Woods KS, Reyna R, Key TJ, Knochenhauer ES, 20. Yildiz BO. The prevalence and features of the polycystic ovary syndrome in an unselected population. J Clin Endocrinol Metab. 2004;89(6):2745-9. DOI: 10.1210/ jc.2003-032046.
21. Moran C, Arriaga M, Rodriguez G, Moran S. Obesity 21. differentially affects phenotypes of polycystic ovary syndrome. Int J Endocrinol. 2012;2012:317241. DOI: 10.1155/2012/317241.
22. Panidis D, Tziomalos K, Misichronis G, Papadakis E, Betsas 22. G, et al. Insulin resistance and endocrine characteristics of the different phenotypes of polycystic ovary syndrome: a prospective study. Hum Reprod. 2012;27(2):541-9. DOI: 10.1093/humrep/der418.
23. Великанова Л.И., Стрельникова Е.Г., Объедкова 23. Е.В., Кривохижина Н.С., Шафигуллина З.Р., и др. Получение стероидных профилей мочи больных с инциденталомой надпочечников методом газовой хромато-масс-спектрометрии. Журнал аналитической химии. 2016;71(7):775-781. DOI: 10.7868/S0044450216070161
24. Hsing AW, Stanczyk FZ, Bélanger A, Schroeder P, Chang 24. L, et al. Reproducibility of serum sex steroid assays in men by RIA and mass spectrometry. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. 2007;16(5):1004-8. DOI: 10.1158/1055-9965.EPI-06-0792.
25. Ворохобина Н.В., Татаринова М.В., Великанова Л.И., 25. Серебрякова И.П., Малеваная Е.В., Галахова Р.К. Особенности метаболизма стероидных гормонов у женщин репродуктивного возраста с различными формами гиперандрогении. Вестник Северо-Западного государственного медицинского университета
им. И.И. Мечникова. 2016;8(3):42-48.eLIBRARY ID: 27470081
26. Унанян А.Л., Аракелов С.Э., Полонская Л.С., 26. Гуриев Т.Д., Коссович Ю.М., Бабурин Д.В. Синдром гиперандрогении: вопросы патогенеза, диагностики, клиники терапии. Российский вестник акушера-гинеколога.2014;14(2):101-106. eLIBRARY ID: 21568190
27. Neven ACH, Laven J, Teede HJ, Boyle JA. A Summary on 27. Polycystic Ovary Syndrome: Diagnostic Criteria, Prevalence, Clinical Manifestations, and Management According to the Latest International Guidelines. Semin Reprod Med. 2018;36(1):5-12. DOI: 10.1055/s-0038-1668085.
28. Lutfallah C, Wang W, Mason JI, Chang YT, Haider A, et al. 28. Newly proposed hormonal criteria via genotypic proof for type II 3beta-hydroxysteroid dehydrogenase deficiency. J Clin Endocrinol Metab. 2002;87(6):2611-22. DOI: 10.1210/ jcem.87.6.8615.
Deng Y, Zhang Y, Li S, Zhou W, Ye L, et al. Steroid hormone profiling in obese and nonobese women with polycystic ovary syndrome. Sci Rep. 2017;7(1):14156. DOI: 10.1038/ s41598-017-14534-2.
Rodriguez Paris V, Bertoldo MJ. The Mechanism of Androgen Actions in PCOS Etiology. Med Sci (Basel). 2019;7(9):89. DOI: 10.3390/medsci7090089.
Azziz R, Woods KS, Reyna R, Key TJ, Knochenhauer ES, Yildiz BO. The prevalence and features of the polycystic ovary syndrome in an unselected population. J Clin Endocrinol Metab. 2004;89(6):2745-9. DOI: 10.1210/jc.2003-032046.
Moran C, Arriaga M, Rodriguez G, Moran S. Obesity differentially affects phenotypes of polycystic ovary syndrome. Int J Endocrinol. 2012;2012:317241. DOI: 10.1155/2012/317241.
Panidis D, Tziomalos K, Misichronis G, Papadakis E, Betsas G, et al. Insulin resistance and endocrine characteristics of the different phenotypes ofpolycystic ovary syndrome: a prospective study. Hum Reprod. 2012;27(2):541-9. DOI: 10.1093/humrep/ der418.
Velikanova L.I., Strel'nikova E.G., Obedkova E.V., Krivokh-izhina N.S., Shafigullina Z.R., et al. Generation of urinary steroid profiles in patients with adrenal incidentaloma using gas chromatography-mass spectrometry. Journal of Analytical Chemistry. 2016;71(7):748-754. (In Russ.). DOI: 10.7868/ S0044450216070161
Hsing AW, Stanczyk FZ, Bélanger A, Schroeder P, Chang L, et al. Reproducibility of serum sex steroid assays in men by RIA and mass spectrometry. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. 2007;16(5):1004-8. DOI: 10.1158/1055-9965.EPI-06-0792.
Vorokhobina N.V., Tatarinova M.V., Velikanova L.I., Serebryakova I.P., Malevanaya E.V., Galahova R.K. Features of steroid hormone metabolism in fertile age females with various forms of hyperandrogenism. Herald of the Northwestern State Medical University named after I.I. Mechnikov.2016;8(3):42-48. (In Russ.). eLIBRARY ID: 27470081
Unanian A.L., Arakelov S., Polonskaia L.S., Guriev T.D., KossovichIu.M., Baburin D.V. Hyperandrogenism: The pathogenesis, diagnosis, and therapy (a clinical lecture). Russian Bulletin of Obstetrician-Gynecologist. 2014;14(2):101-106. (In Russ.).eLIBRARY ID: 21568190
Neven ACH, Laven J, Teede HJ, Boyle JA. A Summary on Polycystic Ovary Syndrome: Diagnostic Criteria, Prevalence, Clinical Manifestations, and Management According to the Latest International Guidelines. Semin Reprod Med. 2018;36(1):5-12. DOI: 10.1055/s-0038-1668085.
Lutfallah C, Wang W, Mason JI, Chang YT, Haider A, et al. Newly proposed hormonal criteria via genotypic proof for type II 3beta-hydroxysteroid dehydrogenase deficiency. J Clin Endocrinol Metab. 2002;87(6):2611-22. DOI: 10.1210/ jcem.87.6.8615.
O. B. Glavnova, N. V. Vorokhobina, L. I. Velikanova, ENDOCRINOLOGY M. I. Yarmolinskaya, E. V. Malevanaya, E. G. Strelnikova, K. A. Balandina
GAS CHROMATOGRAPHY-MASS SPECTROMETRY BASED STEROID METABOLOMICS 3.1.19. IN WOMEN WITH DIFFERENT PHENOTYPES OF POLYCYSTIC OVARIAN SYNDROME
AND NORMAL BODY WEIGHT
Информация об авторах Ольга Борисовна Главнова, врач-эндокринолог, Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта, Санкт-Петербург, Россия, o.glavnova@mail.ru, https://orcid. org/0000-0001-6087-252X
Наталья Владимировна Ворохобина, д.м.н., проф., заведующая кафедрой эндокринологии имени акад. В.Г. Баранова, Северо-Западный государственный медицинский университет им. И.И. Мечникова, Санкт-Петербург, Россия, natalya.vorokhobina@szgmu.ru, https://orcid. org/0000-0002-9574-105X.
Людмила Иосифовна Великанова, д.б.н., проф., заведующая научно-исследовательской лабораторией хроматографии Северо-Западный государственный медицинский университет им. И.И. Мечникова, Санкт-Петербург, Россия, velikanova46@gmail.com, https://orcid. org/0000-0002-9352-4035
Мария Игоревна Ярмолинская, д.м.н., проф., профессор РАН, руководитель отдела гинекологии и эндокринологии, руководитель Центра диагностики и лечения эндометриоза. Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта; профессор кафедры акушерства и гинекологии, Северо-Западный государственный медицинский университет им. И.И. Мечникова, Санкт-Петербург, Россия, m.yarmolinskaya@gmail.com,https://orcid.
org/0000-0002-6551-4147
Екатерина Валерьевна Малеваная, к.х.н., старший научный сотрудник научно-исследовательской лаборатории хроматографии, Северо-Западный государственный медицинский университет им. И.И. Мечникова, Санкт-Петербург, Россия, obedkovaev@gmail.com, https://orcid. org/0000-0003-0880-0814.
Стрельникова Елена Геннадьевна, к.м.н, старший научный сотрудник научно-исследовательской лаборатории хроматографии, Северо-Западный государственный медицинский университет им. И.И. Мечникова, Санкт-Петербург, Россия, lstrelnikova@inbox.ru
Баландина Ксения Александровна, к.м.н., доцент кафедры эндокринологии имени акад. В.Г. Баранова, СевероЗападный государственный медицинский университет им. И.И. Мечникова, Санкт-Петербург, Россия, ksenya_ sautina@mail.ru, https://orcid.org/0000-0002-1977-8299
Information about the authors Olga B. Glavnova, D.O. Ott Research Institute of Obstetrics, Gynecology and Reproductology, St. Petersburg, Russia, o.glavnova@mail.ru, https://orcid.org/0000-0001-6087-252X Natalya V. Vorokhobina, Dr. Sci. (Med.), Professor, Head of the V.G. Baranov Department of Endocrinology, I.I.Mechnikov North-Western State Medical University, St. Petersburg, Russia, natalya.vorokhobina@szgmu.ru, https:// orcid.org/0000-0002-9574-105X.
Lyudmila I. Velikanova, Dr. Sci. (Bio.), Professor, Head of the Research Laboratory of Chromatography, I.I. Mechnikov North-Western State Medical University, St. Petersburg, Russia,velikanova46@gmail.com, https://orcid. org/0000-0002-9352-4035
Maria I. Yarmolinskaya, Dr. Sci. (Med.), Professor, Professor of the Russian Academy of Sciences, Head of the Department of Gynecology and Endocrinology, Head of the Diagnostics and Treatment of Endometriosis Center,D.O. Ott Research Institute of Obstetrics, Gynecology and Reproductology; Professor, The Department of Obstetrics and Gynecology, I.I. Mechnikov North-Western State Medical University, St. Petersburg, Russia, m.yarmolinskaya@gmail. com, https://orcid.org/0000-0002-6551-4147
Ekaterina V. Malevanaya, Cand. Sci. (Chemistry), Senior Researcher. The Research Laboratory of Chromatography, I.I. Mechnikov North-Western State Medical University, St. Petersburg, Russia,obedkovaev@gmail.com, https://orcid. org/0000-0003-0880-0814.
Elena G. Strelnikova, Cand. Sci.(Med.), Senior Researcher of the Scientific Laboratory of Chromatography, I.I. Mechnikov North-Western State Medical University, St. Petersburg, Russia,lstrelnikova@inbox.ru
Ksenia A. Balandina, Cand. Sci.(Med.), Associate Professor, The V.G. BaranovDepartment of Endocrinology, I.I. Mechnikov North-Western State Medical University, St. Petersburg, Russia, ksenya_sautina@mail.ru, https://orcid. org/0000-0002-1977-8299
Вклад авторов:
Все авторы внесли существенный вклад при подготовке статьи, прочли и одобрили финальную версию перед публикацией.
Authors' contribution:
All authors made a significant contribution to the preparation of the article, read and approved the final version before publication.
Конфликт интересов
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Conflict of interest
Authors declares no conflict of interest.
Поступила в редакцию / Received: 25.11.2021 Доработана после рецензирования / Revised: 04.02.2022 Принята к публикации /Accepted: 08.02.2022
