CC BY
108
УДК: 618.1:612.621.31:616.45
ОСОБЕННОСТИ МЕТАБОЛИЗМА СТЕРОИДНЫХ ГОРМОНОВ У ЖЕНЩИН РЕПРОДУКТИВНОГО ВОЗРАСТА С РАЗЛИЧНЫМИ ФОРМАМИ
ГИПЕРАНДРОГЕНИИ
Н. В. Ворохобина, М. В. Татаринова, Л. И. Великанова, И. П. Серебрякова, Е. В. Малеваная, Р. К. Галахова
Северо-Западный государственный медицинский университет им. И. И. Мечникова, Санкт-Петербург,
Россия
В статье приведен анализ стероидных профилей биологических жидкостей, полученных методами высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) и газовой хромато-масс-спектрометрии (ГХ-МС) в сочетании с классическими тестами у 54 женщин с гиперандрогенией (ГА). Идиопатическая гиперандрогения установлена у 20,4%, ожирение с синдромом ГА — у 31,5%, синдром поликистозных яичников (СПКЯ) — у 33,3%, неклассическая форма врожденной дисфункции коры надпочечников (НФ ВДКН) вследствие дефекта 21-гидроксилазы (21-Г) — у 14,8% пациентов с ГА. Снижение соотношений кортизол/кортизон и кортикосте-рон/11 -дегидрокортикостерон, (тетрагидрокортизол+а11о- тетрагидрокортизол+тетрагид рокортизон)/прегнантриолон — (меньше 30), увеличение экскреции с мочой дегидроэпи-андростерона, 16-кето-андростендиола, 21-дезокситетрагидрокортизола и неклассических 5-ен-прегненов являются информативными признаками НФ ВДКН с дефектом 21-Г по данным ВЭЖХ и ГХ-МС. У больных СПКЯ получены признаки уменьшения активности 11р-гидроксис тероиддегидрогеназы 1 типа и увеличения активности 5а-редуктазы по данным ВЭЖХ и ГХ-МС.
Ключевые слова: надпочечники, гиперандрогения, дефект 21-гидроксилазы, синдром полики-стозных яичников, идиопатическая гиперандрогения, высокоэффективная жидкостная хроматография, газовая хромато-масс-спектрометрия, стероидный профиль.
До настоящего времени единой классификации гиперандрогении (ГА) нет. Большинство исследователей выделяют две основные формы: опухолевую и неопухолевую, или функциональную, которую в зависимости от генеза нарушений подразделяют на яичниковую, надпочеч-никовую и смешанную. Кроме того, различают ГА истинную, рецепторную и транспортную [1]. Наиболее частыми причинами ГА являются неклассическая форма врожденной дисфункции коры надпочечников (НФ ВДКН), большинство случаев которой обусловлено недостаточностью фермента 21-гидроксилазы (21-Г), а также синдром поликистозных яичников (СПКЯ) [2-3]. Клиническая картина НФ ВДКН и СПКЯ может быть схожей и требует проведения дифференциальной диагностики [4]. Для выявления источника ГА используют определение различных стероидов, проводят функциональные пробы на стимуляцию и подавление функции яичников и надпочечников. Однако установить локализацию источника ГА представляет значительные трудности, так как спектр синтезируемых гормонов и ключевых ферментных систем в синтезе андрогенов в яичниках и надпочечниках весьма сходны, а периферический метаболизм гормонов вносит еще большие трудности в интерпретацию
источника андрогенных стероидов [5]. Широкое применение в определении гормонов нашли им-муноферментные методы из-за высокой чувствительности. Однако низкая специфичность этих методов, наличие перекрестных реакций приводят к возрастанию числа ложноположительных результатов и, таким образом, гипердиагностике [6]. Так, содержание 17-гидроксипрогестерона (17-ОНП) может быть в пределах нормальных значений у женщин с НФ ВДКН [7]. В свою очередь, при СПКЯ в половине случаев выявляется повышенный уровень 17-ОНП [5]. У пациенток с клиническими признаками ГА при базальном уровне 17-ОНП в пределах нормальных значений для выявления источника ГА проводится стимулирующий тест с синтетическим аналогом кортикотропина (тетракозактидом), который является «золотым стандартом» для диагностики НФ ВДКН [8, 9]. У некоторых гетерозиготных носителей мутаций в гене 21-Г уровни 17-ОНП могут быть как у пациентов с НФ ВДКН [8]. В использовании генетического тестирования главным препятствием является сложность мо-лекулярно-генетического анализа, а также то, что большинство имеющихся в продаже панелей скрининг-тестов исследуют 10-12 наиболее распространенных мутаций и могут не обнаружить все мутации, которые на сегодняшний день из-
вестны [7]. Метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) позволяет получить стероидные профили крови и мочи, являющиеся наиболее ценными диагностическими тестами для заболеваний, связанных с нарушением синтеза и метаболизма стероидных гормонов [10, 11]. По мнению ряда авторов, оценка стероидных гормонов методом тандем-ной хромато-масс-спектрометрии (ТХМС) является более надежным методом диагностики НФ ВДКН, позволяющим существенно снизить число ложноположительных результатов [12]. Другие исследователи придают особое значение определению стероидного профиля мочи (СПМ) методом газовой хромато-масс-спектрометрия (ГХ-МС), дающим возможность идентифицировать большое число стероидов и их метаболитов [10-13]. Таким образом, представляется актуальным поиск дополнительных биохимических маркеров дифференциальной диагностики различных форм ГА.
Материалы и методы
Обследованы 54 женщины с ГА в возрасте 27,3±0,9 лет (от 18 до 42 лет) и 20 здоровых женщин в возрасте 33,5±2,5 лет (от 19 до 40 лет), которые составили контрольную группу. Методами иммуноанализа определяли уровни адре-нокортикотропного гормона, кортизола (К), тестостерона (Т), свободного тестостерона (СТ), 5а-дигидротестостерона (ДТ),А4-андростендиона (А4-А), дегидроэпиандростерона-сульфата (ДГЭА-С),17-ОНП и глобулина, связывающего половые гормоны (ГСПГ) в сыворотке крови. Забор крови проводили в раннюю фолликулярную фазу менструального цикла. Для верификации диагноза НФ ВДКН вследствие дефекта 21-Г использовалась проба с однократным внутримышечным введением 1 мг синтетического аналога кортикотропина (тетракозактида) с определением базальных и через 9 часов стимулированных кортикотропином уровней К и 17-ОНП. Повышение 17-ОНП в три и более раза, а К — в два и менее раза по сравнению с исходными значениями расценивались как результаты, подтверждающие диагноз НФ ВДКН. Для выявления источника синтеза андрогенов проводили двухдневную пробу с 2 мг дексаметазона. Снижение уровня тестостерона на 50% и более от исходного расценивалось как преимущественно адренало-вое происхождение ГА. Генетическим тестированием (метод ПЦР) исследовались 10 мутаций гена CYP21. Стероидные профили мочи опре-
деляли на газовом хромато-масс-спектрометре SHIMADZU GCMS — QP2010 ULTRA в ресурсном центре СПб ГУ «Методы анализа состава веществ». Сбор мочи проводился в фолликулярную фазу менструального цикла. Данным методом идентифицировано 66 стероидов. Методом ВЭЖХ определяли уровни кортизола (F), кортизона (Е), кортикостерона (В), 11-дегидро-кортикостерона (А), 11-дезоксикортикостерона (DOC), 11-дезоксикортизола (S) в сыворотке крови, экскрецию с мочой (ЭМ) свободного кортизола (UFF) и свободного кортизона (UFE). Статистическая обработка данных осуществлялась с использованием программной системы STATISTICA for WINDOWS (версия 7). Результаты представлены в виде средних значений (М±т), показатели ГХ-МС представлены в виде медианы и межквартильного интервала (МЕ/LQ-UQ), сравнение которых осуществлялось c использованием критерия Манна-Уитни. Статистически значимым считался критерий достоверности p<0,05.
Результаты
В результате комплексного обследования больных с ГА идиопатическая форма ГА (ИГА) установлена у 11 человек (20,4%) с ИМТ=24,4±1,6 кг/м2. У 8 пациенток (14,8%) с ИМТ=24,1±2,3 кг/м2 выявлена НФ ВДКН вследствие дефекта 21-Г, у 18 женщин (33,3%) с ИМТ=33,5±1,8 кг/м2 — СПКЯ. 17 пациенток (31,5%) с ИМТ=32,2±2,6 кг/м2 составили группу больных с ожирением и синдромом ги-перандрогении (ОЖ).
НФ ВДКН с дефектом 21-Г была диагностирована на основании увеличения уровня 17-ОНП в сыворотке крови через 9 час после в /м введения кортикотропина до 15,3±4,3 нг/мл, а также уменьшения в сыворотке крови уровней Т на 61,5%, ДГЭА-С — на 50%, А4-А — на 76,8%, СТ — на 59,5% при проведении пробы с 2 мг дексаметазона и результатов генетического исследования. Уровни ДТ и А4-А в крови были увеличены при всех формах ГА, уровни ДГЭА-С и СТ повышены у больных с НФ ВДКН, СПКЯ и ОЖ (табл. 1). У пациентов с дефектом 21-Г в отличие от больных СПКЯ, ИГА и ОЖ были повышены уровни Т и 17-ОНП в крови. Уровень ГСПГ был снижен только у больных СПКЯ (табл. 1). Полученные данные свидетельствовали о недостаточности стандартных тестов для дифференциальной диагностики различных форм ГА.
Таблица 1
Содержание стероидов в крови у пациентов с различными формами гипрандрогении
по данным методов иммуноанализа
M±m
Пациенты с различными формами гиперандрогении
Ожирение Неклассиче-
Идиопа- с син- ская форма Синдром
тическая дромом ВДКН с де- по ликисто-
Здоро- гиперан- гиперан- фектом 21-ги- зых яични-
вые дрогения дрогении дроксилазы ков
Показатели n=20 n=11 n=17 n=8 n=18
Кортизол (нмоль/л) 357±16 433±59 488±53 332 ± 72 413± 44
Тестостерон (нмоль/л) 1,6±0,1 1,5±0,3 2,4±0,7 2,6 ± 0,2** 2,4± 0,6
Свободный тестостерон (пг/мл) 1,4±0,2 2,3±0,5 3,2±0,8* 8,4 ±1,7* 12,9± 4,0***
Дигидротестостерон (пг/мл) 250±25 363±19** 405±56** 726 ± 226* 1155± 31***
Дегидроэпиандростерон (мкг/мл) 1,4±0,2 2,0±0,3 2,6±0,3* 3,5 ± 0,3** 3,1± 0,3**
Андростендион (нг/мл) 1,6±0,2 2,9±0,4* 4,2± 1,0** 5,6 ± 1,1** 5,0± 0,7**
17-гидроксипрогестерон (нг/мл) 0,6±0,1 0,9±0,2 1,3± 0,3 4,0 ± 2,1** 1,5± 0,3
Глобулин, связывающий
половые гормоны (нмоль/л) 73,3±5,1 66,8±7,9 44,9±10,7 55,9 ± 1,0 27,1± 3,5***
Примечание: * — р<0,05, ** — р<0,01, *** — р<0,001- уровень статистической значимости различий по сравнению с группой здоровых лиц.
Таблица 2
Содержание кортикостероидов в сыворотке крови и моче у пациентов с различными формами гиперандрогении по данным высокоэффективной жидкостной хроматографии
M±m
Пациенты с различными
формами гиперандрогении
Ожирение Неклассиче- Синдром
с синдромом- ская форма полики-
гиперандроге- ВДКН с дефек- стозных
Здоро- нии том 21-гидрок- яичников
Показатель вые, n=20 n=17 силазы n=8 n=18
Кортизол, нг/мл 82,7±4,3 126,4 ±15,7 57,0± 11,1 56,0±8,2
Кортизон, нг/мл 19,9±0,9 21,7± 2,5 19,1± 1,8 15,5±1,9
11-дегидрокортикостерон (А), нг/мл 1,8±0,2 2,8± 0,6 3,5± 0,7* 3,3±1,1
Кортикостерон (В), нг/мл 2,5±0,1 2,7± 0,6 1,0± 0,5 1,1±0,3
Соотношение кортизол/кортизон 4,3±0,2 6,3± 1,0 3,0± 0,4* 3,7±0,5
Соотношение В /А 1,6± 0,1 1,6±0,5 0,4± 0,3* 2,0±1,4
Свободный кортизол (UFF), мкг/24 ч 21,0± 3,3 42,9±9,5* 10,7± 4,1* 25,1± 9,6
Свободный кортизон (UFE), мкг/24 ч 50,3±6,9 90,3±20,1* 36,3± 4,8 88,1±11,5*
Соотношение UFF/UFE 0,41±0,03 0,51±0,04 0,4± 0,06 0,28±0,05*
Примечание: * — р<0,05- уровень статистической значимости различий в сравнении с группой здоровых лиц.
Таблица 3
Экскреция основных стероидов с мочой у больных с различными формами гиперандрогении
по данным газовой хромато-масс-спектрометрии
МЕ^Ц-иЦ (мкг/24 ч)
Пациенты с различными формами гиперандрогении
Название стероидов Здоровые п=20 Ожирение с синдромом гиперандро-гении п=17 Неклассическая форма ВДКН с дефектом 21-гидрок-силазы, п=8 Синдром поли-кистозных яичников, п=18
Андрогены и их метаболиты
Андростерон (Ап) 856/486-1369 1457/912-1758 1277/1085-1600 2150/1499-4193
Этиохоланолон (Et) 834/545-1300 882/540-2279 935/613-1438 899/456 -1410
Андростендиол-17р 97/70-104 289/197-569* 305/144-349* 133/70- 222
Дегидроэпиандростерон
фНЕА) 166/124-225 369/225-1002 1039/449-1419** 216/116 -669
Андростентриол (dA3) 182/138-446 759/481-996* 465/303-668 188/149 -401
11 -кето-этиохоланолон 191/166-256 276/174-407 365/300-569* 302/184 -528
11-ОН-андростерон (11Ап) 354/254-375 675/602-856 989/903-1327** 641/342 -2787*
11 -ОН-этиохоланолон (11Et) 239/195-300 389/255-418 360/254-1463* 301/184 -528
Метаболиты предшественников глюкокортикоидов
17-ОН-прегнанолон (17Р)
Прегнантриол (Р3) Прегнантриолон (11-охо-Р3)
Прегнендиол ^Р2) Прегнентриол ^Р3)
Тетрагидро-11 -дезоксикортизол
Тетрагидрокортизон (ТНЕ)
Тетрагидрокортикостерон (ТНВ)
а11о-ТНВ
Тетрагидрокортизол (THF)
а11о-Тетрагидрокортизол
Тетрагидро-11-дегидрокортикостерон (ТНА)
ТНВ/ТНА
(ТНЕ+ТОТ+аПо-ТОТ)/Р3
(ТНЕ+ТОТ+а11о-THF)/11-oxo-P3
54/25-55
373/327-415 15/12-18
215/152-483*
1059/679-1398* 32/22-39
338/152-381**
1370/12872348*
195/85-1030**
Метаболиты предшественников андрогенов
242/115-264 192/110-309
537/324-616* 423/178-535
654/399-971** 388/252-660*
Метаболиты глюкокортикоидов
13/11-14
1229/1179-1710
40/25-63
41/20-66
538/404-602
316/272-394
44/36-99
1,0/0,6-1,2 6,0/4,8-7,5
158/126-218
72/68-98*
2320/1902-2858*
122/71-137*
274/72-238*
934/600-1247*
657/457-1647*
198/124-398 Соотношения 0,6/0,2-0,6 6,4/2,2-8,3
249±125
16/15-60
1070/985-1357
27/25-60
129/80-292*
421/326-617
717/442-931*
80/50-211*
0,4/0,3-0,6* 1,7/1,1-3,0*
18/4-30**
204/123-322
621/490-1130* 21/15-26
255/150-391 366/309-409*
29/28-38*
1690/1228-2594
78/30-89
154/55-273*
558/486-924
700/569-974*
43/36-75
0,9/0,6-1,2 6,9/4,5-9,6
141/78-203
Примечание: * — р<0,05, ** — р<0,01 — уровень статистической значимости различий по сравнению с группой здоровых лиц
Увеличение ЭМ UFF и UFE и метаболитов глюкокортикоидов отмечено у больных с ОЖ (табл. 2, 3). У пациенток с СПКЯ в отличие от пациенток с ОЖ отмечено повышение ЭМ UFE и снижение соотношения UFF/UFE, что может указывать на уменьшение активности llß-гидроксистероиддегидрогеназы 1 типа (Hß-ГСДГ-!) у данных больных. Кроме этого у больных СПКЯ установлено увеличение ЭМ а11о-тетрагидрокортизола (allo-THF) и allo-тетрагидрокортикостерона (allo-THB) (табл. 3). У пациентов с дефектом 21-Г установлено повышение уровня А в крови и снижение ЭМ UFF (табл. 2). Уменьшение соотношений F/E и B/A в крови, THB/THA может быть обусловлено снижением продукции стероидов, обладающих большей активностью F и B в сравнении с E и A.
Анализируя метаболизм андрогенов, у больных с дефектом 21-Г отмечено повышение ЭМ дегидроэпиандростерона (DHEA) и его метаболита — 17ß-андростендиола (17ß-dA2), а также метаболитов А4-А — 11-ОН-андростерона (11Ап), 11-ОН-этиохоланолона (11Et), И-кето-Et и 16-кето-андростендиола
(16-охо^А2). У пациентов СПКЯ была увеличена ЭМ метаболитов Д4-А (Ап и 11Ап), у пациентов с ОЖ — повышена ЭМ метаболитов DHEA (17р^А2 и андростентриола). У больных с ИГА была увеличена только ЭМ 17р^А2 (табл. 3). ЭМ метаболитов предшественников андрогенов (прегнендиола и пре-гнентриола) и предшественников глюкокортикоидов (17-ОН-прегнанолона, прегнантриола и прегнантриолона) была повышена у больных с дефектом 21-Г (табл. 3). ЭМ прегнантриола (Р3) была увеличена при всех формах ГА, но только у больных с дефектом 21-Г отмечено снижение соотношения (ТНF+allo-THF+THE)/P3 (меньше 3), повышение прегнантриолона (11-охо-Р3) и снижение соотношения (ТОТ+аПо-ТОТ+ТНЕ)/11-охо-Р3 (меньше 30) (табл. 3). ЭМ неклассических 5-ен-прегненов, 21 -дезокситетрагидрокорти-зола (21-deoxy-ТНF) и 16-охо^А2 являются важными признаками дефекта 21-гидроксила-зы (табл. 4). Сочетание вышеперечисленных изменений ЭМ метаболитов стероидных соединений имеет 100% специфичность для диагностики НФ ВДКН с дефектом 21-Г.
Таблица 4
Экскреция неклассических стероидов с мочой у пациентов со стертой формой ВДКН
вследствие дефекта 21-гидроксилазы
Наименование стероидов Количество пациентов МЕ/LQ-UQ (мкг/24 ч)
21 -дезокситетрагидрокортизол 4 1465/108-2065
16-гидроксипрегненолон 4 56/36-151
21 -гидроксипрегненолон 3 85/70-112
11 -кето-прегнентриол 4 55/33-125
11 -гидроксипрегнентриол 4 160/149-1615
16-кето-андростендиол 5 88/26-156
Увеличение соотношений An/Et, 11An/11Et, allo-THF/THF и allo-THB/THB у пациентов СПКЯ свидетельствовало о повышение активности 5а-редуктазы (рис. 1). Увеличение allo-THF/THF у пациентов с ИГА, 11An/11Et у больных с ОЖ, allo-THB/THB и 11An/11Et у пациентов с дефектом 21-Г также указывает на увеличение активности 5а-редуктазы, но в меньшей степени, чем у пациенток с СПКЯ (рис. 1).
Обсуждение
Для определения содержания стероидов в крови чаще всего используются методы иммуноанали-за, обладающие достаточной чувствительностью, но низкой специфичностью. Одни исследователи показали, что можно существенно снизить число ложноположительных результатов при использовании ТХМС, другие авторы особое значение придают изучению СПМ методом ГХ-МС [10-13]. В нашем исследовании мы использовали сочетание
1 LYJ • '-■ ■ i г.;л им-1 ■ I ■ Lyj | иш-■ ■ r i г.;л
An/Et allo-THB/THB allo-THF/THF 11An/11Et
О Здоровые О Идиопатическая гиперандогения
ЕЗЭ Ожирение с синдром гиперандрогениии О Синдром поликистозных яичников
_ Неклассическая форма врожденной дисфункции коры надпочечников с дефектом 21-гидроксилазы
Рис. 1. Увеличение соотношений An/Et, 11An/11Et, allo-THF/THF и allo-THB/THB у пациентов СПКЯ
* -p<0.05
методов иммуноанализа с ВЭЖХ и ГХ-МС. Нами, как и другими исследователями [10-13], показана недостаточность классических тестов в дифференциальной диагностике различных форм ГА. Методами ВЭЖХ и ГХ-МС получены дополнительные критерии дефекта 21-Г и установлены особенности метаболизма стероидов у больных с различными формами ГА. Основные критерии дефекта 21-Г получены методом ГХ-МС при исследовании СПМ. Установлены диагностические значения для соотношений (ТНЕ+ТОТ+а11о-ТОТ)/Р3 (меньше 3) и (ТНЕ+ТОТ+а11о-ТОТ)/11-охо-Р3 (меньше 30). Получены важные маркеры дефекта 21-Г, увеличивающие специфичность диагностики: 21-ёеоху-ТНF, 16-охо-ёА2 и неклассические 5-ен-прегнены, не детектируемые у здоровых лиц и больных с другими формами ГА. У пациентов с дефектом 21-Г уменьшение соотношений ТНВ/ТНА, F/E и В /А может быть вызвано снижением продукции более активных гормонов F, В и их метаболитов, а у больных СПКЯ снижение соотношения UFF/UFE может указывать на уменьшение активности 11Р-ГСДГ-1. У больных СПКЯ признаки увеличения активности 5а-редуктазы были более выражены, чем у пациентов с дефектом 21-Г, ИГА и ОЖ. Таким образом, исследование СПМ методом ГХ-МС дает возможность получить наиболее специфичные маркеры дефекта 21-Г в сравнении с методами иммуноанализа без проведения функциональных тестов и установить особенности метаболизма андрогенов, глюкокортикоидных гормонов и их предшественников при различных формах ГА.
Выводы
Неклассическая форма врожденной дисфункции коры надпочечников с дефектом
21-гидроксилазы установлена у 14,8%, синдром поликистозных яичников у 33,3%, синдром гиперандрогении у женщин с ожирением у 31,5%, идиопатическая гиперандрогения у 20,4% пациентов с гиперандрогенией путем сочетания стандартных тестов с методами газовой хромато-масс-спектрометрии и высокоэффективной жидкостной хроматографии.
Уменьшение соотношений кортизол/корти-зон и кортикостерон/11-дегидрокортикостерон в крови, (THE+THF+a11o-THF)/прегнантрио-лон (меньше 30) и (ТНЕ+ТОТ+а11о-ТОТ)/пре-гнантриол (меньше 3,0), увеличение экскреции с мочой дегидроэпиандростерона, 16-кето-андро-стендиола, прегнантриолона, 21-дезокситетраги-дрокортизола и неклассических 5-ен-прегненов свидетельствуют о дефекте 21-гидроксилазы у больных с гиперандрогенией.
При исследовании стероидных профилей мочи методом газовой хромато-масс-спектрометрии у больных с синдромом поли-кистозных яичников выявлены 4 признака, у женщин с неклассической формой врожденной дисфункции коры надпочечников — 2 признака, у пациенток с ожирением и синдромом гиперандрогении и с идиопатической ги-перандрогенией — по 1 признаку повышения активности 5а-редуктазы.
У больных с ожирением и синдромом по-ликистозных яичников отмечено повышение экскреции с мочой свободного кортизона и метаболитов Д4-андростендиона, а у пациенток с ожирением и синдромом гиперандрогении установлено увеличение экскреции с мочой свободного кортизола, свободного кортизона, метаболитов глюкокортикоидов и дегидроэпиандро-стерона.
Литература
1. Доброхотова Ю. Э. Гиперандрогения и репродуктивное здоровье женщи-ны/Ю. Э. Доброхотова, З. Э. Рагимова, И. Ю. Ильина, Д. М. Ибрагимова. М. — ГЭ-ОТАР-Медиа. — 2015. — C. 1-140.
2. Киракосян К. Э. Распространенность неклассической формыврожденнойдисфунк-ции коры надпочечников среди женщин армянской национальности, обращающихся по поводу бесплодия/К. Э. Киракосян, К. В. Краснопольская, Т. А. Назаренко // Российский вестник акушера-гинеколога. — 2012. — № 5. — С. 17-20.
3. Falhammar H. Nonclassic congenital adrenal hyperplasia due to 21-hydroxylase deficiency: clinical presentation, diagnosis, treatment, and outcome/H. Falhammar, A. Nordenstro // Endocrine. — 2015. — Vol. 50 — P. 32-50.
4. FalhammarH. Biochemicalandgeneticdiagnosis of 21-hydroxylase deficiency/H. Falhammar, A. Wedell, A. Nordenstro // Endocrine. -2015. — Vol. 50 — P. 306-314.
5. Андреева Е.Н. Сравнительное изучение влияния инсулинорезистентности на андро-генную активность надпочечников и яичников у женщин раннего репродуктивного возраста с синдромом поликистоза яични-ков/Е. Н. Андреева, А. А. Пищулин, Р. И. Ак-маев, Е. А. Карпова, Д. А. Деркач // Ожирение и метаболизм. — 2010. — № 2 — С. 31-34.
6. Соколова Л. С. Применение газовой хрома-тографии/масс-спектрометрии в анализе натуральных стероидов/Л. С. Соколова, Е. Г. Струкова // XII Всероссийская научно-практическая конференция студентов и молодых ученых «Химия и химическая технология в XXI веке». — ТПУ. — Томск. — 2011. — С. 203-204.
7. Feldman Witchel S. Nonclassic Congenital Adrenal Hyperplasia/S. Feldman Witchel, R. Azziz // International Journal of Pediatric Endocrinology. — 2010 — P. 1-10.
Н.В. Ворохобина
Тел. +7 (921) 936-35-55
E-mail: natvorokh@mail.ru
8. FalhammarH. Biochemicalandgeneticdiagnosis of 21-hydroxylase deficiency/H. Falhammar,
A. Wedell, A. Nordenstro // Endocrine. —
2015. — Vol. 50. — P. 306-314.
9. Молашенко Н.В. Клинические рекомендации. Диагностика и лечебно-профилактические мероприятия при врожденной дисфункции коры надпочечников у пациентов во взрослом возрасте/Н. В. Молашенко, Е. А. Трошина, А. И. Сазонова, Ж. А. Уже-гова // «Российская ассоциация эндокринологов». — М. — 2016. — С. 1-27.
10. Christakoudi S. Steroids excreted in urine by neonates with 21-hydroxylase deficiency. Characterization, using GC-MS and GC-MS/MS, of 11oxo-pregnanes and 11oxo-pregnenes/S. Christakoudi, D. A. Cowan, N. F. Taylor // Steroids. — 2013. — Vol. 78. — P. 468-475.
11. Великанова Л. И. Исследование стероидного профиля мочи методом газовой хромато-масс-спектрометрии у больных с гиперандрогенией/Л. И. Великанова, Н. В. Ворохобина, М. В. Татаринова // Лечащий врач. — 2015. — № 3. — С. 34-37.
12. Stolze B. R. An improved micro-method for the measurement of steroid profiles by APPI-LC-MS/MS and its use in assessing diurnal effects on steroid concentrations and optimizing the diagnosis and treatment of adrenal insufficiency and CAH/B. R. Stolze, V. Gounden, J. Gu, E. A. Elliott, L. S. Masika, B. S. Abel, D. P. Merke, M. C. Skarulis, S.J. Soldin // The Journal of Steroid Biochemistry and Molecular Biology. —
2016. -Vol. 162. — P. 110-116.
13. Krone N. Gas chromatography/massspectrome try (GC/MS) remains a pre-eminent discovery tool in clinical steroid investigations even in the era of fast liquid chromatography tandem mass spectrometry (LC/MS/MS)/N. Krone,
B. A. Hughes [et al.] // Journal of Steroid Biochemistry & Molecular Biology. — 2010. — Vol. 121. — Р. 496-504.
Ворохобина Н. В., Татаринова М. В., Великанова Л. И., Серебрякова И. П., Малеваная Е. В., Галахо-
ва Р. К. Особенности метаболизма стероидных гормонов у женщин репродуктивного возраста с различными формами гиперандрогении // Вестник Северо-Западного государственного медицинского университета им. И. И. Мечникова. — 2016. — Т 8. — № 3. — С.
FEATOURES OF STEROID HORMONE METABOLISM IN FERTILE AGE FEMALES WITH VARIOUS FORMS OF HYPERANDROGENISM
N. V. Vorokhobina, M. V. Tatarinova, L. I. Velikanova, I. P. Serebryakova, E. V. Malevanaya, R. K. Galahova Northwestern State Medical University named after I. I. Mechnikov, Saint-Petersburg, Russia
The article presents the analysis of steroid profiles obtained in biological fluids by high-performance liquid chromatography (HPLC) and gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS) methods in combination with classical tests in 54 women with hyperandrogenism (HA). Idiopathic hyperandrogenism is obtained in 20.4%, the obesity with syndrome HA — in 31.5%, polycystic ovarian syndrome (PCOS) — in 33.3%, non-classical congenital adrenal hyperplasia (NC CAH) due to 21-hydroxylase deficiency (21-HD) — in 14.8% of patients with HA. Decreased ratios of cortisol/cortisol and corticosterone/11 dehydrocorticosterone, (THF + allo-THF + THE)/11-oxo-P3 (less than 30), and increased urinary excretion of 21-deoxy-tetrahydrocortisol, 16-oxo-androstene-diol and non-classical 5-ene-pregnens are informative signs of NC CAH due to 21-HD by HPLC and GC-MS. Signs of reduced activity 11p-hydroxysteroid- dehydrogenase type 1 and enhanced activity of 5a-reductase are received by HPLC and GC-MS in patients with PCOS.
Keywords: adrenal hyperandrogenism, non-classic congenital adrenal hyperplasia due to 21-hy-droxylase deficiency, polycystic ovary syndrome, high-performance liquid chromatography, gas chromatography-mass spectrometry, steroid profile.
N. V. Vorokhobina
Phone: +7 (921) 936-35-55 E-mail: natvorokh@mail.ru
Vorokhobina N. V., Tatarinova M. V., Velikanova L. I., Serebryakova I. P., Malevanaya E. V., Galahova R. K. Features of steroid hormone metabolism in fertile age females with various forms of hyperandrogenism // Herald of the Northwestern State Medical University named after I. I. Mechnikov. — 2016. — V. 8. — No. 3. — P.
