CC BY
61
ВЕСТНИК ПЕРМСКОГО УНИВЕРСИТЕТА
2008 Биология Вып. 9(25)
УДК 612.018:612.017.1:611.018.53
МЕХАНИЗМЫ РЕГУЛЯЦИИ ЛЕПТИНОМ МИКРО-БИЦИДНОГО ПОТЕНЦИАЛА МОНОЦИТОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ ЖЕНЩИН
Е. Г. Орловаа, С. В. ШиршеваЬ
а Институт экологии и генетики микроорганизмов УрО РАН, 614081, г. Пермь, ул. Голева, 13 ь Пермский государственный университет, 614990, Пермь, ул. Букирева, 15
Исследовано влияние лептина в дозах, сопоставимых с концентрацией гормона при беременности, на микробицидную активность моноцитов в крови у женщин. Показано, что гормон разнонаправленно модулирует ферментативную активность эластазы, катепсина G и миело-пероксидазы. Лептин не влияет на спонтанную люминол-зависимую хемилюминесценцию (ЛЗХЛ) и дозозависимо активирует стимулированную ЛЗХЛ. Молекулярный механизм реализации эффектов лептина в процессе регуляции биоцидного потенциала моноцитов связан с работой скавенджер-рецепторов.
Введение
Лептин является пептидным гормоном, который синтезируется главным образом адипоцитами, регулирует энергетический баланс организма и ограничивает избыточное накопление жировой массы (Fan-tuzzi, 2005). Участие лептина в регуляции иммунных реакций определяется его непосредственным влиянием на клетки иммунной системы, которые экспрессируют специфические мембранные рецепторы (Ob-R) (Flier et al., 1998). Лептин является провоспа-лительным гормоном, который способствует преобладанию клеточно-опосредованного иммунного ответа (Flier et al., 1998; Shirshev, 2005). Уровень леп-тина значительно нарастает во время беременности, особенно во втором триместре. Однако роль данного гормона в регуляции иммунных реакций при беременности остается практически неизученной.
Известно, что среди лейкоцитов мононуклеар-ные фагоциты имеют наибольшую плотность экспрессии Ob-R (Dixit et al., 2003; Zarkesh-Esfahani et al., 2001). Неактивированные моноциты/макрофаги экспресссируют на поверхности лишь 5-25% молекул Ob-R, в то время как большая часть рецепторов составляет внутриклеточный пул (Fong et al., 1998; Sarraf еt al., 1997). При активации моноцитов/макрофагов количество Ob-R на их мембране значительно увеличивается (Zarkesh-Esfahani еt al., 2001; Otero еt al., 2003). Моноциты/макрофаги играют важную роль на всех этапах гестации, накапливаясь в децидуальной оболочке благодаря специфическому стероидному фону, и активно принимают участие в имплантации и плацентации (Hunt, 1996). Более того, в период гестации моно-
циты и их потомки - дендритные клетки (Banche-reau et al., 1998) - определяют вид иммунного реагирования, усиливая при определенных условиях активность Т-лимфоцитов хелперов (Th) 2-го типа (Rissoan et al., 1999), от которых зависит трофическая функция иммунной системы матери в отношении зародыша (Wegmann, 1987). Кроме этого, моноциты/макрофаги осуществляют клиренсную функцию, фагоцитируя патогены, клеточный детрит и апоптотические тельца (Abrahams et al., 2004). Поэтому изучение регуляции функциональной активности моноцитов лептином при беременности приобретает особую актуальность.
Цель настоящей работы - исследовать влияние лептина в дозах, сопоставимых с концентрацией гормона в I и во II-III триместрах беременности, на микробицидную активность моноцитов женщин в модели in vitro.
Материалы и методы исследования
В работе использовали фракционированные моноциты периферической крови здоровых небеременных женщин репродуктивного возраста (от 23 до 32 лет). Периферическую кровь забирали из кубитальной вены в фолликулярную фазу менструального цикла (5-11-й день).
Мононуклеарные клетки получали центрифугированием в градиенте плотности фиколл-верографина (1,077 г/см3). Полученную суспензию после двойной отмывки средой 199 помещали на чашки Петри с 5% эмбриональной телячьей сывороткой и инкубировали 45 мин при 37°С, затем адгезированные моноциты снимали механическим способом, дважды отмывали и стабилизировали
© Е. Г. Орлова, С. В. Ширшев, 2008
инкубированием в течение 45 мин при 4°С. Чистота выделения моноцитов, оцениваемая с использованием моноклональных антител к CD14 (Primary Anti-Human CD14; clone 2D-15C, ICN Ph., USA), составляла 78-85%. Жизнеспособность фракционированных моноцитов определялась в тесте с эозином и составляла 95-98%.
Полученную таким образом обогащенную популяцию моноцитов (1х106 мл) инкубировали в течение часа при 37°С с лептином («Sigma», США) в дозах 10 и 35 нг/мл, сопоставимых с концентрацией гормона в I и во II-III триместрах беременности соответственно (Hardie et al., 1997).
Влияние лептина на микробицидный потенциал оценивали по активности ферментов, секрети-руемых моноцитами: эластазы, катепсина G и миелопероксидазы (МПО), которые определялись в клеточных супернатантах. В качестве интегрального теста для определения микробицидной активности моноцитов исследовали люминол-зависимую хемилю-минесценцию (ЛЗХЛ).
Определение активности эластазы. Активность эластазы определяли в клеточных супернатантах спектрофотометрическим методом с использованием синтетического субстрата N-альфа-бензол-Ь-аргинин-этилового эфира гидрохлорид (ВАЕЕ), растворенного в ацетонитриле (O'Connor et al., 1993). В лунку 96-луночного плоскодонного планшета вносили 0,02 мл клеточного супернатанта, добавляли 0,15 мл прогретого до 25°С трис-буфера (pH 8) и 0,03 мл 0,01 М субстратного раствора ВАЕЕ. Затем ex tempore регистрировали оптическую плотность на многоканальном спектрофотометре Anthos HMTL III (Labtec Instruments, Австрия) при длине волны 340 нм в течение 15 мин с 5 интервалами. Активность эластазы выражали в количестве гидролизованного субстрата (нМ) на 106 клеток за минуту (нМ/106 кл в мин).
Определение активности катепсина G. Активность катепсина G определяли в клеточных супернатантах спектрофотометрическим методом с использованием синтетического субстрата N-альфа-бензол-Ь-тирозин-этилового эфира гидрохлорид (BTEE, «Sigma»), растворенного в метаноле (Ми-тенькина, 2003). В лунку 96-луночного плоскодонного планшета вносили 0,02 мл клеточного супернатанта, добавляли 0,100 мл прогретого до 25°С трис-буфера (pH 8) и 0,045 (45 мкл) мл 0,010 М субстратного раствора BTEE. Затем ex tempore регистрировали оптическую плотность на многоканальном спектрофотометре Anthos HMTL III (Labtec Instruments, Австрия) в течение 4 мин каждую минуту. Активность катепсина G выражали в количестве гидролизованного субстрата (мкмоль) за 1 минуту на 1 мл супернатанта культуры моноцитов (мкмоль/мл в мин).
Определение уровня МПО. Активность МПО в клеточных супернатантах тестировали спектрофотометрическим методом (Бакуев, 1991). Для
этого 0,05 мл клеточного супернатанта помещали в лунки плоскодонного 96-луночного планшета, затем вносили 0,1 мл субстратной смеси, состоящей из 0,04% ортофенилендиамина и 0,014% Н2О2 на фосфат-цитратном буфере (рН 5,0). По истечении 10 мин инкубации при комнатной температуре реакцию останавливали добавлением 0,1 мл 10% H2SO4. Интенсивность оптической плотности фиксировалась в многоканальном спектрофотометре Anthos HMTL III (Labtec Instruments, Австрия) при длине волны 492 нм. Результаты выражали в единицах оптической плотности (E).
Оценка ЛЗХЛ. Влияние лептина на микроби-цидный потенциал оценивали по интенсивности ЛЗХЛ. Для стимуляции клеток использовали зимо-зан А («Sigma», США), опсонизированный пулом сывороток. Для этого в пластиковую кювету прибора вносили 0,8 мл раствора, содержащего 110 мМ NaCl, 10 мМ трис-HCl, 2,5 мМ MgCl2, 5 мМ глюкозы и 110-4 М люминола (рН 7,4). После инкубации в течение 3-5 мин при 37°С и замера фонового свечения добавляли 0,1 мл клеточной суспензии (1106/мл) и при непрерывном перемешивании измеряли интенсивность спонтанной ЛЗХЛ. Затем в кювету вносили 0,1 мл опсонизированного зимозана и фиксировали интенсивность стимулированной ЛЗХЛ в течение 20 мин через каждые 5 мин. Анализ проводили на биолюминометре БЛМ-8703М («Наука», Россия). Результаты выражали в имп/сек/клетку.
Для исследования механизмов модулирующих эффектов лептина на биоцидный потенциал моноцитов за 5 мин до внесения гормона в суспензию добавляли блокатор scavenger-рецепторов (Poly I:C, в концентрации 100 мкг/мл, «Sigma», США).
Статистический анализ результатов проводили с использованием парного (Pa) и непарного (Pb) t-критерия Стьюдента. Во всех проведенных исследованиях n=10.
Результаты и их обсуждение
Секреция лизосомальных сериновых протеи-наз, МПО, а также продукция активных кислородных метаболитов являются важнейшими факторами бактерицидности моноцитов, не только обеспечивающими антимикробную резистентность организма, но и участвующими в процессах ремоделирования тканей при физиологически протекающей беременности (Hunt, 1996; Banchereau et al., 1998; Abrahams et al., 2004).
Установлено, что лептин в дозах сопоставимых с концентрацией гормона в крови в I и II-III триместрах беременности разнонаправленно модулирует активность нейтральных протеиназ, продуцируемых моноцитами. Так, гормон вне зависимости от дозы стимулирует активность эластазы в супернатантах клеточных культур моноцитов, одновременно угнетая активность катепсина G (табл. 1). По-видимому, усиление активности эластазы мо-
ноцитов под действием лептина обусловлено, с одной стороны, участием фермента в процессе инвазивного роста синцитиотрофобласта при беременности, т.к. моноциты активно инфильтруют децидуальную оболочку, а с другой стороны, про-
воспалительной направленностью эффектов гормона на моноциты, поскольку, как показано ранее, лептин в исследуемых дозах стимулирует фагоцитарную активность моноцитов (Орлова и др., 2007).
Таблица 1
Влияние лептина на активность сериновых протеиназ и миелопероксидазы в супернатантах
культур моноцитов
№ п/п Экспериментальное воздействие Эластаза (нМ/106 кл в мин) Катепсин G (мкмол/мл в мин) МПО (Е)
1 Контроль гормона 0,429±0,065 1,667±0,070 0,187±0,022
2 Лептин, 10 нг/мл (N т О © ^ © о v -Н Ъ 9 со ™ CD 1,461±0,032 Pabi2-i)<0,05 4 5 10 °« ©" 0< -Н Ь 7 сэ Он
3 Лептин, 35 нг/мл оо т О ^ © ? vs °°8» ©л 1,503±0,029 0,146±0,035
На фоне блокады скавенджер-рецепторов внесением Poly I:C
4 Poly I:C 0,535±0,105 Pab(4-3)<0,05 1,474±0,026 Pab(4-i)<0,05 0,119±0,017 Pab(4-i)<0,05
5 Лептин, 10 нг/мл + Poly I:C 0,543±0,073 9 5 30 °« ©" ? у< 4 ab 1,aP 6 5 10 °« ©" ? у< 0,aP
6 Лептин, 35 нг/мл + Poly I:C 0,493±0,079 1,587±0,051 0,161±0,024
Примечание: значение «р» приведено только для достоверных результатов (р<0,05). Все данные в таблицах представлены в виде М±т.
Следует отметить также, что катепсин G усиливает экспрессию провоспалительных цитокинов моноцитами (Moriuchi, 2000) и таким образом обусловливает запуск клеточно-опосредованных иммунных реакций, активация которых в фетоплацентарной зоне может иметь фатальные последствия для плода, являющегося для организма матери полуаллогенным трансплантантом (Ширшев, 2002). По-видимому, выявленный угнетающий эффект гормона на секрецию катепсин G необходим для предупреждения развития антизиготных реакций и сохранения плода.
Поскольку в ранее проведенных исследованиях было показано участие скавенджер-рецепторов в регуляции лептином поглотительной функции моноцитов (Орлова и др., 2007), учитывая взаимосвязь поглотительной и микробицидной активности, считаем целесообразным проанализировать роль ска-венджер-рецепторов в модуляции лептином био-цидной активности моноцитов. Показано, что на фоне блокады скавенджер-рецепторов активность эластазы в супернатантах клеточных культур усиливалась (табл. 1). Причем добавление лептина на фоне блокады скавенджер-рецепторов отменяло стимулирующее влияние на активность фермента. В отличие от этого блокада скавенджер-рецепторов, а также внесение лептина на фоне блокады ска-венджер-рецепторов не влияли на активность ка-тепсина G, продуцируемого моноцитами.
Таким образом, можно полагать, что молекулярный механизм воздействия лептина на секрецию нейтральных протеиназ связан с работой ска-венджер-рецепторов. Самостоятельное воздействие блокатора скавенджер-рецепторов на активность эластазы моноцитов может быть обусловлено и тем, что Poly I:C является также агонистом
TLR3 (Toll-рецепторов) и запускает сигнальный путь, аналогичный пути острой вирусной инфекции, с активацией NF-kB, последующей продукцией интерферона гамма, усилением фагоцитоза и активности нейтральных протеиназ (Huang et al., 2006).
Учитывая, что биоцидное действие моноцитов, направленное на внеклеточную деструкцию патогенов, осуществляется за счет выброса активных форм кислорода с последующей их трансформацией МПО в перекись водорода и галогеноиды, экст-рацеллюлярную окислительную активность моноцитов оценивали как по продукции активных форм кислорода, так и по активности секретируемой МПО.
Установлено, что лептин в дозах, сопоставимых с концентрацией гормона в крови у беременных женщин, стимулировал активность МПО, секрети-руемой моноцитами, в супернатантах клеточных культур (табл. 1). Статистически достоверной разницы в эффектах изучаемых доз гормона выявлено не было. Стимулирующий эффект гормона, по-видимому, обусловлен необходимостью формирования высокого уровня бактерицидности моноцитов в маточном компартменте при беременности.
Блокада скавенджер-рецепторов, как и внесение гормона на фоне блокады скавенджер-рецепторов, стимулировала активность МПО в супернатантах культур моноцитов (табл. 1). Статистически достоверной разницы между действием разных доз гормона на фоне блокады скавенд-жер-рецепторов обнаружено не было. Таким образом, выявлена однонаправленность эффектов леп-тина и блокады скавенджер-рецепторов в регуляции активности МПО.
Анализ спонтанной продукции активных кислородных метаболитов не выявил модулирующей активности лептина в дозах, характерных для беременности. Статистически достоверных отличий в действии изучаемых доз гормона на спонтанную ЛЗХЛ также не обнаружено (табл. 2). По-
видимому, разнонаправленность эффектов лептина на активность МПО и спонтанной ЛЗХЛ обусловлена реципрокными механизмами регулирования НАДФ-оксидазного комплекса и МПО (Hunt, 1996; Banchereau et al., 1998).
Таблица 2
Влияние лептина на люминолзависимую хемилюминесценцию моноцитов
№ группы Экспериментальное воздействие Интенсивность ЛЗХЛ, имп/сек/клетку
Спонтанный вариант
1 Контроль гормона 5,75±0,50
2 Лептин, 10 нг/мл 5,67±0,36
3 Лептин, 35 нг/мл 5,16±0,49
4 Poly I:C 6,34±0,41
5 Лептин, 10 нг/мл + Poly I:C 5,30±0,38
6 Лептин, 35 нг/мл + Poly I:C 5,25±0,50
Стимулированный вариант, 5 мин
7 Контроль гормона 41,91±0,73
8 Лептин, 10 нг/мл 48,82±2,18 Pa\S-7)<0,05
9 Лептин, 35 нг/мл 45,95±4,96
10 Poly I:C 50,59±1,46 Pabnn-7)<0,05
11 Лептин, 10 нг/мл + Poly I:C 44,60±5,34
12 Лептин, 35 нг/мл + Poly I:C 44,15±3,39
Стимулированный вариант, 10 мин
13 Контроль гормона 38,19±1,56
14 Лептин, 10 нг/мл 38,24±3,60
15 Лептин, 35 нг/мл 45,73±2,14 PabM5-,3»<0,05
16 Poly I:C 33,22±3,78
17 Лептин, 10 нг/мл + Poly I:C 29,71±5,03
18 Лептин, 35 нг/мл + Poly I:C 30,59±5,07
Стимулированный вариант, 15 мин
19 Контроль гормона 25,67±2,42
20 Лептин, 10 нг/мл 27,14±1,71
21 Лептин, 35 нг/мл 28,86±2,54
22 Poly I:C 23,65±1,46
23 Лептин, 10 нг/мл + Poly I:C 11,08±1,82 Pabr2.vi9)<0,05
24 Лептин, 35 нг/мл + Poly I:C 13,20±1,07 Pab(24-19)<0,05
Стимулированный вариант, 20 мин
25 Контроль гормона 12,82±0,84
26 Лептин, 10 нг/мл 15,34±1,14
27 Лептин, 35 нг/мл 10,89±0,76
28 Poly I:C 9,01±0,32 Pab (28-25)<0,05
29 Лептин, 10 нг/мл + Poly I:C 6,99±0,59 Pabr29-25)<0,05
30 Лептин, 35 нг/мл + Poly I:C 8,81±0,88 Pab™-25»<0,05
Не исключено, что при отсутствии выраженного влияния лептина на спонтанную окислительную активность моноцитов происходит защита собственных тканей от повреждения активными кислородными метаболитами и предупреждение развития антизиготных реакций. Блокада скавенд-жер-рецепторов, а также внесение гормона на фоне блокады скавенджер-рецепторов не влияли на спонтанную продукцию активных форм кислорода моноцитами.
В то же время в зимозан-индуцированном варианте ЛЗХЛ гормон дозозависимо стимулирует окислительную активность моноцитов. Так, при индукции опсонизированным зимозаном максимум активации ЛЗХЛ под действием лептина в дозе, характерной для I триместра беременности, отмечался на 5-й минуте (см. табл. 2). Под действием высокой дозы лептина (характерной для II-III триместра беременности) максимум активации ЛЗХЛ регистрировался на 10-й минуте (см. табл.
2). Таким образом, не влияя на фоновый окислительный потенциал моноцитов при антигенной стимуляции, лептин в дозах, характерных для беременности, усиливает активность процессов свободнорадикального окисления в моноцитах.
Блокада скавенджер-рецепторов отменяла активирующий эффект исследуемых доз лептина на стимулированную ЛЗХЛ (см. табл. 2). Таким образом, можно полагать, что молекулярный механизм регуляции лептином функциональной активности НАДФ-оксидазного комплекса моноцитов при беременности взаимосвязан с работой скавенджер-рецепторов.
Анализируя полученные данные, можно заключить, что лептин, который имеется в организме вне беременности, является провоспалитель-ным гормоном и активирует клеточноопосредованные иммунные реакции, теоретически должен способствовать аборту. Однако в дозах, свойственных организму при беременности, гормон, моделируя функциональную активность моноцитов, протектирует реакции, направленные на сохранение плода. Так, лептин стимулирует ферментативную активность эластазы моноцитов, что, с одной стороны, способствует повышению неспецифической резистентности организма матери при беременности, а с другой - необходим для инвазивного роста синцитиотрофобласта. Г ормон угнетает активность катепсина G, что направлено на защиту от повреждения собственных тканей и предотвращение запуска провоспалительных реакций в фетоплацентарном комплексе.
Лептин в исследуемых дозах стимулирует ферментативную активность МПО и не влияет на спонтанную ЛЗХЛ моноцитов, тогда как на индуцированную зимозаном продукцию активных кислородных метаболитов моноцитами гормон оказывает дозозависимый активирующий эффект. Таким образом, гормон стимулирует окислительный потенциал моноцитов, усиливая неспецифическую резистентность организма матери в ответ на антигенную стимуляцию, не инициируя при этом процессы спонтанного образования свободных радикалов, избыток которых может приводить к повреждению собственных тканей и запуску провоспалительных иммунных реакций, имеющих фатальные последствия для развития беременности.
Суммируя все вышесказанное, можно полагать, что лептин при беременности дифференцированно модулирует микробицидный потенциал моноцитов периферической крови, определяя стратегию подготовки иммунной системы матери к успешной имплантации и плацентации оплодотворенной яйцеклетки, а также поддержанию жизнеспособности плода. Молекулярный механизм реализации эффектов лептина в процессе регуляции биоцид-ного потенциала моноцитов связан с работой ска-венджер-рецепторов.
Библиографический список
Бакуев, М.М. Особенности секреции миело-пероксидазы в хемилюминесцентном ответе нейтрофилов человека при контакте со стимуляторами различной природы / М.М. Бакуев, М.З. Саидов, А.А. Бутаков // Иммунология. 1991. № 1. С. 15-19.
Мишенькина, Е.В. Сериновые протеиназы в комплексной оценке тяжести преэклампсии: авто-реф. дис. ... канд. мед. наук: 14.00.01 / Митень-кина Елена Викторовна. Пермь, 2003. 22 с.
Орлова, Е.Г. Модуляция лептином функциональной активности нейтрофилов и моноцитов периферической крови женщин / Е.Г. Орлова, С.В. Ширшев // Цитокины и воспаление. 2007. Т. 6, № 3. С. 44-48.
Орлова, Е.Г. Регуляция лептином окислительной и фагоцитарной активности моноцитов женщин в разные фазы менструального цикла / Е.Г. Орлова, С.В. Ширшев // Пробл. эндокринол. 2007. № 3. С. 26-29.
Ширшев, С.В. Механизмы иммуноэндокринного контроля процессов репродукции: в 2 т. Т. 2 / С.В. Ширшев. Екатеринбург: УрО РАН, 2002. 557 с.
Ширшев, С.В. Молекулярные механизмы регуляции лептином функциональной активности мо-нонуклеарных фагоцитов / С.В. Ширшев, Е.Г. Орлова // Биохимия. 2005. № 8. C. 1021-1030.
Abrahams, V.M. Macrophages and apoptotic cell clearance during pregnancy / V.M. Abrahams, Y.M. Kim, S.L. Straszewski, R. Romero, G. Mor, // Am. J. Reprod. Immunol. 2004. Vol. 51, №. 4. P. 275-282.
Banchereau, J. Dendritic cells and the control of immunity / J. Banchereau, R.M. Steinman // Nature. 1998. Vol. 392. P. 245-252.
Dixit, V.D. Leptin induces growth hormone secretion from peripheral blood mononuclear cells via a protein kinase C- and nitric oxide-dependent mechanism / V.D. Dixit, M. Mielenz, D.D. Taub, N. Par-vizi, // Endocrinol. 2003. Vol. 144. P. 5595-5603.
Fantuzzi, G. Adipose tissue, adipokines, and inflammation // J. Allergy Clin. Immunol. 2005. Vol.
115, N. 5. P. 911-919.
Flier, J.S. Obesity and the hypothalamus: novel peptides for new pathways /J.S. Flier, E. Maratos-Flier // Cell. 1998. Vol. 92. P. 437-440.
Fong, T.M. Localization of leptin binding domain in the leptin receptor / T.M. Fong, R.R. Huang, M.R. Tota, C. Mao, T. Smith, J. Varnerin, V.V. Karpiyskiy, J.E. Krause, L.H. Van der Ploeg // Mol. Pharmacol. 1998. Vol. 53. P. 234-240.
Hardie, L. Circulating leptin in women: a longitudinal study in the menstrual cycle and during pregnancy / L. Hardie, P. Trayhurn, D. Abramovich, P. Fowler // Clin. Endocrinol. 1997. Vol. 47. P. 101-106.
Huang, C.C. A Pathway Analysis of Poly (I:C)-Induced Global Gene Expression Change in Human Peripheral Blood Mononuclear Cells / C.C.
Huang, K.E. Duffy, L.R. San Mateo, B.Y. Ame-gadzie, R.T. Sarisky, M.L. Mbow // Physiol. Genomics. 2006. Vol. 26, N. 2. P.125-133.
Hunt, J.S. Uterine macrophages and environmental programming for pregnancy success / J.S. Hunt, S.A. Robertson // J. Reprod. Immunol. 1996. Vol. 32, N. 1. P. 1-25.
Moriuchi, H. Cathepsin G, a neutrophil-derived serine protease, increases susceptibility of macrophages to acute humanimmunodeficiency virus type 1 infection / H. Moriuchi, M. Moriuchi, A.S. Fauci // J. virol. 2000. Vol. 74, N. 15. P. 6849-6855.
O'Connor, C.M. Alpha 1-Proteinase inhibitor, elastase activity, and lung disease severity in cystic fibrosis / C.M. O'Connor, K. Gaffney, J. Keane, A. Southey [et al.] // Am. Rev. Respir. Dis. 1993. Vol. 148, N. 6. P. 1665-1670.
Otero, M. Synergistic induction of nitric oxide synthase type II: in vitro effect of leptin and interferon-gamma in human chondrocytes and ATDC5 chondrogenic cells / M. Otero, C.M. O'Connor, J.J.
Gomez Reino, O. Gualillo // Arthritis Rheum. 2003. Vol. 48. P. 404-409.
Rissoan, M.C. Reciprocal control of T helper cell and dendritic cell differentiation / M.C. Rissoan, V. Soumelis, N. Kadowski, G. Grouard, F. Briere // Science. 1999. Vol. 283. P. 1183-1186.
Sarraf, P. Multiple cytokines and acute inflammation raise mouse leptin levels: potential role in inflammatory anorexia / P. Sarraf, R.C. Frederich, E.M. Turner, G. Ma, Jaskowiak // J. Exp. Med. 1997. Vol. 185. P. 171-175.
Wegmann, T.G. Placental immunotrophism: Maternal T-cells enhance placental growth and function // Am. J. Reprod. Immunol. Microbiol. 1987. Vol. 15, N. 2. P. 67-69.
Zarkesh-Esfahani, H. High-dose leptin activates human leukocytes via receptor expression on monocytes / H. Zarkesh-Esfahani, A.G. Pockley // J. Immunol. 2001. Vol. 167. P. 4593-4599.
Поступила в редакцию 21.04.2008
Mechanisms of leptin regulation of microbicidal activity of monocytes in peripheral blood of womens
E.G. Orlova, S.V. Shirshev
The influence of leptin in doses, characteristic for I and II-III trimesters of pregnancy, on microbicidal activity of monocytes of women is investigated. It is established, that hormone differently modulated activity of elastase, cathepsin G and mieloperoxidase. Leptin did not influence on spontaneous luminol-dependent chemilumi-nescence and expressed dose-dependent activating effect on zymosan-induced luminol-dependent chemilumi-nescence. Molecular mechanisms of leptin regulation of microbicidal activity of monocytes are connected with scavenger-receptor.
