CC BY
5
по теченню рек) по направлению к нерестилищам происхо-^днт значительное обсеменение микрофлорой различных час-™ген тела рыбы. Установление наличия в мясе тихоокеанских лососей, выловленных на Камчатке, более 2 клеток/г психрофильных и мезофильных микроогранизмов, серди которых в ряде случаев обнаружены БГКП и кло-стридии, свидетельствует о возможных нарушениях санитарных требований и технологического режима при лове, транспортировке и хранении рыбы. Все это может приводить к автолизу и бактериальному разложению мышечной ткани рыбы при хранении, а в дальнейшем — и к изменению структуры мяса рыбопродукции из тихоокеанских лососей.
Выводы. 1. Прибрежная морская вода в районах промысла лососевых рыб на Камчатке характеризуется незначительным уровнем микрофлоры (не более 3 1й клеток/мл).
2. Обсемененность мезофильными и психрофильными микроорганизмами воды рек Камчатки в 2,68—3,36 раза выше, чем морской.
3. Заход тихоокеанских лососей из моря в реки и преодоление больших расстояний на пути их следования к нерестилищам способствуют значительному обсеменению микрофлорой кожного покрова и кишечного содержимого рыбы.
4. Обнаружение микроорганизмов, в том числе санитар-
но-значимых, в мясе лососей, выловленных в реках Камчатки, по-видимому, связано с проникновением бактерий в мышечную ткань с поверхности кожи и из кишечного содержимого, особенно в результате механических травм и сдав-лений, а также после двительной транспортировки сырца из промысловых районов на рыбозаводы.
5. При проведении саннтарно-мнкробиологического контроля и оценки качества выловленной рыбы необходимо определять присутствие БГКП, протеев, клостридий и микроскопических грибов, как наиболее индикаторных микроорганизмов в районах промысла тихоокеанских лососей на Камчатке.
Литература
1. Быков В. П. Технология рыбных продуктов. М., 1980.
2. Вансович М. Л.. Михайлова Н. Ф.. Родин Е. М. Промысловая ихтиология и обработка рыбы. М., 1974.
3. Григорьев Ю. И., Курочкин Ю. В., Шульгин Ю. П. — В кн.: Украинское паразитологическое о-во. Конф. 9-я. Тезисы докладов. Киез, 1980, ч. I, с. 166—167.
4. Дутова Е. Н.. Гофтарш М. М., Призренова И. И., Сазонова Л. С. Техническая микробиология рыбных продуктов. М„ 1976.
Поступила 05.06.84
Краткие сообщения
УДК 614.777:547.391.31-074
Б. И. Здравко, А. К. Маненко. И. Н. Онишук
МАТЕРИАЛЫ К ГИГИЕНИЧЕСКОЙ РЕГЛАМЕНТАЦИИ ГЛИЦИДИЛМЕТАКРИЛАТА В ВОДЕ ВОДОЕМОВ
Львовский медицинский институт; Украинский НИИ полиграфической промышленности.
Львов
Глнцидилметакрилат (ГМА)—сложный эфнр метакрн-ловой кислоты — получают взаимодействием метакрилата калия или натрия с эпнхлоргидрином. Эмпирическая формула ГМА С,НюОз.
ГМА представляет собой подвижную жидкость от светлой до темной окраски, которая усиливается со временем н вызвана ингибитором полимеризации — гидрохиноном. Очищенный ГМА представляет собой прозрачную бесцветную жидкость с мол. м. 142,15. Температура кипения 191 °С при 32 472 ГПа, температура плавления 65 °С, плотность Ш 1,0726 г/см', показатель преломления 1,4505. ГМА плохо растворим в воде: максимальная растворимость в воде 3700 мг (3,5 мл) в 1 л водопроводной дехлорированной воды; хорошо растворим в ацетоне, хлороформе, четырех-хлористом углероде.
ГМА широко применяется в полиграфической промышленности как один из основных компонентов для получения фотополимерных печатных форм, в технологии получения синтетических каучуков и других полимерных материалов. В составе сточных вод предприятий химической и полиграфической промышленности ГМА может сбрасываться в открытые водоемы и загрязнять их.
Влияние ГМА на органолептические свойства воды изучали общепринятыми методами. Нами установлено, что ГМА придает воде резкий ароматический запах, напоминающий запах акрилатов, метакрилатов, гнилых фруктов. Привкус воды определяли органолептически качественно и по интенсивности количественно. Порог восприятия запаха установлен на уровне 1,413 мг/л, илн 9,94 ммоль/л. Прак-
3*
тическнй предел по запаху определен в концентрации 3,1317 мг/л, или 22,03 ммоль/л. Порог восприятия привкуса 2,155 мг/л, или 15,16 ммоль/л. Практический предел привкуса определен в концентрации 4,784 мг/л, или 33,654 ммоль/л. Хлорирование водных растворов ГМА не провоцировало появления посторонних запахов.
Стабильность ГМА в водопроводной дехлорированной воде изучали методами: органолептическнм, методом тонкослойной хроматографии, фотоэлектроколориметрическим методом количественного определения ГМА в воде, разработанным Б. И. Здравко.
Для оценки характера и степени влияния ГМА на процессы естественного самоочищения водоемов исследовали динамику биохимического потребления кислорода (ВПК) в течение 25 сут и его влияние на~процессы аммонификации и нитрификации, окисляемость, активную реакцию среды и количество растворенного кислорода. Испытаны концентрации ГМА от 0,06275 ммоль/л (0,0089 мг/л) до 62,750 ммоль/л (8,90 мг/л), которые соответствуют от '/юо, 4/«o, 4i, 1 — 10 ПК Опыты проводили на речной днестровской воде с развитой сапрофитной микрофлорой.
Концентрации ГМА от 3,1305 до 62,75 ммоль/л уже в первые 5 сут эксперимента повышают ВПК на 43— 529 % по сравнению с контролем (см. таблицу).
Исходя из результатов изучения динамики ВПК, приведенных в таблице, мы высчитали количество растворенного кислорода, которое приходится на 1 мг ГМА на 15-е и 20-е сутки инкубации (удельное БПК). Удельное ВПК не является постоянной величиной, а зависит от срока инкубации и концентрации исследуемого вещества.
— 67 —
25-е сутки orifod -том х % 100,0 113,2 114,4 146,2 147,0 379,6
If/'O Ч1ГОНК 160,937 182,187 184,062 222,812 236,562 610,937
20-е сутки oiifod -той я % 100,0 108,5 105,8 123,5 130,1 456,4
If/'O Ч1/ОИИ 162,187 175,937 171,875 206,562 210,937 740,312
15-е сутки он/od -шоп я % 100,0 112,3 105,2 130,2 128,9 235,6
If/'O Ч1ГОИК 150,000 168,437 167,187 195,312 202,812 665,937
10-е сутки oiu-od -том я % O'OOI 113,3 114,3 124,9 133,6 490,6
if/'O чионп 129,062 146,250 147,500 161,250 172,500 633,125
7-е сутки он,-od -тоя н % JlOO.O 111,8 114,2 140,9 150,15 540,2
if/'O 41/оли 100,937 112,812 115,312 142,187 151,562 545,312
5-е сутки oiti-od -1НОМ я % O'OOI 111.3 110.4 143.5 153,3 629,9
If/'O IlfONH 71,875 80,000 79,375 103,125 110,000 450,625
3-й сутки Ol if od -1.НОЯ я % 100,0 108,1 106,9 109,2 111,6 122,5
if/'O lifo«« 54,687 58,437 57,812 59,062 60,312 66,250
1-е сутки oiirod -тон я % 100,0 102,7 108,2 108,2 105,5 197,3
if/'О 4ifoww 22,812 23,437 24,687 24,687 24,062 45,000
Концентрация ГМА, ммоль/л Контроль 0,05275 0,6275 3,1305 6,2750 62,7500
Характеризуя процесс аммонификации органических загрязнений в модельных водоемах в присутствии ГМА, следует отметить, что ГМА в количестве 0.0089 мг/л не BtJC зывает интенсификации процесса аммонификации более чем на 13 % по сравнению с контролем. Более высокие концентрации ГМА усиливают процесс аммонификации органических загрязнении в период с 5-х по 20-е сутки с 20 до 111%.
При изучении воздействия ГМА на процесс образования нитритных ионов установлено, что данный эфир в количестве 8,9 мг/л (62,75 ммоль/л) угнетает образование нитритов (ионов азотистой кислоты) на 1, 3 и 7-е сутки эксперимента на 7,8, 32,7 и 73,3 % соответственно, а на 6, 10 и 15-е сутки интенсифицирует процесс образования нитритов на 43.5, 173,3 и 37,5 % по сравнению с контролем.
Концентрация ГМА 8,9 мг/л (62,75 ммоль/л) угнетает образование ионов азотной кислоты (нитратов) начиная с 3-х по 25-е сутки.
Оценивая результаты влияния ГМА на содержание растворенного в воде кислорода, можно отметить, что данный эфир в концентрации 8,9 мг/л (62,75 ммоль/л) вызывает снижение содержания растворенного кислорода на 3—10-е сутки опыта на 41,6—13,7% по сравнению с контролем.
ГМА в концентрациях от 0,0089 до 8,9 мг/л оказывает стимулирующее действие на развитие сапрофитной микрофлоры. Данные о динамике роста сапрофитной микрофлоры коррелируют с данными о содержании растворенного кислорода в воде модельных водоемов.
ГМА во всех исследуемых концентрациях (от 0,06725 ммоль/л) не оказывает заметного влияния на як-^j тивную реакцию воды модельных водоемов. "
Оценивая влияние ГМА на окисляемость органических загрязнений в воде модельных водоемов, следует отметить. что ГМА в концентрациях от 0,06275 до 0,6725 ммоль/л не вызывает увеличения окисляемости органических примесей больше, чем на 12,5 %.
На основании материалов по изучению воздействия ГМА на органолептические свойства воды и санитарно-химический режим водоемов можно сделать вывод, что данный эфир оказывает отчетливое влияние на процессы самоочищения водоемов. Следовательно, в качестве недействующей концентрации ГМА на санитарный режим водоемов можно рекомендовать концентрацию 0,6275 ммоль/л (0,089 мг/л) по влиянию на БПК, процесс аммонификации и нитрификации. Концентрация 3,1505 ммоль/л (0,445 мг/л) является минимальной действующей на санитарный режим водоемов.
Определение параметров острой токсичности ГМА проводили на беспородных половозрелых белых крысах, белых мышах и морских свинках, содержащихся на обычном виварном пищевом рационе. Всего в эксперименте использовано 150 белых крыс, 130 белых мышей и 30 морских свинок.
Испытывали следующие дозы ГМА: 1000, 850, 700, 550 и 400 мг/кг для белых крыс; 800, 650. 500 н 200 мг/кг для белых мышей; 1100, 950, 800 и 650 мг/кг для мор^ ских свинок. Каждая испытуемая доза вводилась 10 бе* лым крысам, 6 белым мышам и 6 морским свинкам внутри-желудочно в виде эмульсии с ОП-7. Срок наблюдения 14 сут. В ходе эксперимента определена абсолютно смертельная доза для белых крыс 1000 мг/кг, для белых мышей 800 мг/кг, для морских свинок 1100 мг/кг. Недействующими дозами являются 400, 200, 500 мг/кг соответственно. Основным критерием токсичности служили среднесмертель-ные дозы (LDso). LDso для белых крыс установлена на уровне 597±822 мг/кг, для мышей — 390±679 мг/кг и для морских свинок — 697± 1003 мг/кг.
Для определения видовой чувствительности животных вычисляли коэффициент видовой чувствительности (КВЧ). КВЧ равен 1,6. Согласно классификации КВЧ, предложенной И. В. Саноцкнм и И. П. Улановой [4], ГМА обладает слабо выраженным различием видовой чувствительности животных.
При однократном внутрижелудочном воздействии ГМА в дозе 850 мг/кг в печени белых крыс обнаружены вакуо-
лизация гепатоцнтов, разрушение плазматических мембран ^выходом клеточного содержимого в интерстиций; при введении ГМА в дозах 400 и 550 мг/кг в печени также обнаружены аналогичные изменения, только степень их генерализации значительно ниже. Следовательно, данные об острой токсичности ГМА свидетельствуют о том, что при введении в желудок ГМА является умеренно опасным веществом (3-й класс опасности) согласно ГОСТу 12.1.007—76 «Вредные веществаэ.
ГМА не обладает свойством резорбироваться через кожу и не вызывает местнораздражающего действия. При воздействии ГМА на слизистые оболочки глаз наблюдались слезотечение, гиперемия конъюнктивы и склеры, сужение зрачка. На 2-е сутки после закапывания развивается острый гнойный конъюнктивит с помутнением роговицы. Восстановление наступает на 10—12-е сутки без лечебных мероприятий. Разбавленный ГМА в отношении 1 : 10 не вызывает раздражения слизистой оболочки глаз.
Оценка кумулятивных свойств ГМА проведена по методике Г. Н. Красовского и соавт. |2|. Испытывали 3 дозы ГМА: Vio LDso (70 мг/кг), '/»о LDso (14 мг/кг) и Vas о LDso (2,8 мг/кг). Опыты проводили на беспородных белых крысах (самках) с исходной массой 120—150 г, которые ежедневно на протяжении 30 дней перорально получали указанные выше дозы. ГМА вводили с эмульгатором ОП-7; животным контрольной группы вводили воду с эмульгатором в том же количестве.
Животные, получавшие '/и и Чао, LDso, не отличались по своему состоянию от контрольных. У животных, получав-, ших '/«о LDso ГМА, к 17-му дню эксперимента появлялись Ьюизнаки интоксикации: животные отказывались от пищи, выглядели неопрятными, у них снижался тургор тканей. Поведение животных хорошо согласуется с данными пато-морфологического исследования: в миокарде обнаружена дилатация капилляров с агрегацией эритроцитов, в легких — венозное полнокровие, в печени — жировая дистрофия, в почках — явления, характерные для гломерулонеф-рита, в селезенке — гиперплазия пульпы, в желудке — множественные язвы слизистой. Изменения биохимических показателей свидетельствуют о нарушении окислительно-восстановительных процессов в организме и преимущественном поражении печени и почек.
При изучении кумулятивности к ГМА были получены следующие величины EDso на 5, 10, 20 и 30-й дни эксперимента: 12,88±3,1, 13,50±3,4, 12,67±2,8, 12.80±3,2 мг/кг, которым соответствуют коэффициенты кумуляции на уровне 1, 1,048 и 1,12. Полученные данные свидетельствуют о развитии резистентности (К>1) к ГМА. Среднеэффектив-ная доза в течение подострого санитарно-токсикологическо-го эксперимента находилась на уровне 12,8±3,5 мг/кг. Коэффициент кумуляции при введении '/ю LDso составил 2,6. Минимально действующая доза для условий подострого опыта составляла 2,8 мг/кг.
Хронический санитарно-токсикологическнй эксперимент проведен на белых крысах и морских свинках. Продолжительность хронического эксперимента 6 мес, длительность ^рсстановителыюго периода 1 мес. В серии опытов использовали 3 дозы ГМА: 2,8, 0,56 и 0,112 мг/кг.
У животных, получавших ГМА в дозе '/"о LDst (2,8 мг/кг), развивалась хроническая интоксикация: уменьшались активность холинэстеразы цельной крови до 3,13± ±0,15 ммоль/мл/мин (в контроле 6,52±0,94), фазные колебания уровня трансаминаз в сыворотке крови, снижалась активность каталазы до 1,18±0,13 усл. ед. (в контроле 1,84±0,12). в периферической крови наблюдалась лейкопения. Описанные изменения сохранялись до конца эксперимента. Отмечено развитие процессов торможения в коре головного мозга, что проявлялось в увеличении числа выпадения рефлексов на положительные раздражители (70 % в группе). При патоморфологическом исследовании в миокарде наблюдались изменения сосудистого характера, в печени — реакция разрежения межуточной ткани.
При воздействии ГМА в дозе Ч»гso LDso (0,112 мг/кг) достоверных изменений всех изучаемых показателей не отмечено. Эту дозу следует считать максимальной недействующей дозой в хроническом санитарно-токснкологическом эксперименте.
Изучение влияния ГМА на репродуктивную функцию проведено на половозрелых белых крысах-самцах массой 150—180 г, которым в течение 72 дней (полный цикл сперматогенеза) внутри желудочно вводили ГМА в дозах '/»zso и i/si 250 LDso. Опытные группы состояли из 20 животных каждая. Оценку гонад проводили с использованием функциональных и морфологических методов. Функциональные исследования, проведенные по методике В. К. Милованова [31, включали исследование подвижности сперматозоидов, определение их количества, процента дегенеративных форм, кислотной и осмотической резистентности. Морфологически определяли массу семенников, коэффициент массы, индекс сперматогенеза, количество канальцев со слущенным эпителием, количество канальцев с 12-й стадией мейоза. Полученные результаты свидетельствуют о том, что ГМА не оказывает влияния на функциональное состояние сперматозоидов и не вызывает достоверного отклонения в морфо-метрических показателях у белых крыс.
Аллергическое действие изучали по методике О. Г. Алексеевой и А. И. Петкевич [1|. Применяли внутрикожный способ сенсибилизации с последующими многократными эпи-кутонтными аппликациями разрешающей дозы морским свинкам белой масти. В эксперименте было использовано 20 подопытных и 20 контрольных молодых половозрелых морских свинок с массой тела 150—300 г. Отбирались животные с белой шерстью на туловище, поскольку они более реактивны, чем имеющие пеструю или черную окраску. Через 7 сут после сенсибилизации морских свинок на боковую поверхность туловища (2x2 см) наносили разрешающую дозу, которая в 1,5—2 раза превышала сенсибилизирующую. Через 24 ч после первой аппликации возникла нерезко выраженная гиперемия, а в дальнейшем — отек и инфильтрация дермы. Несмотря на дальнейшее нанесение препарата на кожу морских свинок, отек и инфильтрация дермы постепенно уменьшались, кожа становилась сухой, появлялось мелкопластинчатое отрубевидное шелушение.
Результаты исследований показали, что у животных контрольной группы, которым сенсибилизация проводилась растворителем, показатели аллергии были следующими: кожная проба — 0 баллов, тест дегрануляции тучных клеток— 2,9±0,87 %, т. е. отрицательный. В опытной группе тест дегрануляции тучных клеток составил 14,7±0,29, т. е. был положительным. При изучении аллергических свойств ГМА установлено, что данное вещество обладает свойствами аллергена только при внутрикожной сенсибилизации.
Таким образом, на основании сопоставления недействующих концентраций по всем 3 лимитирующим показателям вредности установлено, что наиболее выраженным лимитирующим показателем является влияние ГМА на санитарный (общесанитарный) режим водоемов. В качестве ПДК в воде водоемов для ГМА можно рекомендовать концентрацию
0.6275.ммоль/л (0,0892 мг/л).
Литература
1. Алексеева О. Г.. Петкевич А. И. — Гиг. и сан., 1972, № 3, с. 64—67.
2. Красовский Г. Н. и др. — Гиг. и сан., 1970, № 3, с. 83— 88.
3. Милованов В. К. Биология воспроизведения и искусственное осеменение животных. М., 1962, с. 419—473.
4. Саноцкий И. В.. Уланова И. П. Критерии вредности в гигиене и токсикологии при оценке опасности химических соединений. М., 1975, с. 75—93.
Поступила 12.06.84
