Маркеры взаимодействия тромбин-фибриноген и толерантность к тромбину в связи с липидпероксидацией Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

УДК 612.115.12

МАРКЕРЫ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ ТРОМБИН -ФИБРИНОГЕН И ТОЛЕРАНТНОСТЬ К ТРОМБИНУ В СВЯЗИ С ЛИПИДПЕРОКСИДАЦИЕЙ

©2007 г. Г. А. Сулкарнаева

Медицинская академия, г. Тюмень

Изучая влияние на гемостаз воздействий, модулирующих липидпе-роксидацию, обычно используют сочетания тестов, не позволяющие в должной мере оценить интенсивность взаимодействия тромбин

— фибриноген (ВТФ), которое отражает состояние непрерывного внутрисосудистого свертывания крови. Контролировать же течение этого физиологического процесса необходимо потому, что его интенсивность характеризует степень напряжения системы гемостаза [5,

9, 14, 19]. Более того, есть основания выстраивать в зависимости от интенсивности внутрисосудистого микросвертывания крови следующий ряд [9]: 1. Уровень маркеров свертывания в пределах нормы.

2. Уровень маркеров повышен (преходящее состояние, не отражающееся на функции органов и систем). 3. Уровень маркеров повышен постоянно, не отражаясь заметно на клинической картине заболевания.

4. Рост содержания маркеров протекает быстро и заметно влияет на функцию органов, угрожая жизни больного (ДВС-синдром). В связи с этим можно полагать, что сдвиги интенсивности внутрисосудистого свертывания крови, контролируемые по содержанию маркеров ВТФ, позволяют судить о наклонности к гипер- или к гипокоагулемии [6,

7, 8, 10]. Существенно и то, что при оценке гемокоагуляции нередко не контролируют тромбоцитарное звено гемостаза, хотя тромбоциты зависят, в частности, от липидпероксидации [17], а также потому, что интенсивность высвобождения факторов Р3 и Р4 зависит от степени тромбинемии, следовательно, косвенно отражает интенсивность тром-биногенеза. Связь же между уровнем маркеров ВТФ и толерантностью к тромбину практически не изучалась.

Цель настоящей работы — экспериментально подтвердить или исключить связь между уровнем маркеров ВТФ и толерантностью к тромбину, а также изучить зависимость интенсивности внутрисосудистого свертывания крови от липидпероксидации.

Методика

Модель, позволившая сформулировать понятие «толерантность к тромбину», предусматривает определение частоты гибели животных при введении тромбина на фоне бодрствования или наркотического сна [20]. Эта модель широко применялась впоследствии [18, 24, 25]. Основанием для ее использования явилось то, что защитная реакция на введение тромбина реализуется эффективнее в состоянии бодрствования и ослабляется в условиях наркотического сна [20]. Изменяется ли интенсивность ВТФ в этих условиях — неизвестно.

Мы определяли толерантность к тромбину согласно запатентованному способу [26]. В качестве маркеров ВТФ оценивали: 1) содержание продуктов деградации фибрина (ПДФ) [13] — индикатора компенсатор-

В опытах на крысах установлено, что толерантность к тромбину находится в обратной зависимости от содержания маркеров взаимодействия тромбин — фибриноген (ВТФ): чем выше интенсивность ВТФ, тем ниже толерантность к тромбину и наоборот; содержание маркеров взаимодействия тромбин — фибриноген растет при ускорении липидпероксидации и снижении антиоксидантного потенциала тромбоцитов; прооксидантные свойства тироксина ответственны за его влияние на интенсивность внутрисосудистого свертывания крови.

Ключевые слова: липидперокси-дация, толерантность к тромбину, фибрин, взаимодействие тромбин — фибриноген.

ной активации фибринолиза, связанного с усиленной фибринацией как следствием тромбиногенеза [23, 35]; 2) содержание D-димеров (D-Д) — маркеров коагуляционной активности или компенсаторного фибринолиза [32], определяли, используя набор «D-dimer test» (Roche); 3) содержание растворимых комплексов фибринмономеров (РКМФ) [22], отражающее коагуляционную активность [16, 35]; 4) концентрацию в плазме осаждаемого тромбином фибриногена [11], снижение которой в присутствии других признаков активации тромбиногенеза свидетельствует об ускорении ВТФ [35], что позволяет выявлять его ускоренное потребление при активации гемостаза [6, 7, 35]; 5) содержание факторов Р3 и Р4 в плазме [4].

Интенсивность липидпероксидации и антиоксидан-тный потенциал в тромбоцитах оценивали по уровню диеновых конъюгат (ДК), продуктов, реагирующих с тиобарбитуровой кислотой (ТБК), периоду индукции (ПИ) и скорости окисления (СО), определявшихся по описанию [28].

Опыты проведены на белых крысах-самцах

— масса тела (150—170 ± 12) г, получавших смесь овсяной и ячменной каши с добавлением дрожжей и растительного масла. Детали, касающиеся отдельных экспериментов (дозы, путь и длительность введения, сроки отбора проб) приведены при их описании, в том числе в таблицах.

Результаты и обсуждение

Изучая связь между ВТФ и толерантностью к тромбину, партию крыс разделили на 2 группы: одной вводили в яремную вену раствор тромбина (1 мл/кг, активность — 25 с по времени свертывания 0,2 % раствора фибриногена) через 5 мин после пробуждения от эфирного наркоза, другой — на высоте наркоза. Через 0,5 ч после инъекции тромбина в пробах крови определяли маркеры ВТФ.

Оказалось (табл. 1), что введение тромбина на фоне наркотического сна повышает содержание маркеров ВТФ и снижает толерантность к тромбину. Тромбин, введенный после пробуждения, менее заметно изменяет те же величины.

Таблица 1

Маркеры ВТФ и толерантность к тромбину у крыс через 0,5 ч после инъекции в яремную вену тромбина во время наркотического сна и после выхода из него

Группа животных

Показатель Контроль (тромбин не вводили) (n=7) Тромбин ввели интактным крысам (n=8) Тромбин введен в период наркоза (n=8) Тромбин введен после выхода из наркоза (n=9)

2 3 4

ПДФ, мг % 15,9±1,1 19,9±1,1* 25,8±1,9*+ 20,1±1,1*+*

РКМФ, мкг/мл 25,1±1,1 30,1±1,1 43,9±2,2*+ 34,3±1,1*+*

D-Д, мкг/мл 0,17±0,04 0,27±0,04 0,46±0,03*+ 0,35±0,04*+*

Р3 , % 90,3±2,1 98,3±2,0* 129±2,2*+ 111,0+2,1*+*

р4 , с 3,1±0,03 3,6±0,02* 4,9±0,03*+ 3,8±0,03*+#

ФГ, г/л 2,2±0,11 1,3±0,11* 0,08±0,08*+ 0,22±0,10*+*

Тол. к тр., % — 100±2,2 6,1±0,8* 16,9±0,9*+*

Примечания: обозначения здесь и далее в таблицах, отсутствующие в тексте: ФГ — фибриноген; Тол. к тр. — толерантность к тромбину; достоверные отличия: * — от контроля; + — 3-й графы от 2-й; # — 4-й графы от 2 и 3-й.

Для количественной характеристики связи уровня маркеров ВТФ и толерантности к тромбину в опытах изменяли количество вводимого тромбина (крысам подопытных групп вводили разбавленный в 2, 3 и 4 раза раствор тромбина в прежнем объеме — 1 мл/кг).

Согласно данным табл. 2, содержание маркеров ВТФ изменилось пропорционально количеству введенного тромбина: ниже доза — ниже интенсивность сдвига всех показателей этого ряда и степень снижения толерантности к тромбину. Видимо, содержание маркеров ВТФ связано с толерантностью к тромбину и позволяет судить о степени готовности организма к изменению тромбинемии.

Как второй прием, вызывающий гипертромбине-мию, использовали введение адреналина — эффектора активации гемостаза при болевом раздражении [2, 3]. Взаимодействие адреналина с адренорецепторами подтипа а2 ингибирует аденилатциклазу, снижая содержание цАМФ [29] и проницаемость мембран для внеклеточных ионов Са2+ [29].

Таблица 2

Маркеры ВТФ и толерантность к тромбину у крыс через 0,5 ч после инъекции в яремную вену разных доз тромбина во время наркотического сна

Показатель Контроль (тромбин не вводили) (n=6) Ввели цельный тромбин интактным крысам (n=7) Ввели разбавленный тромбин

1:1 (n=9) 1:2 (n=9) 1:3 (n=12)

1 2 3 4 5

ПДФ, мг % 15,9±1,1 19,9±1,1* 24,2±1,6*+ 21,1±1,2*+* 17,0±1,1*+*

РКМФ, мкг/мл 25,1±1,1 30,1±1,1 40,1±2,1*+ 31,9±1,1*+* 28,1±1,2*+*

D-Д, мкг/мл 0,17±0,04 0,27±0,04 0,41±0,02*+ 0,34±0,04*+* 0,21±0,04*+*

Р3 , % 90,3±2,1 98,3±2,0* 124±2,1*+ 109±2,0*+* 99,1±2,2*+*

Р4 , С 3,1±0,03 3,6±0,02* 4,3±0,03*+ 3,7±0,02*+* 3,4±0,03*+*

ФГ, г/л 2,2±0,11 1,3±0,11* 0,12±0,08*+ 0,19±0,10*+* 1,11±0,08*+*

Тол. к тр., % — 59,0±2,4 9,2±0 ,7* 14,5± ,9*+* 85,4±1,4*+*

Примечание. Достоверные отличия: * — от контроля; + — 3-й графы от 2-й; + # — 4 и 5-й граф от 2 и 3-й соответственно.

Сдвиги уровня Са2+ в цитозоле модифицируют протеинкиназу [31], следовательно, скорость фос-форилирования и агрегацию [1, 30]. Возможна реализация адреналининдуцируемой агрегации и через стимуляцию натрий-калиевого обмена, и через сдвиги концентрации фосфоинозитола [34]. Так или иначе, активация тромбоцитов адреналином сопровождается ростом гемостатического потенциала [33], т. е. ускоренным тромбиногенезом.

В опытах с адреналином использовали данные о дозе, пути введения и продолжительности гиперко-агуляционного эффекта [27]: контрольным крысам вводили подкожно 0,14 М раствор №С1, 1 мл/кг, подопытным — раствор адреналина солянокислого (1,0 мл/кг, содержащий 30 мкг адреналина), пробы брали через 15 и 30 мин.

По данным табл. 3, инъекция адреналина увеличивает содержание факторов Р3 и Р ПДФ, РКМФ и Э-димеров (тенденция на 15-й и достоверно

— на 30-й мин), что свидетельствует об активации адреналином тромбиногенеза. Это подтверждается снижением фибриногенемии.

Таблица 3

Маркеры ВТФ в разные сроки после подкожного введения адреналина (30 мкг/кг, п = 7 на каждом этапе опыта)

Показатель Контроль 15 мин 30 мин

ПДФ, мг % 15,8±1,2 17,1 + 1,7 21,9±1,0*

РКМФ, мкг/мл 24,7+1,0 26,3±1,2 31,8±1,1*

Э-Д, мкг/мл 0,18±0,011 0,20 + 0,017 0,28±0,012*

Р3, % 89,4+1,8 93,7±1,9 101±2,1*

^ с 3,4±0,03 3,9±0,07 4,3±0,02*

ФГ, г/л 2,2±0,09 2,0±0,11 1,8±0,07*

Примечание. * — достоверные отличия от контроля.

В аналогичном по постановке эксперименте через 15 или 30 мин после инъекции адреналина крысам ввели внутривенно раствор тромбина (1 мл/кг, активность 25 с), контрольным крысам ввели 0,14 М раствор №С1. Через 0,5 ч в пробах крови определяли показатели ВТФ, концентрацию фибриногена и рассчитывали толерантность к тромбину.

Оказалось (табл. 4), что содержание маркеров ВТФ при введении тромбина без предварительной инъекции адреналина или через 30 мин после инъекции ниже, чем при введении тромбина на высоте действия адреналина (на 15-й мин). Повышенному содержанию маркеров ВТФ сопутствует спад толерантности к тромбину, следовательно, и ограничение способности к выживанию при ускорении тромбиногенеза.

В качестве другой модели эндогенно активированного тромбиногенеза использовали кровопотерю, которая в объеме, составляющем 25 % от общего объема циркулирующей крови, активирует гемостаз [18, 24]. Кровопотерю (12,5 мл на кг массы тела, т. е. 25—30 % от общего объема циркулирующей крови) осуществляли из яремной вены и через 1, 3, 6 и 24 ч брали пробы крови.

Таблица 4

Маркеры ВТФ и толерантость к тромбину, введенному через 15 и 30 мин после подкожной инъекции адреналина

(30 мкг/кг, п = 7 на каждом этапе опыта)

Контроль интактный (из табл. 5) Ввели тромбин

без адреналина после адреналина

Показатель через 15 мин через 30 мин

1 2 3 4

ПДФ, мг % 15,8±1,2 21,0± 1,2* 29,3±1,6*+ 22,1±1,2*+#

РКМФ, мкг/мл 24,7± 1,0 31,0± 1,2 47,3±2,2*+ 43,9±2,2*+ 35,8±1,2*+# 34,3±1,1*+#

О-Д, мкг/мл 0,18±0,011 0,28±0,04 0,54±0,04*+ 0,38±0,04*+#

Р3, % 89,4± 1,8 99,8±2,0* 135±2,3*+ 117,0±2,0*+#

^ с 3,4±0,03 3,7±0,03* 5,4±0,03*+ 4,8±0,04*+#

ФГ, г/л 2,2±0,09 1,2±0,11* 0,06±0,05*+ 0,09±0,11*+#

Тол. к тр., % 100±2,4 5,1±0,07* 8,9±0,07*+#

Примечание. Достоверные отличия: * — от контроля; + — 3-й графы от 2-й; # — 4-й графы от 2 и 3-й.

Толерантность к тромбину через 1 и 6 ч после кровопотери представлена табл. 6: через 1 ч после кровоизвлечения, когда уровень маркеров ВТФ был увеличен существеннее, толерантность к тромбину оказалась ниже в 1,51 раза (10,4 : 6,9), чем при тестировании через 6 ч после кровоиз-влечения, т. е. в момент, когда активация тромбиногенеза, вызванная кровопотерей, уменьшилась.

Таблица 5

Маркеры ВТФ в разные сроки после кровопотери

(п = 8 на каждом этапе опыта)

Показа- тель Контроль 1 ч 3 ч 6 ч 24 ч

ПДФ, 14,4 16,9 19,9 24,7 15,4

мг % ±1,2 ±1,1* ±1,5* ±1,6* ±1,4

РКМФ, 25,4 29,4 35,6 38,9 27,0

мкг/мл ±0,8 ±0,6* ±0,5* ±1,3* ±0,9

О-Д, 0,21 0,29 0,30 0,36 0,23

мкг/мл ±0,090 ±0,007* ±0,008* ±0,011* ±0,012

Р3, % 88,6 95,8 99,9 102 90,1

±2,0 ±2,1* ±2,1* ±2,2* ±1,7

Р4, с 3,3 3,6 4,6 4,9 3,7

±0,02 ±0,03* ±0,04* ±0,06* ±0,02

ФГ, г/л 2,1 1,9 1,4 1,3 2,0

±0,07 ±0,06* ±0,05 ±0,04* ±0,08

Примечание. * — достоверные отличия от контроля.

Далее приведены результаты посезонной оценки уровня маркеров ВТФ и толерантности к тромбину (табл. 7). Основанием для этих наблюдений явились данные о сезонной изменчивости гемостатического потенциала [12, 21 ].Оказалось, что содержание маркеров ВТФ в зимний и особенно осенний периоды выше, а весной и летом ниже среднегодовых. Толерантность к тромбину весной и летом ниже среднегодовых значений. Следовательно, как и в уже обсужденных наблюдениях, высоким уровням маркеров ВТФ соответствуют пониженные значения толерантности к тромбину.

Таблица 6

Маркеры ВТФ и толерантность к тромбину (1 мл/кг, активность 25 с), введенному через 1 и 6 ч после кровопотери

(12,5 мл/кг массы тела, п = 6 на каждом этапе)

Показатель Ввели тромбин

интактным крысам крысам после кровопотери

1 2 3

ПДФ, мг % 21,0±1,2* 27,1±1,4*+ 24,3±1,0*+#

РКМФ, мкг/мл 31,0±1,2 45,4±2,0*+ 33,2±1,0*+

Э-Д, мкг/мл 0,28±0,04 0,46±0,02*+ 0,32±0,03*+

Р3, % 99,8±2,0* 130±2,2*+ 117,0±2,0*+#

Р4, с 3,7±0,03* 5,1±0,02*+ 4,3±0,03*+#

ФГ, г/л 1,2±0,11* 0,08±0,03*+ 0,12±0,07*+#

Тол. к тр., % 100 6,9±0,2** 10,4±0,5*+#

Примечание. Достоверные отличия: * — от контроля; + — 2-й графы от 1-й; # — 3-й от 1 и 2-й.

Таким образом, при разных ситуациях сохраняется определенное соотношение между содержанием маркеров ВТФ и толерантностью к тромбину: ниже уровень маркеров — выше толерантность к тромбину и наоборот.

Таблица 7

Маркеры ВТФ в плазме крыс в разное время года

(п = 9 на каждом этапе)

Пока- затель Сред- него- довая вели- чина Зима Весна Лето Осень

ПДФ, 14,6 15,1 13,8 12,9 16,8

мг % ±0,2 ±1,0* ±0,7* ±1,1* ±1,0*

РКМФ, 25,1 24,5 23,1 25,2 27,7

мкг/мл ±0,3 ±0,9* ±1,4* ±1,1* ±0,6*

Э-Д, 0,26 0,29 0,24 0,23 0,28

мкг/мл ±0,003 ±0,006* ±0,006* ±0,003* ±0,004*

Р3, % 89,7 98,0 79,9 78,0 103

±1,0 ±1,2* ±1,0* ±2,1* ±1,3*

^ с 3,4 3,6 3,1 3,0 3,9

±0,01 ±0,02* ±0,02* ±0,06* ±0,02*

ФГ, г/л 2,1 2,3 1,9 1,9 2,4

±0,01 ±0,03* ±0,02* ±0,04* ±0,03

Тол. к 100 77,5 124 128 70,4

тр., % ±0,9 ±1,9* ±3,1* ±1,5* ±0,9*

Примечание. * — достоверные отличия относительно среднегодовых значений, для которых число п = 36 (сумма всех определений за год).

В следующей серии опытов, определяя маркеры ВТФ, контролировали липидпероксидацию и анти-оксидантный потенциал в тромбоцитах. Как прооксиданты использовали ацетат свинца и тироксин, как ингибитор липидпероксидации — комплексный антиоксидант селмевит: 1-ю группу составили ин-тактные крысы; 2-ю — крысы, получавшие тироксин (15 мг/кг ежедневно в течение 15 дней); 3-ю

— получавшие селмевит (25 дней); 4-ю — селмевит (25 дней в количестве, содержащем 0,18 мг витамина А) и с 10-го дня тироксин (15 мг/кг); 5-ю — ацетат свинца, 20 мг/кг в день, 25 дней; 6-ю

группу — получавшие ацетат свинца и с 15 дня тироксин (15 мг/кг). На 25-й день брали пробы крови.

Судя по данным табл. 8, введение тироксина активирует липидпероксидацию, снижает антиокси-дантный потенциал и ускоряет ВТФ, введение антиоксиданта тормозит липидпероксидацию, увеличивает антиоксидантный потенциал тромбоцитов и снижает интенсивность ВТФ, на фоне антиоксиданта влияние тироксина на липидпероксидацию и ВТФ ослаблено. Следовательно, тироксин активирует гемостаз за счет ускорения липидпероксидации, как это предполагалось ранее [17].

Таблица 8

Липидпероксидация и содержание маркеров ВТФ при введении тироксина на фоне селмевита (п = 5)

Показа- тель Контроль Вводили тироксин Вводили селмевит Вводили селмевит +тироксин

1 2 3 4

ДК, А/мг 0,06±0,003 0,12±0,004* 0,04±0,001* 0,09±0,001*х

липидов

ТБК, ед./ 0,75±0,07 0,91±0,03* 0,61±0,05* 0,84±0,05*х

мг липидов

ПИ, мин/мл 46,9±2,3 32,1±2,0* 56,1±2,1* 41,0±1,5*х

СО, мм3 0,72±0,05 0,95±0,09* 0,63±0,04* 0,83±*х

в мин

ПДФ, мг % 16,1±1,6 25,6±1,3* 12,1±1,1* 18,8±0,9*х

РКМФ, мкг/мл 25,1±0,9 33,4±0,8* 20,1±0,8* 29,2±1,1*х

Э-Д, мкг/мл 0,21±0,090 0,28±0,04* 0,22±0,03 0,24±0,03+

Р3, % 91,2±2,3 97,8±1,6 83,1±1,2 96,7±1,7*

^ с 3,3±0,05 4,2±0,04* 2,9±0,04* 3,7±0,03*х

ФГ, г/л 2,4±0,06 1,8±0,06* 2,5±0,15 2,1±0,04*х

Примечание. Достоверные отличия: * — от контроля; .+ — 3-й графы от 2-й; х — 4-й графы от 2 и 3-й.

Данные, полученные при введении тироксина на фоне прооксиданта (свинца), представлены в табл. 9. Здесь видно, что эффект тироксина и свинца — активация липидпероксидации и ВТФ. При их совместном введении наблюдается суммация эффектов на липидпероксидацию и на ВТФ. Можно полагать, что эффект тироксина и свинца на ВТФ обусловлен влиянием их на липидпероксидацию — иные свойства, объединяющие метаболические эффекты этого гормона и свинца, не известны.

Далее вводили тироксин или тироксин одновременно со свинцом. Из данных табл. 10 видно, что способность свинца активировать липидпероксидацию и ВТФ, потенцировать те же сдвиги, вызываемые тироксином, не проявляются на фоне антиоксиданта. Видимо, способность свинца потенцировать эффект тироксина на ВТФ обусловлена его активирующим влиянием на липидпероксидацию — еще один аргумент в пользу того, что воздействие тироксина на гемостаз реализуется через его прооксидантные свойства.

Таблица 9

Липидпероксидация и гемостаз при введении Т4 на фоне ацетата свинца (п = 5 в группе)

Показатель Контроль Тироксин Свинец Свинец+тироксин

ДК, A/мг липидов 0,0б±0,003 0,12±0,004* 0,09±0,003* 0,19±0,002*х

ТБК, ед./мг липидов 0,75±0,07 0,91±0,03* 0,95±0,07* 1,24±0,07*х

ПИ, мин/мл 4б,9±2,3 32,1±2,0* 29,3±1,3* 2б,1±1,3*х

СО, мм3 в мин 0,72±0,05 0,95±0,09* 0,87±0,0б* 1,21±0,08*х

ПДФ, мг % 1б,1±1,б 25,б±1,3* 19,б±1,4 29,9±1,2*х

PКMФ, мкг/мл 25,1±0,9 33,4±0,8* 28,2±1,б* 38,7±1,2*х

D-Д, мкг/мл 0,21±0,090 0,29±0,03* 0,27±0,04* 0,34±0,03+

P3, % 91,2±2,3 97,8±1,2* 100±1,7* 113±1,9*х

P4, с 3,3±0,05 4,2±0,04* 4,4±0,05* 4,9±0,04*х

ФГ, г/л 2,4±0,0б 1,8±0,0б* 1,7±0,04* 1,2±0,02*х

Примечание. Достоверные отличия: * — от контроля, х— от 2-й графы.

Таблица 10

Липидпероксидация и маркеры ВТФ при введении тироксина на фоне уксусно-кислого свинца при одновременном

введении селмевита и без него (п = 5)

Показатель Контроль Тироксин Свинец+ тироксин Свинец+сел- мевит+тироксин

1 2 3 4

ДК, А/мг липидов 0,0б±0,003 0,12±0,004* 0,21±0,003*х 0,14±0,003*’

ТБК, ед./мг липидов 0,75±0,07 0,91±0,03* 1,2б4±0,0б*х 0,88±0,02*’

ПИ, мин/мл 4б,9±2,3 32,1±2,0* 24,7±1,2*х 31,8±2,1*’

СО, мм3 в мин 0,72±0,05 0,95±0,09* 1,30±0,09*х 0,89±0,08*’

ПДФ, мг % 1б,1±1,б 25,б±1,3* 29,1±1,3*х 24,3±1,1*’

РКМФ, мкг/мл 25,1±0,9 33,4±0,8* 39,2±1,1*х 32,8±0,б*’

Рз, % 91,2±2,3 97,8±1,б 115±1,8*х 9б,9±1,4*’

^ с 3,3±0,05 4,2±0,04* 5,0±0,04*х 4,0±0,05*’

ФГ, г/л 2,4±0,0б 1,8±0,0б* 1,0±0,03*х 1,9±0,05*’

Примечание. Достоверные отличия: * — от контроля; х— от 2-й графы; ’ — от 3-й графы.

Заключая, можно констатировать следующее.

Толерантность к тромбину находится в обратной зависимости от содержания маркеров взаимодействия тромбин — фибриноген: чем выше интенсивность ВТФ, тем ниже толерантность к тромбину и наоборот; содержание маркеров взаимодействия тромбин

— фибриноген растет при ускорении липидпероксидации и снижении антиоксидантного потенциала тромбоцитов.

Прооксидантные свойства тироксина являются, видимо, определяющими в его влиянии на интенсивность внутрисосудистого свертывания крови. Реализуется же эффект тироксина (свинца и других прооксидантов) с наибольшей вероятностью за счет ускорения процессов трансформации арахидоновой кислоты в тромбоцитах, что показано ранее [15] и что подтверждено в настоящей работе ускоренным высвобождением тромбоцитарных факторов Р3 и Р4.

Список литературы

1. Алексеева Е. А. Адренорецепторы тромбоцитов / Е. А. Алексеева, П. П. Голиков // Гематол. и трансфузиол.

— 1989. — № 2. — С. 49—54.

2. Балуда В. П. Влияние болевого раздражения на свертывание крови / В. П. Балуда // Патол. физиол. и эксп. терапия. — Куйбышев, 1951. — Т. 1. — С. 41.

3. Балуда В. П. Влияние болевого раздражения на функциональное состояние свертывающей системы крови :

дис. ... канд. мед. наук / Балуда В. П. — Томск, 1958.

— 211 с.

4. Балуда В. П. Лабораторные методы исследования системы гемостаза / В. П. Балуда, З. С. Баркаган, Е. Д. Гольдберг и др. — Томск, 1980. — 310 с.

5. Баркаган З. С. Геморрагические заболевания и синдромы / З. С. Баркаган. — М. : Медицина, 1988. — 528 с.

6. Баркаган З. С. Основы диагностики нарушений гемостаза / З. С. Баркаган, А. П. Момот. — М. : Нью-диамед-АО, 1999. — 224 с.

7. Баркаган З. С. Уроки ДВС-синдрома: основные закономерности патогенеза, развития ведущих субсиндромов и обоснование однонаправленной контролируемой терапии // Труды проблемной комиссии при межведомственном научном совете по гематологии и трансфузиологии РАМН.

— Барнаул, 2000. — С. 143—147.

8. Бокарев И. Н. Проблемы постоянного и диссеминированного внутрисосудистого свертывания крови. Как их понимать? / И. Н. Бокарев // Тромбоз, гемостаз и реология. — 2000. — № 2. — С. 5—9.

9. Бокарев И. Н. Тромбозы, предтромботические состояния, тромбофилии и гиперкоагуляция / И. Н. Бокарев // Тромбозы, геморрагии, ДВС-синдром. Проблемы лечения.

— 2000. — С. 39—43.

10. Бышевский А. Ш. Антиоксиданты в коррекции гемокоагуляционных сдвигов / А. Ш. Бышевский, М. К. Умутбаева, Р Г. Алборов. — М. : Медицинская книга, 2004. — 79 с.

11. Бышевский А. Ш. Метод определения антиплазмина в сыворотке крови / А. Ш. Бышевский, В. Мохнатов //

Система свертывания крови и фибринолиза. — Киев : Здоровье, 19б9. — С. 220.

12. Бышевский А. Ш. Свертываемость крови при реакции напряжения / A. Ш. Бышевский, В. H. Кожевников. — Свердловск : Средне-Уральское кн. изд-во, 198б. — 172 с,

13. Бышевский А. Ш. Способ определения содержания продуктов деградации фибрина в плазме / A. Ш. Бышевский, И. A. Mухачева, В. M. Шафер. : A. С, № 1б59855. Публик. бюл. № 24. — 30.05,1991,

14. Бышевский А. Ш. Тромбопластин / A. Ш. Бышев-ский, Д. M. Зубаиров, О. A. Терсенов. — ^восибирск : Изд-во ^восиб. ун-та, 1993. — 180 с,

15. Бышевский А. Ш. Эффекты ингибиторов трансформации арахидоновой кислоты в тромбоцитах в зависимости от интенсивности перекисного окисления в них / A. Ш. Бышевский, A. И. Волков, О. Ф. Mысник и др. // Mатериалы региональной конференции биохимиков Поволжья, Урала и Западной Сибири «Aктуальные проблемы теоретической и прикладной биохимии. — Ижевск, 2001. — С. 21—23.

16. Ветрилэ С. Т. Mассивная кровопотеря и коагуляционный гемостаз у детей и подростков, подвергшихся хирургическому лечению сколиоза / С. Т. Ветрилэ, Л. Г. Захарин, С. A. Васильев и др. // Тромбоз, гемостаз и реология. — 2003. — № 2(14). — С. 40—44.

17. Влияние антиоксидантов на гемостаз у больных с тиреотоксикозом / A. И. Волков // Mатериалы итоговой научной конференции <^олодежь и медицинская наука на пороге XXI века». — Киров : ^MA, 2000. — Ч. 2.

— С. 13.

18. Галян С. Л. Предупреждение и ограничение витами-

нами-антиоксидантами нарушений гемостаза, вызываемых тромбинемией : автореф. дис..д-ра мед. наук / Галян С. Л.

— Челябинск, 1993. — 44 с.

19. Зубаиров Д. М. Mолекулярные основы свертывания крови и тромбообразования / Д. M. Зубаиров. — Казань : ФЭH AOT, 2000. — 3б7 с.

20. Кудряшов Б. А. Биологические проблемы регуляции жидкого состояния крови и ее свертывания | Б. A. Кудряшов. — M., 1975. — 488 с.

21. Кузник Б. И. ^которые вопросы регуляции свертывания крови / Б. И. Кузник, Т. В. Савельева, С. В. Куликова и др. // Физиология человека. — 197б.

— Т. 5, № 2. — С. 857—858.

22. Момот А. П. Mетодика и клиническое значение паракоагуляционного фенантролинового теста | A. П. Mомот, В. A. Елыкомов, З. С. Баркаган // Клин, лабор. диагностика. — 1999. — № 4. — С. 17—20,

23. Рудницкая Т. А. Частота, значимость и коррекция гипергомоцистеинемии при сахарном диабете 2 типа : автореф. дис. ... канд. мед. наук / Pудницкая Т. A. — Барнаул, 2003. — 22 с.

24. Соловьев В. Г. К механизму защитного действия витаминов A, Е, С и P при тромбинемии : автореф, дис. ... канд. мед наук / Соловьев В. Г. — Челябинск, 1993. — 24 с.

25. Соловьев В. Г. Pоль тромбоцитов, эритроцитов и сосудистой стенки в регуляции тромбинемии при активации перекисного окисления липидов : автореф. дис. ... д-ра мед. наук / В. Г. Соловьев. — Челябинск, 1997. — 43 с.

26. Способ определения толерантности животных

к тромбину / А. Ш. Бышевский, Л. В. Михайлова, Р. Г. Алборов и др. : патент № 2219546, зарегистрирован в Госреестре изобретений РФ 20.12.2003.

27. Умутбаева М. К. Связь липопероксидации с гемостазом / М. К. Умутбаева // Связь гемостаза с перекисным окислением липидов. — М. : Медицинская книга, 2003. — С. 41—50.

28. Ушкалова В. Н. Комплексный анализ липидов крови спектрофотометрическим, флуорометрическим и кинетическим методами / В. Н. Ушкалова, Н. В. Иоанидис,

З. М. Деева и др. // Лаб. дело. — 1987. — № 6. — С. 446—460.

29. Шевлюкова Т. П. Роль тромбоцитов в гемостазе / Т. П. Шевлюкова. — Тюмень : Вектор-Бук, 1999. — 95 с.

30. Block L. H. Adrenaline induced, calcium-dependent phosphorilation on proteins in human platelets / L. H. Block, H. Jaksche, P. Erne et al. // J. Clin. Invest. — 1985. — Vol. 75, N 5. — P. 1600—1607.

31. Chen R.-Y., Jiang Li-M., Qin Y., Ling N.-Ci. M. // Clin. Bioch. J. — 1995. — Vol. 11, N 4. — P. 461—464.

32. De Moerloose P. Should neurologists measure D-dimer concentrations? / De P. Moerloose, F. Boehlen // Lancet Neurol. — 2003. — Vol. 2. — P. 77.

33. Gawaz M. P. Blood Platelets / M. P. Gawaz. — Stuttg. ; N. Y. : Time, 2001. — 190 p.

34. Tranter P. R. Mechanism on agonist synergism, in human isolated platelets / P. R Tranter., R. R. Bruckdorfer, M. Schachter // Bioch. Soc. Trans. — 1989. — Vol. 47, N 1. — P. 216.

35. Wada H. The diagnosis and treatment of the DIC-syn-drome / H. Wada, C. Esteban, Н. Gabbaza et al. // Тромбоз, гемостаз и реология. — 2003. — № 1. — С. 16—22.

THE MARKERS OF THROMBIN - FIBRINOGEN

INTERACTION AND THE TOLERANCE

TO THE THROMBIN BECAUSE OF LIPIDPEROXIDATION

G. A. Sulkarnaeva

The Medical academy, Tyumen

According to the rats experiments, it was determined that the tolerance to the thrombin is in the inverse negative relationships from the content of thrombin - fibrinogen interaction (TFI) markers: the higher TFI activity, the lower the tolerance to the thrombin and vise versa; the content of TFI markers is growing in the presence of lipidperoxidaton acceleration and lowering of platelets antioxidant potential, the oxidant properties of thyroxine are responsible for its influence on intravascular coagulation activity.

Key words: lipidperoxidation, tolerance to the thrombin, fibrin, thrombin - fibrinogen interaction (TFI).

Контактная информация:

Сулкарнаева Гульнур Ахмеровна — кандидат педагогических наук, доцент кафедры гигиены с основами экологии Тюменской государственной медицинской академии

Тел. (3452) 46-37-99

Статья поступила 14.02.2006 г.