CC BY
3
ятных факторов окружающей среды: Сб. науч. ст. IV Международной науч.-практ. конф. — Гомель, 2001. - Ч. !. - С. 128-130.
4. Годик М. А., Бальсевич В. К., Тимошкин В. Н. //Теор. и практ. физ. культуры. — 1994. — № 5—6. — С. 24— 32.
5. Дорошевич В. И. // Здравоохранение. — 2001. — № 11. — С. 35-37.
6. Еганян Р. А., Корольков А. £., Церковный А. Г., Лав-руишна И. Л. // Вопр. питания. — 1988. — № 4. — С. 21-25.
7. Ильин А. Г., Агапова Л. А. // Гиг. и сан. — 2000. — № 5. - С. 43-46.
8. Копыток А. В. // Вопр. организации и информатизации здравоохр. — 2000. — № 4. — С. 32—34.
9. Кошелев И. Ф., Михайлов В. П., Лопатин С. А. Гигиена питания войск. — СПб, 1993.
10. Осотова В. П. // Гиг. и сан. — 1998. - № 1. — С. 44-46.
11. Питание. Глобальная проблема: Международная конференция по питанию. — СПб, 1992.
12. Руководство программы СИ ИДИ по питанию. Здоровье—21: европейская задача II. Более здоровый образ жизни. М,: 2000.
13. Щедрин А. С. Ц Гиг. и сан. - 2000. - № 6. - С. 21 -24.
14. Экологические изменения и биокультурная адаптация человека / Тегако Л. И., Саливон И. И., Марфина О. В. и др. — Минск, 1996.
15. Ямпольская Ю. А., Ананьева Н. А. // Новые методы — новые подходы в современной антропологии: Материалы I конф. Российского отделения Европейской антропологической ассоциации. — М., 1997. — С. 193-201.
16. Ямпольская Ю. А. // Гиг. и сан. - 2000. - № 1. С. 65-68.
17. Obesity: Preventing and Managing the global epidemic; Report of a WHO Consultation on Obesity Geneva 3— 5 June 1997. - Geneva, 1998 (Document WHO/NUT/ NCD/98.1)
18. Ulbricht G. // Ernährungsforschung. - 1985. - Bd 30, N 5. - S. 141-142.
Поступила 08. 04. 2002
Summary. The nutrition status was investigated according to the body weight index (BWI) in teenagers studying at different educational facilities. 77.1% of male teenagers and 70% of female teenagers from among all examined subjects (1456 persons) were assigned to the group with normal BWI ranging from 18.5 to 25.0 kg/m2. Male teenagers with a lower BWI (below 18.5 kg/m20) were more often encountered in boarding schools and specialized technical-and-professional schools; as for female teenagers, subjects with a lower BWI were more often encountered in general education schools and among first-year students of high schools (24 and 43.75%, respectively). An insignificant number of teenagers with an excessive body weight was detected in all educational facilities. Finally, it was concluded that teenagers with normal BWI have the best indices of functional abilities.
Профилактическая токсикология и гигиеническое нормирование
С С. д. ЖАМСАРАНОВА. С. Н. ЛЕБЕДЕВА. 2003
УДК 615.276.2/.4.03:616-092:612.017.|]-008.64-02:615.285.7|.076.9
С. Д. Жамсаранова, С. Н. Лебедева
КОРРЕКЦИЯ ИММУНОДЕФИЦИТНОГО СОСТОЯНИЯ, ВЫЗВАННОГО ГЕРБИЦИДОМ 2,4-Д В ЭКСПЕРИМЕНТЕ
Восточно-Сибирский государственный технологический университет, Улан-Удэ
Ранее было установлено, что гербицид 2,4-дихлорфе-ноксиуксусная кислота (2,4-Д), широко применяющийся в практике сельского хозяйства в нашей стране и за рубежом, оказывает дозозависимое супрессивное действие на показатели основных звеньев иммунного ответа мышей: клеточно-опосредованные (трансплантат против хозяина), антителоопосредованные реакции (количество антителообразующих клеток (АОК) и титр гемагглюти-нинов), активность перитонеальных макрофагов в системах in vivo и in vitro (фагоцитарная активность, спонтанная миграция, Fc-розеткообразование, включение акридинового оранжевого в лизосомы), а также активность естественных киллеров [3, 4, 9]. Последующие работы Э. А. Имельбаевой и соавт. |5, 6], а также П. Б. Цы-ремпилова [13] подтвердили иммунодепрессивное действие феноксигербицидов на основе 2,4-Д. Изменение иммунологической реактивности организма, развивающееся под влиянием данного гербицида, характеризуется как вторичная иммунологическая недостаточность |7).
В целях профилактики и лечения вторичных имму-нодефицитных состояний большое распространение получили препараты пептидной природы, выделенные из тимуса (Т-активин, тималин и др.), особенно эффективные при заболеваниях, сопровождающихся дисфункцией Т-системы иммунитета. Из селезенки получен высокоактивный безбелковый препарат спленин с широким
спектром фармакологического действия, в том числе обладающий и иммуномодулирующими свойствами.
Целью нашей работы явилось исследование возможности коррекции иммунодефицитного состояния, вызванного гербицидом 2,4-Д, известными фармакологическими и биологическими иммуномодуляторами — ле-вамизолом, Т-активином и спленином в эксперименте.
Эксперименты проводились на 360 мышах обоего пола линий СВА и Р1(С57В1/6) массой тела 18—22 г, полученных из питомника лабораторных животных РАМН "Столбовая".
Иммунодефицитное состояние у экспериментальных животных вызывали пероральным введением 2,4-Д в дозе 1/20 ЬОзд (20 мг на 1 кг массы тела) в течение 5 дней. Коррекция левамизолом (упаковка по 2 таблетки по 50 г в виде солянокислой соли, химический завод "Гедеон Рихтер" А. О. Будапешт—Венгрия) была проведена в дозе 2,5 мг на 1 кг массы тела перорально, в течение 3 дней. Т-активин (в виде 0,01% раствора во флаконах по 1 мл — 100 мкг) вводили подкожно в дозе 0,2 мкг/мышь однократно и трехкратно. Спленин (упаковка по 10 ампул по 1 мл, химфармобъединение "Дарница") применяли в дозе 10 мкл/мышь путем однократного и трехкратного подкожного введения.
Иммунокорригирующую активность указанных препаратов выявляли в реакции трансплантат против хозяина (РТПХ) на модели гибридов мышей первого поколе-
Таблица I
Эффективность лсвамизола, Т-активина и спленина мри коррекции нарушений функций иммунной системы под воздействием гербицида 2,4-Д (М ± ш; л = 10)
Условия опыта Индекс увеличения лимфатических умов в РТПХ Количество АОК но 10" спленоиитов Показатели фагоцитоза
активность, % интенсивнось, количество в 1 клетке
Контроль 3,63 ± 0,53 32,4 ± 3,1 67,0 ± 1,3 10,6 ± 0,3
2,4-Д 1,99 ± 0,26* 18,6 ± 2,8* 43,0 ± 2,6* 6,6 ± 0,2*
2,4-Д + левамизол 2,76 ± 0,21** 28,6 ± 4,1" 60,9 ± 2,2** 10,7 ± 0,4**
Контроль 4,06 ± 0,55 31,6 ± 6,4 78,4 ± 1,6 5,2 ± 0,3
2,4-Д 1,77 ± 0,22* 22,7 ±5,1* 72,1 ± 2,3* 3,0 ± 0,1*
2,4-Д + Т-активин (однократно) 4,64 ± 0,28** 26,3 ± 3,4 79,9 ± 1,7** 6,8 ± 0,2**
2,4-Д + Т-активин (трехкратно) 2,45 ± 0,31** 35,4 ± 5,4** 78,3 ± 1,1** 6,8 ±0,1**
Контроль 4,06 ± 0,55 31,6 ± 6,4 87,4 ± 4,4 16.3 ± 2.0
2,4-Д 1,77 ± 0,22* 22,7 ± 5.1* 37,6 ± 8,5* 9,6 ± 1,9*
2.4-Д+ спленин (однократно) 2,25 ± 0,16 23,4 ± 4,4 38,4 ± 4.0 12,2 ± 1.0
2,4-Д+спленин (трехкратно) 2,12 ± 0,33 33,8 ±6,1** 40,2 ± 4,9 13,8 ± 2,3
Примечание. Здесь и в табл. 2 различия достоверны: одна звездочка — по сравнению с контролем; две — по сравнению с показателями группы 2,4-Д.
ния F1 по Тессенову [11], путем определения АОК методом безгелевого локального гемолиза по Cunningham [14], фагоцитарной активности перитонеальных макрофагов мышей в отношении Staphilococcus aureus по Фрейдлин [12].
Полученные экспериментальные данные представлены в табл. 1. Как следует из табл. 1, гербицид 2,4-Д оказывал иммунодепрессивное действие на все изучаемые показатели.
В реакции РТПХ гербицид 2,4-Д снижал индекс увеличения лимфатических узлов на 45—56%. При коррекции левамизолом и Т-активином (трехкратно) наблюдалось достоверное повышение индекса увеличения лимфатических узлов на 39 и 38% соответственно. Однократное введение Т-активина способствовало увеличению данного показателя в 2,6 раза по отношению к действию 2,4-Д. Использование спленина с целью коррекции данного показателя оказалось малоэффективным.
В реакции определения количества АОК, характеризующей состояние гуморального звена иммунного ответа, иммуномодулирующая активность была отмечена у всех препаратов. По отношению к действию гербицида данная активность увеличилась у левамизола — на 53%, Т-активина (однокрано) — на 16%, Т-активина (трехкратно) — на 56%, спленина (трехкратно) — на 49%.
Изучаемые фармакологические средства оказались эффективными и при коррекции фагоцитарной активно-
Таблица 2
Влияние лсвамизола, Т-активина и спленина на фагоцитарную активность макрофагов мышей в системе in vitro (М ± т; п = 10)
Условия опыта Концентрация, мкг/мл Показатели фагоцитоза
активность, % интенсивность, количество в 1 клетке
Контроль - 88,8 + 1,3 14,6 ± 0,5
2,4-Д 100 73,9 ± 1,5* 11,3 ± 0,3*
2,4-Д + левамизол 50 86,6 ± 1,0** 13,7 ± 0,4**
2,4-Д + левамизол 100 90,8 ± 0,8" 14,5 ± 0,6"
Контроль - 87.0 ± 0,7 8,5 ± 0,4
2,4-Д 100 70,2 + 1.3* 5,5 ± 0,4*
2,4-Д + Т-активин 2 80,2 + 1,2** 8,4 ± 0,3"
2,4-Д + Т-активин 20 78,4 ± 1,0" 7,0 ± 0,2**
2,4-Д + Т-активин 200 78,5 ± 1,1" 7,6 ± 0,3**
Контроль - 8,26 ± 1.8 5,4 ± 0,2
2,4-Д 100 67,5 + 1,8* 2,8 ± 0,1
2,4-Д + спленин 2 мкл 69,0 ± 1.6 2,6 ± 0,2
2,4-Д + спленин 20 мкл 78,7 ± 1,7** 3,4 ± 0,3
сти перитонеальных макрофагов мышей. На фоне действия 2,4-Д левамизол увеличивал активность и интенсивность фагоцитоза соответственно на 42 и 62%, Т-ак-тивин (однократно) — на 11% и в 2,2 раза, Т-активин (трехкратно) — на 9% и в 2,2 раза. Введение спленина не выявило корригирующего эффекта по отношению как к активности, так и к интенсивности фагоцитоза.
В табл. 2 приведены экспериментальные данные по влиянию различных концентраций изучаемых иммуно-модуляторов на фагоцитарную активность перитонеальных макрофагов мышей в экспериментах in vitro. Время инкубации с препаратами составляло 1 ч. Как следует из табл. 2, наибольшей активностью обладал левамизол в концентрации 100 мкг/мл и Т-активин в концентрации 2 мкг/мл.
Данные, полученные в опытах im vitro, коррелировали с показателями активности макрофагов мышей, отравленных 2,4-Д, в экспериментах in vivo.
Результаты экспериментов согласуются с данными литературы о том, что левамизол оказывает стимулирующее влияние на Т-клеточные функции, фагоцитарную активность и процессы антителообразования [8, 15]. Т-активин является высокоэффективным иммуномодули-рующим средством при нарушении функций системы Т-лимфоцитов, опосредованно активизируя процессы антителообразования [1, 10]. Имеющиеся экспериментальные и клинические данные подтверждают, что спленин также оказывает иммуномодуляторное действие преимущественно на гуморальное звено иммунного ответа [2|.
Выводы. 1. Показатели иммунной системы организма в условиях супрессии, вызванной гербицидом 2,4-Д, восстанавливались при введении фармакологических иммуномодуляторов левамизола, Т-активина и спленина до уровня таковых у интактных животных (контроль).
2. Левамизол и Т-активин корригировали показатели клеточного и гуморального звеньев иммунитета, а также фагоцитарной активности перитонеальных макрофагов мышей. Спленин оказывал преимущественное действие на гуморальное звено, восстанавливая количество АОК в селезенке мышей до уровня контроля.
3. Экспериментальные данные по коррекции используемыми препаратами показателей фагоцитарной активности перитонеальных макрофагов in vitro коррелировали с таковыми в системе in vivo.
J1 итература
1. Арион В. Я. // ВИНИТИ. Итоги науки и техники. Сер. Иммунология. - М., 1981. - Т. 9. - С. 10-50.
2. Ганджа И. М., Лысенко Г. И., Кишко А. С. // Врач, дело. - 1983. - № 6. - С. 9-14.
3. Жамсаранова С. Д., Лебедева С. Н., Ляшенко В. А. // Гиг. и сан. - 1987. - № 5. - С. 80-81.
4. Жамсаранова С. Д., Лебедева С. Н., Ляшенко В. А. // Гигиена применения, токсикология пестицидов и полимерных материалов: Сб. науч. тр. ВНИИГИН-ТОКСа. - Киев, 1988. - Вып. 18. - С. 143-147.
5. Имельбаева Э. А., Теплова С. Н., Камилов Ф. X., Каю-мова А. Ф. // Журн. микробиол. — 1999. — № 6. — С. 67-70.
6. Имельбаева Э. А., Теплова С. И., Камилов Ф. X. // Там же. - 2000 - № 2. - С. 60-63.
7. Иммунодефицитные состояния / Под ред. В. С. Смирнова, И. С. Фрейндлина. — СПб, 2000
8. Ковалев И. Е. // Хим.-фарм. журн. — 1980. — № 4. - С. 115-121.
9. Лебедева С. Н. Влияние пестицидов 2,4-дихлорфе-ноксиуксусной кислоты (2,4-Д) и карбофоса на иммунологическую реактивность организма животных: Автореф. дис. ... канд. биол. наук. — М., 1990.
10. Лопухин Ю. М. // ВИНИТИ. Итоги науки и техники, Сер. Иммунология. - М., 1982. - Т. 10. - С. 30-44.
11. Тессенов В. // Иммунологические методы / Под ред. X. Хримеля. - М., 1979. - С. 182-186.
12. Фрейдлин И. С. Использование культуры мышиных перитонеальных макрофагов в качестве моделей для изучения клеток мононуклеарной фагоцитарной системы организма и их изменений под влиянием
биологически активных веществ: Метод, рекомендации. - Л., 1976.
13. Цыремпилов П. Б. Действие 2,4-диметиламмониевой соли на иммунобиологическую реактивность организма животных: Автореф. дис.... канд. вет. наук. — Казань 1987
14. Cunningham А. Т. // Nature. - 1965. - Vol. 207. -P. 1106-1107.
15. Symoens J., Rosental M. // J. Reticuloendot. Soc. — 1977. - Vol. 21, N 3. - P. 175-221.
Поступила И. 02. 2002
Summary. A possibility to correct the immunodeficiency state, caused by herbicide 2.4-D (20 mg/kg of weight daily during 5 days), by using immunomodulators Levamisole (per-orally), Tactivinum (hypodermically) and Spleninum (liepo-dermically) in reactions Grafl-versus-Host (GH), Antibody-Forming Cells (AFG) and phagocytic activity of peritoneal macrophages in vivo and in vitro etc. was studied in experiments with 360 mice of lines CBA and F, (CBAxC57BI/6) weighing 18 to 22 g. It was established that Levamisole (2.5 mg/kg per body weight, for 1 to 3 days) and Tactivinum (0.2 mkg/ mouse, for I to 3 days) had an immunocorrecting effect in poisoning by 2.4-D. Spleninum (lOmcl/ mouse) corrected mainly the humoral chain in the immune response with the AFG recovery to the level observed in intact animals (controls). The data on the influence produced by the immunomodulators on the phagocytic activity in vitro correlated with such data obtained in vivo.
О КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ. 2003
УДК 615.322.03:616.36-02:547.412.133).015.4.076.9
В. Г. Спрыгин, Н. Ф. Куишерова, Ю. А. Рахманин
АНТИОКСИДАНТНОЕ ДЕЙСТВИЕ ОЛИГОМЕРНЫХ ПРОАНТОЦИАНИДИНОВ, ВЫДЕЛЕННЫХ ИЗ КАЛИНЫ, ПРИ ПОРАЖЕНИИ ПЕЧЕНИ ЧЕТЫРЕХХЛОРИСТЫМ УГЛЕРОДОМ И ПРОФИЛАКТИКЕ ЕГО ТОКСИЧЕСКОГО ЭФФЕКТА
Тихоокеанский океанологический институт им. В. И. Ильичева ДВО РАН, Владивосток; НИИ экологии человека и гигиены окружающей среды им. А. Н. Сысина РАМН, Москва
Свободные радикалы — одна из причин развития более 80% различных патологических состояний у человека
[16]. При этом избыточное оксидативное повреждение клеточных мембран различной локализации под действием активных форм кислорода является начальной стадией инициации и развития различных патологий [19], включая многочисленные дегенеративные заболевания
[17], отдельные виды рака [12], сердечно-сосудистые болезни [II], патологию печени [13]. Поэтому применение антиоксидантов — ловушек свободных радикалов — один из наиболее перспективных способов профилактики и защиты организма от оксидативного повреждения и развития соответствующих патологических состояний.
Проантоцианидины являются высокоактивными растительными антиоксидантами полифенольной природы, проявляющими антибактериальное, антивирусное, антитоксическое, иммуностимулирующее, желчегонное и ге-патозащитное свойства [19]. Однако список видов растительного сырья, пригодного для получения препаратов с высоким содержанием проантоцианидинов, ограничен, что определяет перспективность поиска новых источников, особенно если они являются конечным бросовым продуктом в технологической цепи. Ранее было показано, что отходы при переработке ряда дальневосточных растений могут служить перспективными источниками получения препаратов олигомерных проантоцианидинов с высокой антирадикальной активностью [7].
Целью настоящей работы явилось изучение антиок-сидантных свойств препарата, представляющего собой комплекс олигомерных проантоцианидинов (КОПЦ), выделенных из калины (Viburnum opulis) (приоритетная справка на изобретение № 2001125776 от 20.09.01), в ус-
ловиях экспериментального токсического гепатита у крыс, вызванного четыреххлористым углеродом (ЧХУ). В качестве препарата сравнения использовали эталонный гепатопротектор "Легалон", представляющий собой комплекс флавоноидов из расторопши Silibinum mat-ianum [14] и стандартизованный КОПЦ из коры сосны (Pinus maritima) ' Пикногенол" [22].
КОПЦ выделяли из жмыха, остающегося после отжима сока калины (Viburnum opuli), который содержал косточки, кожицу и гребни (часть соцветия, освобожденная от ягод). Экстракт из жмыха калины получали методом реперколяции, т. е. обычным способом при приготовлении экстрактов из растительного сырья. Для этого жмых высушивали при температуре, не превышающей 50"С, и измельчали для ускорения и улучшения процесса экстракции. Измельченное сырье экстрагировали 40% этанолом при соотношении сырья и экстрагента 1:1. Полученный экстракт упаривали на роторном испарителе (t < 35"С) для удаления спирта и центрифугировали для освобождения от осадка. Полученное водное извлечение наносили на колонку, заполненную сефадексом LH-20 (800 х 28 мм) и уравновешенную дистиллированной водой (pH 5,5). Колонку элюировали 20% этанолом для удаления фенольных кислот и низкомолекулярных полифенолов, далее колонку промывали дистиллированной водой (5 объемов колонки). Фракцию олигомерных проантоцианидинов элюировали смесью ацетон:вода (70:30). Полученный элюат после упаривания под вакуумом для удаления ацетона центрифугировали, затем лио-филизовали и получали красновато-коричневый порошок. В полученном препарате определяли содержание общих полифенолов [25] и проантоцианидинов [26], ис-
