CC BY
5
Хроматограмма модельной газовоздушной смеси.
По ос» абсцисс — время записи (в мин); по оси ординат — отклонение пера самописца (в см); / — ацетон; 2 — толуол; 3 — стирол; •/ — Фенол.
10
5
О
ставляет известные трудности, особенно при серийном выполнении анализов), либо увеличивать объемы пробоотборной трубки и сорбента в ней с целью увеличения соответствующего объема удерживания. Определение толуола, стирола и фенола не вызывает затруднений вследствие значительно больших объемов их удерживания. Так, для достоверного измерения содержания стирола в атмосфере на уровне 1/2 ПДК на диапазоне по току 5Х 10-11А необходимо отобрать пробу 1,67 л (ПДК 0,003 мг/м3, 11, чувствительность 2,5х
X Ю-5 мг/см2).
На рисунке приведена хроматограмма смеси ве-
ществ — ацетона, толуола, стирола и фенола. Из нее видно, что при анализе газовоздушны смесей с применением описанного метода концентрирования проб не происходит размывания хро-матографических пиков и обеспечивается полное разделение определяемых веществ. Кроме перечисленных модельных компонентов воздушных проб, данная хроматографическая методика может применяться для анализа микропримесей, представляющих другие классы органических соединений; в частности, по этой методике также определено содержание в воздухе паров метакриловой кислоты (концентрация 0,1 мг/м3), ацетофенола, гидроперекиси изопропилбензола (концентрация > 0,005 мг/м3).
Разработанная методика анализа воздушных проб, содержание токсичных компонентов в которых находится на уровне ПДК для атмосферного воздуха, отличается достаточной точностью и простотой и может быть рекомендована для использования при газохроматографическом контроле окружающей среды, особенно ее промышленной зоны.
Литература. Дмитриев М. Т., Мищихин В. А. —
Гиг. и сан., 1978, № 5, с. 59. Дмитриев М. Т., Мищихин В. А. — Там же, 1980, № 9, с. 66.
Допустимые выбросы радиоактивных и вредных химических веществ в приземной слой атмосферы. Под ред. Е. И. Теверовского. М., 1980. Garelli G., Rimatori V., Sperduto В. et al. — Ann. Inst.
Sup. Sanit., 1978, v. 14, p. 425. Nishimoto К. K-, Schumacher R. L., Monteith L. et al. —
Am. industr. hyg. Ass. J., 1980, v. 41, p. 223. Simik V., lednacak M. — Nafta, 1980, v. 31, p. 262.
Поступила 11.12.81
;
i
t
i __i
- — и
Ö ' 2 ' 4 ' 6
УДК 618. 36*002.14-022:678.891]-022.35-07:628.1 9:578.891.063.12
Г. А. Багдасарьян, В. М. Стаханова, N. Г. Нечипоренко, А. Е. Недачин,
Н. В. Дорошенко
КОНЦЕНТРИРОВАНИЕ ВИРУСА ГЕПАТИТА А НА ИСКУССТВЕННОМ И ЕСТЕСТВЕННОМ СОРБЕНТАХ
НИИ общей и коммунальной гигиены им. А. Н. Сысина АМН СССР, Москва
Инфекционный гепатит (гепатит А) является одним из наиболее распространенных вирусных заболеваний человека. Среди путей передачи вируса гепатита А (ВГА) значительную роль играет водный. В литературе имеются сообщения об эпидемических вспышках ВГА, связанных с использованием воды нецентрализованного (Garibaldi и соавт.) и централизованного водоснабжения и воды поверхностных водоемов (X. Ж. Жуматов и Ф. Г. Дардик; Dennis). Однако эти данные были получены при эпидемиологических исследованиях в связи с отсутствием методов выявления ВГА в объектах окружающей среды. Разработанные в последние годы чувствительные и специфичные методы индикации ВГА в биологических средах, такие, как иммунная электронная микроскопия,
радиоиммунологические и иммуноферментатнвные методы, позволяют на новом уровне решать вопросы циркуляции данного этиологического агента в объектах окружающей среды.
В. А. Казанцевой и соавт. была предпринята попытка выделения ВГА из сточной воды тампон-ным методом с последующим исследованием проб с помощью иммуноферментативного теста. Однако тампонный метод является качественным и может быть использован только при исследовании сточных вод. В связи с этим возникает необходимость в разработке чувствительных количественных методов индикации ВГА в объектах окружающей среды и прежде всего в воде различной степени загрязнения. При этом наиболее важный этап — концентрирование, обеспечивающее повышение со-
Эффект концентрирования ВРА: фон (0. адсорбция на асканите (2), адсорбция на ионообменной смоле (?), до концентрирования (4).
По оси абсцисс—разведение вируссодержащей суспензии: по оси ординат — П/О по данным РИА.
держания^вирусных частиц в единице объема пробы.
В экспериментальных условиях для концентрирования ВГА нами были апробированы методы, используемые в практике санитарной вирусологии для выделения энтеровирусов из воды — сорбция на искусственном и естественном сорбентах с последующей элюцией и исследованием проб радиоиммунным анализом (РИА) в твердой фазе. Сорбцию ВГА проводили на ионообменной смоле анио-ните АВ-17-8 в динамических условиях. Смолу обрабатывали по методике, описанной ранее (Г. А. Багдасарьян и соавт.). Высота столбика смолы в колонке соответствовала 10—12 см. Для элюции вируса со смолы использовали 0,5 М фосфатный буфер рН 8,0—8,2. В качестве естественного сорбента применяли алюмосиликатный минерал асканит в виде порошка дисперсностью 0,1—0,05 мм из расчета 500 мг/л. После 3-часового осаждения надосадочную жидкость удаляли водоструйным насосом, а осадок центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 мин. Элюцию ВГА с асканита осуществляли бульоном Хоттингера с 10% бычьей сыворотки и центрифугированием ресуспендированного осадка при 5000 об/мин в течение 20 мик. Фактор физического концентрирования для обоих методов равен 200.
РИА проводили по методу, описанному Н. В. Дорошенко и соавт. Поливиниловые пробирки («твердая фаза») отечественного производства сенсибилизировали содержащим антитела к ВГА у-глобули-ном, разведенным 0,2 М карбонатным буфером с рН 9,4. В каждую пробирку вносили по 0,2 мл раствора антител, инкубировали при комнатной температуре в течение ночи, и несвязавшиеся антитела отсасывали. Для проведения радиоиммунологического теста 0,2 мл исследуемой пробы помещали в сенсибилизированные пробирки и инкубировали 6 ч при комнатной температуре, после чего их четырехкратно промывали физиологическим раствором и вносили 0,2 мл раствора антител, меченных радиоактивным йодом. После 4-часовой инку-
бации при 20 °С пробирки 5—6 отмывали физиологическим раствором и радиоактивность просчитывали в гамма-счетчике. В каждом опыте ставили 7 отрицательных (не содержащие ВГА экстракты фекалий здоровых людей) и 4 положительных (экстракты фекалий с ВГА) контроля. Источником ВГА в эксперименте служили суспензии фекалий больных на ранней стадии заболевания. Для приготовления суспензий 1 г фекалий гомогенизировали в 10 мл дистиллированной воды в ручном гомогенизаторе. Наличие вируса в суспензиях определяли в РИА. Для проведения эксперимента концентрирования в 1 л водопроводной воды добавляли 1 мл 10% суспензии фекалий с различным исходным содержанием ВГА таким образом, чтобы разведение материала в воде соответствовало 10~3, Ю-4, Ю-5, 10_в. Контролем в эксперименте служили суспензии фекалий здоровых людей. Пробы отбирали до концентрирования и на его этапах. Положительными, т. е. содержащими ВГА, считались пробы, в которых отношение радиоактивности положительных проб к средней радиоактивности отрицательных (П/О) по данным РИА превышало 2,5.
Результаты экспериментальных исследований показали, что апробированные I методы могут применяться для концентрирования ВГА в воде.
Эффект концентрирования в случаях использования метода сорбции^на асканите наблюдался при разведениях 10~3, Ю-4 и Ю-8. При этом П/О в разведениях до концентрирования колебался в пределах 1,6—1,3, а после концентрирования — 10,0—3,2. На рисунке представлены результаты эксперимента. При использовании ионообменной смолы эффект концентрирования отмечен для тех же разведений, однако П/О было ниже и колебалось в пределах 1,6—1,3 до концентрирования и в пределах 3,7—2,6 после концентрирования.
Таким образом, в экспериментальных условиях установлена принципиальная возможность применения методов сорбции на искусственном и естественном сорбентах для выделения ВГА из воды.
Методы апробированы в натурных условиях при исследовании сточных вод, поступающих на Са-ларскую станцию аэрации (Ташкент). ВГА выделен из проб сточной воды при П/О, равном, по данным РИА, 3,7—3,9.
Литература. Багдасарьян Г. А., Ловцевич Е. Л., Лепахина Н. К. — Гиг. и сан., 1975, № 4, с. 106—107. Дорошенко Н. В., Заиров Г. К., Вязов О. С. и др. — Вопр.
вирусол., 1980, № 2, с. 238—241. Казанцева В. А., Насташенко Т. А., Дроздов С. Г. —
В кн.: Вирусные гепатиты. М., 1980, с. 105—108. Жуматов X. Ж-, Дардик Ф. Г. — Там же, 1958. № 1,
с зд_43
Dennis J. М. — J. Am. Water Works Ass., 1959, v. 51, p. 1288—1298.
Поступила 20.07.81
--4 ' -4 '-1-Ь?
10° 10 5-Ю Ю Ю6
