Научная статья на тему 'КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ТОКСИЧЕСКИХ СВОЙСТВ ПОЧВЫ ПО ОТНОШЕНИЮ К ПАТОГЕННЫМ МИКРООРГАНИЗМАМ'

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ТОКСИЧЕСКИХ СВОЙСТВ ПОЧВЫ ПО ОТНОШЕНИЮ К ПАТОГЕННЫМ МИКРООРГАНИЗМАМ Текст научной статьи по специальности «Промышленные биотехнологии»

CC BY
25
7
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Журнал
Гигиена и санитария
Scopus
ВАК
CAS
RSCI
PubMed
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по промышленным биотехнологиям , автор научной работы — М И. Тарное, Г В. Меренюк, Л А. Тимченко

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

QUANTITATIVE DETERMINATION OF TOXIC PROPERTIES OF THE SOIL IN RESPECT TO PATHOGENIC MICROORGANISMS

The suggested quantitative method of determining the toxicity of soils for microorganisms consists of spot inoculation of a dosed quantity of the test-microbe on membrane filters placed on the surface of a solid medium consisting of a layer of the soil, of a «poor agar medium» and a nutrient agar medium. The toxicity of the soil is assessed by the per cent of grown inoculations. A classification of weakly toxic soils is suggested. The recommended method may be used for determining the toxicity of soils for test-microorganisms in 42 per cent of cases, when it cannot be detected by means of the qualitative method.

Текст научной работы на тему «КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ТОКСИЧЕСКИХ СВОЙСТВ ПОЧВЫ ПО ОТНОШЕНИЮ К ПАТОГЕННЫМ МИКРООРГАНИЗМАМ»

физического воспитания детей как средства, стимулирующего их правильное развитие и укрепляющего их здоровье, требуются усилия физиологов, педиатров, гигиенистов, педагогов и тренеров.

ЛИТЕРАТУРА

Антропова М. В. Гигиена физического воспитания учащихся общеобразовательных школ. М., 1960.— Александрова Л. И. В кн.: Вопросы школьной гигиены. М., 1959. с. 231.— Левигориневская Е. Г. Закаливание организма ребенка. М., 1956.— Силла Р. В. Гигиеническое значение двигательной активности школьников. Автореф. дисс. докт. Тарту, 1968.— Тарасова О. Т. Закаливание детей дошкольного возраста холодными водными процедурами и его гигиеническая эффективность. Киев, 1953.— Усищева Ц. Л. В кн.: Вопросы школьной гигиены. М., 1959, с. 263.— Фарфель B.C. Развитие движений у детей школьного возраста. М., 1959.—Ф а р -ф е л ь В. С. Труды 2-й научной конференции по возрастной морфологии и физиологии. М., 1955, с. 269.— Филин В. П. Нормирование тренировочных нагрузок (Сборник статей). М., 1964.—О н же. Вопросы юношеского спорта. М., 1967.

Поступила 5/VII 1971 г.

HYGIENIC SUBSTANTIATION OF THE PHYSICAL TRAINING OF SCHOOL

UNDERGRADUATES

N. T. Lebedeva

On the basis of person investigations and published data the author describes the present state of five factors serving as bases for physical training: 1. environment; 2. means of personal hygiene; 3. hardening; 4. dosing of physical loads; 5. continuity of physical training procedures.

УДК 614.77:576.8.063-074

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ТОКСИЧЕСКИХ СВОЙСТВ ПОЧВЫ ПО ОТНОШЕНИЮ К ПАТОГЕННЫМ МИКРООРГАНИЗМАМ

Проф. М. И. Тарков, канд. мед. наук Г. В. Меренюк, Л. А. Тимченко

^Молдавский научно-исследовательский институт гигиены и эпидемиологии

Известен ряд способов качественного и количественного определения токсических свойств почвы. В частности, весьма распространен качественный метод, предложенный Е. Н. Мишустиным и А. Н. Наумовой. Однако качественный метод позволяет лишь разделить почвы в целом на абсолютно токсичные и нетоксичные без учета промежуточных состояний. Количественный метод описан Griffiths: целлофановая пленка отделяет почву, помещенную в чашки Петри, от засеваемых спор, которые в количестве 0,25 мл наносятся на пленку. Пророст в опыте определяют по отношению к контролю (вместо почвы — агаризированная среда).

Нами разработан количественный метод определения токсичности почвы; при этом частично использованы элементы ранее описанных методических приемов.

Метод сводится к следующему. Испытуемую почву (свежую или стерилизованную) отделяют от посевов индикаторного штамма слоем голодного агара для того, чтобы почвенная флора не проросла в местах посева индикаторного штамма. Затем вводят слой агаризированной питательной среды, оптимальной по отношению к индикаторному штамму, так как в качестве последнего используют патогенные гетеротрофы, которым необходима искусственная питательная среда. В качестве дополнительного барьера между почвой и индикаторным штаммом на поверхности питательной среды укладывают мембранный фильтр. Посевы производят дозированным количеством тест-микроба. Последнее является принципиально новой чертой предлагаемого способа.

На матовую поверхность мембранных фильтров отечественного производства № 3—4 или чешские Синпор 8 (диаметр 35 мм) простым карандашом наносили 16 точек, после чего фильтр стерилизовали кипячением обычным способом. Исследуемую почву в количестве 10 г равномерно распределяли по дну чашки Петри и заливали слоем непитательного агара, а затем слоем агаризированной питательной среды, используемой для выращивания данного индикаторного штамма (количественное содержание агар-агара в питательной среде не должно превышать 1,5%; в среде не должно быть углекислого кальция, снижающего токсичность почвы). Приготовленные таким образом чашки Петри оставляли в открытом виде на 30 мин. под бактерицидными лампами. Затем на поверхность питательной среды помещали подготовленные мембранные фильтры (матовая поверхность — верх) в количестве от 1 до 4 на 1 чашку. На поверхность фильтра в местах, отмеченных точками, производили точечный посев бактериальной петлей (иглой) культуры индикаторного штамма, суспендированного в физиологическом растворе, содержащем около 100 млн. бактериальных клеток в 1 мл по оптическому бактериальному стандарту мутности. Эта манипуляция упрощалась при использовании специального штампа в виде металлического диска диаметром 31—32 мм. В диск вмонтированы 16 стальных игл строго одинаковой длины (2 см) и толщины. Культуру наливали в чашку Петри и погружали в нее кончики игл стерильного штампа, а затем одновременно производили посев на 16 точек мембранного фильтра. Посевы инкубировали в термостате или анаэростате в течение 18—24 часов при оптимальной температуре в зависимости от физиологических особенностей индикаторного штамма.

При испытании нового способа определения токсичности почвы в первую очередь была проверена равномерность посева, т. е. одинаковое ли количество микробных клеток попадает на каждую точку посева.

Приготовлена взвесь индикаторного штамма — 100 млн. в 1 мл физиологического раствора. Предлагаемым способом произведено по 1 точечному посеву на 10 мембранных фильтров, каждый из которых был затем погружен во флакон с 10 мл физиологического раствора и отмыт путем взбалтывания на аппарате Шутеля. По 1 мл из каждого флакона засеяны методом «микробного числа» на 5 чашек Петри (всего 50 посевов). При этом мы не ожидали получить столько же колоний, сколько было посеяно клеток, а стремились лишь выяснить, прорастает ли из каждого посева примерно одинаковое количество колоний.

Средняя высеваемость из каждой точки составляла 21 колонию (Б = = ±3,3, 5Х = 1, 195 =- 2,3, V = 15,7%). Полученные данные свидетельствуют о том, что в каждую точку посева попадает примерно одинаковое количество клеток.

Затем была испытана чувствительность метода, а) Посев произвели предлагаемым способом, но на дно чашки не вносили почву. Сделано 180 посевов на фильтры № 3—4, пророст колоний равнялся 180 (100%). б) Посев произведен предлагаемым способом с использованием заведомо высокотоксичной почвы. Посевы повторены 30 раз на 32 точки каждый. В 28 случаях токсичность составляла 100% и в 2 случаях — соответственно 80 и 85%. в) Посев произведен предлагаемым способом с использованием заведомо нетоксичной почвы. Таких посевов сделано 136, пророст колоний равнялся 336 (100%). Приведенные выше данные свидетельствуют о высокой чувствительности испытанного метода.

Следующей нашей задачей явилась разработка методов математической оценки получаемых результатов и их микробиологической интерпретации. При этом мы исходили из следующего. Оптимальным является испытание степени токсичности при посеве на наибольшее количество точек, при котором проросту колоний в месте посева не препятствует слишком близко расположенный аналогичный посев. Учитывая эти условия, мы установили, что на 1 чашку Петри следует укладывать 4 мембранные фильтра и на каж-

дом производить 16 посевов. Следовательно, получаемая совокупность состояла из 64 дат, с альтернативной формой распределения и максимальной величиной удвоенной ошибки, равной 12,4%, в интервале исчисляемых 42— 56% токсичности на уровне 95% достоверности. При этом создается конти-нууменнальная ситуация из 64 возможных величин токсичности от 0 до 100%, в котором между ближайшими минимум 4 и максимум 10 величинами всегда отсутствует достоверность различий. Исключением являются 0 и 100%, для которых ошибка исчисляется с поправкой Фишера.

Положение усложняется, когда токсичность определяется посевом в 16, 32 и 48 точек, т. е. на 1, 2 и 3 фильтра. Такие исследования необходимы при разведочных опытах с целью экономии сред и фильтров (использовались чашки Петри малого диаметра). Однако при этом с уменьшением количества дат возрастает доверительный интервал и увеличивается количество ситуаций, при которых отсутствует достоверность различий. В подобных случаях рекомендуется разбивка на классы путем деления возможного количества величин .(64, 48, 32 или 16) на максимальный доверительный интервал или извлечением из них квадратного корня.

При посеве на 64 точках образуется 8 классов степени токсического воздействия: 1) 0—12,5%; 2) 12,6—25%; 3) 25,1—37,5%; 4) 37,6—50%; 5) 50,1—62,5%; 6) 62,6—75%; 7) 75,1—87,5%; 8) 87,6—100%. Серединами каждого класса являются 6, 2, 18,7, 31,2, 43,7, 56,2, 68,7, 81,2 и 93,7%. Соответственно этим классам токсичность почв оценивается как нетоксичная, слабо токсичная, умеренно токсичная, выраженно токсичная, значительно токсичная, сильно токсичная и абсолютно токсичная.

Аналогичным способом рассчитываются классы при других количествах посевов. Например, при 16 посевах образуются 4 класса степени токсичного воздействия, имеющие следующие интервалы: 1) 0—25%; 2) 25,1—50%; 3) 50,1—75%; 4) 75,1—100%. Серединами каждого класса являются 12,5% (слабо токсичная почва), 37,5% (умеренно токсичная), 62,5% (токсичная), 87,5% (сильно токсичная). По этим 2 параметрам (16 и 64 посева) проведены опыты для сравнения разработанного количественного метода с методом Мишустина — Наумовой.

Посевом на 64 точки испытаны 14 токсичных (по Мишустину и Наумовой) почв. Количественным методом обнаружена в 5 случаях токсичность 3—4-го класса и в 5 случаях токсичность 8-го класса. Три случая токсичности почв, установленного качественным способом, с помощью количественного метода уловить не удалось.

При испытании нетоксичных почв (по Мишустину и Наумовой) в 58% случаях количественным методом определена токсичность 1—2-го классов (нетоксичная и слабо токсичная почва), а в 42% случаях — токсичность почв 3—8-го классов.

Аналогичные соотношения получены при определении токсичности почв посевом на 16 точек и параллельно методом Мишустина и Наумовой. Здесь из 413 изученных образцов почвы токсичными (3—4-го классов) оказались 11,9%, а по классическому методу — 9,7%.

Выводы

1. Предложен метод количественной оценки степени токсичности почв путем засева точного количества клеток микроорганизмов на мембранные фильтры, которые укладываются на плотную питательную среду, отделенную от почвы слоем непитательного агара.

2. Разработан способ оценки получаемых результатов в процентах токсичности с последующим разделением на классы, количество которых зависит от количества точечных посевов (дат).

3. Количественный метод позволяет обнаружить различную степень токсичности почвы в 42% случаев, когда качественным методом токсичность не обнаруживается.

4. В 3 из 14 случаев в заведомо токсичных почвах количественным методом определить токсичность не удалось, возможно, из-за снижения токсичности при хранении образцов.

ЛИТЕРАТУРА

Мишустин Е. Н., Наумова А. Н. Изв. АН СССР. Серия биол., 1955, № 6, с. 3.— Griffiths D. A., Micostasis in Malayan Soils. The Malayan Forster 1964, october, 318—326.

Поступила 7/VII 1971 r.

QUANTITATIVE DETERMINATION OF TOXIC PROPERTIES OF THE SOTL IN RESPECT TO PATHOGENIC MICROORGANISMS

M. I. Tarkov, G. V. Marenyuk, L. A. Timchenko

The suggested quantitative method of determining the toxicity of soils for microorganisms consists of spot inoculation of a dosed quantity of the test-microbe on membrane filters placed on the surface of a solid medium consisting of a layer of the soil, of a «poor agar medium» and a nutrient agar medium. The toxicity of the soil is assessed by the per cent of grown inoculations. A classification of weakly toxic soils is suggested. The recommended method may be used for determining the toxicity of soils for test-microorganisms in 42 per cent of cases, when it cannot be detected by means of the qualitative method.

УДК в13.648:[в21.311.25:621.039

ВОПРОСЫ РАДИАЦИОННОЙ БЕЗОПАСНОСТИ ПРИ ЭКСПЛУАТАЦИИ АТОМНЫХ СТАНЦИЙ

И. Г. Архангельская, М. А. Баранов, Н. В. Бескрестнов,

М. С. Егорова, Н. Г. Гусев, Ю. А. Жаков, А. С. Зыкова, Ф. Я- Овчинников, А. Д. Туркин

В настоящее время намечена широкая программа строительства АЭС как в СССР, так и за рубежом. Хотя эра промышленного освоения атомной энергетики началась лишь 15 лет назад, к январю 1970 г. во всем мире работало уже 80 АЭС общей мощностью приблизительно 15 тыс. Мет (А. М. Петросьянц) Предполагается, что к 1980 г. электрическая мощность АЭС во всем мире достигнет 300 тыс. Мет и составит 15% мощности всех электростанций.

В СССР в 1954 г. была пущена первая в мире АЭС мощностью 5 Мет. В апреле 1964 г. и декабре 1967 г. вступили в строй первый и второй блоки Белоярской АЭС (БАЭС) мощностью 100 и 200 Мет. Два первых реактора БАЭС, как и первая в мире АЭС, относятся к классу энергетических уран-графитовых реакторов с водяным охлаждением, построенных на принципе канальных конструкций. С 1968 г. на БАЭС начались работы по сооружению реактора на быстрых нейтронах для третьего блока БАЭС мощностью 600 Мв (БН-600) с натриевым теплоносителем (А. Н. Петросьянц). Разработке реактора БН-600 предшествовала работа по сооружению экспериментального реактора БОР-бО в Мелекессе и реактора на быстрых нейтронах БН-350 с двухцелевым назначением в г. Шевченко (А. Н. Петросьянц, 1969, 1971; А. И. Лейпунский).

Однако как в отечественном, так и в мировом энергетическом реакторо-строении в настоящее время считаются наиболее распространенными АЭС с водо-водяными реакторами на тепловых нейтронах (ВВЭР). В сентябре 1964 г. введен в эксплуатацию первый блок Нововоронежской АЭС (НВАЭС) мощностью 210 Мет (А. М. Петросьянц). В декабре 1969 г. произведен

1 В тексте доклада приводится электрическая мощность АЭС.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.