CC BY
18
РЕВМАТОЛОГИЯ. КЛИНИКА. ПАТОГЕНЕЗ
Клинико-патогенетическая интерпретация
V | V
иммунных нарушении в периферическом крови у больных ревматоидным артритом
В.Т.Тимофеев1, М.В.Головизнин2, Ю.Р.Булдакова2, Н.С.Лахонина2
'Российский государственный медицинский университет, кафедра факультетской терапии им. акад. А.И.Нестерова лечебного факультета, Москва (зав. кафедрой - проф. Н.А.Шостак);
2Московский государственный медико-стоматологический университет, кафедра внутренних болезней стоматологического факультета, Москва (зав. кафедрой - проф. Р.И.Стрюк)
Цель - выявление особенностей параметров клинико-лабораторной активности, рецепторного аппарата CD-субпопу-ляций и адгезивности лимфоцитов крови у больных РА с ревматоидными узелками, сопоставить их с таковыми у больных РА без узелков. Обследовано 120 (37 мужчин и 83 женщины в возрасте от 24 до 73 лет) больных с достоверным РА по пересмотренным критериям АРА (1987) в стационаре и амбулатории. Использовали иммунофлюоресцент-ный тест на CD-рецепторы лимфоцитов (В.Т.Тимофеев и соавт., 2000) и тест Манчини на определение иммуноглобулинов сыворотки крови. Иммунологические методики использованы у 70 из 120 больных РА. Выявлено, что у больных РА с ревматоидными узелками преобладают внесуставные проявления, обусловленные экспансией лимфоцитов в тканях: лимфаденопатия, иридоциклит, узловатая эритема, кожный васкулит, тогда как у больных РА без ревматоидных узелков преобладают лихорадка, потеря массы тела, анемия, развитие которых преимущественно связано с неспецифическим воспалением и общей интоксикацией. Выявленные изменения CD-субпопуляций лимфоцитов и их адгезивных свойств позволяют расширить представления о патогенезе и роли РУ в течении РА.
Ключевые слова: ревматоидный артрит, ревматоидные узелки, CD-рецепторы лимфоцитов, адгезия лимфоцитов
Clinical and pathogenetic interpretation of immune disturbances in rheumatoid patients' blood-vascular
V.T.Timofeyev1, M.V.Goloviznin2, Yu.R.Buldakova2, N.C.Lakhonina2
'Russian State Medical University, Department of Facultative Therapy named after Acad. A.I.Nesterov of Medical Faculty, Moscow (Head of the Department - Prof. N.A.Shostak);
2Moscow State Medical Stomatological University, Department of Internal Diseases of Dental Faculty, Moscow (Head of the Department - Prof. R.I.Stryuk)
The aim of the research was to investigate the CD-receptors and adhesive function of lymphocytes in RA patients and their relations with clinical symptoms. There were investigated the clinical and immune manifestations in 120 patients (37 males, 83 females at the age interval from 24 to 74 years) with reliable RA by the revised ARA criteria (1987) in hospital and outpatient clinics. Immune fluorescent test on CD-antigens, adhesive test for lymphocytes in reaction to embryo cells, Mancini test for serum immunoglobulins were used. Patients with rheumatoid nodules were characterized by extraarticular symptoms of the disease as a result of lymphocyte tissue expansion: lymphadenopathia, iridocyclitis, nodule erythema, dermatovasculitis. RA patients without nodules had fever, anemia, loss weight resulting from intoxication and nonspecific inflammation. Observed functional disturbance of CD-subpopulations and adhesive function of lymphocytes in RA patients will help to broaden knowledge of pathogeneses and the role of RN in the duration of RA.
Key words: rheumatoid arthritis, rheumatoid nodules, CD-receptor lymphocyte, lymphocyte adhesion
Одной из актуальных проблем современной ревматологии является совершенствование диагностики и лечения ревматоидного артрита (РА). Несмотря на несомненные
Для корреспонденции:
Тимофеев Виталий Тимофеевич, доктор медицинских наук, главный научный сотрудник кафедры факультетской терапии им. акад. А.И.Нестерова лечебного факультета Российского государственного медицинского университета
Адрес: 119049, Москва, Ленинский пр-т, 8, корп. 10 Телефон: (495) 236-9920 E-mail: vtt3@yandex.ru
Статья поступила 04.05.2009 г., принята к печати 10.06.2009 г.
успехи последних десятилетий, все еще не удается прогнозировать тяжесть течения РА, быстро и надежно подавлять его активность.
Клиническая картина РА вариабельна: встречаются как благоприятные формы с медленной деструкцией суставов и минимальными висцеральными проявлениями, так и агрессивные формы с быстро прогрессирующим артритом и высокой активностью аутоиммунных процессов в синовиальной оболочке и внутренних органах. По мнению E.D.Harris (1990), в целом, врачи недооценили смертность и тяжесть течения РА [1]. При РА быстро развивается стойкая нетрудоспособность.
Смерть наступает в более ранние сроки, чем в среднем в популяции [2, 3]. Патологические изменения развиваются в суставах и других органах [1, 2 ,4-6].
Одними из наиболее часто встречающихся системных проявлений РА являются ревматоидные узелки (РУ), которые, входя в число диагностических критериев РА, не имеют четкой трактовки диагностической ценности.Необходимость тщательного и всестороннего изучения ревматоидных узелков как «равноправных» участников ревматоидного процесса подчеркивал заслуженный деятель науки РФ, доктор медицинских наук, профессор Ю.К.Токмачев (1929-2002), явившийся инициатором этого исследования. Генез и клинические особенности других внесуставных проявлений у больных РА с наличием РУ также изучены недостаточно.
Литературные данные о патологии иммунной системы при РА содержат немало сведений о фенотипе и функции лимфоцитов и субпопуляциях Т-лимфоцитов в синовии и синовиальной жидкости больных, значительно меньше данных отражают фенотип и функции лимфоцитов периферической крови больных РА, единичны данные о фенотипе лимфоцитов периферической крови у больных РА с наличием РУ.
В настоящее время уделяется большое внимание роли адгезивных рецепторов в патогенезе аутоиммунного и грануле-матозного воспаления, однако процессы адгезии лимфоцитов периферической крови больных РА с наличием РУ к клеткам микроокружения изучены недостаточно.
Цель работы - выявить особенности параметров клинико-лабораторной активности, рецепторного аппарата CD-субпо-пуляций и адгезивности лимфоцитов крови у больных РА с ревматоидными узелками и сопоставить их с таковыми у больных РА без узелков.
Пациенты и методы
Обследовано 120 (37 мужчин и 83 женщины в возрасте от 24 до 73 лет) больных с достоверным РА по пересмотренным критериям АРА (1987) в стационаре и амбулатории. Использовали иммунофлюоресцентный тест на CD-рецепторы лимфоцитов [7] и тест Манчини на определение иммуноглобулинов сыворотки крови. Иммунологические методики использованы у 70 из 120 больных РА. Группу контроля составили 25 здоровых лиц, сопоставимых по полу, средний возраст которых был 39,9 ± 4,9 года.
Стадию болезни определяли по Штейнброкеру (O.Steinbrocker, 1949). Изменения в суставах, соответствующие II стадии артрита, имели место у половины больных обеих групп (в процентном соотношении), отмечалось процентное преобладание I стадии артрита у больных РА без РУ и, напротив, III стадии артрита у больных РА с наличием РУ.
Активность РА оценивали в соответствии с рекомендациями EULAR (Европейской антиревматической лиги) путем подсчета DAS28 (Disease Activity Score). Активность умеренной степени определена у 55,3% больных РА с наличием РУ и у
Таблица 1. Численность выявленных РУ у больных РА
Больные РУ
единичные 2-3 4 и более
n % n% n%
Мужчины (n = 24) 5 20,8 11 45,8 8 33,4
Женщины (n = 61) 24 39,3 23 37,7 14 22,9
Таблица 2. Показатели активности РА у обследуемых больных
Клиническое проявление РА с РУ (п = 85) РА без РУ (п = 35) р
Утренняя скованность(ч) 3,6 ± 0,3 2,8 ± 0,4 0,161
Число воспаленных суставов 7,8 ± 0,3 8,0 ± 0,5 0,285
ВАШ (мм) СОЭ (мм/ч) 70,0 38,5 ± 0,9 ± 13,3 74,3 37,2 ± 0,9 ± 13,3 0,014 0,611
ЧУЧУЧУ MV1IVI/ СРБ (мг/л) 98,87 ± 40,7 136,8 ± 58,3 0,098
DAS 5,16 ± 0,58 5,07 ± 0,6 0,441
57,15% больных РА без РУ, высокой степени - у 44,7% больных РА с наличием РУ и у 42,85% больных РА без РУ, минимальная степень активности не имела места.
Лабораторное исследование включало биохимический и иммунологический анализы крови, взятой из локтевой вены после 14-часового голодания. Определяли С-реактивный белок полуколичественным методом на основе латексного диагно-стикума; ревматоидный фактор (РФ) в сыворотке крови - методом латекс-агглютинации по Л.Сперанскому (1968); концентрацию иммуноглобулинов А, М, G в сыворотке крови - методом радиальной иммунодиффузии по Манчини в планшетах фирмы «Реафарм». Определение популяций лимфоцитов и субпопуляций Т-лимфоцитов и экспрессии их мембранных маркеров производили методом иммунофлюоресцентной микроскопии (Тимофеев В.Т. и соавт., 2000) с использованием моноклональ-ных антител (фирма «Сорбент») к молекулам С02, С03, С019, С04, С08, С038, С045, С025, С010, Н1_А-0Я человека. При анализе данных иммунологического обследования использовали систему поэтапного иммуномониторинга [7]. Основой интерпретации данных о содержании субпопуляций лимфоцитов периферической крови больных РА служили методические рекомендации Г.В.Порядина и соавт. [8] и Л.В.Ковальчука [9].
Иммунологическое исследование крови выполнялось в лаборатории кафедры факультетской терапии им. акад. А.И.Нестерова лечебного факультета РГМУ под руководством г.н.с. ПНИЛ д.м.н. В.Т.Тимофеева, в иммунологической лаборатории МГРЦ и в лаборатории клеточного иммунитета ГНЦ «Институт иммунологии» ФМБА в рамках проекта 04-48104 «Изучение патологии тимического и внетимусного звеньев положительной селекции Т-лимфоцитов человека и поиск путей ее коррекции» и проекта 08-0401508 «Изучение роли лимфоид-ных клеток с атипичным соотношением антигенраспознающе-го рецептора/ко-рецепторов (ТСЯ-С03/С04, С08) при системной иммунопатологии человека» (руководитель проектов -к.м.н. М.В.Головизнин), поддержанных грантами Российского Фонда Фундаментальных Исследований.
Таблица 3. Внесуставные проявления у больных РА
Внесуставные проявления ЭА с наличием РУ РА без РУ
(n = 85) (n = 35)
Всего % Всего %
Анемия Пиуппягшя 45 24 52,9 28 2 24 11 68,5 31 4
Потеря массы тела 37 43,5 22 62,8
Гипотрофия мышц плечевого 37 43,5 25 71,4
и/или тазового пояса
Лимфаденопатия 8 9,4 - -
Полинейропатия 3 3,5 - -
Кожный васкулит 7 8,2 1 2,8
Узловатая эритема 1 1,2 - -
Глазные 2 2,4 - -
(иридоциклит, эписклерит) Омн пппм 11 1АГП£^НЯ 2 5 7
Синдром Рейно 1 1,2 1 2,8
Асептический некроз головки 1 1,2 3 8,6
бедренной кости
Таблица 4. CD-маркеры лимфоцитов у больных РА в процентном соотношении
Группа CD3 CD19 CD4 CD8 CD2 HLA-DR CD25 CD10 Лф
РА с РУ 58,1 ± 13,8 21,7 ± 9,4* 53,9 ± 11,9*** 23,6 ± 16,2 61,0 ± 13,8* 31,5 ± 18,4* 28,1 ± 14,2**** 22,8 ± 14,6**** 18,7 ± 8,0****
(n = 25)
РА без РУ 62,0 ± 11,1 24,5 ± 7,5**** 50,6 ± 12,5 20,8 ± 9,9 59,3 ± 13,3*** 33,0 ± 12,9*** 23,8 ± 12,6** 21,8 ± 13,5**** 19,9 ± 7,2****
(n = 25)
Здоровые 4,2 ± 11,2 17,0 ± 4,8 45,5 ± 6,9 22,4 ± 6,6 69,3 ± 7,9 21,9 ± 9,1 15,4 ± 7,1 3,1 ± 2,7 29,2 ± 6,1
лица
(n = 25)
* р < 0,05 по сравнению со здоровыми лицами; ** р < 0,01 по сравнению со здоровыми лицами; *** р < 0,005 по сравнению со здоровыми лицами; **** р < 0,0001
по сравнению со здоровыми лицами
Таблица 5. CD-маркеры лимфоцитов у больных РА в абсолютных значениях
Группа CD3 CD19 CD4 CD8 CD2 HLA-DR CD25 CD10 Лф
РА с РУ 691,2 ± 63,5* 275 ± 41,9 638,8 ± 68,7 246,0 ± 29,3 750,0 ± 77,4 406,9 ± 61,9 309,8 ± 32,4* 270,8 ± 43,0 **1132 ± 97,1
(n = 25)
РА без РУ 961,2 ± 82,5 405,0 ± 44,1** 811,8 ± 72,6* 358,6 ± 53,2 971,2 ± 86,9 601,2 ± 73,6** 394,4 ± 50,7* 389,2 ± 62,0 **1608 ± 121
(n = 25)
Здоровые 858,5 ± 50,6 232,2 ± 16,6 602,5 ± 36,8 314,8 ± 29,1 931,2 ± 60,7 286,5 ± 24,8 220,2 ± 23,3 40,8 ± 9,7 1365 ± 82,2
лица
(n = 25)
* р < 0,05 по сравнению со здоровыми лицами; ** р < 0,005 по сравнению со здоровыми лицами; *** р < 0,0001 по сравнению со здоровыми лицами
Статистический анализ полученных данных
Статистический анализ данных выполнялся с использованием пакета программ Statistica 6.1 (StatSoft Inc., США).
Описательная статистика количественных признаков представлена средними и среднеквадратическими отклонениями (в формате M ± s в случае нормальных распределений) либо медианами и квартилями (в формате Me [Q1; Q3]). Описательная статистика качественных признаков представлена абсолютными и относительными частотами.
При анализе соответствия распределений количественных признаков нормальному закону применялся критерий Шапиро-Уилка.
Для сравнения несвязанных групп по количественным и порядковым признакам применялся непараметрический дисперсионный анализ по Краскел-Уоллису, множественные post hoc сравнения групп по Сигэл и Кастеллан, тест Манна-Уитни, для сравнения связанных групп - тест Вилкок-сона. Сравнение несвязанных групп по качественным признакам проводилось с использованием теста Хи-квадрат и точного критерия Фишера. Проводился непараметрический корреляционный анализ по Спирмену.
При проверке гипотез статистически значимыми считались результаты при достигнутом уровне значимости p < 0,05.
Результаты исследования и их обсуждение
Дебют РА в обеих группах приходился в среднем на 46-ой год жизни (45,8 ± 9,3 года). В группе РА с наличием РУ появление РУ в среднем приходится на начало пятого года (4,14 ± ± 1,9 года) от начала заболевания. В группе РА с наличием РУ I степень активности была установлена у 5,8% больных, II степень активности - у 62,45% и III степень - у 31,75%. В группе РА без РУ показатели активности соответственно равнялись 8,5; 65,8 и 25,7%.
Ревматоидные узелки - непостоянные объемные образования, выявляемые у части больных РА. При единообразии микроскопических данных, характерных для гранулемы, РУ имеют большой полиморфизм макроскопического строения, разнооб-
разную локализацию (как наружную, так и во внутренних органах) и различные сроки существования. Данные о численности РУ представлены в табл. 1. Группы больных РА с наличием РУ были сопоставимы по показателям утренней скованности, количеству воспаленных суставов и СОЭ. Отмечался достоверно более высокий (р = 0,014) уровень визуальной аналоговой шкалы (ВАШ) у больных без РУ, что, возможно, обусловлено худшей переносимостью заболевания у больных РА без РУ вследствие более частого одновременного сочетания нескольких видов внесуставных проявлений (табл. 2). Одиночные РУ чаще отмечались у женщин, тогда как множественные РУ преобладали у мужчин. Отмечалась тенденция к увеличению количества РУ по мере прогрессирования РА. У больных с I стадией РА не встречались множественные (4 и более) РУ, а у больных с
IV стадией артрита не отмечались единичные РУ.
Большинство РУ локализовались на верхних конечностях
(179 случаев РУ у 80 больных). Эта цифра включает и одиночные мелкие РУ, и тесно спаянные в крупные конгломераты РУ.
V 15 больных из 85 (17,6%) РУ обнаружены только в области локтевых суставов. У 65 больных из 85 (76,5%) выявлены РУ как этой, так и другой локализации. У 5 больных из 85 (5,9%) имелись РУ только вне области локтевых суставов. У 38 больных (47,5%) РУ в области локтевых суставов были асимметричными (в 3 раза чаще слева, чем справа). В области проксимальных межфаланговых суставов (ПМФС) II и III пальцев кисти РУ имели преимущественно симметричное расположение. Количество РУ в области предплечья, запястья и ПМФС кисти было невелико и не имело закономерности распределения.
Внесуставные проявления РА были выявлены у больных обеих групп. У 43 (50,5%) больных РА с наличием РУ и 25 (70%) больных РА без РУ было отмечено одновременное сочетание 3 и более видов внесуставных проявлений. Более частое выявление у больных РА без РУ одновременно нескольких видов внесуставных проявлений, возможно, объясняет более высокие показатели ВАШ в этой группе (табл. 3).
У больных РА с наличием РУ были выявлены полинейропа-тия (3), лимфаденопатия (8), узловатая эритема (1), иридоцик-лит (1), эписклерит (1), кожный васкулит (7). Все эти проявления (суммарно 21) связаны с пролиферацией Лф, иммуноком-плексными и гранулематозными реакциями. У больных РА без
Таблица 6. Результаты реакции розеткообразования лимфоцитов крови
Группа Клетки
ТЭК, п (%) Фибробласты, п (%) Эпителий легких, п (%)
РА с наличием РУ 17 (28,17%) 12 (15,6%) 13 (28,4%)
РА без РУ 18 (27,30%) 5 (20,0%) 9 (22,9%)
Здоровые лица 8 (10,75%) 5 (4,6%) 5 (5,8%)
РУ отмечались лишь 1 случай кожного васкулита и 2 случая синдрома Шегрена, сходные по патогенезу с вышеперечисленными реакциями, преобладали внесуставные проявления, связанные с неспецифическим воспалением и интоксикацией (лихорадка, потеря массы тела, анемия).
РФ был обнаружен у 80 из 85 (94,1%) больных группы РА с наличием РУ и у 31 из 35 (88,60%) пациентов группы РА без РУ. Преобладание высоких титров РФ (1:640 и выше) у пациентов с РУ не достигло статистической достоверности. Уровень 1дА, 1дМ был достоверно повышен в обеих группах РА по сравнению с контролем. У больных без РУ уровень ^ достоверно превышал таковой у больных РА с наличием РУ. Более низкий уровень ^ у больных с наличием РУ, возможно, связан с более высокими титрами РФ, который является антителом к
Исследование рецепторного фенотипа лимфоцитов ПК больных РА проводилось по уровню экспрессии кластеров дифференциации (антигенов СО): основных маркеров Т- и В-лимфоцитов (С03, С019), маркеров активации (С025, Н1_А-0Я, С038), дифференцировки (С04, С08), адгезии (С02) и созревания (С010). Определению фенотипа предшествовал подсчет содержания лимфоцитов в периферической крови больных в абсолютных значениях и в процентном соотношении. У больных РА с наличием РУ количество лимфоцитов было достоверно ниже (1132,0 ± 97,1; р = 0,005), чем у больных РА без РУ. В процентном соотношении обе группы достоверно (р = 0,0001) отличались от контроля. Содержание СО-популяций лимфоцитов периферической крови больных РА с наличием РУ и без РУ в процентном соотношении и в абсолютных значениях представлено соответственно в табл. 4 и 5.
У больных РА без РУ отмечалось достоверное повышение процентных показателей Н1_А-0Я (р < 0,001), С019 (р < 0,0001), С025 (р < 0,01), С02 (р < 0,005) и С010 (р < 0,0001) по сравнению с контрольной группой здоровых лиц. У больных с наличием РУ по сравнению с контролем был повышен уровень С04 (р < <0,005), С010 (р < 0,0001), С025 (р < 0,0001), С019 (р < 0,05), Н1_А-0Я (р < 0,05) и С02 (р < 0,05).
При наличии РУ у больных РА отмечали достоверное снижение уровня экспрессии С03 как по сравнению со здоровыми лицами, так и по сравнению с больными РА без РУ (табл. 4, 5). Методом корреляционного анализа выявлена обратная зависимость экспрессии С03 от признака множественности РУ у больных РА: больший уровень экспрессии С03 наблюдался при наличии единичных РУ, меньший уровень - в случае множественных РУ.
Экспрессия дифференцировочных рецепторов. Абсолютные значения количества клеток, несущих С04 и С08, у больных РА с наличием РУ было меньше, чем в группе больных РА без РУ, тогда как процентное содержание С04+, С08+ клеток у первых превышало таковое у вторых и у здоровых лиц (табл. 4, 5). Таким образом, уровень дифференцировочных маркеров С04 и С08 в группе РА с наличием РУ не был
пониженным, в этой связи вышеописанное достоверное снижение у них уровня CD3 вряд ли обусловлено Т-клеточным иммунодефицитом и может быть объяснено: а) повышенной миграцией клеток CD3+ из ПК в ткани; б) более низкой плотностью CD3+ на клетках по сравнению с плотностью экспрессии CD4 и CD8; в) наличием в крови больных РА необычных клеток, коэкспрессирующих рецепторы CD4 и CD8. Такое объяснение косвенно подтверждается наличием обратной корреляционной зависимости между уровнем CD3 и множественностью РУ.
Экспрессия адгезивного рецептора CD2. Процентное содержание клеток CD2+ у всех больных РА было достоверно снижено (р < 0,005 в группе РА без РУ, р < 0,05 в группе РА с наличием РУ) по сравнению со здоровыми лицами. В абсолютных значениях содержание лимфоцитов CD2+ у всех больных РА не имело достоверных отличий от контроля (табл. 4, 5).
Экспрессия маркеров созревания Т- и В-лимфоцитов. В обеих группах больных РА отмечалось достоверное многократное повышение содержания клеток CD10+ по сравнению со здоровыми лицами (р = 0,0001) (табл. 4, 5). Т-лимфоциты CD10+ являются незрелыми и в норме не покидают тимус.
Экспрессию маркеров активации оценивали по содержанию лимфоцитов, несущих CD25+ (цепь рецептора к интерлей-кину-2). Уровень клеток CD25+ в обеих группах больных РА достоверно превышал контрольный показатель в процентном и абсолютном значениях. Группы больных РА между собой отличались недостоверно (табл. 4, 5).
В обеих группах РА, но с заметным преобладанием в группе без РУ отмечался рост клеток HLA-DR+. У больных РА без РУ значение НLА-DR+ превышало контроль в процентном (р < 0,01) и в абсолютных значениях (р < 0,0001) (табл. 4, 5). У больных РА без РУ статистически достоверные отличия от здоровых лиц имело только процентное содержание клеток НLА-DR+ (р < 0,001).
Таким образом, в обеих группах больных РА наблюдали достоверное повышение уровня лимфоцитов, несущих рецепторы активации (CD25, HLA-DR), и многократное повышение уровня лимфоцитов, несущих рецепторы созревания (CD10+), по сравнению с контролем. Циркуляция в периферической крови клеток CD10+ ранее описана лишь при некоторых формах лейкозов [9]. Нельзя исключить, что преждевременно вышедшие из тимуса незрелые лимфоциты, циркулирующие в крови больных РА, при взаимодействии с элементами микроокружения активируются, проявляют повышенную адгезивную способность, участвуют в развитии аутоиммуноагрессии.
У больных РА с наличием РУ и без РУ исследована адгезивная способность лимфоцитов периферической крови при их инкубации в культуре in vitro с эпителиальными клетками тимуса (ТЭК), легких и фибробластами. Клетки эпителия тимуса были выбраны нами в связи с выявлением в крови больных РА с наличием и без РУ лимфоцитов, несущих рецептор CD10, свойственный незрелым тимоцитам. Контролем служила реакция взаимодействия ТЭК с тимоцитами человека и с лимфоцитами крови здоровых лиц. В контрольном эксперименте при взаимодействии ТЭК с тимоцитами адгезия составляла 65-80%, при взаимодействии ТЭК с лимфоцитами здоровых лиц розетки образовывались всего в 12,7 ± 2,9% клеток. Лимфоциты у больных РА обеих групп имели выраженную троп-ность к ТЭК (разброс результатов от 14 до 45% клеток; табл. 6).
Так как СD2 является одной из основных адгезивных молекул, то с целью оценки его участия в реакции адгезии у ряда больных (5 больных РА с наличием РУ и 2 больных РА без РУ) мы предварительно инкубировали лимфоциты периферической крови с антителами к рецептору СD2. Степень адгезии заметно ослабевала, ее значения приближались к результатам в группе контроля. Изложенные факты позволяют отнести лимфоциты, участвующие в реакции с ТЭК, к Т-клеткам.
Показатели адгезии в обеих группах больных РА были значительно выше, чем у здоровых лиц (р < 0,05 в обоих случаях), однако не имели достоверных различий между группами больных РА. Адгезия лимфоцитов больных РА обеих групп к ТЭК была несколько выше, чем к эпителию легких и фибробла-стам. Однако и в этих случаях результаты у больных РА кратно превосходят контрольные значения.
Дальнейшее изучение адгезивной способности лимфоцитов периферической крови больных РА с наличием РУ при их сокультивировании с клетками макрофагально-гистиоцитар-ного происхождения и изучение CD2 и других молекул адгезии, которые опосредуют межклеточные взаимодействия (рецепторы группы интегринов), помогут оценить роль иммунных механизмов в патогенезе РА и связи РУ с клиническими проявлениями заболевания.
Таким образом, у больных РА с ревматоидными узелками преобладают внесуставные проявления, обусловленные экспансией лимфоцитов в тканях: лимфаденопатия, иридоцик-лит, узловатая эритема, кожный васкулит, тогда как у больных РА без ревматоидных узелков преобладают лихорадка, потеря массы тела, анемия, развитие которых преимущественно связано с неспецифическим воспалением и общей интоксикацией.
Кроме того, у больных РА с ревматоидными узелками выявлено достоверное снижение количества Т-лимфоцитов, несущих основной дифференцировочный маркер CD3, как по сравнению с больными РА без ревматоидных узелков, так и со здоровыми лицами. У больных РА с множественными ревматоидными узелками количество CD3 достоверно ниже, чем у больных с единичными ревматоидными узелками. Методом корреляционного анализа выявлена обратная зависимость экспрессии CD3 от признака множественности РУ у больных РА: при единичных РУ наблюдался большой уровень экспрессии CD3, меньший уровень - при множественных РУ (рисунок).
Заключение
Исследование CD-рецепторного аппарата и адгезии лимфоцитов периферической крови больных РА, имеющих РУ, в опытах по сокультивированию их с клетками макро-фагально-гистиоцитарного происхождения, а также изучение других молекул адгезии, опосредующих межклеточные взаимодействия, позволят расширить представление об иммунопатогенезе CD-рецепторного аппарата в клинической картине РА и развитии РУ.
Литература
1. Harris E.D. Rheumatoid arthritis: pathology and implication for therapy // New Engl.
J.Med. - 1990. - №18. - P.1277-1286.
I I Единственный РУ Q Более 3-х РУ
Множественные РУ сопровождаются достоверным снижением CD3 (p = 0,029)
Рисунок. Зависимость экспрессии CD3 от признака множественности РУ у больных РА. По оси ординат - абсолютное количество CD3 лимфоцитов.
2. Насонова В.А., Чичасова Н.В., Баранов А.А. и др. Клиническое значение С-реа-ктивного белка при ревматоидном артрите // Клин. мед. - 1997. - №7. -С.26-29.
3. Ребров А.П., Инамова О.В., Каримов Н.Н. Оценка активности ревматоидного артрита //Альманах. Саратовский научно-мед. вестн. - 2003. - №1 (2). -С.104-108.
4. Нестеров А.И., Сигидин Я.А. Клиника коллагеновых болезней. - М.: Медицина, 1966. - С.92-94.
5. Чичасова Н.В. Ревматоидный артрит: клинико-лабораторные и клинико-морфо-логические сопоставления. Прогноз. - Автореф. дис. д.м.н. - М., 2000. - 45 с.
6. Turesson C., O'Fallon W.M., Crowson C.S. et al. Extraarticular disease manifestations in RA: incidence trends and risk factors over 46 years //Annals of Rheum. Dis.
- 2003. - V.62. - № 8. - Р.772-782.
7. Тимофеев В.Т., Головизнин М.В., Ковальчук Л.В., Шостак Н.А. и др. Методика оценки иммунного статуса у больных ревматическими заболеваниями и контроля иммуномодулирующей терапии. Пособие для врачей. - М., 2000. - 39 с.
8. Порядин Г.В., Семенова Л.Ю., Казимирский А.Н. и др. Характеристика субпопуляций лимфоцитов и активационных процессов в иммунной системе больных ранним ревматоидным артритом //Научно-практ. ревматол. - 2002.- №4.
- С.22-25.
9. Ковальчук Л.В. Антигенные маркеры клеток иммунной системы человека. CD (Cluster differentiation) система. Учебно-методическое пособие. - М., 2003. - 76 с.
Информация об авторах:
Головизнин Марк Васильевич, кандидат медицинских наук,
ассистент кафедры внутренних болезней стоматологического факультета
Московского государственного медико-стоматологического университета
Адрес: 127473, Москва, ул. Делегатская, 20/1
Телефон: (499) 199-8895
E-mail: mvasilef@mail.ru
Булдакова Юлия Рафаэлевна, кандидат медицинских наук,
ассистент кафедры внутренних болезней стоматологического факультета
Московского государственного медико-стоматологического университета
Адрес: 127473, Москва, ул. Делегатская, 20/1
Телефон: (499) 737-6232
E-mail: juliafamily@yandex.ru
Лахонина Наталья Сергеевна, аспирант кафедры внутренних болезней
стоматологического факультета Московского государственного
медико-стоматологического университета
Адрес: 127473, Москва, ул. Делегатская, 20/1
Телефон: (499) 737-6232
E-mail: astra70@list.ru
