Клинические аспекты нарушений в гене ТР53 при диффузной В-крупноклеточной лимфоме Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

ВЕСТНИК ГЕМАТОЛОГИИ, том XV, № 3, 2019

шанно-клеточный вариант (n = 20; 41,6 %), у 6 (12,5 %) больных выявлена редкая нозологическая форма — нодулярная лимфома Ходжкина с лимфоидным преобладанием, лимфоидное истощение и классический вариант с большим количеством лимфоцитов был диагностирован у 3 (6,25 %) и 4 (8,4 %) обследуемых соответственно. Большая опухолевая масса (bulky disease) была диагностирована у 16 (33,3 %) пациентов. Экстранодальные поражения (ЭП) отмечены у 27 больных ЛХ, из них у 9 пациентов в опухолевый процесс были вовлечены две и более экстранодальные зоны. В качестве индукции ремиссии все пациенты получали полихимиотерапию по программе ABVD (n = 10) и BEACOPP (n = 38), последующая лучевая терапия (ЛТ) проводилась 28 больным ЛХ в средней суммарной очаговой дозе 30 Гр на зоны исходного поражения. ПХТ II линии (DHAP, ESHAP) была назначена 9 пациентам. Терапия приводила к достижению оптимального ответа (случаи полной и частичной ремиссии) у 39 (81,25 %) пациентов. Трансплантация ауто-логичных гемопоэтических стволовых клеток (аутоТГСК) проведена 1 больному с IV стадией ЛХ. Исследование МПК проводилось с помощью двухэнергетической рентгеновской абсорбци-ометрии (DXA) на аппарате Lunar Prodigy (GE, США). Определяли показатели МПК, Т-критерий в позвоночнике (поясничные позвонки: L1-L4), проксимальных отделах бедра, шейке бедра, предплечье недоминантной руки, у женщин до менопаузы, мужчин моложе 50 лет и детей — Z-критерий. Определение риска основных низкоэнергетических переломов проводилось

с помощью опросника FRAX (веб-версия 3.8, расчет по российской модели). Статистическая обработка проводилась с использованием программы STATISTICA 10 (StatSoft Inc, 2011, США).

Результаты. По результатам DXA у 23 (47,9 %) пациентов с III-IV стадиями ЛХ зафиксировано снижение МПК. Пациенты с остео-порозом в целом были старше, имели меньший ИМТ по сравнению с больными с нормальной МПК. Десятилетний риск основных низкоэнергетических переломов и переломов шейки бедра, согласно FRAX, оказался выше в группах больных с остеопорозом и остеопенией, по сравнению с больными ЛХ с нормальной МПК (р < 0,05). При оценке денситометрических показателей у больных ЛХ, получавших комбинированную терапию, в большинстве случаев (х2 = 6,23; р = 0,0271) выявлялось снижение МПК в сравнении с пациентами, получавшими только ПХТ. У пациента с проведенной аутоТГСК установлена остеопения. Более чем у половины больных, получавших схемы ПХТ, содержащие ГКС (60,1 %), было выявлено снижение МПК. В группе пациентов старше 50 лет и женщин в постменопаузе наиболее частой локализацией остеопороза была шейка бедренной кости, а у молодых пациентов с распространенными стадиями зафиксировано снижение МПК в поясничном отделе позвоночника.

Выводы. Проведение комбинированной терапии и протоколов ПХТ, включающих ГКС, положительно ассоциированы со снижением МПК у пациентов с распространенными стадиями ЛХ.

Е. Н. Воропаева, Т. И. Поспелова, М. И. Воевода, В. Н. Максимов, И. Б. Ковынев, Т. А. Агеева, И. П. Михно

Научно-исследовательский институт терапии и профилактической медицины — филиал Федерального государственного бюджетного научного учреждения «Федеральный исследовательский центр Институт цитологии и генетики Сибирского отделения Российской академии наук», Новосибирск; Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования Новосибирский государственный медицинский университет Минздрава России, Новосибирск; Государственное бюджетное учреждение здравоохранения Новосибирской области «Городская клиническая больница № 2», Новосибирск

КЛИНИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ НАРУШЕНИИ В ГЕНЕ ТР53 ПРИ ДИФФУЗНОЙ в-крупноклеточной лимфоме

Введение. Снижение функции ТР53 может быть вызвано нарушениями в структуре гена, процессах транскрипции, стабильности мРНК, посттрансляционных модификациях или взаимодействиях белка р53. В клетках с инактивацией TP53 отмечается повышенная генетическая

нестабильность, которая способствует ускорению прогрессирования опухоли, ускользанию клеток от иммунологического надзора и формированию лекарственной резистентности.

Цель исследования. Изучение клинического значения соматических мутаций и метилиро-

Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием

«АКТУАЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ ГЕМАТОЛОГИИ И ТРАНСФУЗИОЛОГИИ»

вания промотора гена TP53 в опухолевой ткани диффузной B-крупноклеточной лимфомы (ДВККЛ).

Материалы и методы. Были исследованы образцы ДНК пациентов с ДВККЛ (n = 74) : 35 мужчин и 39 женщин, средний возраст составил 52,8 ± 14,3 года. Подавляющее большинство больных имели III-IV стадии заболевания (91 %), две трети больных — неблагоприятный прогноз, согласно Международному прогностическому индексу (МПИ) [35]. Все пациенты получили 6-8 циклов R-CHOP и подобных протоколов лечения. Геномная ДНК была выделена из парафиновых блоков опухолевых лимфатических узлов и экстранодальных очагов поражения методом фенольно-хлороформной экстракции с применением гуанидина. Анализ кодирующей последовательности гена TP53 выполнялся методом прямого секвенирования по Сангеру. Оценка биологической значимости выявленных миссенс мутаций проводилась с применением программ SIFT, Mut_ass и PolyPhen-2, а интронных мутаций — с применением программы NetGene2. Статус метилирования промотора TP53 изучали с применением метил-специфической ПЦР.

Результаты. Среди миссенс мутаций преобладали (95 %) замены в областях гена, кодирующих ДНК-связывающий домен. В анализируемой выборке пациентов кодоны 275, 155, 272 и 212 были «горячими точками» мутаций

Санкт-Петербург 30-31 мая 2019 г.

в TP53. Функционально значимыми были следующие типы мутаций: р. Я213Х, р. A189Pfs, р. L130F, р. Т1551, р. Я1960, р. G244S, р. V272E и р. А276У. Среди интронных мутаций также были обнаружены две функционально значимые замены (IVS6-36G >С и + 43G > Т). Метилирование промотора гена ТР53 наблюдалось лишь в нескольких проанализированных образцах (6,7 % случаев). Группа исследования была разделена на две подгруппы: с наличием (ГЯ53ти1) и отсутствием (TP53wt) функционально значимых мутаций в гене ТР53. Было показано, что TP53mut статус коррелировал с В-симптомами (р = 0,016), спленомегалией (р = 0,044), опухолевым поражением костного мозга (р = 0,028), а также неблагоприятными группами прогноза по МПИ >2 (р = 0,018). Пациенты с TP53wt чаще постигали ремиссии (р = 0,066) и имели лучшие показатели общей выживаемости (р = 0,026) в сравнении с пациентами с TP53mut (69,4 % против 41,7 %, соответственно). Анализ методом регрессии Кокса показал, что наличие экстранодальных очагов поражения опухолью, МПИ >2 и TP53mut являются независимыми предкторами общей выживаемости больных ДВККЛ группы исследования.

Выводы. В ходе исследования было показано, что мутационный статус гена ТР53 может быть ценным прогностическим биомаркером при ДВККЛ.

А. Х. Габдулхакова, В. А. Овсепян, Е. В. Трегубова, Е. Л. Назарова

Федеральное государственное бюджетное учреждение науки «Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Федерального медико-биологического агентства», г. Киров

ВЗАИМОСВЯЗЬ МУТАЦИОННОГО СТАТУСА ГЕНОВ JAK2, CALR И MPL С ФЕНОТИПИЧЕСКИМИ ОСОБЕННОСТЯМИ ЭССЕНЦИАЛЬНОЙ ТРОМБОЦИТЕМИИ

Введение. Эссенциальная тромбоцитемия (ЭТ) — миелопролиферативное заболевание, характеризующееся повышенной продукцией мегакариоцитов в костном мозге и тромбо-цитозом в периферической крови. Ключевым звеном патогенеза ЭТ является неконтролируемая активация клеточного сигнального пути |АК^ТАТ, в основе которой лежат соматические точечные мутации генов, кодирующих тирозин-киназу (JAK2) и белок кальретикулин (CALR), а также гена рецептора тромбопоэтина (MPL). В последние годы установлена молекулярная картина ЭТ, что предопределило необходимость

дальнейшего изучения влияния указанных мутаций на течение, риск развития осложнений и прогноз заболевания.

Цель исследования. Оценить распространенность драйверных соматических мутаций у пациентов с ЭТ и определить их взаимосвязь с временем дебюта заболевания и некоторыми клинико-лабораторными показателями.

Материалы и методы. Проведен анализ историй болезни 193 пациентов с ЭТ, наблюдавшихся в ФГБУН КНИИГиПК ФМБА России с 1995 по 2019 гг. Возраст обследованных в дебюте заболевания колебался от 18 до 90 лет (меди-