CC BY
11
цитохрома Р-450. Следовательно, при абсорбции метаболитов ДБХП в клетках кишечника и их конъюгации с глутатионом могут образовываться реакционно-способные соединения, индуцирующие цитогенетический эффект.
Генотоксический эффект ДБХП оценивали также в печени, поскольку именно здесь в основном происходит метаболизм этого препарата. ДБХП повышал частоту клеток печени с микроядрами у мышей во всех испытанных дозах, что указывает на большую чувствительность гепато-цитов по сравнению с клетками других органов. Эффект ДБХП увеличивался при действии доз 5,1 и 25,7 мг/кг, а затем при дозе 51,4 мг/кг снижался, но был все-таки значительно выше, чем в контроле. Отменено, что высокие дозы ДБХП приводят к истощению пула глутатиона, уменьшению глутатионовых сшивок и снижению повреждения ДНК |6]. Вероятно, этим и обусловлено снижение цитогенетического эффекта при действии высокой дозы ДБХП. Индукция опухолей в печени при введении ДБХП мышам и крысам не отмечена. Однако он значимо повышает частоту гепатом аквариумных рыб. По-видимому, ДБХП может индуцировать повреждения в гепа-тоцитах мышей, однако в результате того, что эти клетки относятся к медленно пролиферирующим, опухоли в печени не образуются. Можно полагать, что действие ДБХП совместно с веществами, усиливающими пролиферацию гепатоцитов, может индуцировать гепатоканцерогенез.
Общепринятая оценка цитогенетического действия препаратов в ПХЭ костного мозга показала наличие эффекта ДБХП, однако значительно менее выраженного, чем в преджелудке, толстой кишке или печени. ДБХП не индуцировал микроядер в ПХЭ костного мозга у мышей и крыс и аберраций хромосом в клетках костного мозга мышей в диапазоне доз от 0,02 до 0,2 ЬО50 при 4-кратном внутрижелудочном введении. При 2-кратном введении ДБХП также не индуцировал микроядер в дозах 0,02 и 0,004 ЬОГ)0. Однако в более высоких дозах — 0,1 и 0,5 1^05о — он значимо повышал частоту ПХЭ с микроядрами. Полученные нами результаты и данные других авторов [7, 11 ] указывают на то, что ДБХП, по-видимому, обладает слабой цитогенетической активностью в клетках костного мозга в дозах на уровне 0,1 ЬО.зд и выше. Отсутствие эффекта, отмеченное нами в опытах на мышах и крысах при действии ДБХП в дозе 0,2 1-05о, возможно, обусловлено многократным введением препарата. По-
добный эффект показан G. Wooton и соавт. [11|, в опытах которых доза ДБХП 75 мг/кг была эффективной только при однократном введении, но не при 2- или 3-кратном.
Проведенные эксперименты позволяют оценить видовую специфичность цитогенетического эффекта ДБХП. Сходство действия препарата у крыс и мышей выражается в том, что он эффективен в одних и тех же органах: преджелудке и толстой кишке, и не эффективен в желудке, двенадцатиперстной и тонкой кишках. Однако крысы более чувствительны к действию препарата, чем мыши: минимально действующие дозы относительно LD50 у крыс значительно ниже, чем у мышей; возрастание доли клеток с микроядрами на единицу дозы ДБХП при сравнении коэффициентов регрессионных уравнений в 2,33 раза больше, чем у мышей, и это различие статистически достоверно. Данные других авторов при исследовании мутаций в половых клетках также показывают, что крысы более чувствительны к действию ДБХП, чем мыши [9].
Таким образом, результаты микроядерного теста выявляют четкую органную специфичность цитогенетического действия ДБХП (эффекты в клетках печени, преджелудка, толстой кишки), особенно выраженную у крыс.
Литература
1. Выскубенко И. Ф., Шеренешева Н. И. Способ подготовки эпителиальных клеток желудочно-кишечного тракта к исследованию: А. с. 1735737 СССР // Открытия,— 1992.— № 19.
2. Канцерогенные вещества.— М., 1987.
3. Методические указания но изучению мутагенной активности химических веществ при обосновании их ПДК в воде,— М„ 1986.
4. Сычева Л. П.. Беляева H. Н. Объем и методы геноток-сической оценки и побочных эффектов биологически активных веществ.— Л.. 1989.— С. 90.
5. Baertsch A., Lutz W. К., Schlatter С. // Arch. Toxicol.-1991,- Vol. 65.- P. 169-176.
6. Holme Y., Soderlund E. I., Brunborg G. et al. // Carcinogenesis.— 1989.— Vol. 10, N 1.- P. 49—54.
7. Kapp R. W. Jr. // Toxicol, appl. Pharmacol.— 1979.— Vol. 48.— P. A46.
8. Registry of Toxic Effects of Chemical Substances / Eds. R. J. Lewis, R. L. Falken.— NIOSH.— 1980,— Vol. 2,— P. 425.
9. Teramoto S., Shirasu Y. 11 Mutat. Res.— 1989.— Vol. 221, N I.— P. 1—9.
10. Volp R. F. // Toxicol, appl. Pharmacol.— 1984,— Vol. 75, N 1,— P. 8-17.
11. Wooton G. E„ Gatehouse D. G. 11 Mutat. Res.— 1990.— Vol. 234, N 3-4.- P. 129-134.
Поступила 24.06.93
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ. 1993
УД К в 16-092:612.017.11 -02:616-003.671 -07
М. Г. Шандала, Р. В. Меркурьева. Ю. М. Мольков, М. Н. Костина, Г. Н. Степанова
КЛЕЩИ ДОМАШНЕЙ ПЫЛИ КАК НЕБЛАГОПРИЯТНЫЙ ФАКТОР ВНУТРИЖИЛИЩНОЙ
СРЕДЫ
НИИ профилактической токсикологии и дезинфекции ГКСЭН РФ. Москва
При определении влияния дезинфекционных средств (ДС) на состояние здоровья людей и, следовательно, безопасности их применения одной из важнейших задач медико-биологических исследований является оценка наиболее ранних и про-
гностически важных реакций организма человека, в том числе состояния иммунитета [2, 6, 7, 9|, служащего одним из основных объективных показателей состояния здоровья человека в целом. В настоящее время признано, что степень выра-
женности иммунитета является одним из ранних и чувствительных показателей вредного влияния на организм факторов окружающей среды, в том числе и малой интенсивности. Оценка иммунитета дает возможность выявлять донозологические изменения в организме человека, а также определять группы риска среди взрослого и детского населения.
Защитные функции организма осуществляются как неспецифическими механизмами, так и специфическими иммунологическими факторами. Неспецифические факторы обеспечивают устойчивость организма к действию чужеродных агентов с помощью системы стереотипных реакций, выработанных в процессе длительной эволюции. Эта форма защиты возникла в филогенезе раньше факторов специфической резистентности. Первичные защитные реакции являются общебиологическими, а степень их проявления зависит как от. индивидуальных особенностей реагирующего организма, так и от ряда внутренних и внешних факторов, влияющих на него.
Качественные и количественные показатели неспецифического иммунитета характеризуют состояние здоровья организма человека, его способность противостоять неблагоприятному влиянию окружающей среды, в том числе дезинфекционных средств. Показатели иммунитета (иммунный статус) необходимо учитывать при разработке гигиенических нормативов ДС, оценке состояния здоровья работников дезинфекционной службы и разных групп населения при применении ДС, а также при их производстве.
Для оценки иммунного статуса человека используют серию реакций, которые при клинических обследованиях отдельных больных применяются достаточно широко [4, 5, 17]. Однако эти методы оказались малопригодными при обследованиях населения из-за необходимости брать кровь из пальца или даже из вены, что затруднительно при массовых обследованиях как взрослого, так и особенно детского населения. Кроме того, эти методы достаточно дорогостоящие и трудоемкие, что также затрудняет их применение при массовых гигиенических обследованиях людей на производстве и в быту, особенно в отдаленных регионах проживания, различающихся по климатическим условиям.
В связи с изложенным возникла необходимость разработки методов определения иммунного статуса человека по доступному материалу (слюна и другие выделения слизистых, моча, слезная жидкость, грудное молоко, выделения кожных покровов и т. п.). При этом было доказано, что показатели местного иммунитета достаточно информативны для определения иммунного статуса организма в целом.
Согласно современной концепции местного иммунитета, при инфекпионно-воспалительных и аллергических поражениях органов и систем, вызванных биологическими и химическими факторами окружающей среды, значительную роль играют не только системные гуморальные и ключевые иммунные реакции внутренней среды организма, но и местные реакции иммунных систем кожи и слизистых. Резистентность органов дыхания и желудочно-кишечного тракта ко многим инфекциям в большей степени коррелирует с при-
сутствием специфических антител в секретах слизистых, чем в сыворотке крови [3, 12, 13]. Изучение резистентности кожи, на поверхности которой имеются выделения потовых и сальных желез, также свидетельствует о значительной роли в защите организма от влияния внешних факторов, в том числе ДС и других вредных веществ.
Углубленное изучение роли секреторных иммуноглобулинов при различных физиологических и патологических состояниях стало возможным сравнительно недавно, после получения отечественных моноспецифических антисывороток, позволяющих выявлять секреторный ^А, роль которого при респираторной аллергии в настоящее время хорошо изучена, а также в связи с разработкой ряда реакций по определению естественных (гетерофильных) антител в слюне человека |3| и других реакций (определение И-белков, лизоцима, бактерицидной активности слюны человека и др.). Наиболее информативной и доступной для массовых обследований оказалась реакция по определению естественных (гетерофильных) антител в слюне и других выделениях слизистых.
Данные, полученные при изучении содержания в слюне, сопоставляли с результатами изучения титров естественных (гетерофильных) антител. Гетерофильные антитела (агглютинины) обусловливают уровень гуморального ответа в организме [3, 4]. По данным литературы [4, 8], содержание гетерофильных антител в сыворотке крови характеризует В-системы иммунитета, что позволяет рекомендовать их определение при оценке реакции иммунной системы на воздействие ДС и других факторов внешней среды на человека.
Как показали полученные результаты [3], между содержанием гетерофильных антител в сыворотке крови и слюне отмечается выраженная корреляция, что указывает на определенную связь между состоянием местного и общего иммунитета. Исследования гетерофильных антител в сыворотках обычно проводили с эритроцитами барана [14]. Проведенные нами работы по определению гетерофильных антител в слюне и сыворотке крови здоровых людей показали, что наиболее выраженные реакции наблюдаются с эритроцитами кролика (титр 1:254—1:1024), менее — с эритроцитами мыши (1:64), морской свинки (1:8—1:16), барана (1:8—1:32), крысы (1:8). Исследования показали, что по доступному материалу (слюна, слезная жидкость, грудное молоко, моча и т. п.) можно определять степень напряженности иммунной системы так же надежно, как и по сыворотке крови человека, т. е. имеется корреляция всех данных.
В качестве примера успешного применения метода определения естественных антител для оценки иммунологической резистентности и иммунного статуса приведем результаты комплексных исследований людей (дети и взрослые), проживающих в условиях наличия клещей домашней пыли.
Доказано, что 2 вида клещей — Оегта1орЬа-goides р1егош55ти5 (европейский клещ домашней пыли) и О. Гаппае (американский клещ домашней пыли) — являются основными продуцентами аллергенов домашней пыли. Домашняя пыль занимает второе место после пыльцы трав как причина аллергических реакций [16]. Естественной средой обитания пироглифидных клещей является прежде всего пыль, содержащаяся в посте-
Степень иммунологической резистентности у лиц, проживающих в квартирах с повышенным содержанием клещей в домашней пыли
Число
Тнтр клещей
Обследованные естественных (гетерофильных) антител Степень иммунологической резистентности домашней 11ЫЛН в данной квартире
в слюне
С-ва (мать) С-в (сын) Кл-ва (мать) К-в (сын) С-к (мать) С-к (сын) Кр-на (мать) Кр-н (сын) Г-ва (мать) Г-в (сын)
2 (1) Иммунодефицит 8 (3)
512 (9) Нормальная
512 (9) »
128 (7) Средняя (пониженная)
128 (7) » »
512 (4) Нормальная
128 (7) Средняя (пониженная)
4 (2) Иммунодефицит
128 (7) Средняя (пониженная)
342
109
152
265
129
Примечание. При титре I:2 (1) 1:8 (3) — иммунодефицит; 1:16 (4) — 1:32 (5) — резко пониженная иммунологическая резистентность; 1:64 (6) — 1:128 (7) — средняя иммунологическая резистентность; 1:256 (8) — 1:1024 (10) нормальная иммунологическая резистентность, свойственная здоровому человеку (по данным обследований более 1000 здоровых детей и взрослых).
ли, мягкой мебели и коврах, хотя клещей рода Оег-та1орЬ^о1с1е8 находили в гнездах птиц и запасах продуктов [15). Установлено, что все разнообразие мест обитания пироглифидных клещей связаны с человеком и его окружением [10].
Аллергия к клещам домашней пыли достаточно обычна. Клинические симптомы воздействия аллергена клещей домашней пыли включают астму и ринит, и, возможно, имеется связь доза — ответ между количеством клещей домашней пыли и проявлением аллергической астмы [16]. Дети дают более сильный ответ на экстракты из таких клещей [11].
По оценкам Т. Р^ив-МШв и соавт. [18], присутствие в 1 г домашней пыли более 100 клещей должно рассматриваться как серьезный фактор риска возникновения астмы. Установлено, что сильная степень аллергии приводит к понижению уровня иммунологической резистентности [1].
При обследовании семей (дети и взрослые) использовали метод определения титров естественных (гетерофильных) антител в слюне матери и ребенка. Под наблюдение были взяты семьи (мать и ребенок), где имелись случаи сильной аллергии различной степени. Результаты исследований приведены в таблице.
Таким образом, исследования показали, что присутствие клещей в домашней пыли вызывает резкое понижение иммунологической резистентности у большинства обследованных. Отмечено также, что при иммунодефицитах наблюдается выраженная реакция аллергии, что ведет в дальнейшем к различным заболеваниям, в том числе и к брон-
хиальной астме, что и наблюдали у обследованных детей.
Задача последующих исследований — определение иммунного статуса людей (степени иммунологической резистентности) в семьях (квартирах) с большим количеством клещей домашней пыли после их уничтожения путем обработки жилищ ДС, а также оценка здоровья после такого профилактического мероприятия.
Таким образом, апробация нового способа определения иммунологической резистентности показала его преимущества перед сложными методами иммунологических исследований, его информативность, доступность сбора материала в любой ситуации и доставки его в замороженном состоянии в лабораторию из любой точки страны.
Экономическая эффективность нового метода определения иммунного статуса человека с использованием доступного материала несомненна, в связи с чем этот метод должен найти широкое применение в профилактической токсикологии вообще и в дезинфектологии в частности при оценке безопасности ДС как на начальной стадии токсикологического изучения новых ДС, так и для изучения ближайших и отдаленных последствий их действия на человека.
Литература
1. Ado А. Д. Аллергия.— М., 1984.
2. Меркурьева Р. В., Костина М. Н. // Дезинфекц. дело,— 1992,- № 2,- С. 27.
3. Мольков Ю. И. и др. // Гиг. и сан,— 1988,— № 2.— С. 7—9; Методология фундаментальных исследований в гигиене окружающей среды.— М., 1989.— С. 58—62.
4. Петров Р. В. и др. Определение иммунного статуса человека,— М., 1984,— С. 1—35; Иммунология,— 1982. № 6,- С. 21—25; Иммунология,— 1992,— № 6.
5. Петрова И. В. и др. Стандартизированные методы обследования иммунной системы человека: Метод, рекомендации,— М., 1984.
6. Сидоренко Г. И. Гигиена окружающей среды.— М., 1990.— С. 3—8.
7. Сидоренко Г. И., Меркурьева Р. В. и др. // Гиг. и сан.— 1989,- № 3,— С. 14.
8. Чередеев А. Н. Вопросы патологии,- М., 1976.— Т. 4. С. 124—160.
9. Шандала М. Г. и др. // Гиг. и сан,— 1989,— № 3.— С. 11.
10. Anonimus // Sp. Wld.— 1989,— Vol. 12.— P. 15—16.
11. Espuly M. et al. // Bakaema urapy.— 1986.— Vol. 37. N2,— P. 121-127.
12. McNabb et al. // Ann. Rev. Microbiology.— Vol. 35.— P. 477-486.
13. Hanson L. A.. Brandtzaeg P. Immunologic Disorders in Infants and Children / Eds E. R. Stiehm, V. A. Fulgint.— Philadelphia, 1988.— P. 137-164.
14. Jäger L. Клиническая иммунология и аллергология.— М., 1986.
15. Mumouglu J. // Allergologie.— 1988.— Bd 11, N 6.-g 223_228
16. Mosbeck H. Ц Allergy.— 1985,— Vol. 40,— P. 81-90.
17. Norbory К. С. Ц Pharmacol. Rev.— 1982,— Vol. 34, N I.—
p Iß)_i3g
18. Plaits-Mills, Т. A. E„ de Weck A. L. et al. Ц Бюл. ВОЗ — 1988,- Т. 66. № 6,- С. 90—102.
Поступила 01.07.93
