CC BY
7
ВЕСТНИК ГЕМАТОЛОГИИ, том XVIII, № 1, 2022
нерализованная инфекция, вызванная устойчивой к антимикробной терапии госпитальной флорой. Терапия сепсиса проводится одновременно в двух основных направлениях:
I . Воздействие на инфекционное начало заболевания: - санацию первичного и метастатических очагов, - антибактериальная терапия и коррекция измененного биоценоза локусов тела ребенка, контактирующих с внешней средой.
II. Воздействие на организм больного: терапия, направленная на восстановление расстройств гомеостаза, включая нарушения иммунного гомеостаза (иммунокорригирующая терапия) и органные расстройства.
Рациональная антибактериальная терапия предусматривала: максимально раннее начало (в первые 2-3 часа); максимальные дозы
и кратность введения; внутривенный путь введения; использование бактерицидных антибиотиков; комбинированную антибактериальную терапию.
Выводы:
1. Постцитостатическая нейтропения является частым и серьезным последствием цитостатической терапии.
2. ФН ассоциируется с высокой заболеваемостью, летальностью и стоимостью терапии, приводит к потенциальному компромитирова-нию результатов терапии.
3. Совершенствование стандартов сопроводительного лечения в отношении профилактики и лечения инфекционных осложнений на всех этапах программной терапии является резервом улучшения выживаемости и исхода у больных с острыми лейкозами.
Вяткина О.И.
стратегия минимизации риска микробнои контаминации компонентов
крови в условиях одного центра
Государственное учреждение «Республиканский научно-практический центр трансфузиологии и медицинских биотехнологий», Минск, Республика Беларусь
Введение. Проблема микробиологической безопасности сохраняет свою актуальность для организаций, заготавливающих донорскую кровь. Оптимизация скрининга, антисептическая обработка кожи локтевого сгиба донора в месте венепункции, отвод первой порции донорской крови, внедрение патогенредуцирующих технологий привело к снижению частоты бактериальной контаминации компонентов крови, но не устраняет риск полностью. Поэтому разработка актуальной стратегии по многоэтапному мониторингу рисков микробной контаминации в процессе заготовки и хранения компонентов крови до их реализации и её совершенствование являются актуальной задачей службы крови.
Цель. Оценить эффективность используемой стратегии по оценке риска микробной контаминации компонентов крови в государственном учреждении «Республиканский научно-практический центр трансфузиологии и медицинских биотехнологий» (далее -РНПЦ ТМБ) Министерства здравоохранения Республики Беларусь (далее МЗ рб) с учётом существующих в настоящее время рекомендаций FDA и EDQM.
Материалы и методы. Материалом исследования служили результаты оценки риска микробной контаминации тромбоцитных, эритроцитных компонентов крови и компонентов плазмы, отобранных для проведения испытания через 24 часа от момента заготовки и в конце срока хранения в отделении заготовки крови и её компонентов в стационарных условиях РНПЦ ТМБ. Проанализированы результаты испытаний компонентов крови в период с 2011 по 2021 год. Всего исследовано 4614 доз эритроцитных, 4333 дозы тромбо-цитных компонентов крови и 4595 доз компонентов плазмы. В течение анализируемого периода стратегия по оценке риска микробной контаминации компонентов крови была следующая:
2011 - 2018 - одноэтапная стратегия (отбор образцов через 24 часа от момента заготовки, объём образца - не менее 15 мл, метод испытания - автоматический анализатор гемокультур BacT/ALERT 3D с использованием двух культуральных флаконов: флаконы SA Culture Bottles (для выделения аэробных гемокультур) и флаконы SN Culture Bottles (для выделения анаэробных гемокультур), длительность инкубации - 7 суток;
2019 - 2021 - двухэтапная стратегия (отбор образцов через 24 часа от момента заготовки и в конце срока хранения, объём образца на каждом этапе контроля - не менее 15 мл, метод испытания - автоматический анализатор гемокультур BacT/ALERT 3D с использованием двух культуральных флаконов: флаконы SA Culture Bottles (для выделения аэробных гемокультур) и SN Culture Bottles (для выделения анаэробных гемокультур), длительность инкубации - 7 суток.
Результаты. Была проанализирована частота положительных результатов микробиологического анализа компонентов крови, отобранных в процессе их заготовки и в конце срока хранения в РНПЦ ТМБ.
В период с 2011 по 2015 год ежегодно регистрировалось от 3 до 5 случаев бактериальной контаминации компонентов крови (в основном за счёт эритроцитных компонентов, в меньшей степени тром-боцитных компонентов и компонентов плазмы), в 2016-2017 году регистрировались единичные случаи, а с 2018 года случаев бактериальной контаминации компонентов крови не фиксировалось, что явилось причиной пересмотра стратегии по оценке риска микробной контаминации компонентов крови в связи с возможным снижением её эффективности. После внедрения в 2019 году двухэтапной стратегии оценки риска микробной контаминации компонентов крови случаев бактериальной контаминации компонентов также не фиксировалось, однако было отмечено увеличение количества лож-ноположительных результатов при проведении испытаний тромбо-цитных и эритроцитных компонентов крови в конце срока хранения с использованием флаконов SN Culture Bottles (для выделения анаэробных гемокультур) на 11,3 % в сравнении с количеством лож-положительных результатов испытаний при проведении оценки риска микробной контаминации компонентов крови, отобранных через 24 часа от момента заготовки.
Выводы. Использование двухэтапного подхода, включающего отбор и анализ образцов для исследования через 24 часа от момента заготовки и в конце срока хранения, является эффективной стратегией микробиологического мониторинга компонентов крови в процессе заготовки.
Голованова И.С., Касьянов А.Д.
к вопросу о бактериальной безопасности концентрата тромбоцитов
ФГБУ «Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии федерального медико-биологического агентства»
Введение. Трансфузии концентрата тромбоцитов являются в настоящее время общепринятым методом профилактики и коррек-
ции геморрагического синдрома при тромбоцитопении у гематологических, онкологических, кардиохирургических пациентов, а так-
VII ВСЕРОССИЙСКАЯ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ С МЕЖДУНАРОДНЫМ УЧАСТИЕМ «ИНФЕКЦИИ И ИНФЕКЦИОННАЯ БЕЗОПАСНОСТЬ В ГЕМАТОЛОГИИ И СЛУЖБЕ КРОВИ»
же при проведении химио- и лучевой терапии, при трансплантации костного мозга и гемопоэтических стволовых клеток. В 2019 году в Российской Федерации (РФ) заготовлено 1012883 дозы концентрата тромбоцитов (КТ), что на 12,8% больше, чем в 2018 г. Поэтому большое внимание уделяется качеству и безопасности КТ. Качество и безопасность КТ складываются из нескольких аспектов: - соответствие и сохранность параметров в период хранения; - иммунологическая безопасность, - бактериальная безопасность, которая включает отсутствие бактериальной контаминации и снижение рисков передачи гемотрансмиссивных инфекций. Поэтому актуален поиск оптимальных способов заготовки и методов обработки концентрата тромбоцитов для максимального снижения риска посттрансфузионных реакций у пациентов связанными с бактериальной контаминацией и аллоиммунизацией. В значительной степени это достигается эффективным применением современного оборудования, рациональным использованием донорского потенциала, а также внедрением новых трансфузиологических технологий. Лейкодеплеция является одним из самых доступных методов повышения качества КТ, позволяющим снизить частоту трансфузи-онно-опосредованной иммуномодуляции, аллоимунизации к HLA антигенам класса I, развитие фебрильных посттрансфузионных негемолитических реакций, а также уменьшить риск передачи лейко-цитассоциированных инфекционных агентов.
Цель. Контроль качества концентрата тромбоцитов с целью недопущения бактериальной контаминации
Материалы и методы. Материалом для исследования являлись образцы КТ, полученные методом афереза, лейкоредуциро-ванные, заготовленные производственными подразделениями института. Образцы компонентов крови предназначались для выполнения лабораторных исследований контроля по безопасности и качеству, предусмотренными Правилами № 797. Исследуемыми параметрами КТ являлись: остаточные клетки (лейкоциты); количество тромбоцитов; рН (при +22 °С) в конце рекомендованного срока хранения, стерильность. Определение содержания тромбоцитов проводили на гематологическом анализаторе «Medonic M-Series» (Boule Medical AB, Швеция). Измерение рН КТ проводили с помощью
рН-метра (Starter 2100). Определение остаточных лейкоцитов проводили на аппарате для подсчета остаточных лейкоцитов «ADAM-rWBC». Стерильность
Результаты. В 2021 г. проведен контроль 28 компонентов КТ, полученных методом афереза, лейкоредуцированных, 9 компонентов, полученных методом афереза в добавочном растворе, 2 компонента патогенредуцированных. Все КТ полностью соответствуют требованиям отраженными в Правилах №797.
Технология двухэтапного лабораторного скрининга (серологический и тестирование нуклеиновых кислот (NAT) снижают, но не исключают вероятность передачи остаточного риска инфицирования. Это связано с ограничением чувствительности тест-систем, наличием «серонегативного окна». В мире регистрируется постоянное появление новых патогенов с фактическим или потенциальным риском трансфузионной передачи. Для снижения бактериальной и вирусной контаминации, повышения безопасности концентрата тромбоцитов при хранении, снижения аллоиммуниза-ции у пациентов, получающих многократные трансфузии КТ, применяется технология патогенредукция. В 2019 г. в РФ заготовлено 15,8% патогенредуцированных КТ от общего количества. Основными задачами патогенредукции является максимальное снижение патогенной нагрузки на компонент, инактивация остаточных донорских лейкоцитов, максимальная сохранность клеток и белков крови. В 2019 году в РФ заготовлено 7,9% облученных ТК от общего количества. Считается, что гамма- или ренгеновское облучение в дозе от 25 до50 Гр предотвращает развитие реакции «трансплантат против хозяина» за счет блокирования пролиферации тромбоцитов, при этом жизнеспособность и функции тромбоцитов сохраняются. В 2021 г. группой контроля качества проведен контроль 13 облученных компонентов КТ, но оценить качество в полном объеме невозможно. В руководящих документах отсутствуют критерии оценки данного компонента.
Выводы. Лейкофильтрационные технологии направлены на уменьшение риска передачи лейкоцитассоциированных инфекций. Для снижения бактериальной и вирусной контаминации наиболее надежно применение технологии инактивации патогенов.
М.В. Демин1, Д.С. Тихомиров1, Б.В. Бидерман1, О.А. Глинщикова1, М.Ю. Дроков1, А. Б. Судариков1,
Т.А. Туполева1, Ф.П. Филатов2,3
мутации в гене ul97 цитомегаловируса, ассоциированные с устойчивостью к ганцикловиру у реципиентов аллогенных стволовых
гемопоэтических клеток
1ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Москва
2 ФГБНУ «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова», г. Москва
Введение. Инфекция, вызываемая цитомегаловирусом (ЦМВ), является серьезной проблемой для больных с ослабленным иммунитетом. В ходе естественного мутационного процесса, а также при проведении длительной специфической противовирусной терапии, вирус может приобрести устойчивость к действию противовирусных препаратов, что не только осложняет течение инфекционного эпизода, но и требует коррекции терапевтической тактики. Большинство случаев возникновения устойчивых штаммов относятся к мутациям в вирусном гене ^97, кодирующем фосфотрансферазу. У иммуннокомпрометированных пациентов (реципиенты органов и тканей, ВИЧ-инфицированные) наиболее частыми являются следующие мутации: М4601Д С592^ А591У А594ТД L595F/S, С603М
Цель. Определение мутаций в гене фосфотрансферазы цитоме-галовируса, ассоциированных с устойчивостью к действию противовирусных препаратов у пациентов с гемобластозами после трансплантации аллогенных стволовых гемопоэтических клеток.
Материал и методы. В исследование были включены 9 образцов ДНК ЦМВ, выделенных из периферической крови 8 реципиентов алло-ГСК с ЦМВ-инфекцией, находившихся на лечении в клиниках ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России с 2016
по 2017 гг. Для поиска мутаций применяли метод секвенирования по Сенгеру. Полученную последовательность ДНК анализировали с помощью программного обеспечения nucleotide BLAST и Genome compiler. Поиск мутаций осуществлялся в программе MRA mutation resistance analyzer С помощью данного программного обеспечения сравнивали последовательности нуклеотидов с рефересной последовательностью UL97 штамма Merlin.
Результаты. Показано, что частота детекции вирусов с мутациями, потенциально ведущими к устойчивости, довольно высока - три случая из восьми. Были обнаружены следующие ранее описанные мутации: C592G, C607F и C603W. Был установлен временной промежуток, когда мутация возникла в геноме вируса. Полученные данные показали, что наличие и характер мутации влияет на вирусную нагрузку и длительность выявления в крови реципиентов ДНК ЦМВ.
Выводы. В статье представлены результаты определения в крови реципиентов аллогенных стволовых гемопоэтических клеток (алло-ГСК), ДНК цитомегаловируса и мутаций в гене вирусной фосфотрансферазы UL97, приводящих к устойчивости к действию противовирусных препаратов. В ходе исследования у трех пациен-
