CC BY
22
БИОМЕДИЦИНА | т.19«№3«2021 / BIOMEDICINE | УОМ9«№3«2021_
ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ / ORIGINAL ARTICLES DOI: 10.24412/1815-3917-2021-3-24-27
DOI: 10.24412/1815-3917-2021 -3-24-27
К вопросу чувствительности буккальных клеток к вирусу полиомиелита
Ф.Э.Садыхова1, Н.Ф.Муталибова1, Л.МАхмедова1, Ш.Ш.Байрамова2, Д.А.Кожевникова2, А.М. Алиева3, Э.А,Дадашев1, С.Г.Керимов1, Е.В.Маринченко1
1Азербайджанский институт усовершенствования врачей им А.Алиева, г.Баку, Азербайджан; 2НАН Азербайджанской Республики, институт геологии и геофизики, г. Баку, Азербайджан; Республиканский центр гигиены и эпидемиологии, г. Баку, Азербайджан
Резюме: Эта работа посвящена оценке популяции полиовирусов по количеству ядерных аномалий в буккальных эпителиальных клетках человека. Использовали восемь микроскопов и сканирующий избирательный микроскоп SEM, JEOL Japan Electron Optics Laboratory для анализа количества ядерных аномалий в буккальном эпителии человека, возникающих под воздействием полиовирусов (1 и 3 типы) по сравнению с нормальным состоянием клеток.
В ходе работы установлено количество ядерных аномалий в буккальных эпителиальных клетках человека с использованием теста Micronucleus.
Ключевые слова: буккальные эпителиальные клетки, световая микроскопия, сканирующий электронный микроскоп, SEM, микроядерный тест, вирусы полиомиелита.
Для цитирования: Садыхова Ф.Э., Муталибова Н.Ф., Ахмедова Л.М., Байрамова Ш.Ш., Кожевникова Д.А., Алиева А.М., Дадашев Э.А,, Керимов С.Г., Маринченко Е.В. К вопросу чувствительности буккальных клеток к вирусу полиомиелита. Биомедицина (Баку). 2021;19(3):24-27. DOI: 10.24412/1815-3917-2021-3-24-27
Поступила в редакцию: 22.06.2021. Принята в печать: 15.09.2021.
To the question of the sensitivity of buccal cells to the polio virus
Sadikhova F.E.1, Mutalibova N.F.1, Akhmedova L.M.2, Bairamova Sh.Sh.2, Kozhevnikova D.A.2, Alieva A.M.3, Dadashev E.A.1, Kerimov S.G.1, Marinchenko E.V.2
!A.Aliyev's Azerbaijan State Physicians Improvement Institute, Baku, Azerbaijan;
2Academy of Sciences of the Azerbaijan Republic, Institute of Geology and Geophysics, Baku, Azerbaijan; 3Republican Center for Hygiene and Epidemiology, Baku, Azerbaijan
Abstract: This work is devoted to assessing the polioviruses population on the number of nuclear abnormalities in human buccal epithelial cells. Eight microscopes were used and the Scanning Election Microscope SEM, JEOL Japan Electron Optics Laboratory to analyze the Number of nuclear abnormalities in human buccal epithelial that occur after viruses (Polio 1 and 3 types) influence in comparison with the normal cells state.
During the work it was established the number of nuclear abnormalities in human buccal epithelial cells with using Micronucleus Test.
Key words: Buccal epithelial cells, light microscopy, scanning electron microscope, SEM, micronucleus Test, poliomyelitis viruses.
For citation: Sadikhova F.E., Mutalibova N.F., Akhmedova L.M.,.Bairamova Sh.Sh., Kozhevnikova D.A., Alieva A.M., Dadashev E.A., Kerimov S.G., Marinchenko E.V To the question of the sensitivity of buccal cells to the polio virus. Biomedicine (Baku). 2021;19(3):24-27. DOI: 10.24412/1815-3917-2021-3-24-27
Received: 22.06.2021. Accepted: 15.09.2021.
Для корреспонденции: Садыхова Ф.Э.
Д.м.н., з.д.н., профессор кафедры микробиологии и эпидемиологии АзГИУВ им.А.Алиева Email: piraliyevayegana@mail.ru
Corresponding author: Sadikhova F.E.
Doctor of Medical Sciences, Honored Scientist, Professor, Microbiology and Epidemiology Chair, ASATID Email: piraliyevayegana@mail.ru
_БИОМЕДИЦИНА | т.19«№3«2021 / BIOMEDICINE | voM9«№3«2021
DOI: 10.24412/1815-3917-2021-3-24-27 ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ / ORIGINAL ARTICLES
С момента открытия вирусов актуален вопрос разработки методов выделения вирусов с последующим их изучением, что полагает поиск тканевых культур с чувствительностью к тем или иным вирусам, учитывая факт существования тропизма в их взаимодействии.
За последние десятилетия, следует отметить, стремительное развитие вирусологии, резко возросший удельный вес вирусных болезней в инфекционной патологии человека, что обусловливает целесообразность расширения исследований в плане выявления чувствительности различных клеток живых организмов к различного рода воздействиям и к вирусам, в том числе.
Известно, что действие, оказываемое вирусами на клетки, различно. У некоторых клеток не выявляется изменений, вызванных вирусами, и вообще присутствие вируса устанавливают другими методами.
Наряду с этим у многих клеток вирусы вызывают нарушения, как морфологического характера, так и обмена веществ. Морфологические изменения являются достаточно типичными для того, чтобы на этом основании идентифицировать вирусы. Но, следует, отметить, что несколько менее значительный тип поражений вызывают, к примеру, некоторые вирусы энцефалита. Этот тип поражений характеризуется субтотальной дегенерацией клеток, гибелью некоторых клеток и пикнозом ядер у других.
Учитывая вышеотмеченное, следует логичность изучения специфики цитопатогенного действия (ЦПД) вирусной популяции на различные клеточные структуры в целях расширения спектра чувствительных тканей. С этих позиций в последние годы внимание исследователей в качестве материала для неинвазивной экспресс-диагностики привлекает буккальный эпителий [1]. Кроме того, последний может служить источником важной диагностической и прогностической информации о состоянии здоровья, стрессовых воздействиях [2], влиянии факторов внешней среды [3], соматической патологии и биологического воздействия [4]. Кроме того, установлены их адгезивные свойства, что и было использовано при транс-буккальном приёме лекарственных срелств, перо-ральных вакцин и т.д. [5].
Исходя из вышеизложенного, целью настоящей работы было:
- изучение цитологических изменений бук-кального эпителия под воздействием вирусной популяции, в частности вирусов полиомиелита, с помощью микроядерного теста. При выполнении отмеченной установки были поставлены и выполне-
ны следующие задачи:
- приготовление микропрепаратов из буккаль-ных клеток для проведения микроядерного тесты [6];
- заражение буккальных клеток модельным вирусом полиомиелита - 1 и 3 типов, Sabin-вакцин-ного варианта по 0,05 мл с инкубацией в течение 12 часов в термостате при 37? с сохранением контрольных (незаражённых) клеток [7];
- выявление ядерных нарушений в клетках буккального эпителия с использованием световой и электронной микроскопии посредством ультрамикрофотографий изображений на сканирующем электронном микроскопе модели JEOL JSM 66110 ЦУ [8].
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ. Образцы клеток буккального эпителия были взяты у здоровых доноров соскобами с внутренней поверхности щеки с помощью стерильного шпателя. Далее, клетки окрашивали 0,76% раствором сухого красителя азур-эозина по Рамановскому-Гимза втечении 10 минут с последующей промывкой и просушкой.
Слущенные клетки вырашивали в стерильных флаконах с использованием питательной среды -сбалансированного солевого раствора Эрла (Earle) в термостатепри 37° [7] с последущим их просмотром под световым и электронным микроскопами [8].
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ. При проведении отмеченных исследований был применён микроядерный тест [1].
Были выялены морфологические аномалии ядра буккального эпителия под влиянием вирусной популяции, в частности под воздействием вирусов полиомиелита 1и 3 типов вакцинного варианта: цитогенетические:
- протрузии типа микроядра (А) и "разбитое яйцо" (Б);
- деструкционные - кариопикноз (В), кариоли-зис (Г);
- пролиферационные клетки, имеющие нарушения типа двухъядерные клетки (Д), ядро с пери-нуклеарной вакуолью (Е) (рисунок).
ВЫВОДЫ: В результате проведенных исследований впервые получены данные о влиянии вирусной популяции на буккальные эпителиальные клетки человека с определением специфики воздействия их (вирусов) на ядерном уровне, что выявляет факт возможного применения данного метода приэкспресс-диагностике состояния генетического аппарата человека, в частности его стабильности.
Кроме того, полученные данные о характере нарушений в ядребуккальных клеток являются по-
БИОМЕДИЦИНА I т.19^№3^2021 / BIOMEDICINE I vol.19^№3^2021
ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ / ORIGINAL ARTICLES
DOI: 10.24412/1815-3917-2021-3-24-27
А
Б
В
Г
Д
Е
Рис. 1. Окрашенные красителем клетки буккального эпителия человека с нарушениями:
А) микроядро; Б) протрузия типа "Разбитое яйцо"; В) кариопикноз; Г) кариолизис; Д) двухъядерная клетка;
Е) ядро с перинуклерной вакуолью.
казателем специфики вирусного воздействия с микроядерного теста выявили факт возможного
проявлением цитопатогенного эффекта (ЦПЭ), что применения данного метода как наиболее рента-
полагает пополнение спектра клеточных линий бельного метода экспресс-диагностики вирусных
для индикации вирусов из инфицированного мате- инфекций. риала. Результаты исследования с использованием
Литература / References
1. Sarto F et al. The micronucleus assay in exfoliated cells of the human buccal mucosa. Mutogenesis. 1987;2(1):11-17. DOI: 10.1093/mutage/2.1.11.
2. Баранов Д.Ю. Исследование влияния различных факторов на клетки буккального эпителия школьников с помощью микроядерного теста. Вестник науки и образования. 2019;9(63): 11-14. DOI: 10.24411/2312-8089-2019-1090
3. Прядко А.О., Морозов В.Н., Заболотная Н.В. и др. Микроскопические особенности буккального эпителия студентов-индусов в НИУ "БЕЛГУ". Научные результаты биомедицинских исследований. 2015, т.1, Вып. 4 DOI: 10.18413/2313-8955-2015-1-4-45-49
4. Калаев В.Н., Баранов Д.Ю., Гаврилова В.А., Лантушенко А.О. Исследование влияния магнитных бурь на состояние клеток буккального эпителия. Экологическая биофизика. Актуальные вопросы биологической физики и химии. 2018;3(4):906-909.
5. Композиция для буккального введения лекарственных средств и способ ее получения. Патент Российской Федерации. Номер патента: 2109509.
6. Калаев В.Н., Нечаева М.С., Калаева Е.А. Микроядерный тест буккального эпителия ротовой полости человека: Монография. Воронеж: Воронежский Государственный Университет. Издательский дом ВГУ. 2016; 136 с. https://biblioclub.ru/index.php?page=author red&id=127140
БИОМЕДИЦИНА | Т.19«№3«2021 / BIOMEDICINE | VOl.19*№3*2021
DOI: 10.24412/1815-3917-2021-3-24-27 ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ / ORIGINAL ARTICLES
7. Джон Пол. Культура клеток и тканей. Медгиз. 1963; 338 с. (John Paul Cell and tissue culture. Edinburgh and London, 1960)
8. Berechnung der Bahn von Kathodenstrahlen im axialsymmetrischen elektromagnetischen Felde. Annelender Physik. 1926;386:9740993. DOI: https://doi.org/10.1002/andp.19263862507
References
1. Sarto F et al. The micronucleus assay in exfoliated cells of the human buccal mucosa. Mutogenesis. 1987;2(1): 11-17. DOI: 10.1093/mutage/2.1.11.
2. Baranov D.Yu. Investigation of the effect of different factors of buccal cells of schoolchildren by using micronucleus test. Vestnik nauki i obrazovanija. 2019;9(63):11-14. (In Russian). DOI: 10.24411/2312-80892019-1090
3. Pryadko A.O., Morozova E.N., Zabolotnaya S.V., eat al. Microscopic features of buccal epithelium of the indian students studying at belgorod state national research university. Research Result. Medicine and Pharmacy Series. 2015;1(4):42-49 (In Russian).DOI: 10.18413/2313-8955-2015-1-4-45-49
4. Kalaev V.N., Baranov D.Ju., Gavrilova V.A., Lantushenko A.O. [Issledovanie vliyaniya magnitnyh bur na sostoyanie kletok bukkalnogo epiteliya]. Ekologicheskaya biofizika. Aktualnye voprosy biologicheskoy fiziki i khimii. 2018;3(4):906-909.
5. Kompoziciya dlya bukkalnogo vvedeniya lekarstvennykh sredstv i sposob ee polucheniya. Patent Rossiyskoy Federacii. Nomer patenta: 2109509.
6. Kalaev V.N., Nechaeva M.S., Kalaeva E.A. Mikroyadernyj test bukkalnogo epiteliya rotovoy polosti che-loveka: Monografiya. Voronezh: Voronezhskij Gosudarstvennyj Universitet. Izdatelskij dom VGU. 2016; 136 p. https://biblioclub.ru/index.php?page=author_red&id= 127140
7. John Paul. Cell and tissue culture. Medgiz. 1963; 338 p., 95-99 (In Russian).
8. Berechnung der Bahn von Kathodenstrahlen im axialsymmetrischen elektromagnetischen Felde. Annelender Physik. 1926;386:9740993. DOI: https://doi.org/10.1002/andp.19263862507
Информация о соавторах: Н.Ф.Муталибова
Доктор философии по медицине, заведующая кафедрой микробиологии и эпидемиологии, АзГИУВ им А.Алиева, г Баку, Азербайджан Л.М.Ахмедова
Доктор философии по медицине, ЦНИЛ АзГИУВ им
А.Алиева, г. Баку, Азербайджан
Ш.Ш.Байрамова
Доктор философии по геологии, заведующая отделом палеоантологии Института Геологии и Геофизики НАНА, г. Баку, Азербайджан Д.А.Кожевникова
Младший научный сотрудник отдела литогенеза нефте-газаносных бассейнов Института Геологии и Геофизики НАНА, г. Баку, Азербайджан А.М.Алиева
Эпидемиолог отдела эпидемиологии Республиканский центр гигиены и эпидемиологии, г. Баку, Азербайджан Э.А.Дадашев
Ассистент кафедры микробиологии и эпидемиологии АзГИУВ им А.Алиева, г. Баку, Азербайджан С.Г.Керимов
Ассистент кафедры микробиологии и эпидемиологии, АзГИУВ им А.Алиева, г. Баку, Азербайджан Е.В.Маринченко
Старший преподаватель кафедры фармация, АзГИУВ им А.Алиева, г. Баку, Азербайджан
Information about authors: Mutalibova N.F.
PhD in Medicine, Head of Microbiology and Epidemiology Chair, A.Aliyev's Azerbaijan State Physicians Improvement Institute, Baku, Azerbaij an Akhmedova L.M.
PhD in Medicine, CSRL of A.Aliyev's Azerbaijan State Physicians Improvement Institute, Baku, Azerbaijan Bairamova Sh.Sh.
PhD in Geology, Head of Paleonthology Department, Institute of Geology and Geophysics, National Academy of Scinces, Baku, Azerbaijan Kozhevnikova D.A.
Junior Researcher, Oil-Gaz Fields Litogenesis Department, Institute of Geology and Geophysics, National Academy of Scinces, Baku, Azerbaijan Alieva A.M.
Epidemiologist, Epidemiology Department, Republic Center of Epidemiology and Hygene, Baku, Azerbaijan Dadashev E.A.
Assistant of Microbiology and Epidemiology Chair, A.Aliyev's Azerbaijan State Physicians Improvement Institute, Baku, Azerbaijan Kerimov S.G
Assistant of Microbiology and Epidemiology Chair, A.Aliyev's Azerbaijan State Physicians Improvement Institute, Baku, Azerbaijan Marinchenko E.V
Senior Teacher, Pharmacia Chair, A.Aliyev's Azerbaijan State Physicians Improvement Institute, Baku, Azerbaijan
