CC BY
10
| SCIENCE TIME |
К ВОПРОСАМ СТАНДАРТИЗАЦИИ СУХОГО ЭКСТРАКТА НОВОГО ОТХАРКИВАЮЩЕГО СБОРА
Мустафаев Умматжон Гайрат угли, Мухамедова Мавжуда Шамуратовна, Ташкентский фармацевтический институт,
г. Ташкент, Узбекистан
E-mail: iroda.shermatova.94@mail.ru
Аннотация. В результате проведенного исследования показано, что сухой экстракт, полученный из нового отхаркивающего сбора, в полной мере соответствует требованиям, предъявляемым к лекарственным растительным средствам в отношении их микробиологической чистоты, а также к содержанию токсичных тяжелых металлов.
Ключевые слова: сухой экстракт, отхаркивающий сбор, микробиологическая чистота, тяжелые металлы.
Ранее авторами был получен сухой экстракт на основе компазиции, включающей листья подорожника большого, мать-и-мачехи и траву душицы мелкоцветной.
Целью настоящего исследования является определение микробиологической чистоты экстракта, а также содержания токсичных тяжелых металлов.
Экспериментальная часть. Объектом исследования служили пять образцов сухого экстракта на основе нового отхаркивающего сбора. Принимая во внимание, что лекарственные средства, в том числе растительные, не стерилизуемые в процессе производства, могут быть контаминированы микроорганизмами, на первом этапе проведено испытание сухого экстракта на микробиологическую чистоту согласно указаниям статьи ГФ XI «Методы микробиологического контроля лекарственных средств» и Изменения №2 от 12.10.2005г., категория 4А. Испытание на микробиологическую чистоту проводили официальным двухслойным агаровым методом в чашках Петри диаметром 90-100 мм. Образец сухого экстракта в количестве 10 г суспензировали в фосфатном буферном растворе (рН 7.0) так, чтобы конечный
1 SCIENCE TIME 1
объем суспензии был 100 мл. Приготовленную суспензию образца вносили в каждую из двух пробирок с 4 мл расплавленной и охлажденной до температуры от 45° до 50°С среды №1 (соево-казеиновый агар). Быстро перемешивали содержимое пробирок и переносили в чашки Петри, содержащие 15-20 мл соответствующей питательной среды. Быстрым покачиванием чашек Петри равномерно распределяли верхний слой агара. После застывания среды чашки переворачивали и инкубировали в течение 5 суток при температуре 35°С. Посевы просматривали ежедневно. Через 48 ч и окончательно через 5 суток подсчитали число бактериальных колоний на двух чашках, находили среднее значение и, умножая на показатель разведения, вычисляли число микроорганизмов в 1 г образца. Определение общего числа грибов проводили описанным выше агаровым методом, используя среду Сабуро. Выявление и идентификацию бактерий семейства Enterobacteriaceae, а также Pseudomonas aeruginosa и Staphylococcus aureus проводили в соответствии с требованиями ГФ XI.
Результаты испытаний обобщены в таблице 1.
Таблица 1
Показатели микробиологической чистоты сухого экстракта нового отхаркивающего сбора
Показатели Требования нормативных документов (ГФ^^ вып. 2, с 193.) Результаты анализа Соответствие требованиям НД
Общее число аэробных бактерий (в 1г образца) Не более 105 (суммарно) Менее 10 КОЕ Соответствует
Общее число дрожжевых и плесневых грибов ( в 1г образца) Не более 104 (суммарно) 10 КОЕ Соответствует
Enterobacteriaceae, Pseudomonas аeruginosa и Staphylococcus aureus Должны отсутствовать Отсутствуют Соответствует
1 SCIENCE TIME 1
Исходя из полученных данных, можно заключить, что сухой экстракт нового отхаркивающего сбора в полной мере соответствует требованиям, предъявляемым к лекарственному растительному сырью в отношении его микробиологической чистоты.
Как известно, в результате интенсивных антропогенных воздействий на окружающую среду в растительном сырье может наблюдаться повышенное содержание ряда химических элементов [1]. Поэтому при определении качества исследуемого сухого экстракта особое внимание уделено установлению содержания токсичных тяжелых металлов - свинца и кадмия, которые объединенная комиссия ФАО и ВОЗ по пищевому кодексу (Codex Alimentaris) относит к числу компонентов, подлежащих первоочередному контролю при международной торговле продуктами питания [2, 3].
Требования к содержанию тяжелых металлов и методика их определения -согласно ГФ XI издания. К 1г сухого экстракта прибавляют 1 мл концентрированной серной кислоты, осторожно сжигают, прокаливают. Полученный остаток обрабатывают при нагревании 5 мл насыщенного раствора аммония ацетата, фильтруют через беззольный фильтр, промывают 5 мл воды и доводят объём фильтрата водой до 200 мл. 10 мл полученного раствора должны выдерживать испытание металлы (не более 0,01% в препарате).
Определение тяжелых металлов проводили методом атомно-абсорбционной спектрометрии (прибор Shimadzu 6501 S) с пламенной и беспламенной атомизацией.
Подготовка пробы экстракта к измерениям. Для проведения измерений содержания тяжелых металлов навеску (1 г) экстракта растворяли в очищенной воде (10 мл), подкисляли концентрированной азотной кислотой (0,1 мл азотной кислоты).
Определение свинца, кадмия. Определение свинца выполняли в беспламенном режиме при атомизации в графитовой печи атомно-абсорбционного спектрофотометра в потоке аргона. Диапазон измеряемых концентраций свинца 0,1 ppb - 20 ppb. Диапазон измеряемых концентраций кадмия 0,003 - 1,0 ppb.
Проведение измерений. Атомно-абсорбционный спектрофотометр подготавливали к работе в соответствии с техническим описанием и инструкцией по его эксплуатации. Измерения проводили при следующих условиях:
1 SCIENCE TIME 1
свинец
- ток лампы с полым катодом 10 цА;
- длина волны резонансной линии 283,3 (217,0) нм;
- ширина щели 0,5 нм;
- объемный расход аргона 1,0 дм / мин;
- температура атомизации 1800 °С;
- время атомизации 46 s. кадмий
- ток лампы с полым катодом 8 цА;
- длина волны резонансной линии 228,8 нм;
- ширина щели 0,2 нм;
- объемный расход аргона 1,0 дм / мин;
- температура атомизации 1500 °С;
- время атомизации 46 s. цинк
- ток лампы с полым катодом 8 цА;
- длина волны резонансной линии 213,9 нм;
- высота горелки 6 нм;
- ширина щели 0,5 нм;
- объемный расход ацетилена 2,0 дм /мин;
Для учета неселективного поглощения спектрофотометр снабжен оптическим корректором, дейтериевой лампой.
Градуировку прибора проводили по серии растворов сравнения, приготовленных разбавлением ГСО.
После построения градуировочного графика в графитовую печь последовательно вводились приготовленный подкисленные экстракты из растительных образцов. По градуировочному графику определяли массовую долю металла в пробе. Для этого, пипеткой от полученного раствора отбирали определенный объем У1 и разбавляли до объема У2, (кратность разбавления г = У2/У1). Если этого разбавления было недостаточно, то из уже разбавленного раствора пипеткой отбирали объем У3 и доводили до объема У4, (кратность разбавления г = У2 /У1 У4/У3). Содержание металла в разбавленной пробе находили по графику.
| SCIENCE TIME |
Массовую долю элемента в анализируемой пробе экстракта (мг/мл) рассчитывали по формуле:
a ■ r
C = ■
1000
где: а - массовая доля металла в вытяжке, наиденная по градуировочному графику, мг/л; г - кратность разбавления пробы (если исследуемую пробу не разбавляют г =1).
Результаты испытании обобщены в таблице 2.
Таблица 2
Результаты анализа сухого экстракта нового отхаркивающего сбора
Определямые элементы Предельно допустимые концентрации продуктах питания,ppmb Фактическое содержание в исследуемом сырье
Cd 0,50 0,4
Zn 0,03 0,004
Выводы. В результате проведенных исследований установлено, что сухой экстракт, полученный из нового отхаркивающего сбора, в полной мере соответствует требованиям, предъявленным к лекарственным растительным средствам в отношении их микробиологической чистоты, а также содержания токсичных металлов.
Литература:
1. Листов С.А., Непесов Г.А., Сахатов Э.С. Содержание тяжелых металлов в настоях и отварах из лекарственного растительного сырья // Фармация. - 1992. -№ 4. - С. 37-41.
2. Вайцеховская Е.Р. Антропогенное воздействие на некоторые виды лекарственных растений Прибайкалья. - Новосибирск, 1994. - С. 135-139.
3. J. Howenstine. Codex Alimentaris Ends US Supplements in 2005. - URL: http:// www.naturalhealthyteam.com
