CC BY
5Ветеринарный врач. 2023. № 1. С. 57 - 63. The Veterinarian. 2023; (1): 57 - 63
Научная статья
УДК 619:615.9:616.36
DOI: 10.33632/1998-698Х_2023_1_57
Изучение защитного действия профилактических комплексов на ультраструктуру гепатоцитов
кроликов при сочетанном микотоксикозе
Евгения Юрьевна Тарасова, Глеб Сергеевич Кашеваров, Вадим Расимович Сайтов, Ксения Витальевна Перфилова, Айнур Ильнурович Яруллин
Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности», Казань, Россия, Автор, ответственный за переписку: Евгения Юрьевна Тарасова, evgenechka1885@gmail.com
Аннотация. Микотоксины оказывают значительное влияние на здоровье и продуктивность животных, а также качество и безопасность продуктов и кормов, что ведет к необходимости исследований по детальному изучению механизма действия и поиску эффективных средств профилактики микотоксикозов. Целью работы являлось изучение влияния разработанных в ФГБНУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности» профилактических комплексов на ультраструктуру печени и морфометрические характеристики митохондрий кроликов при сочетанном воздействии микотоксинов (Т-2 токсин, афлатоксин В1, зеараленон). Исследования по определению защитного эффекта профилактических комплексов при смешанном микотоксикозе на ультраструктуру гепатоцитов выполнены на 96 кроликах породы шиншилла, разделенных на восемь групп по двенадцать особей в каждой. Показано, что при одновременной интоксикации микотоксинами в высоких дозах в гепатоцитах наблюдаются изменения ультраструктуры ядер: появляются ядра с нехарактерными очертаниями или нетипичной формы, когда во внешнем контуре некоторых ядер возникают впадины и неровности, но при этом не изменяется структура перинуклеарного пространства, происходит переориентация и даже дезинтеграция хроматина, изменяются морфометрические характеристики митохондрий (периметр, площадь и диаметр). При этом наиболее выраженный защитный эффект на исследованные клеточные структуры показал профилактический комплекс № 3, включающий галлуазит, метионин, Р-глюканы, шрот расторопши.
Ключевые слова: кролики, микотоксины, профилактика, печень, ультраструктура, гепатоциты, митохондрии, морфометрия
Study of the protective effect of prophylactic complexes on the ultrastructure of rabbits hepatocytes with combined mycotoxicosis
Evgenya Yu. Tarasova , Gleb S. Kashevarov, Vadim R. Saitov, Ksenia V. Perfilova, Ainur I. Yarullin
Federal State Budgetary Scientific Institution «Federal Center for toxicological, radiation, and biological safety», Kazan, Russia.
Corresponding author: Evgenya Yurievna Tarasova, evgenechka1885@gmail.com
Abstract. Mycotoxins have a significant impact on the health and productivity of animals, as well as the quality and safety of food and feed, which leads to the need for research on a detailed study of the mechanism of action and the search for effective means of preventing mycotoxicoses. The aim of the work was to study the effect of prophylactic complexes developed at the Federal State Budgetary Scientific Institution «Federal Center for Toxicological, Radiation and Biological Safety» on the liver ultrastructure and morphometric characteristics of rabbit mitochondria under combined exposure to mycotoxins (T-2 toxin, aflatoxin B1, zearalenone). Studies to determine the protective effect of prophylactic complexes in mixed mycotoxicosis on the ultrastructure of hepatocytes were performed on 96 chinchilla rabbits, divided into eight groups of twelve individuals each. It has been shown that with simultaneous intoxication with high doses of mycotoxins, changes in the ultrastructure of the nuclei are observed in hepatocytes: nuclei with uncharacteristic
outlines or atypical shapes appear, when cavities and irregularities appear in the outer contour of some nuclei, but the structure of the perinuclear space does not change, reorientation and even chromatin disintegration, morphometric characteristics of mitochondria change (perimeter, area and diameter). At the same time, the most pronounced protective effect on the studied cellular structures was shown by the prophylactic complex No 3, including halloysite, methionine, P-glucans, milk thistle meal.
Keywords: rabbits, mycotoxins, prevention, liver, ultrastructure, hepatocytes, mitochondria, morphometry
Введение. Микотоксины представляют собой вторичные метаболиты, химически и токсикологически гетерогенные, вырабатываемые в результате метаболизма плесневых грибов [1, 6, 8]. Глобальное появление микотоксинов в пищевых продуктах приводит к экономическим проблемам и проблемам со здоровьем, как у людей, так и у животных. Важно отметить, что микотоксины загрязняют около 75 % всех зерновых, производимых в мире [19]. При этом может возникать совместное присутствие нескольких микотоксинов в пище, что потенциально усиливает токсические эффекты за счет аддитивных или синергетических механизмов [14, 15]. Одновременное присутствие нескольких микотоксинов обнаруживается примерно в 55 % зерновых [16, 17, 20]. Более того, учитывая, что многие зараженные злаки могут быть объединены в определенный продукт, совместное присутствие микотоксинов становится еще более вероятным.
Представители двух родов грибов (Aspergillus и Fusarium) являются основными продуцентами наиболее часто обнаруживаемых в пищевых продуктах микотоксинов (Т-2 токсина, афлатоксина В1 и зеараленона) [5, 9].
Афлатоксин B1 является высокотоксичным микотоксином, обладающим канцерогенным потенциалом. Он проявляет гепатотоксические, иммунотоксические, мутагенные, канцерогенные и тератогенные свойства у многих видов животных [3, 12].
Зеараленон имеет сходную структуру с эстрогеном и, таким образом, конкурирует с 17-Р-эстрадиолом за связывание с рецептором эстрогена, что приводит к нарушениям фертильности и репродуктивности у домашнего скота [10].
T-2 является наиболее токсичным членом трихотеценового семейства микотоксинов, ингибируют синтез ДНК, РНК, белка и индуцирует фрагментацию ДНК, вызывая острые или хронические интоксикации у человека и животных [2, 7, 11, 13].
Одним из основных вопросов, связанных с микотоксинами, является механизм их действия на молекулярном уровне, что необходимо для создания эффективных средств лечения и профилактики микотоксикозов. В связи с этим, целью работы являлось изучение влияния разработанных в ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» профилактических комплексов на ультраструктуру печени и морфометрические характеристики митохондрий кроликов при сочетанном воздействии микотоксинов (Т-2 токсин, афлатоксин В1, зеараленон).
Материалы и методы. Работа выполнена на 96 кроликах породы шиншилла живой массой 1,71,9 кг, полученных из вивария ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» и разделенных на восемь групп по двенадцать кроликов в каждой.
Микотоксины добавляли в основной рацион путем ступенчатого перемешивания (афлатоксин В1 - 0,3 мг/кг, Т-2 токсин - 1,2 мг/кг и зеараленон - 1,7 мг/кг корма) в течение 21 сут. Дозы были выбраны исходя из принципа «наихудшего сценария» возможной контаминации микотоксинами в производственных условиях. Биологическим контролем служила первая группа кроликов, токсическим контролем - вторая группа. Кролики 3-5 групп дополнительно к основному рациону получали профилактические комплексы № 1, № 2, № 3 в дозе 0,25 % от рациона (соответственно № 1 - Р-глюканы, шрот расторопши, витамин Е, аскорбиновая кислота, левамизол; № 2 - бентонит, янтарная кислота, метилурацил; витамин А, пробиотический препарат «Флорин»; № 3 -галлуазит, метионин, Р-глюканы, шрот расторопши). Кролики 6-8 групп дополнительно к токсичному рациону получали, соответственно, профилактический комплекс № 1, № 2 и № 3 в дозировке аналогичной таковой для 3-5 групп.
Целью работы являлась оценка действия разработанных в ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» профилактических комплексов на ультраструктуру гепатоцитов кроликов. Для этого на 21 сут опыта отбирали и обрабатывали в соответствии со стандартными электронно-микроскопическими методиками кусочки печени размером до 1 мм3 [4]. Данные методики включают фиксацию в глутаровом альдегиде, получение ультратонких срезов (толщиной до 80 нм), монтаж срезов на медной сеточке с последующим контрастированием солями металлов (уксуснокислый уранил и лимоннокислый свинец) и просмотр полученных препаратов на просвечивающем электронном
микроскопе. Фотографии изготавливались на ортохроматической фототехнической плёнке, затем сканировались и подвергались морфометрической обработке стандартными средствами программы FIJI/ImageJ [18]. Обработка первичных данных и статистические тесты проводились в программных средах MS Excel и Statistica 6.0.
Для морфометрического анализа были выбраны следующие показатели: площадь, периметр, большой диаметр Фере (калиперометрический диаметр), а также коэффициент сферичности (C=4n(S/P2), где C - коэффициент сферичности, S - площадь, P - периметр). Для всех величин вычислялись средние значения M (в качестве показателя варьирования использована величина выборочного стандартного отклонения - Sd).
Алгоритм статистической обработки состоял в следующем:
- проверка распределения значений переменных на нормальность посредством теста Колмогорова-Смирнова,
- выбор и проведение однофакторного теста для множества несвязанных выборок на основании типа распределения,
- проведение апостериорного теста для попарного сравнения несвязанных выборок (вариативно на основании результатов предыдущего теста) для интересующих групп. В частности проводилось сравнение показателей группы биологического контроля со всеми остальными группами, а также показателей группы токсического контроля с показателями групп животных, получавших профилактические комплексы на фоне смешанного микотоксикоза.
Поскольку распределение в большинстве полученных нами выборок отличалось от нормального, для проверки статистических гипотез был выбран критерий Краскела-Уоллиса с апостериорным тестом Манна-Уитни. Исходя из количества проведённых статистических тестов, пороговый уровень статистической значимости а=0,05 был скорректирован нами до а«0,0015.
Результаты исследований. На полученных нами электронограммах (микрофотографиях) наблюдается следующая объективная картина. В группе биологического контроля ядра округлой (характерной) формы, визуализируются ядерные поры. Ядра средней электронной плотности, преобладает эухроматин (небольшие участки гетерохроматина располагаются по периферии). Матрикс митохондрий хлопьевидный, кристы не просматриваются. В цитоплазме хорошо развита эндоплазматическая сеть.
В группе токсического контроля (животные, получавшие в дополнение к основному рациону смесь микотоксинов) отмечается деформация ядер гепатоцитов (ядра с изломами и впадинами по контуру). В ядрах происходит переориентация и дезинтеграция хроматина (хроматин практически однороден фактически по всему ядру, гетерохроматин выражен слабо), но при этом отмечается наличие ядрышек. Цитоплазма вакуолизирована, содержит мало гликогена, но в ней встречаются крупные жировые включения. Митохондрии характеризуются наибольшим отличием морфометрических характеристик от группы биологического контроля среди всех исследованных групп, причём отличия от характеристик биологического контроля подтверждаются статистическими методами.
Группы контроля безвредности (основного рациона с комплексами лекарственных препаратов №1-3) не показали существенных отличий от группы биологического контроля ни по внешним признакам, ни по результатам анализа морфометрических признаков.
Гепатоциты кроликов групп, получавших профилактические средства № 1 и № 2 на фоне смешанного микотоксикоза, показывали схожие между собой изменения. Ядра гепатоцитов в основном характерные - округлые (но встречаются и неправильной формы). Перинуклеарное пространство не увеличено. Ядерные поры просматриваются, хроматин в целом конденсированный, средней электронной плотности, встречаются ядрышки. Цитоплазма с характерными электронно-плотными структурами. Эндоплазматическая сеть выражена нечетко, фрагментарно. Матрикс митохондрий хлопьевидный, кристы не видны. Обе группы показывают статистически значимые отличия от группы биологического контроля по показателям площади и периметра митохондрий (и не отличаются значимо от группы токсического контроля по этим признакам).
В группе животных, получавших на фоне смешанного микотоксикоза профилактический комплекс № 3, гепатоциты обладают округлыми ядрами с видимыми ядерными порами, в целом конденсированным хроматином и перинуклеарным пространством нормальной ширины. Митохондрии с плотным матриксом, кристы не выявляются. Эндоплазматическая сеть выражена небольшими фрагментами. По морфометрическим показателям митохондрии гепатоцитов кроликов данной группы не отличаются от группы биологического контроля, при этом показывают значимые отличия от группы токсического контроля (рисунок 1).
Шгп:шт п ЭПС ■ шжщшш' * - о Ядр Ядро О Ядро ■ * - ДдоЯИЬ зле РЩЩ 3 - . л • ■ * 1
кя эпс ЫУН м . ' — ни шк 0 Ядро ДНУ". ядр □ Ядро г' " О
м - митохондрии, ЭПС - эндоплазматическая сеть, ядр - ядрышко, А - группа биологического контроля, Б - группа токсического контроля, В-Д - группы, получавшие дополнительно к основному рациону профилактические комплексы (ПК №2 1, ПК №2 2, ПК № 3), Е-З - группы, получавшие профилактические средства (ПС № 1, ПС № 2, ПС № 3) дополнительно к токсическому рациону
Рисунок 1 - Фрагменты гепатоцитов кроликов из различных групп
Морфометрические показатели митохондрий гепатоцитов кроликов представлены в таблице 1.
Таблица 1 - Морфометрические показатели митохондрий гепатоцитов кроликов
Группа Площадь*, дм2 Периметр*, дм Диаметр Фере*, дм Сферичность
БК 0,29(0,19)Ь 1,91(0,7)Ь 0,69(0,29)Ь 0,94(0,1)
ТК 0,16(0,16)а 1,36(0,88)а 0,51(0,36)а 0,9(0,14)
ТК+ПК № 1 0,15(0,07)а 1,41(0,45)а 0,52(0,19)а 0,91(0,11)
ТК+ПК № 2 0,23(0,21)а 1,7(0,77)а 0,64(0,33) 0,91(0,13)
ТК+ПК № 3 0,19(0,14)Ь 1,5(0,55)Ь 0,55(0,23)Ь 0,94(0,07)
БК+ПК № 1 0,23(0,13) 1,73(0,59) 0,64(0,27) 0,92(0,11)
БК+ПК № 2 0,22(0,12) 1,68(0,49) 0,62(0,2) 0,93(0,09)
БК+ПК № 3 0,24(0,14) 1,78(0,63) 0,65(0,27) 0,93(0,11)
Примечания 1 - БК - группа биологического контроля.
2 - ТК - группа токсического контроля.
3 - БК+ПК №1-№3 - группы, профилактических комплексов (№1-№3). 4 - ТК+ПК №1-№3 - группы, получавшие в дополнение к основному рациону один из получавшие один из профилактических комплексов (№1-№3)
дополнительно к токсическому рациону.
5 - * - наличие значимых межгрупповых отличий в тесте Краскела-Уоллиса.
6 - а - значимые отличия от группы биологического контроля в тесте Манна-Уитни.
7 - Ь - значимые отличия от группы токсического контроля в тесте Манна-Уитни.
Заключение. Таким образом, изучение (с применением морфометрического анализа) электронно-микроскопических снимков показало, что при одновременной интоксикации микотоксинами (Т-2 токсином, афлатоксином В1, зеараленоном) в гепатоцитах наблюдаются изменения ультраструктуры ядер: появляются ядра с нехарактерными очертаниями или нетипичной формы, когда во внешнем контуре некоторых ядер появляются впадины и неровности, но при этом не изменяется структура перинуклеарного пространства, кроме этого в ядрах происходит переориентация и даже дезинтеграция хроматина, изменяются морфометрические характеристики митохондрий (периметр, площадь и диаметр). При этом наиболее выраженным защитным эффектом на исследованные клеточные структуры (приближая их характеристики к таковым биологического контроля) обладал профилактический комплекс № 3.
Литература
1. Баскова, E. Ю. Применение энтеросорбентов на основе нанотехнологий для борьбы с микотоксикозами животных / E. Ю. Баскова // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н. Э. Баумана. - 2008. - Т. 192. - С. 234.
2. Валиев, А. Р. Иммуносупрессия в патогенезе Т-2 микотоксикоза и её фармакокоррекция / А. Р. Валиев, Э. И. Семёнов, Ф. Г. Ахметов // Ветеринарный врач. - 2011. - № 2. - С. 4-б.
3. Гулюшин, С. Ю. Доноры метильных групп - перспективные средства для профилактики хронических микотоксикозов / С. Ю. Гулюшин, Р. А. Зернов // Сельскохозяйственная биология. - 2011. - № 2. - С. 21-31.
4. Методические рекомендации по электронно-микроскопическим исследованиям биологических объектов / А. В. Иванов, А. А. Иванов, А. Н. Чернов [и др.]. - Казань : Росинформагротех, 2011. - 67 с.
5. Нанотрубки галлуазита - новое эффективное средство для борьбы с микотоксикозами / E. Ю. Тарасова, Э. И. Семенов, Л. E. Матросова [и др.] // Научная жизнь. - 2020. - Т. 15, № 4 (104). - С. 5б1-571.
6. Оценка токсичности кормов по регионам Российской Федерации / С. А. Семенова, Р. М. Потехина, Э. И. Семенов [и др.] // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н. Э. Баумана. - 2015. - Т. 224, № 4. - С. 196-199.
7. Папуниди, Э. К. Ветеринарно-санитарная экспертиза мяса овец при остром и подостром Т-2 микотоксикозе на фоне применения лекарственных средств / Э. К. Папуниди, М. Я. Тремасов, E. Ю. Тарасова // Ветеринарный врач. - 2010. - № 2. - С. 21-23.
8. Случай микоза птиц, вызванный токсигенным изолятом Fusarium proliferatum / Р. М. Потехина, Л. E. Матросова, E. Ю. Тарасова [и др.] // Вестник Марийского государственного университета. Серия: Сельскохозяйственные науки. Экономические науки. - 2019. - Т. 5, № 3 (19). -С. 316-322.
9. Сравнительная оценка адсорбирующей активности дрожжей по отношению к микотоксинам / Э. И. Семенов, Л. E. Матросова, E. Ю. Тарасова [и др.] // Вестник Казанского технологического университета. - 2013. - Т. 16, № 10. - С. 195-197.
10. Тарасова, E. Ю. Изучение сорбционной активности нанотрубок галлуазита по отношению к зеараленону и охратоксину А / E. Ю. Тарасова // Вестник Марийского государственного университета. Серия: Сельскохозяйственные науки. Экономические науки. - 2021. - Т. 7, № 1 (25). -С. 64-70.
11. Тарасова, E. Ю. Изыскание средств для лечения животных при Т-2 микотоксикозе : специальность 06.02.03 «Ветеринарная фармакология с токсикологией», 06.02.02 «Ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология» : диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук. - Казань, 2010. - 209 с.
12. Тремасов, М. Я. Опыт применения пробиотика при микотоксикозах / М. Я. Тремасов, Л. E. Матросова, E. Ю. Тарасова // Вестник ветеринарии. - 2009. - № 3 (50). - С. 38-41.
13. Цитотоксическая активность Т-2 токсина к перевиваемым культурам клеток эпителия легкого эмбриона крупного рогатого скота / И. И. Идиятов, Л. Р. Валиуллин, В. В. Бирюля [и др.] // Гены и Клетки. - 2017. - Т. 12, № 1. - С. 41-4б.
14. Экспериментальный сочетанный микотоксикоз свиней на фоне инфекционной нагрузки / Э. И. Семёнов, Л. E. Матросова, С. А. Танасева [и др.] // Сельскохозяйственная биология. - 2022. - Т. 57, № 2. - С. 371-383.
15. Эффективность адсорбентов при сочетанном микотоксикозе цыплят-бройлеров / С. А. Танасева, E. Ю. Тарасова, Л. E. Матросова [и др.] // Международный вестник ветеринарии. - 2020. - № 4. - С. 50-5б.
16. Co-Occurrence of Mycotoxins in Cereal-Based Feed and Food / R. Palumbo, A. Crisci, A. Venâncio [et al.] // Microorganisms. - 2020. - N 8. - Р. 74.
17. Enterosorbent efficiency mineral attenuation during pig mycotoxicosis / L. E. Matrosova, N. N. Mishina, S. A. Tanaseva [et al.] // International Journal of Mechanical and Production Engineering Research and Development. - 2020. - Vol. 10. - P. 1851.
18. Fiji: an open-source platform for biological-image analysis / J. Schindelin, I. Arganda-Carreras, E. Frise [et al.] // Nature methods. - 2012. - Vol. 9, No 7. - Р. 676-б82.
19. Recent advances in assessing the effects of mycotoxins using animal models / A. F. Furian, M. R. Fighera, L. F. Royes [et al.] // Current Opinion in Food Science. - 2022. - Vol. 47. - 100874.
20. Zeolite, hepatoprotector and probiotic for aflatoxicosis in pigs international / L. E. Matrosova, S. A. Tanaseva, E. Y. Tarasova [et al.] // International Journal of Mechanical and Production Engineering Research and Development. -2020. - Vol. 10. - P. 7053.
References
1. Baskova, E. Yu. The use of enterosorbents based on nanotechnologies for the control of animal mycotoxicoses / E. Yu. Baskova // Scientific notes of the Kazan State Academy of Veterinary Medicine named after N. E. Bauman. - 2008. - Vol. 192. - P. 234.
2. Valiev, A. R. Immunosuppression in the pathogenesis of T-2 mycotoxicosis and its pharmacocorrection / A. R. Valiev, E. I. Semyonov, F. G. Akhmetov // The veterinarian. - 2011. - No 2. - P. 4-6.
3. Gulyushin, S. Yu. Donors of methyl groups - promising means for the prevention of chronic mycotoxicoses / S. Yu. Gulyushin, R. A. Zernov // Agricultural biology. - 2011. - No 2. - P. 21-31.
4. Guidelines for electron microscopic studies of biological objects / A. V. Ivanov, A. A. Ivanov, A. N. Chernov [et al.]. - Kazan : Rosinformagrotech, 2011. - 67 p.
5. Nanotubes of halloysite as a new effective tool for combating mycotoxicoses / E. Yu. Tarasova, E. I. Semenov, L. E. Matrosova [et al.] // Scientific Life. - 2020. - Vol. 15, No 4 (104). - P. 561-571.
6. Evaluation of feed toxicity by regions of the Russian Federation / S. A. Semenova, R. M. Potekhina, E. I. Semenov [et al.] // Scientific notes of the Kazan State Academy of Veterinary Medicine named after N. E. Bauman. - 2015. - Vol. 224, No 4. - P. 196-199.
7. Papunidi, E. K. Veterinary and sanitary examination of sheep meat in acute and subacute T-2 mycotoxicosis against the background of the use of drugs / E. K. Papunidi, M. Ya. Tremasov, E. Yu. Tarasova // The veterinarian. - 2010. - No 2. - P. 21-23.
8. A case of avian mycosis caused by a toxigenic isolate of Fusarium proliferatum / R. M. Potekhina, L. E. Matrosova, E. Yu. Tarasova [et al.] // Bulletin of the Mari State University. Series: Agricultural sciences. Economic sciences. - 2019. - Vol. 5, No 3 (19). - P. 316-322.
9. Comparative evaluation of the adsorbing activity of yeast in relation to mycotoxins / E. I. Semenov, L. E. Matrosova, E. Yu. Tarasova [et al.] // Bulletin of the Kazan Technological University. - 2013. - Vol. 16, No 10. - P. 195-197.
10. Tarasova, E. Yu. Study of the sorption activity of halloysite nanotubes in relation to zearalenone and ochratoxin A / E. Yu. Tarasova // Bulletin of the Mari State University. Series: Agricultural sciences. Economic sciences. - 2021. - Vol. 7, No 1 (25). - P. 64-70.
11. Tarasova, E.Yu. Finding means for the treatment of animals with T-2 mycotoxicosis : specialty 06.02.03 «Veterinary pharmacology with toxicology», 06.02.02 «Veterinary microbiology, virology, epizootology, mycology with mycotoxicology and immunology» : dissertation for the degree of candidate of biological sciences. - Kazan, 2010. - 209 p.
12. Tremasov, M. Ya. Experience in the use of probiotics in mycotoxicoses / M. Ya. Tremasov, L. E. Matrosova, E. Yu. Tarasova // Veterinary Bulletin. - 2009. - № 3 (50). - P. 38-41.
13. Cytotoxic activity of T-2 toxin to transplanted cell cultures of the lung epithelium of the cattle embryo / I. I. Idiyatov, L. R. Valiullin, V. V. Biryulya [et al.] // Genes and Cells. - 2017. - Vol. 12, No 1. - P. 41 -46.
14. Experimental combined mycotoxicosis of pigs against the background of an infectious load / E. I. Semenov, L. E. Matrosova, S. A. Tanaseva [et al.] // Agricultural Biology. - 2022. - Vol. 57, No 2. - P. 371383.
15. The effectiveness of adsorbents in combined mycotoxicosis of broiler chickens / S. A. Tanaseva, E. Yu. Tarasova, L. E. Matrosova [et al.] // International Veterinary Bulletin. - 2020. - No 4. - P. 50-56.
16. Co-Occurrence of Mycotoxins in Cereal-Based Feed and Food / R. Palumbo, A. Crisci, A. Venancio [et al.] // Microorganisms. - 2020. - No 8. - P. 74.
17. Enterosorbent efficiency mineral attenuation during pig mycotoxicosis / L. E. Matrosova, N. N. Mishina, S. A. Tanaseva [et al.] // International Journal of Mechanical and Production Engineering Research and Development. - 2020. - Vol. 10. - P. 1851.
18. Fiji: an open-source platform for biological-image analysis / J. Schindelin, I. Arganda-Carreras, E. Frise [et al.] // Nature methods. - 2012. - Vol. 9, No 7. - P. 676-682.
19. Recent advances in assessing the effects of mycotoxins using animal models / A. F. Furian, M. R. Fighera, L. F. Royes [et al.] // Current Opinion in Food Science. - 2022. - Vol. 47. - 100874.
20. Zeolite, hepatoprotector and probiotic for aflatoxicosis in pigs international / L. Е. Matrosova, S. A. Tanaseva, E. Y. Tarasova [et al.] // International Journal of Mechanical and Production Engineering Research and Development. -2020. - Vol. 10. - P. 7053.
Вклад авторов:
Тарасова Е. Ю. - разработка дизайна исследования; общее руководство; интерпретация результатов исследований; подготовка рукописи.
Кашеваров Г. С. - разработка дизайна исследования; интерпретация результатов исследований; доработка текста.
Саитов В. Р. - концепция исследования; интерпретация результатов исследований. Перфилова К. В. - научно-практическое обеспечение исследований.
Яруллин А. И. - общее руководство; концепция исследования; формулировка заключения. Все авторы сделали эквивалентный вклад в подготовку публикации. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Contribution of the authors:
Evgenya Yu. Tarasova - study design development; general leadership; interpretation of research results; manuscript preparation.
Gleb S. Kashevarov - study design development; interpretation of research results; text revision.
Vadim R. Saitov - research concept; interpretation of research results.
Ksenia V. Perfilova - scientific and practical support of research.
Ainur I. Yarullin - general leadership; research concept; wording of the conclusion.
Contribution of the authors: the authors contributed equally to this article.
The authors declare no conflicts of interests.
© Тарасова Е. Ю., Кашеваров Г.С., Саитов В.Р., Перфилова К.В., Яруллин А.И. 2023
