CC BY
8
Всероссийская научно-практическая конференция молодых ученых санкт-Петербург «АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ КЛИНИЧЕСКОЙ ГЕМАТОЛОГИИ»_15 ноября 2019 г.
Бутолина М. А., Ветошкин К. А., Минаева Н. В., Назарова Е. Л., Фокина Е. С., Осипова Е. С.
Федеральное государственное бюджетное учреждение науки «Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Федерального медико-биологического агентства», г. Киров
ИЗУЧЕНИЕ ЦИТОКИНПРОДУЦИРУЮЩЕЙ СПОСОБНОСТИ МЕЗЕНХИМАЛЬНЫХ КЛЕТОК СТРОМЫ КОСТНОГО МОЗГА ПРИ МНОЖЕСТВЕННОЙ МИЕЛОМЕ
Введение. Множественная миелома (ММ) — это опухолевое заболевание кроветворной системы, морфологическим субстратом которого являются плазматические клетки. Патогенетические механизмы развития заболевания до конца не изучены. Считается, что необходимым условием прогрессирова-ния опухоли является взаимодействие неопластических плазматических клеток с элементами костномозгового микроокружения, доминирующим клеточным компонентом которого являются мезенхимальные стромаль-ные клетки (МСК). Однако функциональное состояние МСК костного мозга у больных ММ остается малоизученным.
Цель работы. Изучить цитокин-продуци-рующую способность МСК костного мозга у пациентов с ММ.
Материалы и методы. Изучены показатели цитокинового профиля МСК у 10 больных ММ до начала проведения программной химиотерапии. Медиана возраста пациентов составила 61 год (42-65 лет). МСК выделяли из миеловзвеси, полученной путем пункцион-ной биопсии костного мозга. Выделение ядерных клеток из миеловзвеси осуществляли путем фракционирования на градиенте плотности (р = 1,077 при температуре 22 °C). МСК культивировали на поверхности пластиковых флаконов в среде aMEM (StemCells) с добавлением богатой тромбоцитами плазмы (4 %), гепарина (Sigma, 2 Ед/мл), L-глутамина 2 мМ (StemCells), при температуре 37 оС и 5 % СО2 в атмосфере. Подсчет фибробластных колониеобразующих единиц (КОЕ-Ф) проводили на 14 сутки культивирования. Уровень интерлейкинов (ИЛ-1р, ИЛ-2, ИЛ-6, ИЛ-12),
фактора некроза опухоли а (ФНО а), трансформирующего фактора роста в (TGF в) определяли методом иммуноферментного анализа в супернатантах культур МСК.
Результаты. При постановке диагноза количество плазматических клеток в костном мозге варьировало от 11,4% до 74,2% (медиана — 27,7%). Среднее количество КОЕ-Ф в культурах составило 2,8 ± 1,8 КОЕ-Ф (п = 10) на 1 х 106 выделенных миелокариоцитов. Установлена прямая корреляционная зависимость между количеством плазматических клеток и числом КОЕ-Ф (коэффициент Пирсона, г = 0,66).
Продукция цитокинов МСК костного мозга больных с ММ (п = 10) составила: ИЛ-1в — 0,704 ±0,480, ИЛ-2-0,648 ± 0,324, ИЛ-6-136,004 ± 9,029, ИЛ-12-0,430 ± 0,111, ФНО а — 0,151 ± 0,029, TGFв — 8,363 ± 3,225 пг/мл/сут.
Определена значимая корреляция между продукцией мезенхимальными клетками ФНОа, ИЛ-6, ИЛ-12, TGFв и уровнем плазматических клеток в костном мозге пациентов с ММ (г = 0,80, 0,69, 0,54 и 0,62 соответственно), то есть, чем выше продукция указанных цитокинов, тем выше содержание плазматических клеток в костном мозге. Между продукцией ИЛ-1в, ИЛ-2 и количеством плазмо-цитов установлена слабая корреляционная зависимость (г = 0,13 и 0,16 соответственно).
Выводы. Определена статистически значимая связь между количественными изменениями МСК стромы костного мозга у больных с ММ, их цитокин-продуцирующей способностью и объемом поражения костного мозга.
