CC BY
7
вый количественный уровень, более высокую ее упорядоченность, что можно, вероятно, рассматривать как проявление адаптационно-компенсаторных механизмов в ответ на введение указанных пестицидов. В этих условиях в головном мозге животных, усиливается биосинтез дофамина — основного катехоламина мозга. Дофамина в головном мозге в норме 78—80% от общего количества катехола-мннов.
При введении хлорофоса, как указывалось, изменения информационных показателей были иные, они свидетельствовали о снижении надежности системы, ее дезорганизации. В мозге крыс, особенно через 15 сут после введения пестицида, развился явный дисбаланс между медиаторным и гормональными звеньями системы катехоламинов, усугублявшейся резким (на 52%) уменьшением количества серо-тонина — амина, принимающего непосредственное участие в передаче нервных импульсов. Можно полагать, что с обнаруженным резким снижением в головном мозге уровня серотонина и дофамина можно в известной мере связать описанные в литературе случаи полиневрита у людей, развивающегося как следствие отравления хлорофосом [1, 2].
Более существенные и более стойкие изменения биогенных аминов мозга при введении хлорофоса, чем при поступлении в организм хостаквика или севина, по-видимому, связаны с особенностями метаболизма препаратов, в частности с возможностью образования из хлорофоса токсичного метаболита — дихлордивинилфосфата.
УДК 613.632.4:547.313.31-07
При сравнении степени изменений исследованных показателей установлено, что наибольшими по величине и стойкости при воздействии хлорофоса, хостаквика и севина были изменения уровня серотонина и дофамина. Активность хо-линэстеразы ингибировалась н меньшей мере и нормализовалась раньше, чем указанные показатели. Учитывая сказанное, количество дофамина и серотонина в головном мозге может быть принято в качестве дополнительного чувствительного показателя при определении порога вредного действия пестицидов, обладающих антихолинэстеразными свойствами.
ЛИТЕРАТУРА
1. Андрейчук Г. И, — В кн.: Военно-мед. факультет. Науч конф. слушателей. 13-я. Тезисы докладов. Куйбышев 1979, с. 68—70.
2. Боголепов Н. К., Каплан О. И., Лужецкая Т. А. — Сов мед., 1979, № 11, с. 109—111.
3. Бондарин В. А. — В кн.: Теория информации в меди цине. Минск, 1974, с. 6—77.
4. Колб В. Г. Биофизические аспекты реактивности орга низма при туберкулезе. Минск, 1974.
5. Мухтарова Н. Д., Качалай. Д. П., Глиняная А. Г. — В кн.: Гигиена применения, токсикология пестицидов и клиника отравлений. Киев, 1969, вып. 7, с. 486—492.
Поступила 09.11.83
Л. А. Антоновича, Е. В. Ковальчук
ИЗУЧЕНИЕ ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ИНГИБИТОРА ДПФ-1
Рижский медицинский институт
/
Народное хозяйство постоянно получает новые сложные химические соединения, одним из которых является 2-окси-
1,3-пропилендиамин-Ы|(^|М[К|-тетраметнлснфосфоновая кислота (синоним «ингибитор ДПФ-1»), которую предполагается широко применять в качестве ингибитора для предотвращения неорганических солеотложений в процессах подготовки, добычи и транспортировки нефти.
Ингибитор ДПФ-1 по параметрам острой токсичности относится к веществам умеренной опасности (III класс), обладает слабой кумуляцией и лишен аллергенных свойств. Однако мутагенное действие ингибитора ДПФ-1 на биологических объектах не изучено.
Целью настоящих исследований явилось изучение мутагенности ингибитора ДПФ-1 па лабораторных животных.
Цитогенетическая активность ингибитора ДПФ-1 изучена на клетках костного мозга самцов белых нелинейных крыс и самцов мышей линии СВА. Препараты хромосом готовили общепринятым методом |3, 4]. Для цитогенетн-ческого анализа клеток костного мозга использовали ме-тафазный метод регистрации хромосомных аберраций [1].
Цитогенетическое действие ингибитора ДПФ-1 на клетки костного мозга крыс изучали при однократной 4-чгсовой ингаляционной затравке животных в концентрациях 20 и 0,5 мг/м3, которые являлись соответственно токсикологическим порогом раздражающего действия и ПДК ингибитора ДПФ-1 при ингаляционном воздействии на животных. Крыс забивали через 24 ч после затравки. Всего использовано 15 самцов крыс, у которых проанализировано 1500 мстафаз клеток котного мозга.
Для выявления возможного мутагенного действия ингибитора ДПФ-1 на клетки костного мозга лабораторных мышей линии СВА использовали общепринятую методику генетического скрининга химических соединений |2]. Возможное мутагенное действие ингибитора ДПФ-1 исследовали при однократном внутрижелудочном введении препарата мышам в дозах 2800, 1400, 280 и 140 мг/кг, которые соот-
ветствовали 1-05о, 'Л^Оао. '/ю!^,, и 'ДоЮзо. Мышей забивали через 24 ч после введения препарата. Всего использовано 25 самцов мышей линии СВА, у которых проанализировано 2500 метафаз.
Результаты изучения цитогенетическнх изменений в клетках костного мозга крыс сведены в табл. 1, из которой видно, что частота клеток с аберрациями при действии ингибитора ДПФ-1 достоверно не изменяется по сравнению с контролем (Р>0.05).
Дальнейшие исследования цнтогенетической активности препарата на лабораторных мышах показали, что ингибитор ДПФ-1 при однократном внутрижелудочном воздействии в изученных дозах не вызывает достоверного изменения частоты хромосомных аберраций в клетках костного мозга мышей по сравнению с уровнем хромосомных аберраций у контрольных животных (табл. 2).
Следует отметить, что при воздействии на мышей ингибитором ДПФ-1 в дозе 2800 мг/кг обнаружена тенденция к
Таблица 1
Частота аберраций хромосом в клетках костного мозга крыс при действии ингибитора ДПФ-1
Концентрация. мг/м5 Число жив^тны X Число проанализированных метафаз Частота метафаз с аберрациями, %
20 0,5 5 5 500 500 0,8±0,37 0,6-0,24
Контроль 5 500 0,6±0,40
Таблица 2
Частота аберраций хромосом в клетках костного мозга мышей при действии ингибитора ДПФ-1
Доза, иг/кг Число животных Число проанализированных ме-тафаз Частота метафаз с аберрациями.
2800 5 500 1,20±0,37
1400 5 500 0,80±0,37
280 5 500 1,00±0,45
140 5 500 1,00±0,32
Контроль 5 500 0,80±0,37
возрастанию частоты хромосомных аберраций. Однако это различие с контролем оказалось недостоверным (Я>0,05).
Таким образом, цитогенетическим анализом на клетках костного мозга крыс и мышей мутагенного действия исследованных концентраций и доз ингибитора ДПФ-1 не выявлено.
Выводы. 1. Ингибитор ДПФ-1 в концентрациях, равных токсикологическому порогу раздражающего действия
(0,5 мг/м3) и ПДК (20 мг/м3), при ингаляционном воздействии не вызывает изменения частоты хромосомных аберраций в клетках костного мозга самцов белых нелинейных крыс.
2. Ингибитор ДПФ-1 в изученных дозах (140— 2800 мг/кг) при внутрижелудочном введении не изменяет частоту структурных хромосомных аберраций в клетках костного мозга самцов мышей линии СВА.
3. Полученные данные могут быть использованы для обоснования гигиенических стандартов содержания ингибитора ДПФ-1 в производственных условиях.
ЛИТЕРАТУРА
1. Бочков Н. П., Демин Ю. С., Лучник Н. В. — Генетика, 1972, № 5, с. 133—141.
2. Малашенко А. М.. Суркова Н. И., Семенов X. X. Определение мутагенности химических соединений (генетический скрининг) на лабораторных мышах. (Метод, указания). М„ 1977.
3. Орлов В. Н„ Чудиновская Г. А.. Крюкова Е. П. Исследование хромосомных наборов млекопитающих. М., 1976.
4. Ford С., Wollam D. — Exp. Cell Res., 1963, v. 32, p. 320—326.
Поступила 01.11.83
1 УДК 614.7:615.285.71-07:612.6.052+ 615.285.7.066:612.6.052
Л. М. Бахитова, Ю. В. Пашин ИЗУЧЕНИЕ МУТАГЕННОЙ АКТИВНОСТИ ПРЕПАРАТА ГХЦГ
Институт общей генетики им. Н. И. Вавилова АН СССР, Москва
Хлорорганические соединения, применяемые в сельском хозяйстве, отличаются сравнительно высокой стабильностью и способны накапливаться в объектах окружающей среды. В\результате миграции по пищевой цепи хлорорганические пестициды могут попадать в организм человека. По данным литературы, в организм человека с пищей ежедневно может поступать до 16,5 мкг такого хлорорганического пестицида, как ГХЦГ. В жировой ткани людей при профессиональных контактах это соединение обнаруживается в концентрации до 0,36 мг/кг. Особенности действия хлорорганнческих соединений определяют необходимость изучения их мутагенных свойств. Мутагенная активность ГХЦГ изучена на клетках растений |1, 4] и костного мозга мышей [2].
Целью настоящей работы являлось изучение мутагенной активности технического препарата (ТП) ГХЦГ.
Для исследования мутагенных свойств препарата в системе in vitro использована линия клеток китайского хомячка V-79. Мутагенную активность оценивали по числу индуцированных прямых генных мутаций по сцепленному с Х-.хромосомой локусу гнпоксантин-гуанинфосфорибозил-трансферазы (ГГФРТ).
ТП, содержащий 12% ГХЦГ, как основная форма практического использования, растворяли в условиях сельскохозяйственного производства в этаноле, затем разводили средой Игла до необходимых концентраций. Клетки обрабатывали во флаконах Повицкого в течение 21 ч с последующей отмывкой раствором Хенкса. Обработанные клетки выращивали при малой плотности посева по методу А. Abbon-dantlolo и соавт. [5] в среде Игла с добавлением 10% эмбриональной сыворотки на чашках Петри при 37 "С в инкубаторе с СОг. После периода фенотипического проявления мутаций в питательную среду добавляли 8-азагуанин (30 мкг/мл). Выросшие из отдельных мутантных клеток клоны через 12—14 дней после обработки окрашивали и подсчитывали.
Мутагенную активность ТП в системе in vivo определяли по методу J. Heddle, W. Schmid (7, 9]. Принцип метода
состоит в том, что под действием мутагенных факторов из хроматид, хромосом или их фрагментов в цитоплазме эрит-робластов костного мозга млекопитающих образуются микроядра. После завершающего митоза эритробласты теряют ядро, превращаясь в молодые полихроматофильные эритроциты, в которых при соответствующей окраске можно выявить микроядра.
Эксперименты проводили на гибридных мышах (СВАХ ХС57ВЬ/6Л) р, в возрасте 60—80 дней с массой тела 23— 25 г. ТП растворяли в подсолнечном масле в концентрациях, соответствующих '/з и Чг.ь ЬО^ в пересчете на активное действующее начало. ¿Мазки костного мозга через 24, 36 и 48 ч после однократной внутрибрюшинной инъекции ТР фиксировали в метаноле, промывали в бидистиллнрованной воде и окрашивали в 7% растворе Гимзы при рН 6,8 [3, 8]. Статистическую обработку данных проводили по методу Стьюдента.
Таблица 1
Влияние технического препарата ГХЦГ на выживаемость клеток линии У-79 и индукцию прямых генных мутаций по локусу ГГФРТ
Показатель Доза ТП, мкг/мл
контроль 100 200 500
Выживаемость клеток Число индуцированных генных мутаций, 10* 100 1,3±0,4 93±6,3 1,70±0,4 53±5,1 4,3±0,5* 1,6±0,4
Примечание. Выживаемость указана в % к контролю. Звездочка — Р<0,01 по сравнению с контролем.
