CC BY
129
мутагенез и канцерогенез
© А. Д. Дурнев,
Н. О. Даугель-Дауге,
А. К. Жанатаев, А. С. Лапицкая,
С. Б. Середенин
ФГБУ «НИИ фармакологии имени В. В. Закусова» РАМН
& Методом учета хромосомных аберраций изучено влияние препарата валокордин на спонтанный и индуцированный кластогенез в клетках костного мозга мышей. Валокордин не проявил цитогенетической активности при исследовании в соответствии с подходами и процедурами оценки мутагенности фармакологических веществ. В экспериментах с предварительной обработкой, а также однократным и 5-кратным совместным введением с мутагеном, валокордин в дозах 0,03, 0,3 и 3 мл/кг на 47-133 % усиливал кластогенные эффекты непрямого алкилирующего Валокордин не оказывал влияния на кластогенные эффекты мутагена-прооксиданта диоксидина. Обсуждаются возможные механизмы комутагенного действия валокордина.
& Ключевые слова: комутаген; генотоксичность; валокордин; циклофосфамид; диоксидин; фенобарбитал; хромосомные аберрации; мыши.
Поступила в редакцию 28.05.2012 Принята к публикации 03.07.2012
УДК 575.224.46.044
КОМУТАГЕННЫЕ ЭФФЕКТЫ ВАЛОКОРДИНА
ВВЕДЕНИЕ
Современные системы генотоксикологического скрининга обеспечивают высокую надежность раннего выявления и предупреждения контакта человека с мутагенами (Дурнев и др., 1998a, 1998b). Вместе с этим вне поля зрения генотоксикологов и гигиенистов остаются соединения, не обладающие собственной мутагенной активностью, но способные усиливать эффекты мутагенов — комутагены. Серьезная опасность комутагенов обусловлена не только их способностью усиливать повреждающее действие мутагенов, присутствующих в среде обитания человека (Дурнев и др., 2003), но и также возможностью влияния на процессы эндогенного мутагенеза.
Просеивание веществ в бесконечном скрининге комутагенов представляется бесперспективным, рациональнее определить первоочередность исследования веществ исходя из возможных механизмов реализации комутагенного эффекта. В этом ключе особое внимание привлекают индукторы и ингибиторы ферментов микросомальной монооксигеназной системы (ММС). Идея о модификации эффектов мутагенов за счет влияния на ММС была сформулирована достаточно давно (Журков и др., 1993), но не получила достаточного экспериментального развития.
К настоящему моменту накоплено существенное количество данных об организации и функционировании ММС и ее ключевого звена системы цитохромов P-450, а также о субстратах, индукторах и ингибиторах этой системы (URL: http://www.de-poort.be/cgi-bin/Document.pl?id=125). Это позволяет целенаправленно ставить задачи по оценке комутагенной активности отдельных соединений. В частности, внимание привлекает широко распространенный препарат безрецептурного отпуска валокордин, содержащий в составе индуктор цитохрома Р450 — фенобарбитал (Петрова, 2008).
Целью настоящего исследования явилась оценка влияния валокордина на цитогенетические эффекты циклофосфамида и диоксидина в клетках костного мозга мышей при различных режимах введения препаратов.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Эксперименты выполнены на самцах мышей гибридах F1 CBAxC57BL/6, в возрасте 8— 12 недель, массой 20 ± 1 г. (питомник «Столбовая» РАМН). Мыши содержались в условиях вивария НИИ фармакологии РАМН при 12-часовом световом режиме, свободном доступе к воде и пище. Основные правила содержания и ухода соответствовали нормативам, данным в руководстве (National Research Council, 2011) и правилам, утвержденным ГОСТ Р 53434—2009 «Принципы надлежащей лабораторной практики». Все процедуры по рутинному уходу за животными выполняли в соответствии с СОП лаборатории.
Для индукции хромосомных повреждений применяли диоксидин (Фармакон, СПб.) в дозе 200 мг/кг или циклофосфамид (Fluka, Germany) в дозе 20 мг/кг. Мутагены разводили в физиологическом растворе и вводили внутрибрюшинно. Выбор доз основывался на предшествующем опыте исследований, в этих дозах мутагены индуцируют хромосомные
повреждения в 10 — 15 % клеток костного мозга, что отвечает задачам по изучению модификации мутагенеза (Дурнев, 2001).
Валокордин (Krewel Meuselbach, Germany) (ВК) разводили 50%-v этанолом и вводили перорально, в объеме не более 0,1 мл на мышь. Для получения до-зовой характеристики действия препарат использовали в трех дозах: 0,03; 0,3 и 3 мл/кг. Первая из доз ориентировочно соответствует суточной дозе для человека при перерасчете на единицу массы тела, вторая рассчитана с учетом коэффициентов межвидового переноса доз (Дурнев и др., 2005). Животным контрольной группы вводили эквивалентные количества 50%-го этанола. В предварительно проведенных экспериментах было установлено, что введение 50%-го этанола не оказывает влияния на цитогенетические эффекты цикло-фосфамида и диоксидина.
Эксперименты проводили с введением соединений в трех различных режимах. В первом случае мутаген и ВК вводили однократно совместно, с забоем животных через 24 часа (острый эксперимент). Во втором, мутаген вводили однократно на фоне четырехдневной предобработки ВК, с забоем животных через 24 часа после последнего введения (предобработка). В третьем, мутаген и ВК вводили совместно в течение 5 дней (совместное введение) с забоем через 6 часов после последнего введения. Схема экспериментов подробно обоснована ранее (Дурнев, 2001).
В отдельной серии эксперимента оценивали цитоге-нетическую активность ВК (дозы: 0,03; 0,3 и 3 мл/кг) при его однократном и пятидневном введении и выведении животных из эксперимента через 24 часа после последнего введения, что соответствует требованиям,
предъявляемым к оценке мутагенности лекарственных средств в цитогенетическом тесте (Дурнев и др., 2005).
Цитогенетическое обследование проводили методом учета хромосомных повреждений в клетках костного мозга мышей (Preston et al., 1987). Микропрепараты готовили стандартным суховоздушным методом. Каждая экспериментальная группа включала 5 мышей, от каждого животного анализировалось по 100 метафазных пластинок. При микроскопическом анализе учитывали одиночные и парные фрагменты хромосом, обмены, ахроматические пробелы хромосом (гепы) и клетки с множественными хромосомными повреждениями (более 5 хромосомных аберраций в клетке). Статистическую обработку данных проводили с использованием ф-критерия путем сравнения долей аберрантных метафаз в контрольной и экспериментальной группах.
Повышение эффекта мутагена (комутагенный эффект) рассчитывали по формуле: КЭ = ((M; - M2) / M2) х 100 где КЭ — комутагенный эффект (%), М1 — процент метафаз с аберрациями при действии мутагена и валокордина, М2 — процент метафаз с аберрациями при действии мутагена.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
В таблице 1 представлены результаты оценки ци-тогенетической активности ВК. Необходимость этого фрагмента исследования вытекала из противоречивости данных, характеризующих цитогенетические эффекты ведущего компонента композиции валокордин—фенобарбитал в соматических клетках млекопитающих
(IARC, 2001).
Таблица 1
Результаты исследования цитогенетической активности валокордина в клетках костного мозга самцов мышей F1CBAxC57BL/6
Условия эксперимента Клеток На 100 клеток Всего поврежденных метафаз (M ± m %) Уровень значимости
Гепов Одиночных фрагментов Парных фрагментов Обменов Клеток с МП *
Контроль (0,1 мл 50 % этанола/мышь) 500 0,2 1,4 0 0 0 1,6 ± 0,6
Однократное введение
Валокордин 0,03 мл/кг 500 0,6 1,8 0 0 0 2,0 ± 0,6 >0,05
Валокордин 0,3 мл/кг 500 0,2 1,2 0 0 0 1,4 ± 0,5 >0,05
Валокордин 3 мл/кг 500 0,2 0,8 0 0 0 2,0 ± 0,6 >0,05
Пятикратное введение
Валокордин 0,03 мл/кг 500 0 1,2 0 0 0 1,2 ± 0,5 >0,05
Валокордин 0,3 мл/кг 500 0,4 1,8 0 0 0 2,2 ± 0,7 >0,05
Валокордин 3 мл/кг 500 0,6 1,2 0 0 0 1,8 ± 0,6 >0,05
* МП — клетки с множественными повреждениями хромосом (более 5 хромосомных аберраций в клетке)
мутагенез и канцерогенез
55
ВК, вводимый перорально в дозах: 0,03; 0,3 и 3 мг/кг (эквивалентно дозам фенобарбитала 0,5, 5 и 50 мг/кг соответственно), не вызывал значимого увеличения выхода клеток с хромосомными аберрациями ни при однократном, ни при пятикратном пероральном введении. Уровни аберрантных клеток и спектры цитоге-нетических повреждений практически не различались в опытных и контрольных сериях эксперимента.
Таким образом, согласно данным настоящего исследования, ВК в использованном диапазоне дозировок не проявляет цитогенетической активности при исследовании в строгом соответствии с подходами и процедурами, рекомендованными для оценки цито-генетической активности фармакологических веществ (Дурнев и др., 2005). Полученные результаты, находятся в противоречии с данными недавнего исследования, указывающего на цитогенетическую активность фенобарбитала при его ежедневном пероральном введении мышам в дозе 1,2 мг/кг в течение нескольких периодов продолжительностью от 7 до 120 дней (Biswas et al., 2004). Однако принципы цитогенети-ческого анализа, положенные в основу данной работы, отличаются от типичных, что, в совокупности с отсутствием в указанной публикации детальных данных, характеризующих спектр цитогенетических повреждений, не позволяет расценивать ее результаты как достаточно доказательные.
Вместе с тем противоречивость экспериментальных данных, полученных в различных тестах, не позволяет дать однозначного заключения о геноток-сичности фенобарбитала. Так, по данным Нандана (Nandan et al., 1982, 1983) фенобарбитал индуцирует хромосомные транслокации в сперматоцитах и образование анеуплоидных сперматоцитов, а также доминантные летальные мутации у мышей. Фенобарбитал продемонстрировал также анеугенное действие в тесте на S. Cerevisiae (Albertini et al., 1985). В двух независимых исследованиях, методом ДНК-комет была показана ДНК-повреждающая активность фенобарбитала в клетках печени in vivo (Sasaki et al., 1997; Rothfuss et al., 2010). Вышеуказанное в очередной раз обозначает важность проблемы генотоксикологических исследований — оценки органо- и тканеспецифичности действия.
Результаты экспериментов по оценке влияния ВК на повреждающие эффекты циклофосфамида представлены в таблице 2. Анализ полученных данных демонстрирует дозозависимое, статистически значимое увеличение выхода клеток с хромосомными аберрациями при всех режимах комбинированного введения ВК и циклофосфамида, свидетельствующее о комутагенном действии ВК. Важно при этом отметить, что комутагенные эффекты ВК выявлены в дозе, соответствующей суточной для человека. Наряду с основным показателем «поврежденных метафаз» наблюдалось пропорциональное уве-
личение выхода клеток со всеми типами хромосомных аберраций и клеток с множественными хромосомными аберрациями, тогда как количество клеток с ахроматическими повреждениями (гепы) оставалось практически неизменным. Особенно отчетливо увеличение выхода хромосомных повреждений и аберрантных метафаз под влиянием ВК выявлено в режимах предобработки и совместного введения. В этих случаях отмечалось более чем двукратное увеличение эффекта мутагена. Меньшая выраженность комутагенных эффектов при однократном введении препаратов типична для исследований по модификации эффектов мутагенов и свидетельствует в пользу ранее выдвинутого тезиса о предпочтительности подос-трых экспериментов в практике генотоксикологических исследований (Дурнев, 2001).
В таблице 3 представлены данные, характеризующие влияние ВК на цитогенетические эффекты ди-оксидина. ВК во всем диапазоне дозировок и режимов введения не изменял проявления цитогенетических эффектов мутагена ни по одному из анализируемых показателей.
Совокупность полученных данных позволяет заключить, что в рамках использованных подходов и дозировок ВК не демонстрирует собственной цитогенетической активности, не оказывает модифицирующего действия на цитогенетическую активность прооксиданта диокси-дина, не требующего метаболической активации, но при этом усиливает мутагенные эффекты непрямого алкили-рующего мутагена циклофосфамида.
Комутагенная активность ВК может быть объяснена способностью фенобарбитала, как одного из компонентов препарата, вызывать индукцию ММС. В пользу этого заключения, во-первых, свидетельствует отсутствие влияния ВК на эффекты мутагена диоксиди-на, не требующего метаболической активации (Дурнев и др., 1998 а), во-вторых, сведения о том, что непрямой алкилирующий мутаген циклофосфамид является субстратом CYP2B6, тогда как фенобарбитал, входящий в состав ВК, является индуктором этого цитохро-ма (Aiub et al., 2011). Отсюда логично дозозависимое, статистически значимое увеличение выхода клеток с хромосомными аберрациями при всех режимах комбинированного введения ВК и циклофосфамида. Объяснение комутагенной активности ВК через индукцию цитохрома хорошо согласуется с данными ранее проведенных независимых исследований с использованием фенобарбитала per se. Препарат существенно увеличивал цитогенетическое действие циклофосфамида у крыс (Журков и др., 1983).
Потенциальная комутагенная опасность содержащих фенобарбитал препаратов (валокордин, корвалол и др.) усугубляется их чрезвычайной популярностью на фармацевтическом рынке. По показателю «объем продаж» среди безрецептурных успокоительных и снотворных лекарств, ВК и близкий по составу корвалол в 2007 —
Таблица 2
цитогенетические эффекты в клетках костного мозга самцов мышей F1CBAxC57BL/6 при сочетанном введении валокордина и циклофосфамида
Условия эксперимента Клеток На 100 клеток Всего поврежденных метафаз (M ± m %) Повышение эффекта мутагена (%) Уровень значимости
Гепов Одиночных фрагментов Парных фрагментов Обменов Клеток с МП*
Контроль (0,1 мл 50 % этанола/мышь) 500 0,2 1,4 0 0 0 1,6 ± 0,6
Острый эксперимент
Циклофосфамид 20 мг/кг 500 1,6 18,0 0,2 1,0 2,0 11,4 ± 1,4 <0,001*
+Валокордин 0,03 мл/кг 500 1,6 20,4 0,4 2,2 2,2 15,2 ± 1,6 >0,05**
+Валокордин 0,3 мл/кг 500 1,0 20,6 0 1,6 1,8 16,8 ± 1,7 47 <0,05**
+Валокордин 3 мл/кг 500 1,2 25,2 0,6 3,2 3,0 19,4 ± 1,8 70 <0,001**
Предобработка
Циклофосфамид 20 мг/кг 500 1,6 18,0 0,2 1,0 2,0 11,4 ± 1,4 <0,001*
+Валокордин 0,03 мл/кг 500 1,0 32,0 0,8 1,2 4,2 23,2 ± 1,9 104 <0,001**
+Валокордин 0,3 мл/кг 500 1,4 33,4 0,4 2,6 4,8 24,8 ± 1,9 118 <0,001**
+Валокордин 3 мл/кг 500 0,6 38,2 1,4 3,8 7,2 26,6 ± 2,0 133 <0,001**
Совместное введение
Циклофосфамид 20 мг/кг 500 1,2 18,6 0,4 2,2 3,6 14,8 ± 1,6 <0,001*
+Валокордин 0,03 мл/кг 500 1,4 35,4 0,4 1,8 2,8 26,4 ± 2,0 78 <0,001**
+Валокордин 0,3 мл/кг 500 1,4 30,2 0,2 3,4 5,0 25,8 ± 2,0 74 <0,001**
+Валокордин 3 мл/кг 500 0,8 38,0 0,8 2,8 5,2 30,2 ± 2,1 104 <0,001**
* — при сравнении с контролем; ** — при сравнении с эффектом циклофосфамида
2008 гг. делили в России 2 и 3 место, и входили в первую пятерку в странах СНГ и Украине (Петрова, 2008).
Принципиально отметить, что фенобарбитал внедрялся в практику задолго до того, как оценка мутагенности стала обязательным требованием в системе доклинической оценки безопасности лекарств. Сведения об изучении его генотоксичности, имеющиеся в литературе, отрывочны, противоречивы и часто получены за рамками современных стандартов генотоксических исследований, в особенности в отношении выбора дозировок и тест-систем. Подобная ситуация характерна в отношении целого ряда лекарственных средств и, вероятно, требует специальных усилий по созданию программы, предполагающей тестирование подобных препаратов в соответствии с современными принципами генотоксикологических исследований.
Настоящее и ряд других исследований показывают, что индукторы семейства цитохромов 450 являются потенциальными комутагенами в отношении непрямых мутагенов, что позволяет ставить вопрос о направленном исследовании комутагенной активности этой группы соединений. На современном этапе это становится возможным, т. к. постоянно пополняемые базы данных по субстратам, индукторам и ингибиторам P450 легко доступны (URL: http://www.de-poort.be/cgi-bin/Document. pl?id=125).
Представляется, что оценка комутагенности соединений, контакт которых с человеком имеет перманентный характер (лекарственные средства, пищевые добавки, отдельные производственные вредности), в ближайшей перспективе должна стать неотъемлемой составляющей обязательных генотоксических исследований.
Таблица 3
Цитогенетические эффекты в клетках костного мозга самцов мышей F1CBAxC57BL/6 при сочетанном введении валокордина и диоксидина
Условия эксперимента Клеток На 100 клеток Всего поврежденных метафаз (М ± т %) Повышение эффекта мутагена (%) Уровень значимости
Гепов Одиночных фрагментов Парных фрагментов Обменов Клеток с МП*
Контроль (0,1 мл 50 % этанола/мышь) 500 0,2 1,4 0 0 0 1,6 ± 0,6
Острый эксперимент
Диоксидин 200 мг/кг 500 1,0 10,4 0,2 1,6 2,4 8,6 ± 1,3 0 <0,001*
+ Валокордин 0,03 мл/кг 500 1,2 10,0 0,2 1,8 3,0 8,4 ± 1,3 0 >0,05**
+ Валокордин 0,3 мл/кг 500 0,4 8,6 0 1,0 1,8 7,2 ± 1,2 0 >0,05**
+ Валокордин 3 мл/кг 500 0,6 12,4 0,4 1,6 2,2 10,8 ± 1,4 0 >0,05**
Предобработка
Диоксидин 200 мг/кг 500 1,0 10,4 0,2 1,6 2,4 8,6 ± 1,3 0 <0,001*
+ Валокордин 0,03 мл/кг 500 0,2 8,8 1,0 2,0 1,6 7,8 ± 1,2 0 >0,05**
+ Валокордин 0,3 мл/кг 500 0,8 10,6 0,4 1,8 3,4 9,2 ± 1,3 0 >0,05**
+ Валокордин 3 мл/кг 500 0,8 9,2 0,4 1,0 2,4 9,6 ± 1,3 0 >0,05**
Совместное введение
Диоксидин 200 мг/кг 500 0,8 12,2 0,4 2,0 3,6 10,8 ± 1,4 0 <0,001*
+ Валокордин 0,03 мл/кг 500 1,0 11,8 0,8 1,4 3,2 12,0 ± 1,5 0 >0,05**
+ Валокордин 0,3 мл/кг 500 0,4 10,6 0,2 2,2 2,6 8,8 ± 1,3 0 >0,05**
+ Валокордин 3 мл/кг 500 0,4 13,6 0,4 2,6 3,2 13,2 ± 1,5 0 >0,05**
* — при сравнении с контролем; ** — при сравнении с эффектом диоксидина
ЛИТЕРАТУРА
1. Дурнев А. Д., Середенин С. Б., 1998а. Мутагены: скрининг и фармакологическая профилактика воздействий. Москва: Медицина. 328 с.
2. Дурнев А. Д., Ревазова Ю.А., Верстакова О. Л. и др., 1998Ь. Оценка мутагенности фармакологических средств. Методические рекомендации // Ведомости Фармакологического комитета. № 4. С. 32—39.
3. Дурнев А. Д., 2001. Модификация мутационного процесса в клетках человека // Вестник РАМН. № 10. С. 70-76.
4. Дурнев А. Д., Середенин С. Б., 2003. Комутагенез — новое направление исследований в генотоксиколо-гии // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. № 6. С. 604-612.
5. Дурнев А. Д., Ревазова Ю. А., Верстакова О.Л. и др., 2005. Методические указания по изучению мутагенных свойств фармакологических веществ // Руководство по экспериментальному (доклиническому изучению новых фармакологических веществ / Под общей редакцией Хабриева Р У Москва. С. 100-122.
6. Журков В. С., Меркурьева Р. В., Бурмантова Н. Р. и др., 1983. Влияние фенобарбитала на цитогенетичес-кую активность циклофосфамида // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. № 4. С. 77-79.
7. Журков В. С., Сычева Л. П., 1993. Роль системы мик-росомальных моноксигеназ в модификации эффекта мутагенов // Вестник РАМН. № 1. С. 41-46.
8. Петрова Е.П., 2008. Рынок безрецептурных успокоительных и снотворных средств // Ремедиум. № 10. С. 25-27.
58
мутагенез и канцерогенез
9. Aiub C. A., Gadermaier G, OliveiraI. et al., 2011. N-Ni-trosodiethylamine genotoxicity in primary rat hepato-cytes: effects of cytochrome P450 induction by phenobarbital // Toxicology Letters., Vol. 206 (2). P 139-143.
10. Albertini S, Friederich U., Groschel-Stewart U, et al., 1985. Phenobarbital induces aneuploidy in Sac-charomyces cerevisiae and stimulates the assembly of porcine brain tubulin // Mutation Research. Vol. 144 (2). P. 67-71.
11. Biswas S. J., Pathak S., Khuda-Bukhsh A.R., 2004. Assessment of the genotoxic and cytotoxic potential of an anti-epileptic drug, phenobarbital, in mice: a time course study // Mutation Research. Vol. 563 (1). P. 1-11.
12. National Research Council, 2011. Guide for the care and use of laboratory animals. Eights edition // National Academy Press: Washington D. C. 220 p.
13. IARC, 2001. Phenobarbital and its Sodium Salt (Group 2B) // International Agency for Research on Cancer (IARC) — Summaries and Evaluations. Vol. 79. P. 161-288.
14. Nandan S.D, Rao M. S, 1982. Induction of chromosome aberrations by phenobarbitone in the germ cells of Swiss male mice // Toxicology Letters. Vol. 14. P. 1-6.
15. Nandan S.D, Rao M. S., 1983. Evaluation of the mutagenic effects of phenobarbital by dominant lethal assay in Swiss mice // Food and Chemical Toxicology. Vol. 21. P. 335-337.
16. P450 substraten — inhibitors — inducers. URL: http://www.de-poort.be/cgi-bin/Document. pl?id=125 (дата обращения 16.05.2012).
17. Preston R. J., Dean B. J., Galloway S. et al., 1987. Mammalian in vivo cytogenetic assays. Analysis of
chromosome aberrations in bone marrow cells // Mutation Research. Vol. 189. P. 157-165.
18. Rothfuss A., O'Donovan M, De Boeck M. et al., 2010. Collaborative study on fifteen compounds in the rat-liver Comet assay integrated into 2-and 4-week repeat-dose studies // Mutation Research. Vol. 70. P. 240-269.
19. Sasaki Y.F., Izumiyama F., Nishidate E. et al., 1997. Detection of rodent liver carcinogen genotoxicity by the alkaline single-cell gel electrophoresis (Comet) assay in multiple mouse organs (liver, lung, spleen, kidney, and bone marrow) // Mutation Research. Vol. 391. P. 201-214.
COMUTAGENIC EFFECTS OF VALOCORDIN
Durnev A. D, Daugel-Dauge N. O., Zhanatayev A. K., Lapitskaya A. S., Seredenin S. B.
SUMMARY: The chromosome aberration test in bone marrow cells of mice was used to study the influence of Valocordin on spontaneous and induced clastogenesis. Valocordin showed no inherent clastogenic activity. In experiments with pretreatment and with single or repeated combined administration , Valocordin in doses of 0.03, 0.3 and 3 ml/kg significantly (47-133 %) enhanced the clastogenic activity of cyclophosphamide. There was no effect of Valocordin on the cytogenetic activity of dioxidine, a mutagen with a pro-oxidative mode of action. Possible mechanisms of comutagenic activity of valocordin are discussed.
KEY WORDS: comutagen; genotoxicity; valocordin; cyclophosphamide; dioxidine; phenobarbital; chromosome aberrations; mice.
Ф Информация об авторах
Дурнев Андрей Дмитриевич — д. м. н., член-корреспондент РАМН, профессор, руководитель лабораторий лекарственной токсикологии и фармакологии мутагенеза ФГБУ «НИИ фармакологии имени В. В. Закусова» РАМН. 125315, г. Москва, ул. Балтийская, д. 8. E-mail: [email protected].
Даугель-Дауге Наталья Олеговна — к. б. н., старший научный сотрудник лаборатории фармакологии мутагенеза ФГБУ «НИИ фармакологии имени В. В. Закусова» РАМН. 125315, г. Москва, ул. Балтийская, д. 8. E-mail: [email protected].
Жанатаев Алий Курманович — к. б. н., ведущий научный сотрудник лаборатории фармакологии мутагенеза ФГБУ «НИИ фармакологии имени В. В. Закусова» РАМН. 125315, г. Москва, ул. Балтийская, д. 8. E-mail: [email protected].
Лапицкая Анастасия Сергеевна — к. м. н., старший научный сотрудник отдела фармакологической генетики ФГБУ «НИИ фармакологии имени В. В. Закусова» РАМН. 125315, г. Москва, ул. Балтийская, д. 8. E-mail: [email protected].
Середенин Сергей Борисович — д. м. н., академик РАН и РАМН, профессор, руководитель отдела фармакологической генетики, директор ФГБУ «НИИ фармакологии имени В. В. Закусова» РАМН. 125315, г. Москва, ул. Балтийская, д. 8. E-mail: [email protected].
Durnev Andrey Dmitriyevich — Zakusov State Research Institute of Pharmacology of Russian Academy of Medical Sciences. Baltiyskaya St. 8, Moscow, 125315, Russia. E-mail: [email protected].
Daugel-Dauge Natalya Olegovna — Zakusov State Research Institute of Pharmacology of Russian Academy of Medical Sciences. Baltiyskaya St. 8, Moscow, 125315, Russia. E-mail: [email protected].
Zhanatayev Aliy Kurmanovich — Zakusov State Research Institute of Pharmacology of Russian Academy of Medical Sciences. Baltiyskaya St. 8, Moscow, 125315, Russia. E-mail: [email protected].
Lapitskaya Anastasiya Sergeyevna — Zakusov State Research Institute of Pharmacology of Russian Academy of Medical Sciences. Baltiyskaya St. 8, Moscow, 125315, Russia. E-mail: [email protected].
Seredenin Sergey Borisovich — Zakusov State Research Institute of Pharmacology of Russian Academy of Medical Sciences. Baltiyskaya St. 8, Moscow, 125315, Russia. E-mail: [email protected].
