CC BY
28
УДК 615.038
ИЗУЧЕНИЕ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ И ИММУНОГЕННОСТИ ПРЕПАРАТА СПЛЕНОПИД
Черненкова М.Л., Стяжкина С.Н., Валинуров А.А.
ИГМА, ФГБОУ ВО «Ижевская Государственная медицинская академия», г. Ижевск, Российская Федерация.
Аннотация: Проблема коррекции иммунного ответа на сегодняшний день - одна из актуальнейших, целью ее является восстановление измененных количественных и функциональных параметров до физиологической нормы с помощью лекарственных средств, в частности иммуномодуляторов. Интерес к использованию ткани селезенки для производства иммунных препаратов не случаен, поскольку это самый богатый по количеству лимфоидной ткани орган. В середине 1940-х годов В.П. Комисаренко выделил экстракт коровьей селезенки под названием «Спленин». По описанию автора - это специфический препарат, обладающий противовоспалительными, мембрано-стабилизирующими и иммуномодулирующими свойствами. Существующие сходные препараты, полученные из ксеноселезенки - «Спленопид» (Россия), «Спленин» (Украина), «Спленин А и Б» (США), «Спленотракт» (Швейцария»), имеют, однако, разную технологию производства и поэтому обладают неодинаковым спектром биологической активности. Было установлено, что эффективность ксеноспленоперфузата и подобных препаратов обусловлена наличием в них биологически активных веществ - тафтсина, пропердина, иммуноглобулинов, опсони-нов, бактериолизина, лизоцима фибронектина.
Ключевые слова: иммунитет, иммуносупрессия, иммунопатология, спленопид, иммунопрофилактика, фагоцитарный индекс.
Специфическую активность раствора спленопида определяли постановкой реакции фагоцитоза с подсчетом фагоцитарного индекса и фагоцитарной активности. Определение фагоцитоза проводили по общепринятым методам [1,2]. Для постановки реакции фагоцитоза плазму донора с исходно сниженными показателями фагоцитарной активности и фагоцитарного индекса (0,1 мл) - опыт, смешивали с равным количеством спленопида и 0,05 мл суспензии латекса и инкубировали в течение 60 минут при температуре 370С. В контрольной серии плазму доноров с нормальными показателями фагоцитоза смешивали с равным количеством спленопида и 0,05 мл суспензии латекса. Из полученных взвесей готовили мазки на предметных
стеклах, затем препараты высушивали на воздухе, фиксировали 5 минут и окрашивали по способу Рома-новского-Гимза в течение 30 минут, после чего мазки отмывали от красителя, высушивали и микроскопиро-вали. Подсчет поглощенных частиц вели в 200 нейтрофилах по фагоцитарному показателю (фагоцитарная активность) и фагоцитарному числу. Фагоцитарный показатель (фагоцитарная активность) - процент фагоцитирующих клеток из числа сосчитанных нейтрофилов (у здоровых лиц 30-80%). Фагоцитарное число [3,4] (фагоцитарный индекс) - среднее число частиц, поглощенное одним активным нейтрофилом (в норме у взрослых 2-9). Результаты эксперименты отражены в таблице (Табл.1.).
Таблица 1.
Результаты эксперимента по изучению изменения реакции фагоцитоза после воздействия спленопидом
Тесты Исходный показатель Плазма+спленопид Исходный показатель Плазма+спленопид
Количество 20 20 25 25
Фагоцитарная активность нейтро-филов 46,64+1,18 48,75+1,02 Р>0,05 28,39+1,12 35,7+1,16 Р>0,05
Фагоцитарный индекс 3,58+0,07 3,71+0,02 Р>0,05 1,62+0,06 1,81+0,04 Р>0,05
Р> - разница при сравнении исходных и полученных результатов эксперимента.
—--—
Журнал включен в Перечень рецензируемых научных изданий ВАК
Эксперимент по изучению специфической активности спленопид показал, что добавленный в плазму донора, с исходно сниженными показателями фагоцитоза спленопид, вызывает повышение фагоцитарной активности нейтрофилов, не влияя на поглотительную способность отдельного лейкоцита. При добавлении спле-нопида в плазму донора, с исходно нормальными величинами фагоцитарной активности и фагоцитарного числа, значимых изменений этих показателей не происходит.
Исследование спленопида на иммуногенность проводили постановкой реакции двойной иммунодиффу-зии. Во всех наблюдениях (п=25) полос преципитации не было (реакция отрицательная), т.е. во всех разведенных сыворотках антител к антигену спленопид не обнаружено. Так как метод двойной иммунодиффузии характеризуется высокой специфичностью и чувствительностью [5], то с большей степенью вероятности можно утверждать об отсутствии выраженной имму-ногенности спленопида.
В настоящее время все большее признание клиницистов завоевывают рекомбинантные цитокины - ген-ноинженерные интерлейкины ИЛ-1, ИЛ-2; интерфе-роны, ронколейкин, фактор некроза опухоли-а и гра-нулоцитарно-макрофагальный колониестимулирую-щий фактор успешно используется в инфекционной патологии, сепсисологии, гематологии, онкологии. Кроме того, именно комплекс цитокинов в их естественном природном соотношении проявляет уникальный механизм действия, когда возможна активация именно тех компонентов комплекса, в которых имеется физиологическая необходимость.
На базе Московского НИИ трансплантологии и искусственных органов под руководством профессора А.Б. Цыпина разработан препарат-иммуномодулятор пептидной природы из тканей селезенки свиньи -«Спленопид». В экспериментальных и клинических исследованиях доказано, что препарат снижает активность аутоиммунных процессов, обладает детоксици-рующими свойствами при сепсисе, иммуномодулиру-ющими - при миелодепрессии.
ЛИТЕРАТУРА
1. Варганов М. В., Ситников В. А., Стяжкина С. Н. Эффективность применения препарата «Спленопид», лазеротерапии и озонотерапии в комплексном лечении гнойно-воспалительных заболеваний органов брюшной полости и забрю-шинного пространства // ПЭМ. 2006. №24-4 С.63-65.
2. Варганов М. В., Брындина И. Г., Стяжкина С. Н., Ситников В. А. Оценка эффективности применения цитокино-, озонои лазеротерапии на экспериментальной модели перитонита // ПЭМ. 2007. №27-3 С.42-44.
3. Стяжкина С. Н., Ситников В. А., Леднева А. В., Климентов М.Н., Акимов А. А. Применение и эффективность
«Спленопида» и «Ронколейкина» в лечении гнойно-воспалительных и иммунодефицитных заболеваний // Пермский медицинский журнал. 2016. №1 С.66-70.
4. Шкляев А. Е., Малахова И. Г., Горбунов Ю. В., Кова-рина Ж. А., Рачихина А. Н. Факторы риска летального исхода при заболеваниях печени (ретроспективный и проспективный анализ) // Практическая медицина.- 2014. №1 (77) С.74-77.
5. Андреева А. В., Арсланова Ю. Ф., Мишуковская Г. С. Эффективность применения ронколейкина и прополис-ного молочка при иммунизации телят против сальмонеллеза // Ученые записки КГАВМ им. Н.Э. Баумана. 2013. № С.47-50.
STUDY OF SPECIFIC ACTIVITY AND IMMUNOGENICITY OF PREPARATION OF SPLINOPID
Chernenkova M.L., Stjazhkina S.N., Valinurov A.A.
Izhevsk State Medical Academy, Izhevsk, Russian Federation
Annotation: The problem of correction of the immune response to date is one of the most urgent, its goal is to restore the changed quantitative and functional parameters to the physiological norm with the help of drugs, in particular immunomodulators. Interest in using the tissue of the spleen for the production of immune preparations is not accidental, since it is the organ richest in lymphoid tissue. In the mid-1940s, V.P. Komisarenko singled out a cow's spleen extract called Splenin. According to the author's description -this is a specific drug that has anti-inflammatory, membrane-stabilizing and immunomodulating properties. Existing similar preparations obtained from xeno-spleen - Splenopid (Russia), Splenin (Ukraine), Splenin A and B (USA), Splenotract (Switzerland), however, have different manufacturing techniques and therefore possess Unequal spectrum of biological activity. It was found that the effectiveness of xenosplenumperfuzate and similar drugs is due to the presence in them of biologically active substances - taftin, properdin, immunoglobulins, opsonins, bacteriolysin, lysozyme fibronectin.
Key words: immunity, immunosuppression, immunopathology, splenopide, immunoprophylaxis, phagocytic index.
REFERENCES
1. Varganov M. V., Sitnikov V. A., Stjazhkina S. N. Jeffek-tivnost' primenenija preparata «Splenopid», lazeroterapii i ozo-noterapii v kompleksnom lechenii gnojno-vospalitel'nyh zabolevanij organov brjushnoj polosti i zabrjushinnogo pros-transtva // PJeM. 2006. №24-4 S.63-65.
2. Varganov M. V., Bryndina I. G., Stjazhkina S. N., Sitnikov V. A. Ocenka jeffektivnosti primenenija citokino-, ozonoi lazeroterapii na jeksperimental'noj modeli peritonita // PJeM. 2007. №27-3 S.42-44.
3. Stjazhkina S. N., Sitnikov V. A., Ledneva A. V., Klimentov M.N., Akimov A. A. Primenenie i jeffektivnost'
«Splenopida» i «Ronkolejkina» v lechenii gnojno-vospalitel'nyh i immunodeficitnyh zabolevanij // Permskij medicinskij zhurnal. 2016. №1 S.66-70.
4. Shklyaev A. E., Malahova I. G., Gorbunov Ju. V., Ko-varina Zh. A., Rachihina A. N. Faktory riska letal'nogo ishoda pri zabolevanijah pecheni (retrospektivnyj i prospektivnyj analiz) // Prakticheskaja medicina.- 2014. №1 (77) S.74-77.
5. Andreeva A. V., Arslanova Ju. F., Mishukovskaja G. S. Jeffektivnost' primenenija ronkolejkina i propolisnogo molochka pri immunizacii teljat protiv sal'monelleza // Uchenye zapiski KGAVM im. N.Je. Baumana. 2013. № S.47-50.
