Изучение системы Toll-подобных рецепторов врожденного иммунитета в острый период после инфаркта миокарда Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

ВРОЖДЕННЫЙ ИММУНИТЕТ В КАРДИОЛОГИИ

Изучение системы Toll-подобных рецепторов врожденного иммунитета в острый период после инфаркта миокарда

Л.В.Ковальчук1, М.В.Хорева1, А.С.Никонова1, Е.В.Константинова2, А.А.Юдин1, М.А.Николаева3

1Российский государственный медицинский университет, кафедра иммунологии, Москва (зав. кафедрой - акад. РАЕН, проф. Л.В.Ковальчук); 2Российский государственный медицинский университет,

кафедра факультетской терапии им. акад. А.И.Нестерова лечебного факультета, Москва

(зав. кафедрой - проф. Н.А.Шостак);

3Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии

им. акад. В.И.Кулакова Росмедтехнологий, Москва

(директор - акад. РАМН, проф. Г.Т.Сухих)

В супернатантах мононуклеарных клеток (МНК) периферической крови доноров и больных с острым инфарктом миокарда (ОИМ) определяли спонтанную и индуцированную лигандами TLR выработку ФНОа, а также экспрессию TLR2 и TLR4 на моноцитах. Выявили повышенную спонтанную выработку ФНОа МНК больных с ОИМ в 1-е сутки заболевания. Лиганды TLR2/6 и TLR4 - зимозан и липополисахарид обладают выраженным стимулирующим влиянием на выработку ФНОа МНК у этих больных. Процентное содержание CD14+ моноцитов, экспрессирующих TLR2, TLR4, у больных с ОИМ на 1-е сутки заболевания выше (79,13 и 75,78% для TLR2 и TLR4, соответственно), чем в группе здоровых доноров. Выявленные изменения экспрессии и функционирования TLR2 и TLR4 у больных с ОИМ свидетельствуют о вовлечении этих рецепторов в патогенез ОИМ, а их гиперактивация может приводить к избыточной выработке провоспалительных цитокинов, в частности ФНОа, к развитию осложнений и неблагоприятному исходу заболевания.

Ключевые слова: Toll-подобные рецепторы, ФНОа, МНК, острый инфаркт миокарда

Study of innate immune toll-like receptors' system in acute period after myocardial infarction

L.V.Kovalchuk1, M.V.Khoreva1, A.S.Nikonova1, E.V.Konstantinova2, A.A.Yudin1, M.A.Nikolayeva3

1Russian State Medical University, Department of Immunology, Moscow (Head of the Department - Prof. L.V.Kovalchuk);

2Russian State Medical University, Department of Faculty Therapy named after Acad. A.I.Nesterov, Moscow (Head of the Department - Prof.N.A.Shostak);

3Scientific Center for Obstetrics, Gynecology and Perinatology named after Acad. V.I.Kulakov, Moscow (Director - Acad. of RAMS, Prof. G.T.Sukhikh)

There was evaluated spontaneous and induced by TLR ligands TNFа production in peripheral blood mononuclear cells (PBMC) supernatants from healthy controls and patients with acute myocardial infarction (AMI), and expression of TLR2 and TLR4 on monocytes. Spontaneous TNFа production by PBMC of AMI patients was increased on the 1st day of the disease. Zymosan and lipopolysaccharide, TLR2/6 and TLR4 ligands marked stimulatory effect on TNFа production in those patients. Percentage of CD14+ monocytes expressing TLR2 and TLR4 in the patients on the 1st day of AMI (79,13% and 75,78%, for TLR2 and TLR4, accordingly) was higher in comparison with healthy controls. Revealed changes in TLR2 and TLR4 expression and functioning indicated that those receptors were involved in pathogenesis of AMI, and TLR hyperactivation could lead to the excessive production of proinflammatory cytokines, TNFа in particular, to the development of complications and unfavorable disease outcome.

Key words: Toll-like receptors, TNFа, PBMC, acute myocardial infarction

Для корреспонденции:

Хорева Марина Викторовна, кандидат медицинских наук, доцент кафедры иммунологии Российского государственного медицинского университета Адрес: 117997, Москва, ул. Островитянова, 1 Телефон: (495) 434-3165 E-mail: mv@rsmu.ru

Статья поступила 12.10.2009 г., принята к печати 09.12.2009 г.

Заболевания сердечно-сосудистой системы - одна из основных причин смертности, временной и стойкой утраты трудоспособности населения в России и в других странах мира. Хорошо известна роль воспалительных и традиционных иммунных процессов в их патогенезе. Однако механизмы, определяющие кардиоиммунные взаимодействия, базирующиеся на современных представлениях о

врожденном иммунитете, практически не изучены. В настоящее время в иммунологии большое внимание уделяется изучению компонентов врожденного иммунитета, в частности, Toll-подобных рецепторов (TLR), их роли в патогенезе иммуноопосредованных заболеваний человека. Лигандами TLR являются не только консервативные структуры микроорганизмов (бактерий, вирусов), но и эндогенные структуры, образующиеся в результате деструкции клеток и воспалительного процесса (белки теплового шока - Hsp60, Hsp70 и gp96, фибриноген, экстра-домен А фибронектина, минимально модифицированные ЛПНП и др.) [1, 2]. TLR распознают эндогенные «сигналы опасности» как маркеры тканевого повреждения. Активация клеток иммунной системы через TLR приводит к выработке разнообразных эффекторных молекул (цитокинов и других медиаторов иммунного ответа, воспаления и регенерации), к развитию и реализации реакций врожденного и адаптивного иммунного ответа [3].

В последние годы установлено, что TLR экспрессируются не только клетками иммунной системы, но и широко представлены на клеточных элементах негемопоэтического происхождения, в частности, на кардиомиоцитах, клетках эндотелия сосудов и т.п. [4]. Накапливаются данные о роли полиморфизма генов TLR в ассоциации с чувствительностью или устойчивостью к атеросклерозу, острому инфаркту миокарда (ОИМ) и к другим заболеваниям, что открывает новые пути к формированию групп генетического риска и к профилактике сердечно-сосудистой патологии [5].

На кафедре иммунологии РГМУ разработана концепция комплексной оценки разных уровней функционирования системы TLR-рецепторов и с 2004 года начаты исследования по ее реализации при различных заболеваниях человека [6, 7]. В литературе встречаются лишь единичные работы, касающиеся изучения TLR при остром инфаркте миокарда и его осложнениях [8, 9]. Цель данного исследования - изучить выработку провоспалительных цитокинов мононукле-арными клетками (МНК) периферической крови, экспресси-рующими TLR у больных с ОИМ.

Пациенты и методы исследования

Группу больных с ОИМ составили 13 человек. Из них 12 мужчин в возрасте от 50 до 80 лет и одна женщина в возрасте 70 лет (средний возраст - 65,7 ± 10,7 года). У всех обследованных больных развился трансмуральный инфаркт миокарда. 75% больных страдали артериальной гипертензи-ей. У 17% больных ишемия сосудов сердца предшествовала ОИМ. Больные получали стандартную терапию с использованием препаратов из группы p-адреноблокаторов, ингибиторов ангиотензинпревращающего фермента (АПФ), нитратов и антиагрегантов. Забор крови у больных проводили на 1-е и 14-е сутки после ОИМ.

В группу сравнения включили здоровых доноров крови (17 человек в возрасте 20-40 лет).

Выделение мононуклеарных клеток. МНК выделяли из гепаринизированной периферической крови (25 ед./1 мл крови) здоровых людей и больных с ОИМ в одноступенчатом градиенте плотности фиколл-урогра-фин («Pharmacia», р = 1,077 г/см3). Клетки культивировали в среде RPMI-1640, содержащей 5% сыворотки эмбрионов

коров («Hy Clone, Perbio»), 2 мМ L-глутамина (ФГУП «ПИПВЭ им. М.П.Чумакова РАМН») и 100 мкг/мл гентами-цина (ОАО «Дальхимфарм», Хабаровск) в течение 24 ч при 37°С в атмосфере с 5% СО2. Рабочая концентрация клеток составляла 1 х 106/мл.

Стимуляция клеток. В качестве лигандов TLR использовали следующие стимуляторы: пептидогликан (Staphylococcus aureus, «Sigma/Fluka») 5 мкг/мл, зимозан (Saccharomyces cerevisiae, «Sigma») 10,0 мкг/мл, ЛПС (E. coli 0127: B8, «Sigma») в дозе 0,1 мкг/мл, флагеллин (Salmonella thyphimurium, «InvivoGen») 0,5 мкг/мл, Poly(I:C) («Sigma») 20 мкг/мл и олигодезоксинуклеотид (ОДН) CpG («InvivoGen») 1,0 мкг/мл, действующие через TLR1/2, TLR2/6, TLR4, TLR5, TLR3 и TLR9, соответственно. Контролем служили МНК, культивируемые только в полной среде RPMI-1640 (спонтанная выработка ФНОа). По окончании культивирования (24 часа) МНК осаждали центрифугированием при 400 g в течение 15 мин, получали суперна-танты и хранили в течение 2-3 мес при минус 70°С.

Определение концентрации ФНОа. Концентрацию ци-токина определяли в супернатантах культур клеток с использованием иммуноферментного анализа, применяя коммерческие тест-системы «Biosours».

Определение экспрессии TLR. Для определения экспрессии TLR2 и TLR4 на нестимулированных лигандами моноцитах периферической крови МНК инкубировали с FITC-меченными антителами к CD14 («Caltag»), PE-меченными антителами к TLR2 (TL2.1, «e-Bioscience») или PE-меченными антителами к TLR4 (HTA-125, «e-Bioscience»), а также с соответствующими изотипическими контролями («Caltag») 30 мин при 4°С. Анализ экспрессии CD14, TLR2 и TLR4 проводили на проточном цитофлуориметре Facscan (Becton Dickinson, США), выделяя в окне Dot Plot моноциты. Оценивали процент моноцитов, несущих на своей поверхности TLR2 и TLR4, и среднюю интенсивность флуоресценции (СИФ), величину которой выражали в условных единицах флуоресценции.

Статистическая обработка результатов проводилась стандартными статистическими методами с использованием программы Statistica. Результаты выражали как среднее арифметическое для анализируемой группы показателей ± стандартное отклонение. Для оценки достоверности различий применяли непараметрические критерии Вилкоксона и Манна-Уитни. Различие средних показателей считалось достоверным при уровне значимости менее 0,05.

Результаты исследования и их обсуждение

Взаимодействие индивидуальных TLR с их лигандами инициирует активацию сигнальных путей в клетках, в результате чего происходит экспрессия генов провоспалительных цитокинов: фактора некроза опухоли (ФНОа), интерлей-кинов (ИЛ) ИЛ-1, ИЛ-6, ИЛ-12, интерферонов 1 типа -ИФНа/ß, хемокинов, костимуляторных молекул и др. Продукты этих генов опосредуют дальнейшие эффекты TLR: регулируют реакции врожденного иммунитета и направляют развитие адаптивного иммунного ответа.

На кафедре иммунологии РГМУ разработан метод оценки эффекторных функций TLR по выработке ФНОа МНК периферической крови человека в ответ на лиганды TLR. Пара-

метры выработки ФНОа в ответ на различные лиганды у здоровых людей приведены в предыдущей работе [6]. ФНОа -один из основных эффекторных цитокинов, обеспечивающих развитие воспалительной реакции. Для разработки метода мы использовали МНК, выделенные в градиенте плотности фиколл-верографин, а не цельную кровь, так как растворимые ингибиторы TLR, цитокины, предсуществующие в плазме, могут негативно влиять на оценку функций TLR.

На 1-м этапе оценили спонтанную выработку ФНОа МНК больных с ОИМ на 1-е и 14-е сутки заболевания. В 1-е сутки выявили повышенную спонтанную выработку ФНОа (153,68 ± 37,38 пг/мл) у больных с ОИМ по сравнению с группой здоровых доноров (34,51 ± 1,06 пг/мл). В обследованную группу входили больные, страдающие ишемической болезнью, спонтанная выработка ФНОа у них была выше и составила 330,13 ± 57,03 пг/мл. К 14-м суткам заболевания продукция провоспалительного цитокина нестимулированными МНК снижается и приближается к спонтанной выработке ФНОа МНК у здоровых доноров - 38,76 ± 7,63 пг/мл.

Повышенная спонтанная продукция ФНОа МНК больных в 1-е сутки ОИМ свидетельствует о предактивации клеток у этих больных in vivo, что может быть связано с воздействием различных молекул, высвобождающихся при повреждении клеток, например, белков теплового шока, активных форм кислорода и др.

На 2-м этапе исследовали влияние лигандов TLR на выработку ФНОа МНК у больных с ОИМ на 1-е и 14-е сутки. Оптимальные дозы используемых лигандов были выбраны на основании методических рекомендаций фирм-производителей используемых лигандов, данных литературы и собственных исследований.

Лиганды TLR1/2, TLR2/6, TLR3 и TLR4 стимулируют продукцию ФНОа МНК у больных с ОИМ. При этом лиганды TLR2/6 (зимозан) и TLR4 (ЛПС) обладают наиболее выраженным действием на выработку цитокина. Продукция ФНОа у больных с ОИМ в 1-е сутки в ответ на зимозан составила 1846,32 ± 112,88 пг/мл, на ЛПС - 988,01 ± 52,51 пг/мл. В группе здоровых доноров продукция ФНОа в ответ на зи-мозан и ЛПС составила 585,07 ± 88,28 пг/мл и 337,72 ±

± 11,63 пг/мл, соответственно. Повышенное высвобождение провоспалительного ФНОа МНК больных в ответ на лиганды Т1_Я свидетельствует об активации Т1_Я2/6 и Т1_Я4 и может быть следствием повышенной экспрессии этих рецепторов на поверхности МНК, а также результатом гиперактивации сигнального каскада этих рецепторов. К 14-м суткам стимулированная лигандами Т1_Я2/6 и Т1_Я4 выработка ФНОа снижалась (зимозан - 1417,22 ± 103,03 пг/мл; ЛПС -910,69 ± 102,79 пг/мл), оставаясь высокой по сравнению со значениями в группе здоровых доноров (рис. 1).

У двух больных с ОИМ в обследованной нами группе наблюдалось повышение спонтанной продукции ФНОа на 14-й день заболевания по сравнению со значениями их спонтанной выработки в 1-й день. Выявили также повышение синтеза ФНОа к 14-му дню у этих больных и при стимуляции лигандами Т1_Я4 и Т1_Я2/6 - ЛПС и зимозаном (рис. 2). В дальнейшем у них развились осложнения (повторный инфаркт миокарда в одном случае и формирование аневризмы - в другом). Не исключено, что избыточная выработка ФНОа у больных с ОИМ на 14-е сутки заболевания является одним из факторов, приводящим к развитию осложнений основного заболевания.

Таким образом, дальнейшее увеличение выработки ФНОа МНК больных в ответ на лиганды Т1_Я - ЛПС и зимо-зан к 14-м суткам после развития ОИМ в сравнении с индуцированной выработкой ФНОа на 1-е сутки заболевания может служить прогностическим признаком неблагоприятного исхода заболевания.

Лиганды Т1_Я3 и Т1_Я9 - Ро1у(1:С) и CpG обладают меньшей стимулирующей активностью на выработку ФНОа. В обследованных нами группах здоровых доноров и больных с ОИМ мы не выявили достоверных различий в выработке ФНОа в ответ на Ро1у(1:С) и CpG (см. таблицу).

Наряду с изучением функциональной активности Т1_Я проводилась оценка поверхностной экспрессии Т1_Я клетками врожденного иммунитета. Мы изучали экспрессию Т1_Я2 и Т1_Я4 на моноцитах периферической крови здоровых доноров и больных с ОИМ. Процентное содержание С014+-мо-ноцитов, экспрессирующих на поверхности Т1_Я2 у здоровых

пг/мл 2000

1500

1000

500

i

Í

Í

Í

[fL

Спонтанная ЛПС 0,1 1-е сутки

Зимозан 10 CpG 1,0 14-е сутки

P(I:C)20

Рис. 1. Концентрация ФНОа в супернатантах культур, стимулированных лигандами TLR МНК больных с ОИМ на 1-е и 14-е сутки.

пг/мл 2500

2000

1500

1000

500

Спонтанная ЛПС 0,1

1-е сутки

Зимозан 10 14-е сутки

P(I:C)20

Рис. 2. Концентрация ФНОа в супернатантах культур, стимулированных лигандами TLR МНК больного с осложнениями ОИМ (аневризма) на 1-е и 14-е сутки.

0

0

Таблица. Концентрация ФНОа (пг/мл) в супернатантах культур МНК в ответ на лиганды TLR в норме и у больных с ОИМ

Группы обследованных Спонтанная ЛПС, Зимозан, Пептидогликан, 0,1 мкг/мл 10 мкг/мл 5 мкг/мл Poly(I:C), 20 мкг/мл CpG, 1 мкг/мл Флагеллин, 0,5 мкг/мл

Доноры 34,51 ± 3,06 337,72 ± 11,63 585,07 ± 88,28 145,87 ± 13,24 141,63 ± 29,17 277,17 ± 149,62 309,20 ± 118,49

ОИМ, 1-е сутки 153,68 ± 37,38* 988,01 ± 138,71* 1846,32 ± 374,02* 422,54 ± 45,83* 209,45 ± 41,29 196,73 ± 74,51 н.о.

*р < 0,05 по сравнению с группой здоровых доноров; н.о. - значения не определялись.

доноров, составило 55,04 ± 3,69% от общей популяции моно-цитарных клеток. Количество С014+Т1_Я4+ клеток у здоровых доноров составило 42,53 ± 6,12%. Средняя ИФ для Т1_Я2 и Т1_Я4 у здоровых доноров составила 100,86 ± 9,45 и 97 ± 8,38, соответственно. Начатые исследования по изучению экспрессии Т1_Я у больных с ОИМ показали, что процентное содержание Т1_Я2 и Т1_Я4 на моноцитах больных с ОИМ на 1-е сутки заболевания оказалось выше (79,13 и 75,78% для Т1_Я2 и Т1_Я4, соответственно), чем в норме. К 14-м суткам заболевания экспрессия Т1_Я2 снижалась (41,22%), хотя Т1_Я4 оставалась высокой (70,34%). На рис. 3 представлены результаты анализа экспрессии Т1_Я2 и Т1_Я4 на моноцитах больного с ОИМ.

Выявленные изменения экспрессии и функционирования Т1_Я2 и Т1_Я4 у больных с ОИМ свидетельствуют о вовлечении этих рецепторов в патогенез ОИМ, а их гиперактивация может приводить к развитию осложнений и неблагоприятного исхода заболевания.

Известно, что важную роль в патогенезе острых патологических состояний играют провоспалительные цитокины (ФНОа, ИЛ-1, ИЛ-6 и др.), их экспрессия может быть индуцирована при активации специфических рецепторов врожденного иммунитета.

Одним из основных эффекторных цитокинов, выработка которого реализуется преимущественно через Т1_Я, является ФНОа. Длительная и избыточная активация Т1_Я приво-

дит к высвобождению повышенных количеств данного цито-кина, который обладает плейотропными свойствами и в зависимости от концентрации будет выполнять не только позитивную роль в организме, но может оказаться фактором тканевого повреждения, способствующим развитию различных осложнений основного заболевания; так, хроническое воспаление, включающее повышенные уровни провоспали-тельных цитокинов, способствует прогрессированию дисфункции левого желудочка и его ремоделированию после инфаркта миокарда [10-12].

Проведенное исследование свидетельствует о повышенной эффекторной функции и экспрессии TLR1/2, TLR2/6 и TLR4 на МНК периферической крови больных с ОИМ, увеличенной спонтанной выработке ФНОа и повышенной индуцированной соответствующими лигандами TLR выработке этого цитокина. Несомненно, избыток провоспалительных цитокинов, в частности ФНОа, может влиять на репаратив-ные процессы, происходящие в ткани миокарда. При этом важным остается вопрос о природе лигандов, которые могут способствовать их выработке in vivo. В последние годы активно обсуждается роль эндогенных лигандов в активации рецепторов врожденного иммунитета. Недавние исследования показали, что Toll-подобные рецепторы могут быть вовлечены в воспаление в миокарде не только в ответ на микробы, но также в ответ на молекулы, высвобождающиеся из поврежденных клеток, например, на белки теплового

А

ÉL

W щ

Б

IIM

■л - '

V4ÍÍ

"У

[Хм я ЯК.

J

Рис. 3. Экспрессия ТЫЧ на моноцитах здоровых доноров и больного с ОИМ: А, Б - экспрессия Т1_В2 и Т1_В4 на клетках здоровых доноров, соответственно; В, Г - экспрессия Т1_Я2 и Т1_Я4 на клетках больного с ОИМ на 1-е сутки, соответственно.

В

Г

шока, фибронектин и активные формы кислорода. Показано, что при ОИМ из ишемизированных участков миокарда в системный кровоток поступают эндогенные молекулы Нэр70. Уровни циркулирующего Нэр70, мРНК Т1_Я4 и белка Т1_Я4 на циркулирующих моноцитах, а также провоспалительных ци-токинов - ИЛ-6 и ФНОа в плазме у пациентов с ОИМ положительно коррелировали и были выше по сравнению с таковыми у здоровых лиц [5]. Стимуляция Т1_Я ведет к последующей активации транскрипционного фактора ЫР-кЬ и экспрессии провоспалительных цитокинов, хемокинов, молекул адгезии, что приводит к развитию постинфарктного воспалительного и иммунного ответов в пределах миокарда [10]. Таким образом, на начальных этапах развития воспалительной реакции активация Т1_Я способствует реализации адекватного ответа на повреждение и инициации процессов тканевой репарации.

Своевременное снижение уровня провоспалительных цитокинов важно для индукции процессов тканевой репарации. Длительная же и чрезмерная активация Т1_Я моноцитов, кардиомиоцитов и других клеток, участвующих в процессах постинфарктного заживления, избыточным количеством высвобождающегося Нэр70 или других эндогенных лигандов у больных с ОИМ, в присутствии лигандов Т1_Я экзогенного происхождения сопровождается продукцией высоких уровней провоспалительных цитокинов, приводящих к дополнительному повреждению ткани, и может играть роль в развитии системного воспалительного ответа, способствующего развитию неблагоприятного исхода заболевания. Затянувшийся воспалительный процесс, включающий продукцию повышенных уровней провоспали-тельных цитокинов, возможно, играет важную роль в формировании осложнений ОИМ, в частности, сердечной недостаточности [4, 13]. Подтверждением данного предположения служат трансгенные мышиные модели со сверхэкспрессией ИЛ-6 или ФНОа, демонстрирующие, что оба ци-токина способствуют развитию клинических и физиологических аспектов сердечной недостаточности, включающих прогрессию дисфункции левого желудочка (ЛЖ), ремоде-лирование ЛЖ и апоптоз кардиомиоцитов. В нескольких исследованиях сообщается о связи между увеличением уровней воспалительных цитокинов и хемокинов в плазме и прогрессивным снижением левожелудочковой фракции выброса; исходя из этого, эти воспалительные медиаторы вполне могут давать важную прогностическую информацию о пациенте [13].

Важно, что источником провоспалительных цитокинов могут быть не только клетки иммунной системы, но и клетки миокарда. Имеются работы, свидетельствующие об экспрессии мРНК и белков Т1_Я кардиомиоцитами. Они экс-прессируют широкий спектр Т1_Я, включая Т1_Я2, Т1_Я3, Т1_Я4, Т1_Я5, Т1_Я7 и Т1_Я9, через ЫР-кЬ эти рецепторы инициируют высвобождение провоспалительных цитокинов и хемокинов самими кардиомиоцитами. В местах повреждения миокарда на кардиомиоцитах выявлено увеличение экспрессии Т1_Я4. Активация Т1_Я сопровождается быстрым снижением сократимости кардиомиоцитов [14]. Провоспали-тельные цитокины могут участвовать в развитии локальной воспалительной реакции и приводить к развитию системного воспаления.

Заключение

Таким образом, негативное значение рецепторов врожденного иммунитета при некоторых острых патологических процессах может реализоваться, по крайней мере, через 2 механизма. Один из них связан с повышением активации клеток врожденного иммунитета, в частности, нейтрофилов, макрофагов и др., с более высокой экспрессией TLR. Другой механизм может быть связан с функцией тех рецепторов врожденного иммунитета, которые экспрессируются непосредственно клетками органа-мишени патологического процесса, в нашем случае сердечной мышцы. Причиной повышенной выработки провоспалительных цитокинов может быть как сам воспалительный процесс в органе-мишени, так и полиморфизм генов TLR, цитокинов.

Анализ экспрессии и эффекторных функций TLR у больных c ОИМ позволяет сделать вывод о неоднозначной роли рецепторов врожденного иммунитета в реализации патологического процесса. TLR могут рассматриваться как маркеры диагностики и прогрессирования заболеваний сердечнососудистой системы.

Поиск лекарственных средств кардиотропного и иммуно-тропного действия на систему врожденного иммунитета приведет к совершенно новому подходу в лечении больных с патологией сердечно-сосудистой системы.

Литература

1. Tsan Min-Fu, Gao B. Endogenous Ligands of Toll-like receptors // J. Leuk. Biol. -

2004. - V.76. - P.514-519.

2. Wallin R.P., Lundqvist A., More S.H. et al. Heat-shock proteins as activators of the innate immune system // Trends Immunol. - 2002. - V.23. - P.130-135.

3. Ковальчук Л.В., Хорева М.В., Варивода А.С. Врожденные компоненты иммунитета: Toll-подобные рецепторы в норме и при иммунопатологии // ЖМЭИ. -

2005. - №4. - С. 96-104.

4. Zhu X., Bagchi A., Zhao H. et al. Toll-like receptor 2 activation by bacterial peptidoglycan-associated lipoprotein activates cardiomyocyte inflammation and contractile dysfunction // Crit. Care Med. - 2007. - V.35. - N3. - P.886-892.

5. Olivieri F., Antonicelli R., Cardelli M. et al. Genetic polymophisms of inflammatory cytokines and myocardial infarction in the elderly // Mech. Ageing Dev. - 2006. -V.127 (6). - P.552-559.

6. Ковальчук Л.В., Хорева М.В., Варивода А.С. и др. Влияние лигандов Toll-подобных рецепторов на выработку in vitro провоспалительных цитокинов мононуклеарными клетками периферической крови здоровых людей и больных с общей вариабельной иммунологической недостаточностью // ЖМЭИ. - 2007. - №1. - С.38-42.

7. Ковальчук Л.В., Хорева М.В., Варивода А.С. и др. Рецепторы врожденного иммунитета: подходы к количественной и функциональной оценке Toll-подобных рецепторов человека // Иммунология. - 2008. - № 4. - С.223-227.

8. Satoh M., Shimoda Yu., Akatsu T. et al. Elevated circulating levels of heat shock protein 70 are related to systemic inflammation reaction through monocyte Toll signal in patients with heart failure after acute myocardial infarction // Eur. Soc. Cardiol. - 2006. - V.8. - P.810-815.

9. Satoh M., Shimoda Y., Maesawa C. et al. Activated toll-like receptor 4 in monocytes is associated with heart failure after acute myocardial infarction // Int. J. Cardiol. - 2006. - V.109 (2). - P.226-234.

10. Aukrust P., Gullestad L., Ueland T. et al. Inflammatory and anti-inflammatory cytokines in chronic heart failure: potential therapeutic implications // Ann. Medicine. - 2005. - V.37. - P.74-85.

11. Sun M., Chen M., Dawood Fayez et al. Tumor necrosis factor-a mediates cardiac remodeling and ventricular dysfunction after pressure overload state // Circulation. - 2007. - V.115. - P.1398-1407.

12. Torre-Amione G., Kapadia S., Benedict C. et al. Proinflammatory cytokine levels in patients with depressed left ventricular ejection fraction: a report from the stadies of left ventricular dysfunction (SOLVD) // J. Am. Coll. Cardiol. - 1996. - V.27. -P.1201-1206.

13. Frantz S., Ertl G., Bauersachs J. Mechanisms of disease: Toll-like receptors in cardiovascular disease // Nat. Clin. Pract. Cardiovas^ Med. - 2007. - V.4 (8). - P.444-454.

14. Boyd J.H., Mathur S., Wang Y. et al. Toll-like receptor stimulation in cardiomyocytes decreases contractility and initiates an NF-kB dependent inflammatory response // Cardiovasc. Res. - 2006. - V.72 (3). - P.384-393.

Информация об авторах:

Ковальчук Леонид Васильевич, доктор медицинских наук, академик РАЕН, профессор, заведующий кафедрой иммунологии Российского государственного медицинского университета Адрес: 117997, Москва, ул. Островитянова, 1 Телефон: (495) 434-8047 E-mail: lkov@rsmu.ru

КРАТКОЕ СООБЩЕНИЕ

Ростовой фактор дифференцировки 15

Ростовой фактор дифференцировки 15 (GDF-15/MIC-1 - growth differentiation factor 15 или macrophage-inhibitory cytokine 1) - цитокин суперсемейства трансформирующего фактора роста р (TGFp). В норме данный белок продуцируется различными тканями (главным образом в плаценте и простате), исключая сердце. В сердце GDF-15 начинает синтезироваться на фоне окислительного стресса при инфаркте миокарда и других сердечно-сосудистых заболеваниях (гипертония, атеросклероз). Повышенный уровень GDF-15 коррелирует с увеличением риска кардиоваскулярных событий и является новым биомаркером риска смерти у пациентов с острым коронарным синдромом без подъема ST-сегмента у пациентов с легочной гипертензией. Также имеется взаимосвязь между повышенным уровнем GDF-15 и факторами риска сердечно-сосудистых заболеваний (мужской пол, индекс массы тела, курение, окружность талии, диабет, уровни постпрандиальной глюкозы, триглицеридов, холестерина, липопротеидов высокой плотности), снижением эндотелийзависимой вазодилатации, степенью развития атеросклеротической бляшки, концентрической левожелу-дочковой гипертрофией, массой левого желудочка, сниженной фракцией выброса левого желудочка, манифестацией болезни коронарных артерий, сердечной недостаточностью, а также является прогностическим фактором смертности от сердечно-сосудистых заболеваний у женщин старшего возраста.

Пациенты с хронической сердечной недостаточностью и уровнем GDF-15 в пределах нормального диапазона (<1200 нг/л) имеют хороший прогноз на следующие 4 года, тогда как пациенты с повышенными уровнями GDF-15 имеют высокий риск смерти. Фактически смертность более чем за 4 года составила менее 10% у пациентов с наиболее низкими уровнями GDF-15, тогда как среди пациентов с очень высокими уровнями этого показателя смертность была 56,2%. Важно, что GDF-15 добавляет прогностическую информацию к установленным прогностическим маркерам (почечная недостаточность, анемия, высокий уровень мочевой кислоты или мозгового натрийуретического пептида). По сравнению с другими маркерами, используемыми для мониторинга пациентов с хронической систолической дисфункцией (N-терминальный предсердный натрийуретический про-пептид, N-терминальный мозговой натрийуретиче-ский про-пептид, тропонин Т и высокочувствительный С-реактивный белок), GDF-15 - единственный маркер, который коррелирует с ренальной функцией у этих пациентов.

Источник: Каталог ЗАО «БиоХимМак». 2009. Т. 2. С. 567.

Никонова Анна Сергеевна, кандидат медицинских наук, старший преподаватель кафедры иммунологии Российского государственного медицинского университета Адрес: 117997, Москва, ул. Островитянова, 1 Телефон: (495) 434-3165 E-mail: annesha@mail.ru

Юдин Александр Александрович, кандидат медицинских наук,

научный сотрудник отдела иммунологии

Российского государственного медицинского университета

Адрес: 117997, Москва, ул. Островитянова, 1

Телефон: (495) 434-3165

E-mail: youdine@gmail.com

Константинова Екатерина Владимировна, кандидат медицинских наук, ассистент кафедры факультетской терапии им. акад. А.И.Нестерова лечебного факультета Российского государственного медицинского университета

Адрес: 119049, Москва, Ленинский пр-т, 8, корп. 8 Телефон: (495) 236-9661 E-mail: Katekons@mail.ru

Николаева Марина Аркадьевна, доктор медицинских наук, старший научный сотрудник Научного центра акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И.Кулакова Росмедтехнологий

Адрес: 117997, Москва, ул. акад. Опарина, 4 Телефон: (495) 438-2600 E-mail: nikolaeva_ma@mail.ru