CC BY
46
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ» 59
Материалы и методы. Использовали перевиваемые КЛ Результаты и Заключение. Обнаружено, что пентапеп-меланомы кожи — melIS, melH; глиобластомы — Glb-Sh, тид CIF и тетрапептиды TP-OMe и TP-ONH2 способны Glb-17; рака яичников — CrovCel; рака молочной железы специфически связываться с рецепторами соматостатина с множественной лекарственной устойчивостью — HBL- и ингибировать синтез цАМФ аденилатциклазой в клетках 100/Dox; гепатокарциномы — Huh7; гепатобластомы — нейробластомы человека линии IMR-32 в концентрации HepG2, рака поджелудочной железы — Panel, MiaPaCan2, 10 мкМ. Наибольшая специфичность связывания показа-AsPcl, CaPa2; и контроль — фибробласты линии H1036. на для CIF. Тетрапептиды не проявляли цитостатической Цитотоксичность 5 КП, обогащенных Arg/Lys, изучали активности в концентрациях до 50 мкМ, в отличие от CIF. в МТТ-тестах; механизмы цитотоксичности — с помощью Преинкубация клеток с пептидами в течение 24 ч не вли-проточной цитометрии, ОТ-ПЦР, ИГХ, вестерн-блоттин- яла на теломеразную активность. га с использованием коммерческих антител к С23/В23/р53; Работа выполнена при финансовой поддержке НИЦКИ флуоресцентно меченный Су5*-КП RgK4K2KAC-NH2 при- (внутренний грант, приказ № 1030 от 05.07.2017). меняли для микроскопического контроля процесса. Результаты. Показана высокая селективная цитоток- Т.Р. Приходченко1, Н.П. Акентьева1, Е.С. Немирова2, сичность изученных КП: выживаемость клеток в МТТ-те- А.Р. Гизатуллин1, Н.И. Шкондина1 стах после 2—3-суточной инкубации опухолевых КЛ с КП ИЗУЧЕНИЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТИ составила, в зависимости от КЛ, 8-25 %, а в контроле РАСТИТЕЛЬНЫХ ЭКСТРАКТОВ не изменилась. Окрашивание инкубированных с КП кле- (KALANCHOE DAIGREMONTIANA, ALOEARBORESCENS) ток DAPI и Höchst выявило апоптоз, подтвержденный ме- НА КЛЕТКАХ МНОЖЕСТВЕННОЙ МИЕЛОМЫ тодом проточной цитофлуориметрии. ОТ-ПЦР, блоттинг ФГБУНИПХФ РАН, Черноголовка, Московская область, и ИГХ-анализ выявили гиперэкспрессию генов NCL/NPM Россия; и белков С23/В23 во всех опухолевых КЛ. Например, после 2МГОУ, Москва, Россия 3-суточной инкубации КЛ melIS с КП уровень С23 упал Введение. Множественная миелома (ММ) составляет наиболее резко, а р53 — вырос до 2,5 раза; до инкубации со- около 1 % всех злокачественных новообразований и чуть ответственные уровни были в ~ 8,5 раза выше и в ~ 2,8 раза более 10 % гемобластозов, поэтому поиск новых методов ниже контрольных. Возможный механизм избирательной ее лечения является весьма актуальным. Проявление по-токсичности КП во всех исследованных КЛ включает взаи- бочных эффектов при использовании химических препа-модействие (+)-кластеров молекул КП с (-)-доменами ре- ратов, оперативных методов, а также необходимость дли-цепторного С23, конкурентное связывание КП с избытком тельной (иногда годами) коррекции патологического С23/В23 после транспорта в клетки, с последующей акти- процесса — все это заставляет врачей обратить внимание вацией супрессора р53 и каспаз 3, 8, 9 и дальнейшим апо- на возможности традиционной медицины. Лекарственные птозом. растения могут быть эффективны в профилактике реци- Заключение. Показано, что изученные КП с разной дивов онкологических заболеваний, во многих случаях молекулярной структурой индуцируют гибель опухолевых только фитотерапия позволяет избежать осложнений, выз-клеток из различных модельных линий в результате акти- ванных применением химиопрепаратов. Растительные вации каспаз 3, 8 и 9 и апоптоза. Эти КП отобраны для средства обладают способностью выводить токсические дальнейшего исследования in vivo. вещества и продукты обмена благодаря диуретическому действию, повышению антитоксической функции печени, Г.А. Посьтанова1. В.Н. Осипов2, Ю.П. Семочкина1, стабилизации клеточных мембран. Поэтому поиск расти-О.В. Высоцкая1, Д.С. Хачатрян2 тельных экстрактов, обладающих противоопухолевой ак-ИССЛЕДОВАНИЕ БИОЛОГИЧЕСКОЙ тивностью, важен для онкомедицины. АКТИВНОСТИ НОВЫХ ЛИНЕЙНЫХ ПЕПТИДОВ - Цель исследования. Оценить противоопухолевую ак-АНАЛОГОВ СОМАТОСТАТИНА тивность экстрактов Kalanchoe daigremontiana, Aloe arbore-1НИЦ«Курчатовский институт», Москва, Россия; scens на клетках ММ (линия 8226). Изучить влияние рас-2НИЦ«Курчатовский институт» — ИРЕА, тительных экстрактов каланхоэ и алоэ на метаболизм Москва, Россия опухолевых клеток ММ. Цель исследования. Выявление новых пептидов — ли- Материалы и методы. Исследования выполнены на кле-нейных аналогов соматостатина, способных избирательно точной линии ММ 8226. Эта линия характеризуется выра-связываться с опухолевыми клетками, и изучение механиз- женной экспрессией мРНК IGF-1 и мРНК IGF-2 и всех ма их действия. их рецепторов. Определение жизнеспособности клеток Материалы и методы. Пептиды синтезировали с помо- проводили флуоресцентным методом, с помощью Alamar щью классических методов пептидной химии в жидкой reagent assay. Были исследованы следующие концентрации фазе. Связывание пептидов с клетками и анализ клеточно- растительных экстрактов: для каланхоэ — 0,45 мг белка, го цикла исследовали с помощью проточной цитофлуори- для алоэ — 0,16 мг. В качестве контроля использовали док-метрии. Уровень цАМФ в клетках определяли с помощью сорубицин (7 х 10—4 М). Аддитивный эффект экстрактов конкурентного иммуноферментного анализа. Определение каланхоэ и алоэ определяли в комбинации доксорубицина теломеразной активности в экстрактах из клеток проводи- с растительными экстрактами. Для определения митохон-ли с помощью метода TRAP. Цитостатическую активность дриального мембранного потенциала использовался флуо-пептидов исследовали с помощью МТТ-теста. риметрический метод с помощью красителя JC-1. Уровень
Спецвыпуск / том 17 / 2018 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
60
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
общего глутатиона определяли флуоресцентным методом с помощью о-фталевого альдегида.
результаты. Предварительная инкубация клеток ММ с растительными экстрактами каланхоэ (Kalanchoe daigre-montiana) и алоэ (Aloe arborescens) понижала жизнеспособность опухолевых клеток на 16 и 45 % соответственно. Для сравнения: доксорубицин понижал выживаемость клеток на 40 %. Экстракт каланхоэ в комбинации с доксо-рубицином уменьшал жизнеспособность клеток на 28 %, а алоэ — на 52 %. Комбинация растительных экстрактов с доксорубицином показала аддитивный синергизм действия, при этом экстракт алоэ демонстрировал более значительный противоопухолевый эффект. Растительные экстракты каланхоэ и алоэ значительно понижали митохондриальный мембранный потенциал — экстракт каланхоэ в 2 раза, а экстракт алоэ в 8 раз. Уровень внутриклеточного глутатиона также понижался под действием экстракта каланхоэ на 25 %, а под действием алоэ — на 63 %. Эти данные указывают на то, что растительные экстракты каланхоэ и алоэ влияют на метаболизм опухолевых клеток и уменьшают их выживаемость, при этом экстракт алоэ является наиболее эффективным.
Заключение. Результаты проведенных экспериментов показали, что растительные экстракты Kalanchoe daigremon-tiana и Aloe arborescens обладают противоопухолевой активностью.
В.А. Пурцхванидзе, Ю.Г. Симаков
фотодинамическая терапия отдаленных метастазов
Медицинский центр высоких технологий «ЛазерВита», Москва, Россия
введение. В последнее время изучение механизмов действия фотодинамической терапии (ФДТ) показало, что помимо прямого цитотоксического действия на опухолевые клетки ФДТ имеет антиваскулярный и иммуностимулирующий эффект. Иммунный ответ после ФДТ распространяется не только на область первичного очага опухоли, но и на метастазы. После проведения ФДТ клетки злокачественной опухоли погибают, и из них выделяется комплекс «некрогормонов», или аутонозодов, которые мы можем назвать продуктом распада опухоли после ФДТ, или ПРОФДТ ПРОФДТ, действуя на выжившие после проведенной терапии раковые клетки, приводит к их некрозу и апоптозу. Считается, что в этом процессе важную роль играют цитокины, лейкоциты и Т-лимфоциты. В экспериментах на животных было показано, что облучение при ФДТ первичного очага привитой опухоли у крыс приводило также к исчезновению очагов метастазов. Клинический случай регрессии опухоли в необлученных очагах ангиосаркомы наблюдался, если только 1 очаг опухоли был облучен с помощью ФДТ.
Цель исследования. Оценить воздействие ФДТ и ПРОФДТ на выжившие клетки опухоли и отдаленные метастазы.
материалы и методы. В наших исследованиях за последние 5 лет мы изучили 8 клинических случаев подавления неразрушенной части опухоли и метастазов после ФДТ Все пациенты проходили многократные курсы ФДТ (5—10 курсов). В качестве фотосенсибилизатора применялись препараты фотодитазин и радахлорин. Доза препара-
та составляла от 1 до 2 мг/кг массы тела пациента. Доза энергии составляла от 250 до 400 Дж/см2.
результаты. Нами было пролечено 8 пациентов (4 женщины и 4 мужчины). Средний возраст — 41 ± 12,5 года. Из них 3 пациента с диагнозом «рабдомиосаркома», 2 — с диагнозом «рак молочной железы» и 2 пациента с диагнозом «меланома». У 1 пациента был диагноз «ПРК голени». Число повторов сеансов ФДТ — 5—10. У всех пациентов наблюдался распад метастазов, что подтверждалось результатами цитологического исследования, иммунограммы крови, УЗИ и КТ.
Заключение. Таким образом, можно говорить о том, что ФДТ активирует противоопухолевый иммунитет больного, а ПРОФДТ приводит к некрозу и апоптозу выживших клеток. Также вероятно, что в клетках существует ау-тонозодная память и клетки передают информацию другим пораженным клеткам о проведенной ФДТ. ПРОФДТ открывает путь борьбы с раком и позволяет создать новый тип «вакцины» от рака. ПРОФДТ требует дальнейшего изучения и нуждается в многочисленных экспериментах.
О.Ф. Рабинович, И.М. Рабинович, Е.С. Абрамова
применение фотодинамической терапии у больных с осложненными формами красного плоского лишая слизистой оболочки рта
ФГБУ ЦНИИСиЧЛХМинздрава России, Москва, Россия
введение. Красный плоский лишай (lichen ruber planus, КПЛ) — один из наиболее часто встречаемых дерматозов с проявлениями на слизистой оболочке рта (СОР) и кожи. Являясь хроническим воспалительно-деструктивным заболеванием, характеризуется упорным течением, наличием осложненных форм (эрозивно-язвенной и буллезной), которые при определенных условиях могут трансформироваться в рак.
Цель исследования. Повышение эффективности комплексного лечения больных с осложненными формами КПЛ СОР с применением фотодинамической терапии (ФДТ).
материалы и методы. Для достижения поставленной цели в отделении заболеваний слизистой оболочки рта ФГБУ «ЦНИИСиЧЛХ» Минздрава России было проведено комплексное клинико-лабораторное обследование 27 пациентов с эрозивно-язвенной и буллезной формами КПЛ (16 женщин и 11 мужчин) в возрасте от 30 до 70 лет. Пациенты были распределены на 2 группы: 1-ю (контрольную) из 7 пациентов, которых лечили традиционными методами, включающими местное и общее назначение препаратов; и 2-ю (основную) из 20 пациентов, которым на фоне традиционных методов лечения применяли ФДТ. Наблюдение за пациентами проводилось в течение 1,5— 2,0 лет. В обеих группах общее лечение заключалось в применении иммунокорригирующей терапии и витаминотерапии. При присоединении вторичной инфекции пациентам назначали противомикробные и антимикоти-ческие препараты, а также пре- и пробиотики для улучшения микробиоценоза полости рта. Назначали также корти-костероидные препараты (преднизолон, дексаметазон и др.). Пациентам 2-й группы в дополнение к стандартной схеме лечения назначалась ФДТ, которая применялась в условиях
Спецвыпуск / том 17 / 2018
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
