CC BY
10
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ» 59
Материалы и методы. Использовали перевиваемые КЛ Результаты и Заключение. Обнаружено, что пентапеп-меланомы кожи — melIS, melH; глиобластомы — Glb-Sh, тид CIF и тетрапептиды TP-OMe и TP-ONH2 способны Glb-17; рака яичников — CrovCel; рака молочной железы специфически связываться с рецепторами соматостатина с множественной лекарственной устойчивостью — HBL- и ингибировать синтез цАМФ аденилатциклазой в клетках 100/Dox; гепатокарциномы — Huh7; гепатобластомы — нейробластомы человека линии IMR-32 в концентрации HepG2, рака поджелудочной железы — Panel, MiaPaCan2, 10 мкМ. Наибольшая специфичность связывания показа-AsPcl, CaPa2; и контроль — фибробласты линии H1036. на для CIF. Тетрапептиды не проявляли цитостатической Цитотоксичность 5 КП, обогащенных Arg/Lys, изучали активности в концентрациях до 50 мкМ, в отличие от CIF. в МТТ-тестах; механизмы цитотоксичности — с помощью Преинкубация клеток с пептидами в течение 24 ч не вли-проточной цитометрии, ОТ-ПЦР, ИГХ, вестерн-блоттин- яла на теломеразную активность. га с использованием коммерческих антител к С23/В23/р53; Работа выполнена при финансовой поддержке НИЦКИ флуоресцентно меченный Су5*-КП RgK4K2KAC-NH2 при- (внутренний грант, приказ № 1030 от 05.07.2017). меняли для микроскопического контроля процесса. Результаты. Показана высокая селективная цитоток- Т.Р. Приходченко1, Н.П. Акентьева1, Е.С. Немирова2, сичность изученных КП: выживаемость клеток в МТТ-те- А.Р. Гизатуллин1, Н.И. Шкондина1 стах после 2—3-суточной инкубации опухолевых КЛ с КП ИЗУЧЕНИЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТИ составила, в зависимости от КЛ, 8-25 %, а в контроле РАСТИТЕЛЬНЫХ ЭКСТРАКТОВ не изменилась. Окрашивание инкубированных с КП кле- (KALANCHOE DAIGREMONTIANA, ALOEARBORESCENS) ток DAPI и Höchst выявило апоптоз, подтвержденный ме- НА КЛЕТКАХ МНОЖЕСТВЕННОЙ МИЕЛОМЫ тодом проточной цитофлуориметрии. ОТ-ПЦР, блоттинг ФГБУНИПХФ РАН, Черноголовка, Московская область, и ИГХ-анализ выявили гиперэкспрессию генов NCL/NPM Россия; и белков С23/В23 во всех опухолевых КЛ. Например, после 2МГОУ, Москва, Россия 3-суточной инкубации КЛ melIS с КП уровень С23 упал Введение. Множественная миелома (ММ) составляет наиболее резко, а р53 — вырос до 2,5 раза; до инкубации со- около 1 % всех злокачественных новообразований и чуть ответственные уровни были в ~ 8,5 раза выше и в ~ 2,8 раза более 10 % гемобластозов, поэтому поиск новых методов ниже контрольных. Возможный механизм избирательной ее лечения является весьма актуальным. Проявление по-токсичности КП во всех исследованных КЛ включает взаи- бочных эффектов при использовании химических препа-модействие (+)-кластеров молекул КП с (-)-доменами ре- ратов, оперативных методов, а также необходимость дли-цепторного С23, конкурентное связывание КП с избытком тельной (иногда годами) коррекции патологического С23/В23 после транспорта в клетки, с последующей акти- процесса — все это заставляет врачей обратить внимание вацией супрессора р53 и каспаз 3, 8, 9 и дальнейшим апо- на возможности традиционной медицины. Лекарственные птозом. растения могут быть эффективны в профилактике реци- Заключение. Показано, что изученные КП с разной дивов онкологических заболеваний, во многих случаях молекулярной структурой индуцируют гибель опухолевых только фитотерапия позволяет избежать осложнений, выз-клеток из различных модельных линий в результате акти- ванных применением химиопрепаратов. Растительные вации каспаз 3, 8 и 9 и апоптоза. Эти КП отобраны для средства обладают способностью выводить токсические дальнейшего исследования in vivo. вещества и продукты обмена благодаря диуретическому действию, повышению антитоксической функции печени, Г.А. Посьтанова1. В.Н. Осипов2, Ю.П. Семочкина1, стабилизации клеточных мембран. Поэтому поиск расти-О.В. Высоцкая1, Д.С. Хачатрян2 тельных экстрактов, обладающих противоопухолевой ак-ИССЛЕДОВАНИЕ БИОЛОГИЧЕСКОЙ тивностью, важен для онкомедицины. АКТИВНОСТИ НОВЫХ ЛИНЕЙНЫХ ПЕПТИДОВ - Цель исследования. Оценить противоопухолевую ак-АНАЛОГОВ СОМАТОСТАТИНА тивность экстрактов Kalanchoe daigremontiana, Aloe arbore-1НИЦ«Курчатовский институт», Москва, Россия; scens на клетках ММ (линия 8226). Изучить влияние рас-2НИЦ«Курчатовский институт» — ИРЕА, тительных экстрактов каланхоэ и алоэ на метаболизм Москва, Россия опухолевых клеток ММ. Цель исследования. Выявление новых пептидов — ли- Материалы и методы. Исследования выполнены на кле-нейных аналогов соматостатина, способных избирательно точной линии ММ 8226. Эта линия характеризуется выра-связываться с опухолевыми клетками, и изучение механиз- женной экспрессией мРНК IGF-1 и мРНК IGF-2 и всех ма их действия. их рецепторов. Определение жизнеспособности клеток Материалы и методы. Пептиды синтезировали с помо- проводили флуоресцентным методом, с помощью Alamar щью классических методов пептидной химии в жидкой reagent assay. Были исследованы следующие концентрации фазе. Связывание пептидов с клетками и анализ клеточно- растительных экстрактов: для каланхоэ — 0,45 мг белка, го цикла исследовали с помощью проточной цитофлуори- для алоэ — 0,16 мг. В качестве контроля использовали док-метрии. Уровень цАМФ в клетках определяли с помощью сорубицин (7 х 10—4 М). Аддитивный эффект экстрактов конкурентного иммуноферментного анализа. Определение каланхоэ и алоэ определяли в комбинации доксорубицина теломеразной активности в экстрактах из клеток проводи- с растительными экстрактами. Для определения митохон-ли с помощью метода TRAP. Цитостатическую активность дриального мембранного потенциала использовался флуо-пептидов исследовали с помощью МТТ-теста. риметрический метод с помощью красителя JC-1. Уровень
Спецвыпуск / том 17 / 2018 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
