ИЗУЧЕНИЕ ЭКСПРЕССИИ ГЕНА ТОЛЛ-ПОДОБНОГО РЕЦЕПТОРА TLR-4 В СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКЕ НОСОГЛОТКИ Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

Научные статьи

Демиденко Диана Юрьевна - ассистент каф. оториноларингологии Северо-Западного ГМУ им. И. И. Мечникова. Россия, 195067, Санкт-Петербург, Пискаревский пр., д. 47; тел.: +7 911 845 40 40, e-mail: terra_rasa@mail.ru

Левин Сергей Владимирович - канд. мед. наук, ст. н. с. Санкт-Петербургского НИИ уха, горла, носа и речи. Россия, 190013, Санкт-Петербург, ул. Бронницкая, д. 9; e-mail: megalor@gmail.com

Кузьмин Денис Михайлович - ассистент каф. оториноларингологии Северо-Западного ГМУ им. И. И. Мечникова. Россия, 195067, Санкт-Петербург, Пискаревский пр., д. 47; тел.:+812- 543-94-13, e-mail: kuzmindenis1985@ yandex.ru

УДК 616.327.2:576.8.077.3

ИЗУЧЕНИЕ ЭКСПРЕССИИ ГЕНА ТОЛЛ-ПОДОБНОГО РЕЦЕПТОРА TLR-4 В СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКЕ НОСОГЛОТКИ

Е. В. Тырнова1, Г. М. Алешина2, Ю. К. Янов1, В. Н. Кокряков2

1 ФГБУ «Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт уха, горла, носа и речи»

Минздрава России, Санкт-Петербург, Россия

(Директор - засл. врач РФ, член-корр. РАМН, проф. Ю. К. Янов)

2 ФГБУ «Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины» СЗО РАМН,

Санкт-Петербург, Россия

(Директор - засл. деят. наук РФ, акад. РАМН, проф. Г. А. Софронов)

INVESTIGATION OF TOLL-LIKE RECEPTOR-4 GENE EXPRESSION ON THE MUCOSAL SURFACE OF THE NASOPHARYNX

E. V. Tyrnova1, G. M. Aleshina2, U. K. Yanov1, V. N. Kokryakov2

1 Saint Petersburg ENT and Speech Research Institute, St. Petersburg, Russia

2 Scientific Research Institute of Experimental Medicine RAMS, St. Petersburg, Russia

Цель работы: оценить экспрессию гена толл-подобного рецептора TLR-4 в поверхностном эпителии слизистой оболочки носоглотки. Исследовали 127 образцов операционного материала: слизистая оболочка нижних и средних носовых раковин, верхнечелюстных пазух, полипы; небные миндалины при хроническом декомпенсированном тонзиллите и гипертрофии; аденоиды. Оценку экспрессии генов TLR-4 и бета-актина по уровню синтеза соответствующих матричных рибонуклеиновых кислот (мРНК) проводили методом обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции в режиме реального времени. Экспрессия гена TLR-4 детектирована в большинстве образцов ткани аденоидов и небных миндалин, но лишь в единичных образцах слизистой оболочки носа и верхнечелюстных пазух (р < 0,001; тест Манна-Уитни). Различия экспрессии TLR-4 в различных отделах слизистой оболочки носоглотки могут свидетельствовать о функциональной модуляции системы врожденного иммунитета в специфических анатомических областях.

Ключевые слова: аденоиды, небные миндалины, нижние носовые раковины, полипы носа и верхнечелюстных пазух, слизистая оболочка среднего носового хода, полимеразная цепная реакция (ПЦР) в режиме реального времени, толл-подобный рецептор 4.

Библиография: 22 источника.

The aim of this study was to investigate the TLR-4 gene expression in the surface epithelium of the nasopharynx. 127 surgical samples of nasal and maxillary sinuses mucosa (inferior turbinate mucosa, the mucosa of the middle nasal passage, polyps), palatine tonsils in chronic decompensated tonsillitis, hypertrophic adenoids and tonsils were investigated. Estimation of TLR-4 and beta-actin gene expression by levels of the corresponding messenger ribonucleic acid (mRNA) synthesis was performed by real-time reverse-transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR). The expression of TLR-4 gene was detected in the most samples of adenoids and tonsillar epithelium, but it was absent in most cases of the sinonasal mucosa (р < 0,001; MannWhitney test). Diverse expression of TLR-4 in different parts of the nasopharyngeal mucosa suggests region-specific functional modulation of the innate immune system.

Keywords: adenoids, inferior turbinate, toll-like receptor 4 (TLR-4), middle nasal passage mucosa, nasal and maxillary sinuses polyps, real-time polymerase chain reaction, tonsils.

Bibliography: 22 sources.

Внутренняя эпителиальная поверхность верхних дыхательных путей обеспечивает не только механический противоинфекционный барьер, но также является областью активных взаимодействий между патогенами и врожденной и адаптивной иммунной системой [9]. Открытие толл-подобных рецепторов [toll-like receptors (TLRs)] как представителей эволюционного древнего механизма распознавания микроорганизмов эпителиальными клетками подтверждает роль поверхностного эпителия как авангардной линии иммунной системы слизистых оболочек. Экспрессия TLR-рецепторов, выявленная на различных клетках иммунной системы (моноциты, макрофаги, дендритные клетки, нейтрофилы, у5 T клетки, Th1 и Th2 ар T клетки и B клетки), подтверждает их роль в формировании и регуляции воспалительных и иммунных реакций [9]. Присутствие TLR-рецепторов на эпителиальных клетках кишечника, эпителиальных клетках ротовой полости [19] и эпителии дыхательных путей [20] подтверждает их защитную роль на поверхности (границе) раздела с окружающей средой, а также дополнительно обосновывает положение об их участии в распознавании и элиминации патогенов в кооперации с иммунной системой, ассоциированной со слизистыми оболочками и покровами [1].

Семейство толл-подобных рецепторов у человека к настоящему времени насчитывает 10 членов (TLR-1-10), которые являются трансмембранными белками с внеклеточным обогащенным аминокислотой лейцином доменом и консервативным цитоплазматическим доменом TIR, который присущ не только всем изоформам толл-рецепторов, но и рецептору IL-1 первого типа [3, 4]. TLRs относятся к обширному семейству паттерн-распознающих рецепторов врожденного иммунитета, которые при связывании лигандов инициируют каскад внутриклеточных процессов, приводящих к синтезу провоспалительных цитокинов, хемокинов, адгезионных молекул и антимикробных пептидов [1]. Распознавание патоген-ассоциированных молекулярных паттернов толл-подобными рецепторами считают необходимым для активации иммунных реакций врожденного и адаптивного типов в ответ на проникающие в дыхательные пути патогены [18]. Основным агонистом изучаемого нами TLR-4 является маркерный компонент клеточной стенки грамотрицательных бактерий липополисахарид (LPS) [6, 12, 17].

TLR-4 - один из рецепторов иммунной системы, играющий ключевую роль в распознавании грамотрицательных бактерий. Точечные мутации в генах TLR-4 и (или) ведущих компонентов пути сигнальной трансдукции (MyD88, MD-2, IRAK) приводят к нарушению экспрессии около сотни

физиологически активных белков и пептидов, участвующих в воспалительных и иммунных реакциях организма человека, могут изменять связывание лигандов и баланс между про- и противовоспалительными цитокинами, тем самым модулируя риск хронического воспаления и рака. Полиморфизмы гена TLR-4 могут быть ассоциированы по крайней мере с девятью типами рака, в том числе раком желудка и желчного пузыря [13].

Известно о регулирующей роли TLRs в патогенезе аллергического воспаления дыхательных путей. Рецепторы TLRs распознают микробные компоненты и вызывают разнообразные реакции в иммунных и респираторных клетках. Бактериальные и вирусные инфекции дыхательных путей модулируют степень аллергического воспаления. Стимуляция TLR регулирует диф-ференцировку T-хелперных клеток (типов Th1, Th2 и Th17), продукцию цитокинов тучными клетками и активацию эозинофилов. Сигналы с TLR в дендритных клетках повышают экспрессию белков главного комплекса гистосовмести-мости и корецепторов T-клеток, приводящую к активации T-клеток типа Th1. В тучных клетках сигналы TLR повышают секрецию IL-5, а в эпителиальных клетках дыхательных путей усиливают продукцию проаллергических цитокинов. Тем самым эти реакции, играющие защитную роль в условиях инфекции, могут вызвать и обострение аллергического воспаления. При некоторых условиях стимуляция TLR снижает ^2-зависимое аллергическое воспаление посредством индукции реакций, опосредованных Thl-лимфоцитами [2, 11, 21].

Исследования in vitro и in vivo показали, что совокупность толл-подобных рецепторов формирует комплексную регуляторную сеть [16]. Ранее описаны образование гетеродимеров, синергия и перекрестная толерантность [12], установлена взаимозависимость экспрессии TLR-2 и TLR-4 [9]. Экспрессия TLR происходит в ответ на внедряющиеся патогены, а их природа и пути проникновения в организм человека модулируют профиль экспрессии многочисленных TLRs, в том числе TLR-4. В экспериментах на мышах показано, что кателицидин мыши mCRAMP ингибирует опосредованную TLR-4 индукцию созревания дендритных клеток и освобождение цитокинов, препятствуя активации рецепторов TLR-4 дендритных клеток и контактной аллергической сенсибилизации [5].

Цель исследования. Оценить экспрессию гена толл-подобного рецептора TLR-4 на основе определения мРНК в слизистой оболочке носоглотки больных заболеваниями носа и околоносовых пазух, гипертрофией аденоидов и небных миндалин, хроническим декомпенсированным тонзиллитом.

Пациенты и методы. Материалом для исследования служили образцы слизистой оболочки носоглотки (табл. 1), полученные во время планового хирургического вмешательства в условиях общей анестезии. Образцы немедленно помещали в стабилизирующий раствор RNAlater. Исследованы три вида тканей: аденоиды, небные миндалины, слизистая оболочка носа и верхнечелюстных пазух.

Исследовано 127 образцов операционного материала от 118 больных. В качестве контрольной ткани служили нижние носовые раковины больных с искривлением перегородки носа, обычно используемые в литературе с этой целью. Вторым контролем служили образцы здоровой ткани слизистой оболочки среднего носового хода, полученные попутно в ходе операций. Хирургическое лечение проведено больным в период вне обострения заболевания.

Научные статьи

Общую РНК выделяли согласно протоколу Gen Elute Mammalian Total RNA Miniprep Kit и On-Column DNase I Digestion Set из поверхностного эпителия исследуемых образцов ткани. Синтез первой цепи комплементарной ДНК (кДНК) проводили с использованием обратной транскрип-тазы M-MLV в присутствии oligo(dT) и dNTPs. Амплификацию проводили с использованием специфических праймеров [9] (прямого 5' ctg-caatggatcaaggacca 3' и обратного 5' ttatctgaaggtgtt-gcacattcc 3') и реактивов iQ™ SYBR Green Supermix методом ПЦР в режиме реального времени с помощью системы детекции продуктов ПЦР в реальном времени CFX96 Touch™ и программного обеспечения CFX Manager™ версия 2.1. Режим проведения реакции амплификации: инициальный нагрев 5 мин при t = 95 °С, затем 40 циклов: 10 с при t = 95 °С, 1 мин при t = 60 °С. В трети случаев из общей РНК с использованием специфиче-

Т а б л и ц а 1

Характеристика образцов слизистой оболочки носоглотки

Операционный материал -слизистая оболочка Количество Сведения о пациентах

Пол м/ж Возраст (годы) Диагноз / показания к операции Операция

Нижние носовые раковины (контроль 1) 13 9/4 19-57 Искривление перегородки носа Септум-операция

Гипертрофические нижние носовые раковины 13 7/6 15-60 Искривление перегородки носа, гипертрофический ринит Септум-операция и конхотомия

Слизистая оболочка среднего носового хода (контроль 2) 13 5/8 19-64 Киста лобной пазухи / сфено-идит / киста верхнечелюстной пазухи / искривление перегородки носа / эпифора / ликворея / дакриоцистит/ инородное тело верхнечелюстной пазухи Инфундибу-лотомия / септопласти-ка

Слизистая оболочка верхнечелюстной пазухи 14 6/8 17-53 Инородное тело / кистоподобное образование верхнечелюстной пазухи Микрогаймо-ротомия

Носовые хоанальные полипы 13 9/4 13-58 Хронический полипозный рино-синусит Полипэкто-мия

Полипы верхнечелюстной пазухи 6 6/0 13-46

Полипы среднего носового хода и решетчатого лабиринта 13 9/4 36-76

Аденоиды 13 6/7 3-8 Обструктивная гипертрофия аденоидов, приводящая к назальной обструкции Аденоидэкто-мия

Аденоиды (ГНМ) 8 4/4 3-11 Обструктивная гипертрофия аденоидов и гипертрофия небных миндалин, приводящие к затруднению носового дыхания и развитию секреторного отита Аденои-дэктомия и тонзилл-эктомия

Небные миндалины (ГНМ) 8

Небные миндалины (ХТ) 13 6/7 8-44 Хронический декомпенсирован-ный тонзиллит Тонзиллэкто-мия

ских праймеров [9] и реактивов iScript™ One-Step RT-PCR Kit With SYBR® Green проведена совмещенная (одностадийная) обратная транскрипция и ПЦР в режиме реального времени (синтез кДНК и амплификация выполняются в одной пробирке) с использованием того же оборудования. Режим проведения реакции амплификации: 10 мин при t = 50 °С, 5 мин при t = 95 °С, затем 40 циклов: 10 с при t = 95 °С, 1 мин при t = 60 °С. Уровень экспрессии мРНК стандартизировали относительно экспрессии гена бета-актина человека - одного из белков домашнего хозяйства (housekeeping gene) (прямой праймер 5' gggtcagaaggattcctatg 3' и обратный праймер 5' gggtcagaaggattcctatg 3'). Относительную экспрессию генов рассчитывали как 2-АСт, где ДСТ - разность пороговых циклов целевого гена и бета-актина, и оценивали в условных единицах.

Статистическую обработку данных проводили с помощью программы GraphPad Prism 5 методами описательной статистики с использованием непараметрических критериев различия (тест Манна-Уитни). Значения p < 0,05 рассматривали как статистически значимые.

Результаты и обсуждение. Экспрессия гена толл-подобного рецептора TLR-4 детектирована в большинстве образцов ткани аденоидов и небных миндалин, но лишь в единичных образцах слизистой оболочки носа и верхнечелюстных пазух (рис., табл. 2). В контрольной ткани нижних носовых раковин больных с искривлением перегородки носа и здоровой ткани слизистой

оболочки среднего носового хода, полученных попутно в ходе операций, экспрессия гена И^4 оказалась ниже порога чувствительности метода. Исследованные группы тканей, в которых экспрессия гена отсутствовала во всех образцах, не приведены на рисунке и в табл. 2.

Установлены достоверные различия экспрессии гена И^4 в исследованных тканях. В аденоидах и небных миндалинах экспрессия гена И^4 достоверно повышена по сравнению со слизистой оболочкой носа и верхнечелюстных пазух (в том числе полипозно измененной) (р < 0,001 для аденоидов, аденоидов ГНМ, небных миндалин ГНМ; р < 0,05 для небных миндалин ХТ).

Существует мнение, что небным миндалинам принадлежит основная роль в иммунном обнаружении присутствующих в воздухе и проглатываемых антигенов бактерий и вирусов. Методами количественной ПЦР, проточной цитометрии и иммуногистохимии показано наличие широкого репертуара рецепторов TLR (И^1-10) в Т-клетках небных миндалин детей, больных рецидивирующим тонзиллитом и гиперплазией миндалин и подвергнутых тонзилэктомии, при этом продукция белка И^4 была выше в CD8 + цитотоксических Т-лимфоцитах по сравнению с CD4+ Т-хелперами [18].

В линиях эпителиальных клеток небных миндалин иТ^СС-60А и иТ^СС-60В методами ПЦР по конечной точке, ПЦР в реальном времени, проточной цитометрии оценивали экспрессию на уровне мРНК и белка и функцию рецепторов ТЬ^

Рис. Относительная экспрессия мРНК толл-подобного рецептора ТЬ^-4 в поверхностном эпителии слизистой оболочки носоглотки (достоверность различий приведена в тексте статьи).

= ^^

Научные статьи

Т а б л и ц а 2

Частота детекции экспрессии гена толл-подобного рецептора TLR-4 в слизистой оболочке носоглотки

Образцы слизистой оболочки носоглотки Частота детекции экспрессии гена TLR-4

абс. %

Слизистая оболочка верхнечелюстной пазухи 1/14 7,14

Носовые хоанальные полипы 1/13 7,69

Аденоиды при гипертрофии аденоидов 11/13 84,62

Аденоиды при гипертрофии аденоидов и небных миндалин (ГНМ) 8/8 100

Небные миндалины при гипертрофии аденоидов и ГНМ 8/8 100

Небные миндалины при хроническом декомпенсированном тонзиллите (ХТ) 7/13 53,85

по уровню секреции цитокинов при стимуляции клеток лигандами ТЬ^ Первичные эпителиальные клетки миндалин экспрессировали рецепторы TLRs, свидетельствуя о том, что эпителий небных миндалин выполняет не только защитную роль, но также роль отбора проб патоген-ас-социированных молекулярных паттернов, однако функциональные ответы на лиганды TLR-4 не выявлены [14].

Все 10 известных рецепторов TLRs экспресси-рованы в диапазоне разнообразной интенсивности в ткани аденоидов (ПЦР в реальном времени) и небных миндалин (ПЦР по конечной точке), полученных у пациентов при аденотонзиллэкто-мии [15]. Экспрессия TLRs сильно варьировала у разных больных.

В операционном материале от больных тон-зиллярной болезнью [идиопатическая гипертрофия миндалин, рецидивирующий (хронический) тонзиллит], гипертрофией аденоидов и болезнями носа и околоносовых пазух (хронический синусит, полипы носа, в качестве контроля слизистая оболочка нижних носовых раковин) методами иммуногистохимии и ПЦР в реальном времени детектирована постоянная экспрессия мРНК TLR-4 во всех исследованных тканях, но достоверные различия экспрессии мРНК и белка TLR-4 между различными тканями не выявлены [9].

Методом иммуногистохимии белок И^-4 выявлен на мембранах эпителиальных и железистых клеток во всех операционных образцах слизистой оболочки больных хроническим риносинуситом, в ткани носовых полипов и в тканях нижних носовых раковин больных, подвергнутых операции на перегородке носа. Экспрессия мРНК И&-4 (полуколичественная ПЦР) в ткани при хроническом риносинусите была достоверно повышена по сравнению с носовыми полипами и контрольной тканью нижних носовых раковин (р < 0,05). Достоверные различия экспрессии мРНК и продукции белка TLR-4 между носовыми полипами и контрольной тканью отсутствовали (р > 0,05) [8].

Известно, что однонуклеотидные полиморфизмы гена, кодирующего TLR-4, Asp299Gly и Thr399Ile, ассоциированы с ослаблением развития воспалительной реакции на липополисаха-рид и повышенной восприимчивостью к инфекционным заболеваниям [16]. Функциональные исследования генетики TLR-4 путем генотипиро-вания (анализ Taqman и плавление высокого разрешения) не выявили связи с риском развития аллергического ринита. Генотип и частота аллелей 4216G>C гена TLR-4 не имели достоверных различий между больными аллергическим ринитом и контролем (p > 0,05) [10].

В срезах ткани нижней носовой раковины взрослых больных круглогодичным аллергическим и идиопатическим ринитом методом ПЦР в реальном времени показана ослабленная экспрессия мРНК TLR-4 в слизистой носа при хроническом аллергическом и неаллергическом рините по сравнению с контролем - здоровой слизистой носа, повышенные уровни экспрессии исследуемого гена наблюдали в ткани небных миндалин [21].

В мазках эпителиальных клеток носа, полученных путем соскоба со средней трети нижней носовой раковины больных хроническим рино-синуситом и здоровых взрослых добровольцев, методом гибридизации in situ детектирована экспрессия мРНК TLR-4. Экспрессия гена TLR-4 была достоверно выше в группе хронического риноси-нусита, чем у нормального контроля (p < 0,0005), что свидетельствует о стимуляции экспрессии в условиях инфекции [7]. При хроническом синусите в эпителиальных клетках слизистой носа экспрессия мРНК TLR-4 (гибридизация in situ) сильнее, чем в контроле у здоровых взрослых (p < 0,0005) [22], т. е. эпителий слизистой носа не только служит механическим барьером, но и представляет собой механизм активной иммунной защиты макроорганизма от бактериальной инфекции.

Заключение. Различия экспрессии TLR-4 в различных отделах слизистой оболочки носоглот-

ки могут свидетельствовать о функциональной модуляции системы врожденного иммунитета в специфических анатомических областях. По-видимому, в условиях планового хирургического лечения хронических воспалительных заболеваний носоглотки микробные или воспалительные триггерные механизмы не побуждают к экспрессии гена TLR-4 в эпителиальной выстилке слизистой оболочки носа и верхнечелюстных пазух. В соответствии с представлениями о том, что пусковые механизмы врожденного иммунного ответа, наряду с защитой, могут представлять и определенный риск для организма (например, развитие синдрома токсического шока), обосно-

ванно допустить, что только инвазивные патогены и одновременное стимулирование компонентом микробных клеток липополисахаридом или определенные провоспалительные условия запускают врожденный ответ посредством воздействия на экспрессию И^-4. Экспрессия гена И&-4 в покровном эпителии тканей с высоким бактериальным обсеменением (небные миндалины и аденоиды) может представлять собой реакцию как на комменсальные, так и на патогенные микроорганизмы в очаге проникновения патогенов.

Работа частично поддержана грантами РФФИ № 12-04-01498 и № 12-04-01573.

ЛИТЕРАТУРА

1. Кокряков В. Н. Очерки о врожденном иммунитете. - СПб.: Наука, 2006. - 261 с.

2. Современные аспекты системной кортикостероидной терапии у больных хроническим полипозным риноси-нуситом / С. В. Рязанцев [и др.] // Рос. оторинолар. - 2013. - № 2 (63). - С. 114-121.

3. A distinct Toll-like receptor repertoire in human tonsillar B cells, directly activated by PamCSK, R-837 and CpG-2006 stimulation / A. Mansson [et al.] // Immunology. - 2006. - Vol. 118, N 4. - P. 539-548.

4. Botos I., Segal D. M., Davies D. R. The structural biology of Toll-like receptors // Structure. - 2011. - Vol. 19, N 4. -P. 447-459.

5. Cathelicidin antimicrobial peptides block dendritic cell TLR4 activation and allergic contact sensitization / A. Di Nardo [et al.] // J. Immunol. - 2007. - Vol. 178, N 3. - P. 1829-1834.

6. Defective LPS signaling in C3H/HeJ and C57BL/10ScCr mice: mutations in TLR-4 gene / A. Poltorak [et al.] // Science. - 1998. - Vol. 282, N 5396. - P. 2085-2088.

7. Dong Z., Yang Z., Wang C. Expression of TLR-2 and TLR-4 messenger RNA in the epithelial cells of the nasal airway // Am. J. Rhinol. - 2005. - Vol. 19, N 3. - P. 236-239.

8. Expression difference of toll-like receptors among chronic rhinosinusitis and nasal polyps / X. J. You [et al.] // Zhonghua Er Bi Yan Hou Tou Jing Wai Ke Za Zhi. - 2007. - Vol. 42, N 5. - P. 345-349.

9. Human beta-defensins and toll-like receptors in the upper airway / S. Claeys [et al.] // Allergy. - 2003. - Vol. 58, N 8. - P. 748-753.

10. Identification of polymorphisms in the Toll-like receptor gene and the association with allergic rhinitis / I. Kang [et al.] // Eur. Arch. Otorhinolaryngol. - 2010. - Vol. 267, N 3. - P. 385-389.

11. Iwamura C., Nakayama T. Toll-like receptors in the respiratory system: their roles in in-flammation // Curr. Allergy Asthma Rep. - 2008. - Vol. 8, N 1. - P. 7-13.

12. Janssens S., Beyaert R. Role of toll-like receptors in pathogen recognition // Clin. Microbiol. Rev. - 2003. - Vol. 16, N 4. - P. 637-646.

13. Kutikhin A. G. Impact of Toll-like receptor 4 polymorphisms on risk of cancer // Hum. Immunol. - 2011. - Vol. 72, N 2. - P. 193-206.

14. Lange M. J., Lasiter J. C., Misfeldt M. L. Toll-like receptors in tonsillar epithelial cells // Int. J. Pediatr. Otorhinolaryngol. - 2009. - Vol. 73, N 4. - P. 613-621.

15. Lesmeister M. J., Bothwell M. R., Misfeldt M. L. Toll-like receptor expression in the human nasopharyngeal tonsil (adenoid) and palantine tonsils: a preliminary report // Int. J. Pediatr. Otorhinolaryngol. - 2006. - Vol. 70, N 6. -P. 987-992.

16. Lorenz E. TLR-2 and TLR-4 expression during bacterial infections // Curr. Pharm. Des. - 2006. - Vol. 12, N 32. -P. 4185-4193.

17. Lung inflammation induced by lipoteichoic acid or lipopolysaccharide in humans / J. J. Hoogerwerf [et al.] // Am. J. Respir. Crit. Care Med. - 2008. - Vol. 178, N 1. - P. 34-41.

18. Mansson A., Adner M., Cardell L. O. Toll-like receptors in cellular subsets of human tonsil T cells: altered expression during recurrent tonsillitis // Respir. Res. - 2006. - Vol. 7, N 36. - 10 p.

19. Uehara A., Sugawara S., Takada H. Priming of human oral epithelial cells by interferon-c to secrete cytokines in response to lipopolysaccharides, lipoteichoic acids and peptoglycans // J. Med. Microbiol. - 2002. - Vol. 51. - P. 626634.

20. Toll-like receptor 4 mediates innate immune responses to Haemophilus influenzae infection in mouse lung / X. Wang [et al.] // J. Immunol. - 2002. - Vol. 168. - P. 810-815.

21. Vanhinsbergh L. J., Powe D. G., Jones N. S. Reduction of TLR2 gene expression in allergic and nonallergic rhinitis // Ann. Allergy Asthma Immunol. - 2007. - Vol. 99, N 6. - P. 509-516.

22. Wang C. S., Dong Z. [Expression of toll-like receptor mRNA in epithelial cell of nasal mucosa] // Zhonghua Er Bi Yan Hou Ke Za Zhi. - 2003. - Vol. 38, N 4. - P. 243-246.

Научные статьи

Тырнова Елена Валентиновна - канд. мед. наук, ст. н. с. лабораторно-диагностического отдела Санкт-Петербургского НИИ уха, горла, носа и речи. Россия, 190013, Санкт-Петербург, ул. Бронницкая, д. 9; тел.: 8-812317-84-43, e-mail: 7101755@mail.ru, tyrnovaev@mail.ru

Алешина Галина Матвеевна - канд. биол. наук, ст. н. с. отдела общей патологии и патологической физиологии НИИ экспериментальной медицины СЗО РАМН. Россия, 197376, Санкт-Петербург, ул. акад. И. П. Павлова, д. 12; тел.: 8-812-234-07-64, e-mail: galina_aleshina@mail.ru

Янов Юрий Константинович - засл. врач РФ, докт. мед. наук, член-корреспондент РАМН, профессор, директор Санкт-Петербургского НИИ уха, горла, носа и речи. Россия, 190013, Санкт-Петербург, ул. Бронницкая, д. 9; тел.: 8-812-316-22-56, e-mail: 3162256@mail.ru

Кокряков Владимир Николаевич - докт. биол. наук, профессор, руководитель лаборатории общей патологии отдела общей патологии и патологической физиологии НИИ экспериментальной медицины СЗО РАМН. Россия, 197376, Санкт-Петербург, ул. акад. И. П. Павлова, д. 12, тел.: 8-812-234-07-64, e-mail: kokryak@yandex.ru

УДК: 616-035.9

ОСОБЕННОСТИ ДИНАМИКИ РЕЗИДУАЛЬНОЙ МИКРОФЛОРЫ ПОЛОСТИ НОСА В ОСТРЫЙ ПЕРИОД ЗАКРЫТОГО ПЕРЕЛОМА КОСТЕЙ НОСА И СОТРЯСЕНИЯ ГОЛОВНОГО МОЗГА

А. В. Тюменев1, В. В. Павлов2, Е. В. Шабалдина1, А. В. Шабалдин1, 3

1ГБОУ ВПО «Кемеровская государственная медицинская академия» Минздрава России, г. Кемерово, Россия (Ректор - проф. В. М. Ивойлов)

2 ГБОУ ДПО «Новокузнецкий государственный институт усовершенствования врачей» Минздрава России, г. Новокузнецк, Кемеровская область, Россия (Ректор - засл. врач РФ, проф. А. В. Колбаско)

3ФГБУ «НИИ комплексных проблем сердечно-сосудистых заболеваний» СО РАМН, г. Кемерово, Россия (Директор - О. Л. Барбараш)

FEATURES OF DYNAMICS OF RESIDUAL MICROFLORA

OF A NOSE DURING THE SHARP PERIOD OF THE CLOSED FRACTURE

OF BONES OF A NOSE AND BRAIN CONCUSSION

A. V. Tyumenev, V. V. Pavlov, E. V. Shabaldina, A. V. Shabaldin

1 Kemerovo State Medical Academy, Kemerovo, Russia

2 Novokuznetsk State Institute of Advanced Medical, Novokuznetsk, Kemerovo region, Russia

3 Institute for Complex Problems of cardiovascular disease, Kemerovo, Russia

Сочетанные травмы носа и головного мозга ассоциированы с активацией условно-патогенной микрофлоры назальной микробиоты (Staph. epidermidis, Str. mitis, Staph. aureus, Klebs. oxytoca). Применение при репозиции костей носа турунд с рекомбинантным IL-1b (мазевая форма) достоверно снижает (по отношению к пациентам, у которых во время репозиции не применялся рекомбинантный IL-1b) уровень условно-патогенной микрофлоры (Staph. epidermidis, Str. mitis, Klebs. oxytoca) назальной микробиоты.

Ключевые слова: закрытый перелом костей носа, сотрясение головного мозга, бактериологическое исследование, рекомбинантный IL-1b.

Библиография: 12 источников.

The combined nasal and brain trauma are associated with activation of opportunistic microflora of nasal micro-biota (Staph. epidermidis, Str. mitis, Staph. aureus, Klebs. oxytoca). Application at a reposition of bones of a nose of turunda with IL1b Recombinant (ointment) authentically reduces (in relation to patients at which reposition was without IL1b Recombinant) level of opportunistic microflora (Staph. epidermidis, Str. mitis, Klebs. oxytoca) of nasal microbiota.

Кeywoгds: the closed fracture of bones of a nose, brain concussion, bacteriology research, IL1b Recombinant.

Bibliography: 12 sources.