CC BY
16УДК 616.372.2:576.8.077.3
ИЗУЧЕНИЕ ЭКСПРЕССИИ ГЕНА КАТЕЛИЦИДИНА LL-37 В СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКЕ НОСОГЛОТКИ
Е. В. Тырнова1, Г. М. Алешина2, Ю. К. Янов1, В. Н. Кокряков2
1 ФГБУ «Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт уха, горла, носа и речи»
Минздрава России, Россия
(Директор - засл. врач РФ, член-корр. РАМН, проф. Ю. К. Янов)
2 ФГБУ «Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины» СЗО РАМН,
Санкт-Петербург, Россия
(Директор - засл. деятель науки РФ, акад. РАМН, проф. Г. А. Софронов)
INVESTIGATION OF CATHELICIDIN LL-37 GENE EXPRESSION ON THE MUCOSAL SURFACE OF THE NASOPHARYNX
E. V. Tyrnova1, G. M. Aleshina2, U. K. Yanov1, V. N. Kokryakov2
1 Saint Petersburg ENT and Speech Research Institute, St. Petersburg, Russia
2 Scientific Research Institute of Experimental Medicine, St. Petersburg, Russia
Цель работы: оценить экспрессию гена LL-37 в поверхностном эпителии слизистой оболочки носоглотки. Исследовали 61 образец операционного материала: слизистую оболочку носа, верхнечелюстных пазух (нижние носовые раковины, слизистая среднего носового хода, полипы), небные миндалины при хроническом декомпенсированном тонзиллите. Оценку экспрессии генов LL-37 и бета-актина по уровню синтеза соответствующих матричных рибонуклеиновых кислот (мРНК) проводили методом обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции в режиме реального времени. Экспрессия гена LL-37 детектирована во всех образцах тонзиллярного эпителия. Она отсутствовала в слизистой оболочке верхнечелюстных пазух (11,1%), 12,5% образцов гипертрофированных нижних носовых раковин, носовых полипов и нижних носовых раковин. Самая низкая экспрессия гена LL-37 выявлена в тонзилляр-ном эпителии и слизистой оболочке верхнечелюстных пазух (р < 0,001; тест Манна-Уитни). Микробная колонизация, часто ассоциированная с хроническим риносинуситом, не обусловлена нарушением экспрессии гена кателицидина LL-37 в эпителии носоглотки.
Ключевые слова: кателицидин LL-37, небные миндалины, нижние носовые раковины, полипы носа и верхнечелюстных пазух, полимеразная цепная реакция (ПЦР) в режиме реального времени, слизистая оболочка среднего носового хода.
Библиография: 22 источника.
The aim of this study was to investigate the LL-37 gene expression in the surface epithelium of the nasopharynx. 61 surgical samples of nasal and maxillary sinuses mucosa (inferior turbinate mucosa, the mucosa of the middle nasal passage, polyps), palatine tonsils in chronic decompensated tonsillitis, were investigated. Estimation of LL-37 and beta-actin gene expression by levels of the corresponding messenger ribonucleic acid (mRNA) was performed by real-time reverse-transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR). The expression of LL-37 gene was detected in all samples of tonsillar epithelium, but it was absent in 11,1% cases of the maxillary sinuses mucosa, 12,5% samples of the hypertrophic inferior turbinate, nasal polyps and inferior turbinate. The lowest expression of LL-37 gene was detected in the tonsillar epithelium and maxillary sinuses mucosa (р < 0,001; Mann-Whitney test). Defect in LL-37 gene expression by epithelial cells lining the nasopharynx mucosa is not responsible for the microbial colonisation often associated with chronic rhinosinusitis.
Key words: inferior turbinate, cathelicidin LL-37, middle nasal passage mucosa, nasal and maxillary sinuses polyps, real-time polymerase chain reaction, tonsils.
Bibliography: 22 sources.
Для предотвращения избыточного роста бактерий, эпителиальной колонизации и последующей транслокации (структурное изменение хромосом в результате переноса генетического материала) респираторный тракт поддерживает эффективный слизистый барьер. Помимо слизи наиболее важными компонентами этой защитной системы являются эпителиальные антимикробные пептиды и белки, такие как дефенсины,
кателицидин LL-37, лизоцим, лактоферрин, секреторная фосфолипаза А2, секреторный ингибитор протеазы лейкоцитов (SLPI) и другие вещества, такие как комплемент, сурфактантные белки и белок клеток Клэра (секреторных клеток бронхиолы) (СС10, CCSP), которые вносят вклад в защиту макроорганизма от инфекции [1, 14]. Секретируемая слизистыми железами и бокаловидными клетками слизь захватывает частицы,
которые затем продвигаются (проталкиваются) движением ресничек и, вероятно, обеспечивают микроокружение, необходимое для действия антимикробных веществ.
LL-37 - единственный представитель пептидов семейства кателицидинов, выделенный у человека к настоящему времени. Его рассматривают в качестве неотъемлемого молекулярного компонента системы врожденного иммунитета. Помимо антибактериальной активности, внимание исследователей привлекают такие функциональные свойства LL-37, как хемотаксическая активность, участие в репарации (заживлении ран), воздействие на апоптоз и цитотоксичность LL-37 [20]. Повышение содержания LL-37 может вести к усилению активности адаптивной иммунной системы, так как известно, что этот антимикробный пептид может выступать в качестве хемоаттрактанта фагоцитов и дендритных клеток, а также влиять на дифференцировку дендритных клеток [4, 19].
Экспрессия антимикробных пептидов регулируется тканево-специфическим способом на транскрипционном, посттранскрипционнном и посттрансляционном уровнях [6]. При стимуляции липополисахаридом или CSE продукция пептида LL-37, оцениваемая ИФА и иммуноги-стохимически, возрастала в культуре эпителиальных клеток бронхов (BEP2D) и альвеолярных эпителиальных клеток (A549). Молекулярная масса пептида LL-37 составляет 4494 Da. Пептид LL-37 способствует секреции провоспалительно-го цитокина IL-8 и индуцирует апоптоз бронхиальных и альвеолярных эпителиальных клеток [20]. Известна способность LL-37 связываться со слизью дыхательных путей и ДНК тяжей мокроты больных муковисцидозом [7].
В дополнение к антимикробной активности LL-37 действует на механические свойства, проницаемость и поглощение бактерий эпителиальными клетками. Показано в культурах клеток эпителия легких A549 и первичных эпителиальных клеток легких зависимое от концентрации LL-37 повышение ригидности (жесткости) и содержания F-актина в кортикальной области. Опосредованное LL-37 повышение клеточной ригидности (жесткости) сопровождалось снижением проницаемости и поглощением Pseudomonas aeruginosa сливным монослоем клеток эпителия нормальных бронхов. Предполагают, что зависимое от LL-37 повышение плотности межклеточных контактов предупреждает бактериальную инвазию эпителия [5].
Среди эндогенных регуляторов продукции LL-37 клетками эпителия известен витамин D, роль которого в костном метаболизме и гомео-стазе кальция давно установлена. Он усиливает функцию врожденного иммунитета множества клеточных типов, включая эпителиальные клет-
ки дыхательных путей [13]. Витамин D3 активирует промотор кателицидина в культурах кера-тиноцитов HaCaT и кишечном эпителии HT-29. Индукция транскриптов кателицидина в этих культурах клеток коррелировала с усиленным процессингом зрелого пептида и повышением антимикробной активности эпителиальных клеток в отношении Staphylococcus aureus [6]. Первичные эпителиальные клетки легких экс-прессируют высокие базальные уровни активированной 1альфа-гидроксилазы и низкие уровни инактивированной 24-гидроксилазы, благодаря чему вырабатывается активный витамин D, который, в свою очередь, приводит к повышенной экспрессии управляемых витамином D генов, в том числе генов LL-37 и CD14 - корецептора TLR4. Двуспиральная РНК усиливает экспрессию 1 альфа-гидроксилазы в респираторном эпителии, повышая продукцию активного витамина D, и синергически с витамином D усиливает экспрессию кателицидина. Присутствие витамина D усиливает продукцию антимикробных пептидов и ослабляет индукцию провоспалительных цито-кинов (интерлейкина IL-8) в реакциях легочного эпителия на вирусы [17]. Обработка клеток нормального эпителия бронхов активной формой витамина D3 приводила к 10-кратному повышению уровней мРНК кателицидина, эффект усиливался 2-кратно при совместной инкубации с раствором кальция. Более того, активный витамин D3 индуцировал антимикробную активность в отношении патогенов дыхательных путей Bordetella bronchiseptica и P. aeruginosa. Активный витамин 1,25(OH)(2)D(3) индуцировал экспрессию мРНК кателицидина в равной степени как в нормальных клетках бронхиального эпителия, так и больных муковисцидозом [8]. Обработка активным витамином 1,25(OH)(2)D(3) клеточных линий респираторного эпителия больных муковисци-дозом повышала уровни мРНК и пептида LL-37 и снижала продукцию провоспалительных цитоки-нов IL-6 и IL-8 при введении антигенов P. aeruginosa [21].
Эпителиальные клетки носа и околоносовых пазух способны вырабатывать активный витамин D, который достоверно усиливает экспрессию антимикробного пептида кателицидина [18]. В культурах эпителиальных клеток носа и околоносовых пазух человека показана конститутивная выработка фермента 1бета-гидроксилазы (ПЦР в реальном времени и иммуногистохимия), что приводит к местной продукции активного витамина D. Эпителиальные клетки носа и околоносовых пазух, подвергнутые обработке неактивным витамином D, показали достоверное 8-кратное повышение экспрессии кателицидина (ПЦР в реальном времени и иммуногистохимия) по сравнению с контролем [18].
Эпителий носа и околоносовых пазух играет важную роль в первоначальном распознавании присутствия микробов и реагировании путем увеличения продукции антимикробных пептидов и цитокинов с привлечением фагоцитов и лимфоцитов адаптивной иммунной системы для элиминации инфекции [15]. Антимикробные пептиды, в частности LL-37, считаются важным молекулярным фактором защиты против микроорганизмов в барьерных органах, подобных слизистой оболочке носоглотки [3].
Цель исследования. Оценить экспрессию гена кателицидина LL-37 на основе определения мРНК в слизистой оболочке носоглотки больных заболеваниями носа и околоносовых пазух и хроническим декомпенсированным тонзиллитом.
Пациенты и методы исследования. Материалом для исследования служили образцы слизистой оболочки носоглотки, полученные во время планового хирургического вмешательства в условиях общей анестезии. Образцы немедленно помещали в стабилизирующий раствор RNAlater. Исследованы два вида ткани: слизистая оболочка носа и околоносовых пазух и небные миндалины.
Материал получен от 61 больного (табл. 1). В качестве контрольной ткани служили нижние носовые раковины больных с искривлением
перегородки носа. Хирургическое лечение было проведено больным в период вне обострения заболевания.
Общую РНК выделяли согласно протоколу Gen Elute Mammalian Total RNA Miniprep Kit и On-Column DNase I Digestion Set из поверхностного эпителия исследуемых образцов ткани. Синтез первой цепи комплементарной ДНК (кДНК) из молекул РНК проводили с использованием обратной транскриптазы M-MLV (Moloney Murine Leukemia Virus) в присутствии oligo(dT) и dNTPs. Амплификацию проводили с использованием специфических праймеров [16] и реактивов iQ™ SYBR Green Supermix методом ПЦР с детекцией накопления продуктов реакции в режиме реального времени (40 циклов) с помощью системы детекции продуктов ПЦР в реальном времени CFX96 Touch™ и программного обеспечения CFX Manager™ версия 2.1. В половине случаев из общей РНК с использованием специфических прай-меров [16] и реактивов iScript™ One-Step RT-PCR Kit With SYBR® Green проведена совмещенная (одностадийная) обратная транскрипция и ПЦР с детекцией накопления продуктов реакции в режиме реального времени (синтез кДНК и амплификация ПЦР (40 циклов) выполняются в одной пробирке) с использованием того же оборудования. Уровень экспрессии мРНК стандартизиро-
Т а б л и ц а 1
Характеристика операционного материала - образцов слизистой оболочки носоглотки
Операционный материал -слизистая оболочка Количество Сведения о пациентах
Пол м/ж Возраст, лет Диагноз / показания к операции Операция
Нижние носовые раковины 8 7/1 19-57 Искривление перегородки носа Септум-операция
Гипертрофические нижние носовые раковины 8 4/4 20-49 Искривление перегородки носа, гипертрофический ринит Септум-операция и конхотомия
Слизистая оболочка верхнечелюстной пазухи 9 3/6 17-53 Инородное тело / кистоподоб-ное образование верхнечелюстной пазухи Микрогайморото-мия
Носовые полипы 8 5/3 24-58 Хронический полипозный рино-синусит Полипэктомия
Полипы верхнечелюстной пазухи 6 5/1 13-46
Полипы среднего носового хода и решетчатого лабиринта 8 8/0 36-64
Слизистая оболочка среднего носового хода 6 2/4 26-64 Киста лобной пазухи / сфенои-дит / киста верхнечелюстной пазухи / искривление перегородки носа Инфундибулото-мия / септопластика
Небные миндалины 8 4/4 18-44 Хронический декомпенсирован-ный тонзиллит Тонзиллэктомия
Последовательность праймеров, использованных для ПЦР амплификации
Т а б л и ц а 2
Показатель Последовательность оснований
Кателицидин LL-37:
sense antisense 5' TCACCAGAGGATTGTGACTTCAA 3' 5' TGAGGGTCACTGTCCCCATAC 3'
Бета-актин человека:
sense antisense 5' GGGTCAGAAGGATTCCTATG 3' 5' GGTCTCAAACATGATCTGGG 3'
вали относительно экспрессии гена бета-актина человека (табл. 2). Относительную экспрессию генов рассчитывали как 2-Дст, где ДСт - разность пороговых циклов целевого гена и одного из генов белка домашнего хозяйства (housekeeping gene), и оценивали в условных единицах.
Статистическую обработку данных проводили с помощью программы GraphPad Prism 5 методами описательной статистики с использованием непараметрических критериев различия (тест Манна-Уитни). Значения p < 0,05 рассматривали как статистически значимые.
Результаты исследования и их обсуждение. Индуцибельная экспрессия гена кателицидина LL-37 обнаружена в респираторном эпителии, полученном из разных отделов носоглотки при различных патологических состояниях, и тонзилляр-ном эпителии при хроническом тонзиллите (ХТ) (рис.).
В ткани небных миндалин относительная экспрессия гена LL-37 детектирована во всех образ-
цах. В респираторном эпителии экспрессия гена LL-37 отсутствовала в 11,1% образцов слизистой оболочки верхнечелюстных пазух, 12,5% образцов гипертрофических нижних носовых раковин, носовых полипов и нижних носовых раковин. Наблюдалась заметная вариация экспрессии мРНК LL-37 между пациентами обследованных групп. Достоверные различия по сравнению со здоровой тканью слизистой оболочки среднего носового хода, образцы которой получены попутно в ходе операций, выявлены в тонзиллярном эпителии (р = 0,001) и слизистой оболочке верхнечелюстных пазух (р < 0,001), где детектирована самая низкая экспрессия гена LL-37.
Комменсальные виды микроорганизмов слизистой оболочки верхних дыхательных путей устойчивы к действию антимикробных пептидов. В нескольких исследованиях показано изменение экспрессии антимикробных пептидов под непосредственным влиянием состава микробиоты. Присущий макроорганизму баланс между микро-
Рис. Относительная экспрессия мРНК кателицидина LL-37 в поверхностном эпителии слизистой оболочки носоглотки (достоверность различий приведена в тексте статьи).
биотой и структурно-функциональной целостностью слизистых оболочек всегда является динамическими, чувствительными и специфичными для организма (хозяин-специфичными) взаимоотношениями [14].
Показано, что при аллергических расстройствах Th2 цитокины (IL-4, IL-5, IL-10) могут подавлять продукцию антимикробных пептидов эпителиями слизистых. Присутствие Th2 цитоки-нов также затрагивает структуру эпителиального слоя, который может изменять свои функции [2, 7, 15].
Компоненты оболочек бактериальных клеток (липополисахариды, липотейхоевые кислоты) могут повреждать функцию мукоцилиарного клиренса дыхательного эпителия [22]. В культуре нормального респираторного эпителия пазух синтетический антимикробный пептид P60.4-Ac, основанный на структуре кателицидина LL-37, нейтрализовал индуцированные липополисаха-ридом и липотейхоевыми кислотами провоспа-лительные эффекты, в том числе достоверно угнетал вызванное ими разрастание эпителиального слоя [22].
Методом иммуногистохимии в качестве клеточных источников пептида LL-37 идентифицированы эпителиальные клетки, подслизистые железы и клетки соединительной ткани слизистой оболочки носа. В культурах первичных эпителиальных клеток носа во всех группах после стимуляции S. aureus наблюдали усиление продукции LL-37. В носовых секретах нормального контроля высокие концентрации пептида LL-37 (ИФА) наблюдали у колонизированных S. aureus лиц по сравнению с неколонизированными, тогда как у больных хроническим риносинуситом с носовыми полипами различия содержания пептида в зависимости от колонизации S. aureus отсутствовали. Такое нарушение регуляции продукции LL-37 эпителием носового барьера авторы считают частью многофакторной патофизиологии носовых полипов [3].
Китайскими авторами показана экспрессия мРНК LL-37 и IL-8 (полуколичественная ПЦР и иммуногистохимия) во всех исследованных образцах нижних носовых раковин больных хроническим ринитом и носовых полипах больных хроническим синуситом. Экспрессия мРНК LL-37 и IL-8 и содержание пептида LL-37 и IL-8 достоверно повышены в ткани носовых полипов по сравнению с нижними носовыми раковинами (p < 0,01). Наблюдали положительную корреляцию между экспрессией мРНК и пептида LL-37 и IL-8 (p < 0,01) [11]. Особенности экспрессии антимикробных пептидов могут быть обусловлены расовыми различиями.
Известно, что LL-37 обладает in vitro антибактериальными и антигрибковыми свойствами
[12], а также бактерициден в отношении образующего биопленки P. aeruginosa, часто выступающего в качестве этиологического фактора хронического синусита. На модели экспериментального синусита у новозеландских кроликов, зараженных штаммом PAO-1, помимо антибактериального эффекта (достоверное снижение числа колониеобразующих единиц) применяемого в высоких концентрациях (2,5 мг/мл) 24-амино-кислотного пептида, укороченного производного от LL-37, гистологическим методом показано дозозависимое усиление признаков воспаления внутри слизистой и кости в группах, получавших пептид. Сканирующая электронная микроскопия выявила дозозависимую утрату ресничек. Высокие концентрации производного от LL-37 пептида показали in vivo способность эрадикации биопленок Pseudomonas и снижения количества бактерий. Однако значительное повышение концентрации пептида оказало провоспалительный и цилиотоксический (повреждающий реснички) эффект на слизистую оболочку пазух [10].
При обследовании больных со стрептококковой болезнью горла (фарингит, ангина) обнаружена индукция вирулентности Streptococcus группы А антимикробным пептидом человека. Показано, что субингибирующие концентрации LL-37 стимулируют экспрессию оперона синтеза капсулы Streptococcus pyogenes группы А (hasABC), сопровождающуюся обильной выработкой капсулярного полисахарида гиалуроновой кислоты, ключевого фактора, определяющего вирулентность связанного с тяжелыми инфекциями стрептококка группы А [9]. Повышенная выработка факторов вирулентности опосредуется компонентом регуляторной системы CsrRS 2: ее необходимым условием является функциональный белок-рецептор CsrS. Работе системы может противодействовать внеклеточный Mg2+, другие установленные для CsrS сигналы окружающей среды. Стимуляция также доказана для других регулируемых CsrRS генов вирулентности, включая протеазу IL-8 PrtS/ScpC и протеазу интегрино-подобных/IgG Mac/IdeS. Результаты свидетельствуют, что этот антимикробный эффекторный пептид вызывает координированные реакции вирулентности стрептококка группы А. Сигнальный путь LL-37 через CsrRS приводит к заметному повышению устойчивости стрептококка группы А к опсонин-фагоцитарному киллингу лейкоцитами человека. Определяемое in vitro усиление вирулентности стрептококка группы А согласуется с повышенной экспрессией антифагоцитарного капсулярного полисахарида и Mac/IdeS. Предполагают, что кателицидин человека LL-37 оказывает парадоксальный эффект, стимулирующий регулируемую CsrRS экспрессию гена вирулентности, тем самым повышая патогенность
стрептококка группы А во время инфекционного заболевания. Способность стрептококка группы А воспринимать и реагировать (отвечать) на LL-37 может объяснить, по крайней мере частично, уникальную восприимчивость человека как биологического вида к стрептококковой инфекции [9].
Заключение. Полученные данные свидетельствуют о том, что антимикробные факторы врожденного иммунитета могут первоначально запускаться независимо от секреции других провоспалительных молекул, что поддерживает стратегию усиления врожденной иммунной защиты путем синтеза антимикробных пептидов (дефенсинов, кателицидинов) без усиления процесса локального воспаления [2, 6]. Экспрессия
гена кателицидина LL-37 стабильно детектирована у больных хроническим риносинуситом, подтверждая, что микробная колонизация, часто ассоциированная с хроническим риносинуситом, не обусловлена нарушением продукции (экспрессии) кателицидина LL-37. Функциональная активность кателицидина LL-37 у больных хроническим риносинуситом требует дальнейших исследований. Относительно низкая экспрессия гена LL-37 в тонзиллярном эпителии может представлять собой реализацию эволюционно закрепленного механизма повышения резистентности к стрептококковой инфекции верхних дыхательных путей.
Работа частично поддержана грантами РФФИ № 12-04-01498 и № 12-04-01573.
ЛИТЕРАТУРА
1. Кокряков В. Н. Очерки о врожденном иммунитете. - СПб.: Наука, 2006. - 261 с.
2. Современные аспекты системной кортикостероидной терапии у больных хроническим полипозным риноси-нуситом / С. В. Рязанцев [и др.] // Росийская оториноларингология. - 2013. - N 2 (63). - С. 114-121.
3. Antimicrobial peptides in nasal secretion and mucosa with respect to Staphylococcus aureus colonization in chronic rhinosinusitis with nasal polyps / M. L. Thienhaus [et al.] // Rhinology. - 2011. - Vol. 49, N 5. - P. 554-561.
4. Cathelicidin LL-37: a multitask antimicrobial peptide / R. Bucki [et al.] // Arch. Immunol. Ther. Exp. (Warsz). -2010. - Vol. 58, N 1. - P. 15-25.
5. Cathelicidin LL-37 increases lung epithelial cell stiffness, decreases transepithelial permeability, and prevents epithelial invasion by Pseudomonas aeruginosa / F. J. Byfield [et al.] // J. Immunol. - 2011. - Vol. 187, N 12. -P. 6402-6409.
6. Control of the innate epithelial antimicrobial response is cell-type specific and dependent on relevant microenvironmental stimuli / J. Schauber [et al.] // Immunology. - 2006. - Vol. 118, N 4. - P. 509-519.
7. IL-4 and IL-13 exposure during mucociliary differentiation of bronchial epithelial cells increases antimicrobial activity and expression of antimicrobial peptides / S. Zuyderduyn [et al.] // Respir. Res. - 2011. - P. 12-59. http:// respiratory-research.com/content/12/1/59
8. Induction of cathelicidin in normal and CF bronchial epithelial cells by 1,25-dihydroxyvitamin D(3) / S. Yim [et al.] // J. Cyst. Fibros. - 2007. - Vol. 6, N 6. - P. 403-410.
9. Induction of group A Streptococcus virulence by a human antimicrobial peptide / I. Gryllos [et al.] // Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. - 2008. - Vol. 105, N 43. - P. 16755-16760.
10. Effects of an LL-37-derived antimicrobial peptide in an animal model of biofilm Pseudomonas sinusitis / S. K. Chennupati [et al.] // Am. J. Rhinol. Allergy. - 2009. - Vol. 23, N 1. - P. 46-51.
11. Expressions of LL-37 and IL-8 in chronic sinusitis with nasal polyps / D. Xie [et al.] // Lin Chung Er Bi Yan Hou Tou Jing Wai Ke Za Zhi. - 2010. - Vol. 24, N 8. - P. 337-340.
12. Mendez-Samperio P. The human cathelicidin hCAP18/LL-37: a multifunctional peptide involved in mycobacterial infections // Peptides. - 2010. - Vol. 31, N 9. - P. 1791-1798.
13. Nijnik A., Hancock R. E. The roles of cathelicidin LL-37 in immune defences and novel clinical applications // Curr. Opin. Hematol. - 2009. - Vol. 16, N 1. - P. 41-47.
14. Nuding S., Antoni L., Stange E. F. The host and the flora // Dig. Dis. - 2013 - Vol. 31, N 3-4. - P. 286-292.
15. Ooi E. H., Wormald P. J., Tan L. W. Innate immunity in the paranasal sinuses: a review of nasal host defenses // Am. J. Rhinol. - 2008. - Vol. 22, N 1. - P. 13-19.
16. Phenylbutyrate induces antimicrobial peptide expression / J. Steinmann [et al.] // Antimicrob. Agents Chemother. -2009. - Vol. 53, N 12. - P. 5127-5133.
17. Respiratory epithelial cells convert inactive vitamin D to its active form: potential effects on host defense / S. Hansdottir [et al.] // J. Immunol. - 2008. - Vol. 181, N 10. - P. 7090-7099.
18. Sinonasal epithelial cells synthesize active vitamin D, augmenting host innate immune function / B. Sultan [et al.] // Int. Forum Allergy Rhinol. - 2013. - Vol. 3, N 1. - P. 26-30.
19. The cationic antimicrobial peptide LL-37 modulates dendritic cell differentiation and dendritic cell-induced T cell polarization / D. J. Davidson [et al.] // J. Immunol. - 2004. - Vol. 172. - P. 1146-1156.
20. The effect of human antibacterial peptide LL-37 in the pathogenesis of chronic obstructive pulmonary disease / Y. Y. Jiang [et al.] // Respir. Med. - 2012. - Vol. 106, N 12. - P. 1680-1689.
21. Vitamin D receptor agonists inhibit pro-inflammatory cytokine production from the respiratory epithelium in cystic fibrosis / P. McNally [et al.] // J. Cyst. Fibros. - 2011. - Vol. 10, N 6. - P. 428-434.
Российская оториноларингология № 3 (70) 2014
22. Vonk M. J., Hiemstra P. S., Grote J. J. An antimicrobial peptide modulates epithelial responses to bacterial products // Laryngoscope. - 2008. - Vol. 118, N 5. - P. 816-820.
Тырнова Елена Валентиновна - канд. мед. наук, ст. н. с. лабораторно-диагностического отдела Санкт-Петербургского НИИ уха, горла, носа и речи. Россия, 190013, Санкт-Петербург, ул. Бронницкая, д. 9; тел.: 8-812317-84-43, e-mail: 7101755@mail.ru, tyrnovaev@mail.ru
Алешина Галина Матвеевна - канд. биол. наук, ст. н. с. отдела общей патологии и патологической физиологии НИИ экспериментальной медицины СЗО РАМН. Россия, 197376, Санкт-Петербург, ул. акад. И. П. Павлова, д. 12; тел.: 8-812-234-07-64, e-mail: galina_aleshina@mail.ru
Янов Юрий Константинович - засл. врач РФ, член-корреспондент РАМН, докт. мед. наук, профессор, директор Санкт-Петербургского НИИ уха, горла, носа и речи. Россия, 190013, Санкт-Петербург, ул. Бронницкая, д. 9; тел.: 8-812-316-22-56, e-mail: 3162256@mail.ru
Кокряков Владимир Николаевич - докт. биол. наук, профессор, руководитель лаборатории общей патологии отдела общей патологии и патологической физиологии НИИ экспериментальной медицины СЗО РАМН. Россия, 197376, Санкт-Петербург, ул. акад. И. П. Павлова, д. 12; тел.: 8-812-234-07-64, e-mail: kokryak@yandex.ru
УДК 616.833.17-073.97:616.316.5-006
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ЧЕТЫРЕХКАНАЛЬНОГО ИНТРАОПЕРАЦИОННОГО МОНИТОРИНГА ЛИЦЕВОГО НЕРВА У ПАЦИЕНТОВ С ДОБРОКАЧЕСТВЕННЫМИ НОВООБРАЗОВАНИЯМИ ОКОЛОУШНОЙ СЛЮННОЙ ЖЕЛЕЗЫ
Н. Н. Хамгушкеева, К. А. Матвеев, Х. М. Диаб
ФГБУ «Санкт-Петербургский НИИ уха, горла, носа и речи» Минздрава России, Санкт-Петербург, Россия
(Директор - засл. врач РФ, член-корр. РАМН, проф. Ю. К. Янов)
USING FOUR CHANNEL INTRAOPERATIVE FACIAL NERVE MONITORING IN PATIENTS WITH BENIGN DISEASES OF PAROTID SALIVARY GLAND
N. N. Khamgushkeeva, K. A. Matveev, H. M. Diab
Saint Petersburg ENT and Speech Research Institute, St. Petersburg, Russia
В статье представлен клинический опыт применения 4-канального ЭМГ мониторинга в процессе выполнения операций по удалению новообразований околоушной слюнной железы. Данное исследование было выполнено на 3 пациентах со смешанной опухолью околоушной слюнной железы. Были определены показатели электрической стимуляции ствола и ветвей лицевого нерва. Минимальная сила тока подаваемой стимуляции составила 0,2-0,5 мА, а супрамаксимальная - 3-5 мА. Таким образом, применение 4-канальной регистрации моторного ответа с мимических мышц лица является полезным дополнением в идентификации ствола и ветвей лицевого нерва в хирургии околоушных слюнных желез.
Ключевые слова: парез лицевого нерва, лицевой нерв, электромиография (ЭМГ), интраопераци-онный мониторинг, доброкачественное новообразование околоушной слюнной железы, паротидэкто-мия.
Библиография: 14 источников.
The article presents the clinical experience with 4-channel EMG monitoring during operations to remove neoplasm of the parotid gland. This study included 3 patients with mixed tumor of the parotid gland. Electrical stimulation of different parts of the trunk and branches of the facial nerve were determined. Minimum electric current intensity supplied stimulation ranged from 0,2 to 0,5 mA, and supramaximal from 3 to 5 mA. Thus, the use of 4-channel registration of motor response to the facial muscles is a useful adjunct in the identification of the trunk and branches of the facial nerve in surgery of the parotid salivary glands.
Key words: facial nerve paralysis, facial nerve, electromyography (EMG), intraoperative monitoring, neoplasm benign parotid salivary gland, parotidectomy.
Bibliography: 14 sources.
