CC BY
10
Современная нейрореабилитация больше не заключается лишь в компенсации инвалидности у пациентов с травмой спинного мозга (ТСМ), а направлена на функциональное восстановление двигательной способности за счет использования нейропластичности. Одним из факторов, препятствующих пластичности и восстановлению нейронов, являются NGS-клетки, которые быстро реагируют на повреждения головного и спинного мозга. Эта реакция характеризуется ретракцией клеточных отростков, набуханием клеточного тела и повышенной экспрессией NG2 проте-огликана [1, 2]. Целью данного исследования была оценка влияния двигательной реабилитации на экспрессию NG2 протеогликана клетками-продуцентами на различном удалении от эпицентра ТСМ.
Чтобы оценить возможное влияние двигательной реабилитации на экспрессию NG2 протеогликана был проведен иммуногистохимический и молекулярный анализ ткани спинного мозга крысы на разном расстоянии от эпицентра повреждения (4, 7 и 1 1 мм) в каудальном направлении. Для этого крысам опытной группы наносили дозированную контузионную ТСМ при помощи импактора (1,5 м/с). Крысам контрольной группы моделирование ТСМ не проводили. В качестве маркеров к NG2 экспрес-сирующим клеткам были использованы антитела к белкам NG2, S100A10, Iba1 и GFAP. Коллокализацию NG2 проте-огликана и пан-маркеров клеток астроцитов и микроглии оценивали при помощи коэффициента Пирсона.
Результаты показали различные изменения в экспрессии NG2 протеогликана как клетками микроглии, так и астроцитами на фоне ТСМ и двигательной нагрузки к 30 суткам исследования при удалении от эпицентра повреждения (4, 7 и 11 мм). При этом общий уровень экспрессии NG2, оцениваемый по параметру средней интенсивности свечения данного белка (mean intensity), был ниже в группах с ТСМ при сравнении с интактным контролем. Однако двигательная реабилитация не влияла на данный показатель и между опытной и контрольной группами достоверных различий обнаружено не было. Исследование выполнено в рамках Программы стратегического академического лидерства Казанского федерального университета (ПРИОРИТЕТ-2030) и за счет средств гранта Российского научного фонда № 21-75-00016.
Литература:
1. Tan A.M., Zhang W., & Levine J.M. J. of anatomy, V.207(6). P.
717-725.
2. Filous A.R., & Schwab J.M. The American j. of pathology,
V.188(1). P. 53-62.
КЛЕТКИ С ФЕНОТИПОМ ПОДОБНЫМ МЕЗЕНХИМНЫМ СТВОЛОВЫМ ИЗ ПОДКОЖНОГО ЖИРА ЖИВОТНЫХ ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ SARCOPTES SCABIEI/MANGE
А.А. Савченкова
ФГБОУ ВО Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии — МВА им. К.И. Скрябина, Москва, Россия
e-mail: redbullshark01@gmail.com
Ключевые слова: подкожный жир, животные, фенотип, ме-зенхимные стволовые клетки, чесоточный клещ.
Чесотка, вызываемая Sarcoptes scabiei/mange, входит в список тропических болезней ВОЗ. Клещ имеет широкий круг хозяев, включая человека, сельскохозяйственных, домашних и диких животных. Болезнь имеет
зоонозное значение и представляет серьезную проблему для здравоохранения из-за перекрестной передачи между видами. Дифференциальная диагностика на уровне разновидности очень важна для эпидемиологического исследования и разработки будущей программы ликвидации болезни. Поиск клеточной системы, которая способствовала бы поддержанию клеща in vitro, представляет интерес для медицины, в том числе ветеринарной. Ранее было продемонстрировано, что клетки с фенотипом, подобным мезенхимным стволовым (МСК), выделенные из подкожно-жировой ткани (ПЖТ), могут быть контаминированы клещом [1]. Из прижизненной биопсии подкожного жира клинически здоровой собаки были выделены клетки с фенотипом подобным МСК: с: фибробластоподобной морфологией, высокими адгезирующими и клонообразующими свойствами и способными при индукции формировать в культуре клетки жировой и костной тканей. МСК культивировали в 2% растворе желатина. Заражали клетки клещом посредством добавления к питательной среде 25 % кондиционной среды из МСК ПЖТ КРС у которых ранее были выявлен клещ на разной стадии своего развития. Анализ образцов зараженных МСК на 5, 10, 15 и 20 сут продемонстрировал размножение клеща в культуре с формирование гнезд, в которых визуализировались разные стадии его развития. Наибольшее число личинок и нимф паразита выявляли на 10 и15 сут, соответственно. На 15 сут были обнаружены значительные изменения в клеточном монослое с образованием пустот. Можно предположить, что МСК ПЖТ могут быть перспективным материалом в разработке новой клеточной системы для изучения паразита с целью диагностики и лечения чесотки у млекопитающих. Работа выполнена в лаборатории стволовой клетки ФГБНУ ФНЦ ВИЭВ РАН.
Литература:
1. Савченкова И.П. Сельскохозяйственная биология. 2018. Т.53. № .4. с. 868-875.
ИЗМЕНЕНИЯ СВОЙСТВ МУЛЬТИПОТЕНТНЫХ МЕЗЕНХИМНЫХ СТРОМАЛЬНЫХ КЛЕТОК У ПАЦИЕНТОВ С ОСТРЫМИ ЛЕЙКОЗАМИ
А.В. Садовская1, 2, Н.А. Петинати1,
Н.М. Капранов1, Н.И. Дризе1, А.Н. Васильева1,
О.А. Алешина1, Е.Н. Паровичникова1
1 ФГБУ НМИЦ гематологии Министерства здравоохранения Российской Федерации, Москва, Россия
2 Кафедра иммунологии, Биологический факультет, МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия
e-mail: sadovskaya.sasha@gmail.com
Ключевые слова: мультипотентные мезенхимные стро-мальные клетки, острый миелоидный лейкоз, острый лим-фоидный лейкоз, интерферон-у.
При остром лейкозе строма костного мозга претерпевает изменения из-за воздействия опухолевых клеток и химиотерапии. Изучение этих изменений играет важную роль в исследовании патогенеза острых лейкозов и поиске новых целей для терапевтического воздействия, поскольку стромальное микроокружение регулирует активность как нормальных, так и злокачественных гемопоэтических клеток. В организме мультипотентные мезенхимные стромальные клетки (МСК) постоянно получают сигналы от других клеток. Способность МСК реагировать на эти сигналы имеет большое значение, и,
возможно, изменяется у пациентов с лейкозом. Целью работы было изучить изменения в иммунофенотипе МСК и экспрессии ими генов-маркеров активации и диффе-ренцировки при воздействии ИФНу.
Исследование относительных уровней экспрессии генов (REL) показало значимое повышение REL маркеров активации HLA-DR и IDO-1 после инкубирования с ИфНу МСК всех исследованных групп: больных в дебюте заболевания (N=26), больных в ремиссии (N=17) и здоровых доноров (N=19). При парном сравнении образцов больных в дебюте и в ремиссии заболевания был выявлен значимо более низкий уровень экспрессии HLA-DR после активации в ремиссии. Также во всех группах после активации повышался REL PPARj, маркера адипогенной дифференцировки, однако в МСК больных в ремиссии он был значимо ниже, чем в дебюте. Уровень экспрессии SOX9, маркера хондро-генной дифференцировки, до активации был выше у доноров по сравнению с обеими группами больных. После активации различие между донорами и больными в ремиссии сохранилось, а у больных в дебюте его экспрессия повышалась. Хотя активация значимо не повлияла на REL маркеров остеогенной дифференцировки, BGLAP и SPP-1, наблюдалась тенденция к повышению экспрессии SPP-1 при активации МСК больных в ремиссии, она становилась значимо выше, чем в МСК здоровых доноров. REL BGLAP доноров был значимо выше, чем у больных обеих групп, до инкубации с ИФНу. После активации сохранялась разница между МСК доноров и больных в ремиссии. Различия между МСК доноров и пациентов в дебюте острого лейкоза после активации перестали быть достоверными.
Иммунофенотипирование показало повышение после активации средней интенсивности флуоресценции (MFI) ряда маркеров: HLA-ABC, HLA-DR, CD90, CD274, CD54, а также процента CD54+ МСК. Все эти белки играют роль в воспалении. При этом разницы между группами не было обнаружено. MFI CD105 (эндоглин) на клетках больных в ремиссии был значимо ниже, чем у доноров, вне зависимости от активации. Это может быть связано с повышенным запросом на пролиферацию стволовых клеток при восстановлении кроветворения после терапии. Выявлены изменения физиологической реакции МСК на активацию ИФНу у пациентов с острыми лейкозами. Исследование выполнено за счет гранта Российского научного фонда № 22-15-00018.
НЕКОТОРЫЕ ЗАКОНОМЕРНОСТИ
ПРОЛИФЕРАЦИИ КЛЕТОК ПРИ СТАРЕНИИ
ОРГАНИЗМА И ПРИ РАЗВИТИИ ПАТОЛОГИИ
С.В. Сазонов
1 Институт медицинских клеточных технологий, Екатеринбург, Россия
2 Уральский государственный медицинский университет, Екатеринбург, Россия
e-mail: Prof-SSazonov@yandex.ru
Ключевые слова: клеточная регенерация, пролиферация,
клеточный цикл, внутриклеточные сигнальные пути.
Показано, что активность процессов физиологической и репаративной регенерации тканей изменяется при старении организма [1]. Установлены основные закономерности состояния пролиферативных процессов в тканях с разной скоростью клеточного обновления.
При старении организма во всех без исключения тканях уровень пролиферативных процессов снижается. Использование проточной ДНК-цитометрии позволило
установить, что в основе изменения состояния пролиферативных процессов в тканях лежит торможение процессов вступления клеток в митотический цикл и последующего прохождения ими премитотического (G2) периода клеточного цикла, без изменения скорости прохождения синтетического (S) периода, что проявляется в ткани увеличением числа полиплоидных клеток [2].
Обнаруженные закономерности прослежены не только в организме экспериментальных животных, но и при индукции регенераторных процессов в печени больных хроническим гепатитом из разных возрастных групп [3], в коже у больных атопическим дерматитом [2], при развитии карциномы молочной железы [4]. При индукции регенераторных процессов во всех изученных моделях одним из основных механизмов появления полиплоидных клеток является торможение прохождения клетками G2 периода. При развитии опухоли в клетках активируются внутриклеточные механизмы, используемые ранее в эмбриогенезе, но заблокированные в более поздние стадии развития. Появление коэкспрессии Е- и Р-кадгеринов, запуск каскада внутриклеточных сигнальных путей, высвобождение внутриклеточных р и р120-катенинов из кадгерин-катени-новых комплексов, запуск сигнального пути Wnt приводит к стимуляции пролиферации и инвазии клеток опухоли [5].
Литература:
1. Сазонов С.В. Сб. науч. трудов. Екатеринбург, Изд.: СВ-96, 1999. С.352.
2. Сазонов С.В. Актовая речь на итоговой научной конференции УГМУ, Екатеринбург, УГМУ, 2022. 40 с.
3. Блинкова Н.Б., Сазонов С.В., Леонтьев С.Л. Екатеринбург: Юника, 2017. 106 с.
4. Сазонов С.В., Бриллиант А.А. Германия, Lambert Academic Publishing, 2013, 140 с.
5. Сазонов С.В., Засадкевич Ю.М., Леонтьев С.Л. Екатеринбург: ИМКТ, 2016, 110 с.
РЕГУЛЯЦИЯ АКТИВОСТИ МЕТАЛЛОПРОТЕ-ИНАЗЫ МЕПРИНА КАК СПОСОБ ВЛИЯНИЯ НА РЕГЕНЕРАТИВНЫЕ ПРОЦЕССЫ
Е.В. Самойлова, Д.А. Чепурнова, А.Г. Фесенко, А.А. Коротаева
ФГБУ НМИЦК им. Е.И. Чазова Минздрава России, Москва, Россия
e-mail: erihter@mail.ru
Ключевые слова: меприн, внеклеточный матрикс, коллагены, фибронектин, актинонин, эндотоксемия, острое повреждение легких.
Участие металлопротеиназ в процессах повреждения и репарации тканей хорошо известно, однако роль специфических протеиназ в различных фазах регенерации недостаточно изучена. Меприны являются единственными астациновыми протеиназами, проявляющими функции как в интерстиции, так и на клеточной мембране, поскольку существуют в двух формах, растворимой и мем-бранно-связанной [1]. Это значительно расширяет ареал их действия. Кроме того, меприны участвуют не только в деградации белков внеклеточного матрикса, но и в образовании зрелых форм фибриллярных белков, что способствует как повреждению, так и регенерации ткани. Являясь проколлагеназами, меприны расщепляют прокол-лагены I и III типа, превращая их в зрелые белки, способные собираться в коллагеновые фибриллы [2]. В то же время меприны расщепляют белки базальных мембран
