CC BY
6
Результаты. В послеоперационном периоде зафиксированы 5 «нежелательных явлений», связанных с проведенными в рамках исследования манипуляциями: местные реакции I-II классов по Clavien-Dindo в области липосакции [3], в области введения препарата [2]. Эпителизация ран донорской зоны на 10 сутки зафиксирована у всех пациентов. Функциональные характеристики кожи на исследуемом и контрольном участках ран различались по параметрам трансдермальной потери жидкости и не различались по параметрам эластичности. Гистоморфометрия показала, что суммарная толщина эпидермиса и дермы в исследуемых участках ран была на 22% больше, в контрольных участках ран (p=0,046).
Заключение. Трансплантация стромально-васкуляр-ной фракции аутологичной жировой ткани в раны донорской зоны у пациентов с ожогами не вызвала реакций и осложнений у 87% пациентов, сопровождалась незначительными местными реакциями I-II классов по Clavien-Dindo в области липосакции — у 8% пациентов, в области инъекции — у 5% пациентов. Эффект трансплантации проявился достоверным снижением трансдермальной потери воды и увеличением толщины новообразованной кожи в ранах донорской зоны.
Работа выполнена в рамках реализации «Приоритет-2030».
Литература:
1. Арцимович И.В., Зиновьев Е.В., Гостимский А.В. и др. Ортопедия, травматология и восстановительная хирургия детского возраста. — 2021. — Т. 9. — № 2. — C. 175-181.
2. Гатиатулина Е.Р., Мантурова Н.Е., Димов Г.П. и др. Пластическая хирургия и эстетическая медицина. 2019; 2: 43-48.
3. Rangatchew F. Vester-Glowinski P., Rasmussen B.S., et al. Burns. 2021;47(2): 270-294.
4. Momeni M., Fallah N., Bajouri A., et al. Burns. 2019;45(4): 914-922.
КЛЕТКИ РАННИХ СТРОМАЛЬНЫХ ПАССАЖЕЙ ИЗ ОПУХОЛЕВОЙ ТКАНИ ПРЕДСТАТЕЛЬНОЙ ЖЕЛЕЗЫ И ПРОИЗВОДНЫЕ ОРГАНОИДНЫЕ КУЛЬТУРЫ ЭКСПРЕССИРУЮТ ТКАНЕСПЕЦИФИЧЕСКИЕ ЭПИТЕЛИАЛЬНЫЕ И ОПУХОЛЕВЫЕ МАРКЕРЫ
В.М. Рябов1, М.М. Барышев2, М.А. Воскресенский3, Б.В. Попов1
1 Институт Цитологии РАН, Санкт-Петербург, Россия
2 Институт Микробиологии и Вирусологии, Рижский Университет им. Страдиньша, Рига, Латвия
3 Городская многопрофильная больница № 2, Санкт-Петербург, Россия
e-mail: borisvp478@gmail.com
Ключевые слова: органоидные, первичные стромальные и эпителиальные культуры предстательной железы человека, эпителиально-мезенхимный переход, рак предстательной железы.
Рак предстательной железы (РПЖ) диагностируется в течение жизни у каждого восьмого лица мужского пола. Во многих случаях РПЖ протекает в дремлющей форме, не требующей активной терапии. Однако в некоторых случаях болезнь трансформируется в агрессивную метастатическую форму, устойчивую к лекарственной терапии и неизбежно приводящую к быстрой смерти пациента. Различные формы РПЖ могут происходить из разных
типов эпителиальных клеток ПЖ, которые представлены популяциями базальных, люминальных, промежуточных, и нейроэндокринных клеток. Молекулярные профили разных типов эпителиальных клеток, их способность к дифференцировке, трансдифференцировке и репро-граммированию в опухолевые клетки являются объектом изучения во многих биомедицинских лабораториях в настоящее время. Одним из неотложных вопросов для диагностики, лечения, прогноза и исследования патогенеза РПЖ является поиск ранних маркеров перехода дремлющей форма РПЖ в его агрессивную форму.
Для изучения этого вопроса мы использовали модель стромальных культур (СКПЖ) человека и соответствующих органоидных культур (ОК), полученных из опухолевой и нормальной тканей ПЖ, пациентов, оперированных по поводу РПЖ. Технология ОК основана на получении 3D культуры клеток, которые появляются из стволовых клеток и сохраняют все свойства исходной материнской ткани [1]. Мы обнаружили, что ОК могут быть приготовлены из СКПЖ, подразделенных нами на ранние (пассажи 1-3), и поздние (пассажи 4-6). Используя по-лимеразную цепную реакцию с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР), мы нашли, что клетки ранних и поздних СКПЖ, и соответствующие ОК, экспрессируют люминальные (андрогенный рецептор, AR), цитокератин 1 8 (ЦК1 8) и базальные (ЦК5, р63) эпителиальные маркеры, продукция которых снижается или исчезает в поздних СКПЖ и производных ОК. СКПЖ ранних пассажей и соответствующие ОК, полученные из опухолевой ткани, продуцируют также маркер РПЖ AMACR, а в половине из них выявляется рекомбинантный маркер РПЖ TMPRSS2-ERG. Такой рекомбинантный мутантный ген идентифицирован нами путем клонирования и секвенирования продуктов ОТ-ПЦР, полученных из опухолевой ткани ПЖ, производных ранних СКПЖ и соответствующих ОК. В опухолевой ткани, соответствующих ранних СКПЖ и ОК нами также выявлена путем ОТ-ПЦР, электрофореза белков и имму-ноблотинга со специфическими антителами повышенная продукция белка Ezh2.
Полученные результаты предполагают, что ранние пассажи СКПЖ и соответствующие ОК представляют эффективную преклиническую модель для поиска ранних маркеров агрессивной форма РПЖ. Работа выполнена в рамках бюджетной темы Института цитологии РАН № 0124-2019-0004 и поддержана внутренним грантом Института цитологии РАН.
Литература: 1. Sato et al., Gastroenterology, 2011, V. 141, P. 1762.
ВЛИЯНИЕ ДВИГАТЕЛЬНОЙ РЕАБИЛИТАЦИИ
НА ЭКСПРЕССИЮ NG2 ПРОТЕОГЛИКАНА ПРИ
ТРАВМЕ СПИННОГО МОЗГА КРЫСЫ
Д.Х. Сабиров, Э.Ф. Давлетшин, А.В. Тимофеева,
Т.В. Повышева, Я.О. Мухамедшина
Казанский (Приволжский) Федеральный
Университет, Казань, Россия
e-mail: davraniwe@gmail.com
Ключевые слова: NG2, травма спинного мозга, двигательная реабилитация.
Двигательная реабилитация в современной концепции продолжает рассматриваться как достаточно эффективный, легко воспроизводимый и дозируемый способ стимулирования восстановления двигательной функции.
Современная нейрореабилитация больше не заключается лишь в компенсации инвалидности у пациентов с травмой спинного мозга (ТСМ), а направлена на функциональное восстановление двигательной способности за счет использования нейропластичности. Одним из факторов, препятствующих пластичности и восстановлению нейронов, являются NGS-клетки, которые быстро реагируют на повреждения головного и спинного мозга. Эта реакция характеризуется ретракцией клеточных отростков, набуханием клеточного тела и повышенной экспрессией NG2 проте-огликана [1, 2]. Целью данного исследования была оценка влияния двигательной реабилитации на экспрессию NG2 протеогликана клетками-продуцентами на различном удалении от эпицентра ТСМ.
Чтобы оценить возможное влияние двигательной реабилитации на экспрессию NG2 протеогликана был проведен иммуногистохимический и молекулярный анализ ткани спинного мозга крысы на разном расстоянии от эпицентра повреждения (4, 7 и 1 1 мм) в каудальном направлении. Для этого крысам опытной группы наносили дозированную контузионную ТСМ при помощи импактора (1,5 м/с). Крысам контрольной группы моделирование ТСМ не проводили. В качестве маркеров к NG2 экспрес-сирующим клеткам были использованы антитела к белкам NG2, S100A10, Iba1 и GFAP. Коллокализацию NG2 проте-огликана и пан-маркеров клеток астроцитов и микроглии оценивали при помощи коэффициента Пирсона.
Результаты показали различные изменения в экспрессии NG2 протеогликана как клетками микроглии, так и астроцитами на фоне ТСМ и двигательной нагрузки к 30 суткам исследования при удалении от эпицентра повреждения (4, 7 и 11 мм). При этом общий уровень экспрессии NG2, оцениваемый по параметру средней интенсивности свечения данного белка (mean intensity), был ниже в группах с ТСМ при сравнении с интактным контролем. Однако двигательная реабилитация не влияла на данный показатель и между опытной и контрольной группами достоверных различий обнаружено не было. Исследование выполнено в рамках Программы стратегического академического лидерства Казанского федерального университета (ПРИОРИТЕТ-2030) и за счет средств гранта Российского научного фонда № 21-75-00016.
Литература:
1. Tan A.M., Zhang W., & Levine J.M. J. of anatomy, V.207(6). P.
717-725.
2. Filous A.R., & Schwab J.M. The American j. of pathology,
V.188(1). P. 53-62.
КЛЕТКИ С ФЕНОТИПОМ ПОДОБНЫМ МЕЗЕНХИМНЫМ СТВОЛОВЫМ ИЗ ПОДКОЖНОГО ЖИРА ЖИВОТНЫХ ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ SARCOPTES SCABIEI/MANGE
А.А. Савченкова
ФГБОУ ВО Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии — МВА им. К.И. Скрябина, Москва, Россия
e-mail: redbullshark01@gmail.com
Ключевые слова: подкожный жир, животные, фенотип, ме-зенхимные стволовые клетки, чесоточный клещ.
Чесотка, вызываемая Sarcoptes scabiei/mange, входит в список тропических болезней ВОЗ. Клещ имеет широкий круг хозяев, включая человека, сельскохозяйственных, домашних и диких животных. Болезнь имеет
зоонозное значение и представляет серьезную проблему для здравоохранения из-за перекрестной передачи между видами. Дифференциальная диагностика на уровне разновидности очень важна для эпидемиологического исследования и разработки будущей программы ликвидации болезни. Поиск клеточной системы, которая способствовала бы поддержанию клеща in vitro, представляет интерес для медицины, в том числе ветеринарной. Ранее было продемонстрировано, что клетки с фенотипом, подобным мезенхимным стволовым (МСК), выделенные из подкожно-жировой ткани (ПЖТ), могут быть контаминированы клещом [1]. Из прижизненной биопсии подкожного жира клинически здоровой собаки были выделены клетки с фенотипом подобным МСК: с: фибробластоподобной морфологией, высокими адгезирующими и клонообразующими свойствами и способными при индукции формировать в культуре клетки жировой и костной тканей. МСК культивировали в 2% растворе желатина. Заражали клетки клещом посредством добавления к питательной среде 25 % кондиционной среды из МСК ПЖТ КРС у которых ранее были выявлен клещ на разной стадии своего развития. Анализ образцов зараженных МСК на 5, 10, 15 и 20 сут продемонстрировал размножение клеща в культуре с формирование гнезд, в которых визуализировались разные стадии его развития. Наибольшее число личинок и нимф паразита выявляли на 10 и15 сут, соответственно. На 15 сут были обнаружены значительные изменения в клеточном монослое с образованием пустот. Можно предположить, что МСК ПЖТ могут быть перспективным материалом в разработке новой клеточной системы для изучения паразита с целью диагностики и лечения чесотки у млекопитающих. Работа выполнена в лаборатории стволовой клетки ФГБНУ ФНЦ ВИЭВ РАН.
Литература:
1. Савченкова И.П. Сельскохозяйственная биология. 2018. Т.53. № .4. с. 868-875.
ИЗМЕНЕНИЯ СВОЙСТВ МУЛЬТИПОТЕНТНЫХ МЕЗЕНХИМНЫХ СТРОМАЛЬНЫХ КЛЕТОК У ПАЦИЕНТОВ С ОСТРЫМИ ЛЕЙКОЗАМИ
А.В. Садовская1, 2, Н.А. Петинати1,
Н.М. Капранов1, Н.И. Дризе1, А.Н. Васильева1,
О.А. Алешина1, Е.Н. Паровичникова1
1 ФГБУ НМИЦ гематологии Министерства здравоохранения Российской Федерации, Москва, Россия
2 Кафедра иммунологии, Биологический факультет, МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия
e-mail: sadovskaya.sasha@gmail.com
Ключевые слова: мультипотентные мезенхимные стро-мальные клетки, острый миелоидный лейкоз, острый лим-фоидный лейкоз, интерферон-у.
При остром лейкозе строма костного мозга претерпевает изменения из-за воздействия опухолевых клеток и химиотерапии. Изучение этих изменений играет важную роль в исследовании патогенеза острых лейкозов и поиске новых целей для терапевтического воздействия, поскольку стромальное микроокружение регулирует активность как нормальных, так и злокачественных гемопоэтических клеток. В организме мультипотентные мезенхимные стромальные клетки (МСК) постоянно получают сигналы от других клеток. Способность МСК реагировать на эти сигналы имеет большое значение, и,
