CC BY
34
оказывала депрессивного эффекта на функциональную активность фагоцитов. Таким образом, блокада кальмоду-лина полностью нивелирует угнетающий эффект ХГ (100 МЕ/мл) на лейкоциты периферической крови.
Таким образом, можно считать, что эффекты ХГ, реализуемые на уровне фагоцитов, в большой степеии зависят от концентрации интрацеллюлярного Саг', при этом различные дозы гормона запускают разные механизмы трансдукции гормонального сигнала. Не исключено, что депрессивный эффект высокой дозы ХГ (100 МЕ/мл) реализуется не только через ферментные системы, определяющие уровень кальция, но и, как показано нашими предыдущими исследованиями, тесно связан с активностью циклооксигеназы и уровнем внутриклеточного цАМФ — антагониста кальмодулина.
О влиянии нейтрофилокина на иммунную систему
Зурочка А.В., Колесникова А. А., Всшчегорский И. А., Цейлнкман В.Э., Долгушин И.И., Колесников ОЛ., АхкямовЭ.М.
Челябинская Государственная медицинская академия Челябинск, Россия
Стимулированные латексом нейтрофилы секретиру-ют биологически активные вещества, названные нейт-рофилокинами. Нейтрофилокины обладают широкой гаммой эффектов: они стимулируют заживление ран и консолидацию переломов, влияют на гемопоэз, обладают актопротекторным действием, индуцируют стресс, стимулируют перекисное окисление липидов и оказывают противоопухолевое действие. Нейтрофилокины также стимулируют иммунный ответ и повышают фагоцитарную активность макрофагов. До сих пор иммуно-тропные эффекты нейтрофилскинов были изучены лишь на мышах. Целью настоящей работы явилась оценка влияния нейтрофилокина на иммунную систему крыс.
В работе использованы крысы линии Вистар. Нейтро-филокин (НК) был выделен из 5-й фракции супернатанта стимулированных латексом нейтрофилов человека и является пептидсодержащим веществом. НК вводили крысам трижды подкожно в дозе 7 х 10'7 мг/крысу. Иммунизацию крыс и забор перитонеальных макрофагов осуществляли через 24 часа после завершения введения НК. Гуморальный иммунный ответ оценивали по числу антителообразующих клеток (АОК) в селезенке животных, а клеточный — по интенсивности реакции повышенной чувствительности замедленного типа (ГТЧЗТ). Функциональную активность макрофагов оценивали по способности к фагоцитозу частиц латекса и НСТ-тесту. Достоверность различий с контрольной группой оценивали с помощью критериев Стьюдента (X) и Розенбаума (<3).
Трехкратное введение НК достоверно повышало гуморальный иммунный ответ: абсолютное число АОК в селезенке возросло с 18.21 ± 1.71 х 103 в контроле (п=14) до 27.50 ± 2.37 х 105 в группе, получавшей НК (п=14, Р < 0.05,0.
Параллельно увеличилось и относительное количество АОК (в расчете на миллион спленокариоцитов) с 68.39 ± 7.69 у контрольных крыс до И 6.48 ± 22.85. Одновременное нарастание абсолютного и относительного числа АОК позволяет предположить, что НК способствует активации клеток, реагирующих на антигены эритроцитов. Введение НК вызывает также стимуляцию клеточного иммунного ответа. Об этом свидетельствует повышение интенсивности реакции ПЧЗТ на 33.14% по сравнению с контролем (Р <
0.05, t). В то же время, НК не оказал влияния на функциональную активность перитонеальных макрофагов. Так, активность фагоцитоза в контрольной в и опытной группах составила 38.49 ± 4.89% и 35.34 ± 4.38% соответственно. Результаты НСТ-тестау крыс, получавших НК, также не отличались от контрольных показателей.
Таким образом, НК стимулирует гуморальный и клеточный иммунный ответ у крыс. Это хорошо соответствует данным об иммуностимулирующем воздействии НК на мышей. В то же время, у мышей при введении НК возрастала фагоцитарная активность макрофагов, а у крыс этот эффект не наблюдался.
Изменение миграционной активности лейкоцитов крови и спектров метаболитов головного мозга крыс при развитии экспериментального аллергического энцефаломиелита (ЭАЭ)
Житнухин Ю.Л., Абдурасулова И.Н., Поздняков А.В.
НИИ экспериментальной медицины РАМН,
ЦНИ рентгено-радиологический институт МЗРФ С.-Петербург
ЭАЭ, моделирующий рассеянный склероз и другие демиелинизирующие заболевания центральной нервной системы (ЦНС), индуцировали у крыс-самок Wistar подкожной инокуляцией гомогената гомологичного спинного мозга с полным адъювантом Фрейнда. Тяжесть заболевания оценивали по клиническому индексу (КИ) от 0 до 3. Исследовали миграционную активность лейкоцитовк-рови в стеклянных 5-канальных плоских капиллярах Пер-фильева-Габе. Основной белок миелина (ОБМ) был выделен из головного мозга мыши методом колоночной хроматографии. Головной мозг крыс с различными клиническими проявлениями ЭАЭ исследовали на аппарате Magnetom Vision фирмы Siemens для получения магнитно-резонансных спектров метаболитов. Неврологические симптомы ЭАЭ зарегистрированы у 58% животных. Продолжительность латентного периода ЭАЭ составила 12± 1,3 сут., периода заболевания 8,7±2,4 сут. Установлено снижение спонтанной миграционной активности лейкоцитов у заболевших животных в первые три недели наблюдения (индексы у больных издоровых крыс соответственно 9,3±0,9; 13,7± 1,2; р<0,05). Реакции торможения миграции лейкоцитов (PTMJI) при добавлении ОБМ отмечены у заболевших крыс на 7,14 и 21 сутки после иммуниза-
ции, тогда как у животных без симптомов ЭАЭ не наблюдалось статистически достоверного уменьшения зон миграции клеток под влиянием ОБМ на протяжении 5 недель. Таким образом, РТМЛ на ОБМ удалось выявить преимущественно у заболевших животных, что указывает на тесную связь этих реакций с развитием патологического процесса и их прогностическое значение в отношении неврологических расстройств.
Спектры, полученные от мозга здоровых животных, позволили оценить содержание метаболитов: N ацетил аспартата ЫАА (213,46ррм), холина СЬо (44,93 ррм), креатина Сг (76,47 ррм), инозитола 1п (71,15 ррм). У легко болевших крыс (КИ=1) спектры отличались от контрольных незначительно. У тяжело болевших животных (КИ=3) в 21 раз уменьшены пики N АА и в 7,6 раза Сг, пик СЬо увеличен в 4,1 раза, а также появился двойной пик липидов (60,50 ррм и 38,06 ррм). Можно предположить, что незначительные отклонения в содержании метаболитов связаны с временной дисфункцией клеток, вызванной воспалительными реакциями. Существенное снижение ЫАА (до 5%)иСг (до 14%), при наличии пика липидов, свидетельствует о необратимости патологического процесса, сопровождающегося нарушением энергетического метаболизма и гибелью нервных клеток.
Исследование показало, что метод протонной магнитно-резонансной спектроскопии перспективен для диагностики стадии и мониторинга лечения демиелини-зирующих заболеваний ЦНС в клинике.
Влияние гемоперфузии на пролиферацию и индукцию поликлональной дифференцировки В-лимфоцитов в антитилообразующие клетки различной специфичности
Канаев П. А., Кузнецов С.И., Блинов Н.П.,
Эйсмонт Ю. А.
Медицинская академия последипломного образования Санкт-Петербург, Россия
Как известно, при проведении гемоперфузии через различные сорбенты в организме индуцируется выработка цитокинов. В связи с этим представляется интересным рассмотреть, какое влияние оказывает гемоперфузия на индукцию поликлональной дифференцировки и пролиферации В-лимфоцитов в антителообразующие клетки (АОК) в интактном организме. Учитывая многогранность воздействия на организм гемоперфузии, мы предположили, что в организме мышей могут находиться примированные клоны В-клеток к стохастически выбранным нами антигенам — бычьему сывороточному альбумину (БСА), человеческому гамма-глобулину (ЧГГ), и убитым нагреванием клеткам С.аИэкапБ.
Опыты по гемоперфузии через сорбенты — угольный сорбент СКН-2К, полисахаридные сорбенты агарозу 4В и ГПА (гранулированный поперечно-сшитый ауба-
зидан) проводили на белых беспородных мышах. Животных, находящихся под нембуталовым наркозом и после соответствующей гепаринизации, подключали к колонке, заполненной сорбентом по схеме вена-вена. На 1-е, 5-е и 14-е сутки после проведения гемоперфузии выявляли АОК в селезенке мышей методом иммунофер-ментных зон “Элиспот”.
Результаты показали, что количество АОК в селезенке мышей после гемоперфузин не отличается от контролен. Эти данные свидетельствуют о том, что предсуществую-щие клоны клеток-антнтелопродуцентов к выбранным антигенам присутствуют в селезенке мышеи, однако гемоперфузия через апробированные сорбенты не приводит к увеличению их количества, то есть не вызывает диф-ференцировку и пролиферацию В-лимфоцитов данной специфичности. Отсутствие усиления антителопродукции было подтверждено и при регистрации антител данной специфичности в сыворотке мышей в те же сроки методом иммуноферментного анализа.
Гомология между антигенными детерминантами дифтерийного токсина и белками человека
Канаев П.А., Кузнецов С.И., Носикова Е.В., Коростелева Ю.Г., Ткжавин А.И.
Медицинская академия последипломного образования
Санкт-Петербург, Россия
В настоящее время принято считать, что основным фактором патогенности С.сНрЫЬепае является токсин белковой природы (ДТ). Однако еще не до конца раскрыты механизмы токсического действия ДТ, участие которого предполагается в генезе дифтерийных осложнений.
Нами, методом компьютерного моделирования, выявлены гомологичные участки между С-концом В-цепи ДТ и белками человека. При этом наиболее выражена гомология в области антигенных детерминант. В данной работе представлен только наиболее высокий (более 80%) процент гомологии между ДТ и белками человека, который указан ниже по классам белковых молекул (в скобках указан процент гомологии по антигенным детерминантам):
1. Мембраносвязанные белки—интегрин 3 (86,1), рецептор к фактору роста фибробластов (85,5), белок клеточной адгезии для нейронов (82,0), протеолипид (82,0).
2. Белки ферментативных каскадных систем — фактор Хагемана (82,1), фактор коагуляции XI (84,6), компоненты комплемента С1 г (83,0) и С 15(88,0).
3. Ростовые факторы и цитокины — нейротрофин 3 (90,6), фактор роста фибробластов (82,6), нейротрофный фактор (82,3), лимфотоксин (93,8), фактор некроза опухолей (97,4).
Как видно, наиболее высокая гомология определяется между антигенными детерминантами С-конца В-цепи
