CC BY
10
ВЛИЯНИЕ НАНОСТРУКТУРНОГО САПРОПЕЛЯ НА ЖИВУЮ МАССУ ГУСЕЙ И
КАЧЕСТВО ИХ МЯСА
Алимов И.Ф. Резюме
В статье показано, что применение наноструктурного сапропеля в виде кормовых добавок в дозах 0,5-1,5 % к сухому веществу корма при выращивании гусей способствует увеличению их живой массы на 7,9-11,1 % в сравнении с контрольными аналогами. Также введение наноструктурного сапропеля в качестве кормовой добавки в дозе 1,0 % при выращивании гусей показало наилучшие результаты для повышения мясной продуктивности. Физико-химическое исследование показало соответствие содержания требуемым нормам кадмия и свинца.
INFLUENCE OF NANO-STRUCTURAL SAPROEL ON THE LIVING WEIGHT OF THE GOES AND THE QUALITY OF THEIR MEAT
The article shows that the use of nanostructured sapropel in the form of feed additives in doses of 0.5-1.5 % to the dry matter of feed during the cultivation of geese contributes to an increase in their live weight by 7.9-11.1 % in comparison with control analogues. Also, the use of nanostructured sapropel as a feed additive at a dose of 1.0 % in the cultivation of geese showed the best results for increasing meat productivity. A physical and chemical study showed that the content corresponded to the required standards of cadmium and lead.
ИССЛЕДОВАНИЕ ЖИЗНЕСПОСОБНОСТИ И ФЕНОТИПИЧЕСКИХ СВОЙСТВ ШТАММОВ ВОЗБУДИТЕЛЯ ИНФЕКЦИОННОЙ АГАЛАКТИИ ОВЕЦ И КОЗ
Артемьева Е.А. - к.вет.н., зав. лабораторией, Мельникова Л.А. - к.вет.н., вед.н.с.,
Родионов А.П. - мл.н.с.
Ключевые слова: инфекционная агалактия овец и коз, коллекция, штамм, биологические свойства
Keywords: infectious agalactia of sheep and goats, collection, strain, biological properties
Alimov I.F. Summary
DOI 10.31588/2413-4201-1883-245-1-9-13
УДК: 619:576.809.7.852
ФГБНУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности»
Кроме того, данное заболевание может быть вызвано видами M.capricolum и M.mycoides, а также их подвидами, M.purtrfaciens и сapri, относящихся к роду Mycoplasma, и проявляются такими симптомами, как маститы, пневмония и артриты.
Aгалактия овец и коз встречается в Европе, Азии и Африке, особенно в странах по берегам Среднеземного моря (Ис-
пании, Италии, Франции, Швейцарии, Румынии и прочее [9, 12, 15]. Анализ литературных источников показал, что в 20012002 гг. в штате Параиба (Восточная Бразилия) было выявлено 2 случая контагиозной агалактии овец и коз, вызванной М.а§а1асйае [11]. На территории Монголии за период 2003-2012 гг. зарегистрированы случаи возникновения заболевания в 6929 неблагополучных пунктах [1]. В бывшем Советском Союзе данное заболевание было зарегистрировано в Азербайджане в 1936 году, затем в 1943 в Армении, в Грузии в 1946. В последующем болезнь была установлена в Киргизии и ряде других республик Средней Азии.
Овцеводство как отрасль сельского хозяйства в России и за рубежом является одним из видов традиционной фермерской деятельности, и играет важную роль в решении продовольственной программы по обеспечению населения высококачественной бараниной, шерстью, овчиной и молоком [2]. С расширением экономических и торговых связей между государствами и внутри страны, существенно повышается риск возникновения случаев инфекционной агалактии овец и коз в регионах с традиционным ведением овцеводства: Южный и Северо-Кавказский федеральные округа (Дагестан, Республика Калмыкия, Ставропольский край, Астраханская область, Карачаево-Черкессия), а также Ростовская область, Республика Тыва, Волгоградская область, Башкортостан, Республики Алтай и Татарстан [3, 10].
Заболевание наносит хозяйствам значительный экономический ущерб в результате падежа и вынужденного убоя заболевших животных, снижения молочной и шерстной продуктивности, высокого процента выбраковки овец и коз [11]. Во время эпизоотии потеря молочной продуктивности нередко достигает 60 %. При этом во многих случаях у переболевших животных молочная продуктивность не восстанавливается. Несмотря на то, что заболевание не всегда сопровождается высокой смертностью, вынужденный убой и выбраковка переболевших животных нередко составляет 25-30 % и более.
Успех профилактики и ликвидации
инфекционных болезней, в том числе и инфекционной агалактии овец и коз во многом зависит от наличия профилактических в иммунобиологическом отношении вакцин и диагностических препаратов [4]. В основе изготовления данных препаратов используются производственные и контрольные штаммы микроорганизмов, получаемые биопредприятиями агропромышленного комплекса (АПК) из государственных коллекций микроорганизмов, где созданы оптимальные условия хранения, способствующие сохранности штаммов в жизнеспособном состоянии, а также их стабильности и всех присущих им генетических признаков (маркеров) [5, 6, 8]. Исходя из вышесказанного, целью работы явилось проверка жизнеспособности и биологических свойств штаммов А-319 и 8899 инфекционной агалактии овец и коз, находящихся в лиофилизированном состоянии при длительном хранении в герметически запаянных ампулах.
Материал и методы исследований. Для проведения исследований были взяты штаммы возбудителя инфекционной агалактии овец и коз, хранящиеся в лио-филизированном виде при температуре +4 - 8 оС в течение 20 лет:
- А-319 - аттенуированный, полученный путем многократного пассирования на развивающихся куриных эмбрионах, обладающий высокой иммуногенно-стью, не реактогенен, не реверсирует и не обладает контагиозностью;
- 8899 - высоковирулентный, используется для контроля иммуногенной активности вакцин и для серологической диагностики инфекционной агалактии овец и коз.
Жизнеспособность штаммов определяли путем посева культур микроорганизмов пипеткой Пастера из ампул после суспендирования лиофилизата физиологическим раствором в пробирки на питательную среду Мартена с добавлением 20 % нормальной лошадиной сыворотки и 10 % дрожжевого экстракта рН 7,0-8,0. Помещали в термостат при 37 оС и культивировали в течение 6 суток, одновременно контролировали время появления первых колоний и характер их роста. Установив
жизнеспособность штаммов и чистоту их посевов, делали две генерации для последующих исследований по определению культуральных свойств посевом культур на жидкую, полужидкую (добавление -0,3 % агар агара) и твердую (2 % агар агара) питательные среды Эдварда с последующим инкубированием при 37 оС в течение 5 суток. Исследование тинкториаль-но-морфологических свойств проводили путем приготовления мазков из культур, их фиксации и окраски по Романовскому-Гимзе. Для этого подогретую до 90 оС краску вводили под предметное стекло, расположенное мазком вниз и окрашивали 20 минут. Изучение ферментативной активности осуществляли посевом культур на жидкую питательную среду с добавлением глюкозы, учет проводили через 10 дней инкубирования при 37 оС по изменению окраски среды. Для определения фос-фатазной активности производили посев исследуемой культуры на плотную питательную среду в чашки Петри с добавлением фенолфталеиндифосфата (рН среды 7,8-8,0). Контроль результатов проводили в течение 14 дней: на 3, 7 и 14 сутки по одной испытуемой и контрольной чашке, вынимали из термостата, наносили на поверхность среды 5 N (нормальный) раствор едкого натра (200 г №ОН на 1 л дистиллированной воды). Полученные результаты сверяли с паспортными данными исследуемых штаммов.
Для проведения пассажа штаммов А-319 и 899 возбудителя агалактии овец и коз использовали развивающиеся 8-10 дневные эмбрионы кур (РЭК) по 3 эмбриона на штамм, которым вводили бульонную культуру в дозе 0,3 мл в аллантоис-ную полость закрытым способом и инкубировали в термостате при 37 оС. При гибели эмбрионов их вскрывали, делали посевы на жидкие и твердые питательные среды.
Результат исследований. Определение жизнеспособности штаммов А-319 и 8899 инфекционной агалактии овец и коз, хранящихся в лиофилизированном виде при температуре +4-8 оС в течение 20 лет, показало наличие на среде Мартена жизнеспособных микробов, что говорит о доста-
точном проценте живых клеток в лиофи-лизированных культурах.
При изучении культурально-морфологических свойств наблюдали на твердых питательных средах (концентрация агар-агара 3 %) мелкие, прозрачные, росинчатые колонии, которые, разрастаясь в среде, выступают на поверхности в виде дисковидных возвышений с окруженной опаловой (более темной) зоной. На жидких питательных средах наблюдали рост в виде помутнения среды, который достигал максимума при 72-120-часовом инкубировании (оптимальный температурный режим 37-38 оС) и едва заметный придонный осадок, который при встряхивании поднимался со дна пробирки в виде волнообразного помутнения.
При окраске мазков, приготовленных из культур и окрашенных по Романов-скому-Гимзе, в поле зрения отмечали мелкие полиморфные коккобактерии фиолетового цвета.
На жидкой питательной среде с добавлением глюкозы на 10 день инкубирования при 37 0С происходило изменение окраски среды, при постановке теста на фосфатазную активность регистрировали изменение цвета питательной среды с фе-нолфталеиндифосфатом после нанесения на ее поверхность 5 N (нормального) раствора едкого натра (№ОН), что говорит об их ферментативной и фосфатазной активности. Полученные данные соответствуют таксономическим показателям My^plasma agalactia [2].
Проведенные ранее нами исследования по определению жизнеспособности и биологических свойств штаммов Burkholderia mallei [6] и Mycobacterium bovis [7], хранившихся длительное время (13 и 20 лет соответственно) в лиофилизиро-ванном виде, показали также аналогичные результаты: штаммы не утратили способности роста и не изменили своих биологических свойств. Пассаж культур штаммов агалактии овец и коз через куриные эмбрионы показал, что все опытные эмбрионы погибли в течение 3-5 дней, при их вскрытии были отмечены патологоанато-мические изменения в виде очаговых или точечных кровоизлияний и отеков на кож-
ных покровах в области головы, шеи, спины, низа живота. Из посевов, сделанных с патологоанатомически измененных тканей эмбрионов на жидкие и твердые питательные среды, были выделены культуры возбудителя агалактии овец и коз. Исследование штаммов возбудителя агалактии овец и коз, хранящихся в течение 20 лет, в сравнении с предыдущими годами, показало, что в течение этого времени культуры остались стабильными, как по отношению основных биологических свойств, так и по количеству микробных клеток для получения их роста. Исследования будут продолжены до установления предельного (максимального) срока хранения.
Заключение. Работа в коллекции микроорганизмов направлена на создание оптимальных условий хранения штаммов возбудителей инфекционных болезней, где каждые 5 лет отслеживают сохранность жизнеспособности и основных биологических свойств лиофилизированных культур микроорганизмов, что позволяет вовремя принимать меры по устранению изменений в фенотипических характеристиках исследуемых штаммов. На основании проведенных исследований установлено, что штаммы А-319 и 8899 возбудителя инфекционной агалактии овец и коз, хранящиеся в лиофилизированном виде в течение 20 лет при температуре +4о - 8оС, сохранили свою жизнеспособность и биологические свойства, предусмотренные паспортными данными.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Боянжоргал, Б. Эпизоотологиче-ские аспекты инфекционных болезней на трансгенной территории России (Бурятии) и Монголии / Б. Боянжоргал, О.Б. Бадмое-ва, О.Н. Ринчинова [и др.] // Ветеринария Кубани. - 2014. - № 1. - С. 10-12.
2. Галиуллин, А.К. Культурально-морфологические и биохимические свойства вакцинного штамма Ланге возбудителя сибирской язвы после длительного хранения / А.К. Галиуллин, И.И. Задорина, Н.С. Садыков [и др.] // Научные труды международной научно-практической конференции «Сельское хозяйство и продовольственная безопасность: технологии, инновации, рынки, кадры». - 2019. - С.
440-447.
3. Дж. Хоулта. Краткий определитель бактерий Берги / Хоулта Дж. - М.: Изд. «Мир», 1980. - 316 с.
4. Ерохин, А.И. Разведение овец и коз / А.И. Ерохин - М.: Изд. «ЭКСПО-Пресс», 2001. - 304 с.
5. Лушников, В.П. Пищевая ценность мяса чистокровных и помесных овец / В.П. Лушников, В.И. Криштафович, Е.Д. Абросьева // Мясная индустрия. -2008. - № 7. - С. 19-21.
6. Маркин, В.А. Коллекция патогенных вирусов в решении общебиологических проблем / В.А. Маркин // Журнал микробиологии, эпидимиологии и иммунобиологии. - 2007. - № 6. - С. 84-93.
7. Мельникова, Л.А. Определение жизнеспособности и сохранность биологических свойств штаммов возбудителя сапа при длительном хранении / Л.А. Мельникова, С.В. Иванова, А.К. Галиуллин [и др.] // Ветеринария сельскохозяйственных животных. - 2019. - № 2. - С.60-63.
8. Мельникова, Л.А. Изучение стабильности основных свойств штамма возбудителя туберкулеза при длительном хранении / Л.А. Мельникова, А.П. Родионов // Сборник статей ХХХ Международного научно-исследовательского конкурса «Лучшая научная статья 2019». - 2019. -С. 140-143.
9. Осидзе, Д.Ф. Ветеринарные препараты / Д.Ф. Осидзе. - М.: Изд. «Колос», 1981. - С 24-33.
10. Соколов, В.В. Мировой генофонд овец и коз / В.В. Соколов, Г.А. Куц, А.И. Любимов [и др.] // Ижевск: Изд. РИО ФГОУ ВПО Ижевская ГСХА, 2004. -315 с.
11. Шарлапаев, Б.Н. Научное и практическое обоснование адаптивной ресурсосберегающей технологии производства баранины в засушливых районах Поволжья / Б.Н. Шарлапаев // Афтореф. Дисс. док.с.-х. наук. - Дубровицы. - 2005. - 40 с.
12. Edisio, O.A. ^ntagious agalactia by mycoplasma agalactiae in small ruminants in Brazil: first report / O.A. Edisio, M.D. Bezerra de Alcántara, E. Rosendo do Nascimento [et al.] // Brazilian Journal of Microbiology. - 2006. - № 37. - P. 576-581.
13. Egwu, G.O. Caprine mycoplasmal mastitis in Nigeria / G.O. Egwu, J.A. Ameh, MM. Aliyu [et al.] // Small Rum. Res. -2001. - № 39. - P. 87-91.
14. Fasanya, O.O. Microbiology of the genitlia of nulliparous and postpartum savanna brown goats / O.O. Fasanya, D.S. Adeg-boye, E.C.I. Molokwu [et al.] // Vet. Res.
Com. - 1987. - № 11. - P. 191-198.
15. Madanat, A.D. Prevalence of Mycoplasma agalactiae Antibodies in Czech and Jordanian Herds of Small Ruminants / A.D. Madanat, P. Zendulkova, Z. Lany [et al.] // Acta Vet. Brno. - 2002. - № 71. - P. 37-44.
ИССЛЕДОВАНИЕ ЖИЗНЕСПОСОБНОСТИ И ФЕНОТИПИЧЕСКИХ СВОЙСТВ
ШТАММОВ ВОЗБУДИТЕЛЯ ИНФЕКЦИОННОЙ АГАЛАКТИИ ОВЕЦ И КОЗ
Артемьева Е.А., Мельникова Л.А., Родионов А.П.
Резюме
В статье приведены данные о первых случаях выявления и распространения инфекционной агалактии овец и коз, как в России, так и за рубежом. Выявлено, что в основном это регионы с традиционным ведением овцеводства, к ним относятся регионы Европы, Азии, Африки, а также страны, расположенные по берегам Средиземного моря. Успех профилактики и ликвидации этого заболевания зависит от наличия профилактических вакцин и диагностических препаратов. Основой для их изготовления служат производственные и контрольные штаммы возбудителя, которые получают биопредприятия агропромышленного комплекса из государственных коллекций микроорганизмов. В коллекциях проводятся исследования штаммов с периодичностью, указанной в паспорте, а также создаются оптимальные условия, предотвращающие потерю микроорганизмами жизнеспособности и их биологических свойств при длительном хранении. В работе приведены результаты исследований штаммов А-319 и 8899 возбудителя инфекционной агалактии овец и коз, хранящихся в течение 20 лет в лиофилизированном виде. Полученные данные определения жизнеспособности и изучения биологических свойств штаммов, показали соответствие их паспортным данным.
VERIFICATION OF VIABILITY AND PHENOTYPICAL PROPERTIES OF STRAINS INFECTIOUS AGALACTIC OF SHEEP AND GOATS
Artemeva E.A., Melnikova L.A., Rodionov A.P.
Summary
The article provides data about the first cases of detection and spread of infectious agalactia in sheep and goats, both in Russia and abroad. It was revealed that these are mainly regions with traditional sheep breeding, which include regions of Europe, Asia, Africa, as well as countries located along the shores of the Mediterranean Sea. The success of preventing and eradicating this disease depends on the availability of prophylactic vaccines and diagnostic drugs. The basis for their manufacture is the production and control strains of the pathogen, which are obtained by biological enterprises of the agro-industrial complex from the state collections of microorganisms. In the collections, strains are studied at the frequency indicated in the passport, and optimal conditions are created to prevent microorganisms from losing their viability and their biological properties during long-term storage. The present work shows results of studies of strains A-319 and 8899 of the causative agent of infectious agalactia in sheep and goats stored for 20 years, in a lyophilized form. The data obtained for determining the viability and studying the biological properties of the strains showed their compliance with the passport data.
