CC BY
12© Коллектив авторов, 2014
Исследование белка теплового шока молекулярной массой 70 кД в сыворотке крови и моче у больных хроническим гломерулонефритом
H.В. ЧЕБОТАРЕВА, Н.В. НЕПРИНЦЕВА, И.Н. БОБКОВА, Л.В. КОЗЛОВСКАЯ
ГБОУ ВПО «Первый МГМУ им. И.М. Сеченова» Минздрава России, Москва
Investigation of 70-kDa heat shock protein in the serum and urine of patients with chronic glomerulonephritis
N.V. CHEBOTAREVA, N.V. NEPRINTSEVA, I.N. BOBKOVA, L.V. KOZLOVSKAYA
I.M. Sechenov First Moscow State Medical University, Ministry of Health of Russia, Moscow
Резюме
Цель исследования. У больных с разными вариантами течения хронического гломерулонефрита (ХГН) определить уровень белка теплового шока молекулярной массой 70 кД (БТШ-70) в моче и антител (АТ) к БТШ-70 в сыворотке крови, оценить их клиническое и прогностическое значение.
Материалы и методы. Обследовали 79 больных ХГН: 15 с неактивным течением нефрита (1-я группа), 35 с активным ХГН и сохраненной функцией почек (2-я группа), 14 с наиболее высокой активностью ХГН и преходящей креатининемией (3-я группа), 15 с сохраняющейся протеинурией и стойкой почечной недостаточностью (4-я группа). В обследованных группах уровни БТШ-70 в моче и АТ к БТШ-70 в сыворотке крови оценены методом ELISA.
Результаты. У пациентов с активным течением ХГН выявлялись более высокие уровни экскреции БТШ-70 с мочой и АТ к БТШ-70 в сыворотке крови. Экскреция БТШ 70 с мочой была достоверно выше у пациентов 3-й группы, чем у больных других групп. В то же время отмечено снижение уровня АТ к БТШ-70 в сыворотке крови, что являлось неблагоприятным фактором персистирования нефротического синдрома, несмотря на иммуносупрессивную терапию (ИСТ). У 9 (60%) из 15 пациентов с низкими титрами АТ в сыворотке крови нефротический синдром персистировал, несмотря на длительную ИСТ. В то же время у 8 (80%) из 10 пациентов с повышенным уровнем АТ в сыворотке крови получен ответ на ИСТ в течение 9 мес.
Заключение. Результаты исследования демонстрируют большое значение БТШ-70 как показателя степени повреждения и активации механизмов самозащиты почки у больных ХГН. Определение АТ к БТШ-70 в сыворотке крови может использоваться для оценки прогноза ХГН.
Ключевые слова: хронический гломерулонефрит, нефротический синдром, самозащита почки, белок теплового шока молекулярной массой 70 кД, антитела к белку теплового шока молекулярной массой 70 кД.
Aim. To determine the levels of 70-kDa heat shock protein (HSP70) in urine and anti-HPS70 antibodies (Abs) in serum and to assess their clinical and prognostic value in patients with different forms of chronic glomerulonephritis (CGN). Subjects and methods. Seventy-nine patients with CGN, including 15 with inactive nephritis (Group 1), 35 with active CGN and preserved renal function (Group 2), 14 with the highest CGN activity and transient creatininemia (Group 3), and 15 with persistent proteinuria and chronic renal failure (Group 4) were examined. ELISA was used to estimate urinary HSP70 levels and serum anti-HSP70 Abs in the examined groups.
Results. The patients with active CGN were found to have higher excretions of urinary HSP70 and serum anti-HSP70 Abs. Urinary HSP70 excretion was significantly higher in the patients with transient renal function (Group 3) than in those from the other groups. At the same time, there was a decrease in serum anti-HSP70 Abs, which was a poor factor of persistent nephrotic syndrome despite immunosuppressive therapy (IST). Despite long-term IST, the nephrotic syndrome was persistent in 9 (60%) of the 15 patients with low serum Ab titers. At the same time, 8 (80%) of the 10 patients with higher serum Ab titers responded to IST during 9 months.
Conclusion. The investigation demonstrates the great value of HSP70 as an index of the severity of lesion and the activation of kidney self-defense mechanisms in patients with CGN. Determination of serum anti-HSP70 Abs may be used to assess the prognosis of CGN.
Key words: chronic glomerulonephritis, nephrotic syndrome, kidney self-defense, 70-kDa heat shock protein, anti-70-kDa heat shock protein antibodies.
АГ — артериальная гипертония АД — артериальное давление АТ — антитела
БТШ-70 — белки теплового шока молекулярной массой 70 кД
ИЛ — интерлейкин
ИСТ — иммуносупрессивная терапия
МИ — минимальные изменения
МКГН — мезангиокапиллярный гломерулонефрит
МН — мембранозная нефропатия
МПГН — мезангиопролиферативный гломерулонефрит
МС — мочевой синдром
НС — нефротический синдром
ОНС — остронефритический синдром
ПН — почечная недостаточность
ПУ — протеинурия
ФСГС — фокальный сегментарный гломерулосклероз ХГН — хронический гломерулонефрит
Механизмы, определяющие течение и исход воспали- время являются предметом детального исследования. тельного процесса при заболеваниях почек, в настоящее Среди этих механизмов наиболее изучены повреждающие
(эффекторные) звенья патогенеза — формирование клеточного воспалительного инфильтрата, высвобождение воспалительных цитокинов, кислородных радикалов, активация компонентов комплемента [1]. Однако степень повреждения ткани почки и течение нефрита зависят от баланса локально воздействующих повреждающих факторов и противостоящих им факторов самозащиты почки. На протяжении нескольких последних десятилетий интерес исследователей в этой области сосредоточен на изучении белков теплового шока (БТШ), в частности молекулярной массой 70 кД (БТШ-70), которые, являясь частью системы самозащиты почки на внутри- и внеклеточном уровне, повышают резистентность клеток почечной ткани к повреждению [2, 3].
Опубликованы данные ряда исследований, посвященных определению уровня БТШ-70 в ткани почки или в моче при остром повреждении почек, опухолях, после трансплантации почки [4, 5], однако подобные работы у больных хроническим гломерулонефритом (ХГН) единичны [6].
Цель исследования — у больных с разными вариантами течения ХГН определить уровни БТШ-70 в моче и антител (АТ) к БТШ-70 в сыворотке крови, оценить их клиническое и прогностическое значение.
Материалы и методы
Обследовали 79 больных с различными формами ХГН: 33 (42%) женщины и 46 (58%) мужчин, средний возраст 33,5 (25; 48) года.
Морфологически диагноз подтвержден у 58 больных: у 20 выявлен мезангиопролиферативный ГН (МПГН), у 8 — мезанги-окапиллярный ГН (МКГН), у 12 — мембранозная нефропатия (МН), у 3 — минимальные изменения (МИ), у 7 — фокальный сегментарный гломерулосклероз (ФСГС), у 8 — нефросклероз.
Результаты исследования молекулярных медиаторов сравнивали в 4 группах больных, различающихся по степени активности ХГН и выраженности почечной недостаточности (ПН).
В 1-ю группу вошли 15 пациентов с неактивным течением заболевания: у 8 латентный ХГН, у 7 полная ремиссия ХГН в результате иммуносупрессивной терапии (ИСТ). У больных этой группы выявлялась протеинурия (ПУ) менее 1 г/сут — 0,42 (0,36; 0,8) г/сут: у 7 из них изолированная, у 8 в сочетании с умеренной эритроцитурией. Функция почек у 11 больных была сохранена, у 3 отмечалось стойкое снижение скорости клубочковой фильтрации (СКФ) — 70 (46; 75) мл/мин и повышение уровня креатини-на сыворотки крови до 1,56 (1,45; 1,86) мг/дл. У 2 пациентов отмечалась умеренная артериальная гипертония (АГ) — 150— 160/90—100 мм рт.ст.
Во 2-ю группу включены 35 больных активным ХГН с высокой ПУ и сохраненной функцией почек, включая 17 пациентов с выраженным мочевым синдромом — МС (ПУ субнефротическо-го уровня до 3,5 г/сут, у 9 больных этой группы ХГН изначально протекал с выраженным МС, а у 8 МС был результатом неполной ремиссии нефротического синдрома — НС) и 18 — с НС: у 5 выраженный НС: анасарка, гипоальбуминемия около 20 г/л, ПУ до 10,7 (7,8; 14,3) г/сут, у 13 умеренный НС: ПУ 7,5 (5,6; 10,9) г/сут. У 21 больного ПУ была изолированная, у 9 — сочеталась с уме-
Сведения об авторах:
Непринцева Наталья Викторовна — асп. каф. нефрологии Института профессионального образования Бобкова Ирина Николаевна — д.м.н., зав. отд. нефрологии НИИ уронефрологии и репродуктивного здоровья человека Козловская Лидия Владимировна — д.м.н., проф., в.н.с. отд. нефрологии НИИ уронефрологии и репродуктивного здоровья человека
ренной эритроцитурией (до 50 в поле зрения), у 5 — с выраженной эритроцитурией (более 50 в поле зрения). Средний уровень креатинина в сыворотке крови составил 0,9 (0,72; 1,05) мг/дл, СКФ (в пробе Реберга—Тареева) — 126 (94; 168) мл/мин. У 5 пациентов, несмотря на прием антигапертензивных препаратов, выявлялась умеренная АГ (артериальное давление — АД 160— 170/100 мм рт.ст.), у 1 — высокая АГ (АД до 180/120 мм рт.ст.).
В 3-ю группу вошли 14 больных с наиболее высокой активностью ХГН, у которых ПУ сочеталась с преходящим нарушением функции почек. У 3 пациентов отмечался выраженный МС: ПУ 2 (1,45; 4,2) г/сут, эритроцитурия до 12 в поле зрения, у 4 пациентов — умеренный НС: ПУ 7,9 (6,3; 8,16) г/сут, у 7 — выраженный НС: анасарка, гипоальбуминемия до 19,9 (18,3; 20,7) г/л, ПУ 12 (7,52; 18) г/сут. У всех пациентов выявлено транзиторное снижение функции почек — СКФ 60—30 мл/мин, креатинин — 1,52 (1,35; 1,96) мг/дл. У 5 пациентов этой группы НС сочетался с остронефритическим синдромом (ОНС).
К 4-й группе отнесли 15 пациентов с сохраняющейся ПУ до 2,85 (1,74; 3,96) г/сут и стойкой более 9 мес ПН: СКФ 43 (26; 66) мл/мин, креатинин в сыворотке крови 2 (1,59; 2,9) мг/дл. У всех больных выявлялась АГ (повышение АД до 170/100 мм рт.ст.). В биоптатах почек в этой группе выявлялся фиброз.
Выраженность воспалительной инфильтрации в ткани почки оценивали в баллах (0 — отсутствие инфильтратов при световой микроскопии почечного биоптата, 1 — наличие очаговых лимфомакрофагальных инфильтратов, 2 — наличие диффузных лимфомакро фагальных инфильтратов).
Уровень АТ к БТШ-70 в сыворотке крови и БТШ-70 в моче исследовали методом непрямого иммуноферментного анализа (ELISA).
Статистический анализ данных проводили с применением стандартных статистических методик с помощью программы Statistica 6,0. Для сравнения двух групп использовали непараметрический критерий Манна—Уитни. Корреляционный анализ проводили методом ранговой корреляции Спирмена. Для оценки прогностического значения уровня АТ к БТШ-70 в сыворотке крови применен метод Каплана—Майера, достоверность различий оценена по лог-ранговому критерию.
Результаты
Повышение уровня БТШ-70 в моче выявлялось у больных ХГН высокоактивного течения с преходящим нарушением функции почек (3-я группа). Экскреция БТШ-70 с мочой в этой группе была значимо выше, чем у пациентов с высокой ПУ и сохраненной функцией почек (2-я группа), у больных со стойкой ПН (4-я группа) и при неактивном течении заболевания (1-я группа) (табл. 1).
Уровни экскреции БТШ-70 с мочой не различались достоверно у больных с разными морфологическими формами ХГН (табл. 2). Однако нами выявлена прямая достоверная корреляция между уровнем БТШ-70 в моче и выраженностью воспалительной инфильтрации ткани почки, оцененной в баллах (Rs=0,612; p<0,05), что, по-видимому, отражает усиление экспрессии защитного БТШ-70 в различных структурах почки по мере прогрес-сирования иммунного воспаления и активности ХГН.
Уровень АТ к БТШ-70 в сыворотке крови больных активным ХГН в целом был выше, чем у пациентов с неактивным течением заболевания, — 24 (17,6; 31) пг/мл и 22,5 (16,3; 23,9)-106 нг/мл соответственно (p<0,05). Однако у пациентов с НС данный показатель был несколько ниже
Контактная информация:
Чеботарева Наталья Викторовна — к.м.н., в.н.с. отд. нефрологии НИИ уронефрологии и репродуктивного здоровья человека; тел.: +7(905)543-4250; e-mail: natasha_tcheb@mail.ru
Таблица 1. Уровень БТШ-70 в моче и АТ к БТШ-70 в сыворотке крови у больных ХГН
Группа Число больных БТШ-70 в моче, нг/мл АТ к БТШ-70, -106 нг/мл
1-я: неактивный ХГН 15 1 (1; 1,06) 22,5 (16,3; 23,9)
2-я: активный ХГН с сохраненной функцией почек 35 1 (1; 1,017) 29,5 (19,8; 31,4)*
3-я: активный ХГН с преходящей ПН 14 1,06 (1; 1,79)* 20,2 (19,3; 22,1)**
4-я: активный ХГН со стойкой ПН 15 1 (1; 1,0015) 27,9 (14,7; 31,3)
Примечание. * — р<0,05 по сравнению с 1-й группой; ** — р<0,01 по сравнению со 2-й и 4-й группами.
Таблица 2. Уровень БТШ-70 в моче и АТ к БТШ-70 в сыворотке крови у больных с разными морфологическими формами ХГН
Морфологический вариант ХГН БТШ-70 в моче, нг/мл АТ к БТШ-70 в сыворотке, -106 нг/мл
МИ (п=4) 1,06 (1; 1,41) 24 (16,1; 25,8)
ФСГС (и=7) 1 (0,9; 1,1) 24,5 (17,6; 31,3)
МПГН (и=20) 1 (0,8; 1,1) 24,3 (19,8; 29,6)
МКГН (и=8) 1 (1,01; 1,05) 25,6 (18,5; 29,1)
МН (и=8) 1,004 (1; 1,07) 15,9 (11,3; 20,5)*
Примечание. * — р<0,05 по сравнению с остальными группами.
Таблица 3. Уровень АТ к БТШ-70 в сыворотке крови у больных с разной выраженностью НС и ПН
Показатель Умеренный НС с сохраненной функцией почек (п=13) Выраженный НС с сохраненной функцией почек (п=5) Выраженный НС с нарушением функции почек (п=5)
Общий белок г/л 46,6 (43,2; 49,7) 37,9 (34,1; 37,7) 35 (33,6; 37)
Альбумин, г/л 28,1 (26,2; 30) 21,6 (19,9; 22) 19,9 (18,3; 20,7)
Протеинурия, г/сут 7,8 (5,6; 10) 10,7 (7,8; 14,3) 12 (11,2; 18)
Креатинин, мг/дл 0,7 (0,7; 0,9) 0,93 (0,72; 1,02) 1,41 (1,39; 1,57)*
СКФ, мл/мин 127 (100; 161) 90 (76; 164) 43 (42; 58)*
АТ к БТШ-70, -106 нг/мл 23,5 (16,2; 31,5) 25,6 (18,7; 31,9) 20,3 (15,3; 24,3)*
Примечание. * — р<0,05 по сравнению с НС с сохраненной функцией почек.
— 22,7 (17,6; 31,4)106 нг/мл, чем при умеренном МС — 28,2 (18,9; 31,1)-106 нг/мл. При наиболее тяжелом течении нефрита (сочетание НС с нарушением функции почек, в том числе с ОНС) снижение уровня АТ к БТШ-70 становилось статистически значимым (табл. 3).
Среди морфологических форм нефрита наиболее низкий уровень АТ к БТШ-70 отмечался при МН (см. табл. 2). В нашем исследовании этот морфологический вариант нефрита диагностирован у 8 пациентов с активным ХГН с выраженным НС, высокой ПУ от 6 до 10 г/сут. У 5 из 8 больных НС протекал с нарушением функции почек, что, по-видимому, и служило причиной столь низких уровней АТ к БТШ-70 в сыворотке крови этих больных.
Для оценки прогностического значения уровня АТ к БТШ-70 при ХГН мы проанализировали ответ на ИСТ у 39 пациентов в зависимости от исходной величины этого показателя. Купирование НС и/или достижение ремиссии ХГН в течение ближайших месяцев ИСТ наблюдалось у больных с высоким исходным уровнем АТ к БТШ-70 в сыворотке крови — более 21 пг/мл (рис. 1). У 8 (80%) из 10 пациентов с исходным уровнем АТ в сыворотке крови выше 21 пг/мл ответ на ИСТ был получен в течение 9 мес, у 50% — в течение ближайших 5 мес (рис. 2). Напротив, у 9 (60%) из 15 пациентов с низкими титрами АТ в сыворотке крови (менее 21 пг/мл) НС персистировал, несмотря на упорное в течение 12—14 мес лечение различными имму-
носупрессивными препаратами (введение голюкокорти-костероидов и цитостатиков, в том числе в сверхвысоких дозах, применение циклоспорина А, микофенолата мофе-тила).
В целом повышение уровня АТ к БТШ-70 у больных активным ХГН, по-видимому, отражает более интенсивную экспрессию защитного БТШ-70 в ткани почки. Снижение уровня этих АТ у больных с тяжелым прогрессирующим течением является прогностически неблагоприятным признаком, указывающим на возможность в последующем торпидного течения НС.
Обсуждение
Синтез БТШ в ответ на разные повреждающие факторы, в том числе воспалительные, являются универсальным защитным механизмом клеток, предотвращающими их повреждение [7]. Повышение экспрессии БТШ внутри клетки обеспечивает стабилизацию и восстановление структуры поврежденных белковых молекул и поддерживает оптимальный баланс между синтезом и деградацией белков. Это приводит к повышению резистентности клеток к стрессу. БТШ-70 играют роль в формировании структуры вновь синтезированных белков, в восстановлении частично денатурированных протеинов и деградации белков, не подлежащих восстановлению, т.е. выполняют
Рис. 1. Ответ на ИСТ у больных ХГН с НС в зависимости от исходного уровня АТ к БТШ-70 в сыворотке крови (п=25).
0 — персистирование НС; 1 — купирование НС.
функцию шаперонов. БТШ-70 могут взаимодействовать со структурами цитоскелета, участвовать в транспорте белков через мембраны в органеллы [2].
В семейство БТШ-70 входят два белка с разной молекулярной массой: БТШ-73 кДа и БТШ-72 кДа. БТШ-73
— главный конституциональный белок этого семейства. У экспериментальных животных в норме он экспрессиру-ется во всех зонах почечной ткани, у человека — преимущественно клетками дистальных канальцев, в меньшей степени — проксимальных [8]. При экспериментальном нефрите (ПАН-нефрозе) экспрессия БТШ-73 повышается в мезангии, клетках петли Генле, дистальных канальцах, собирательных трубочках, что может быть обусловлено повышенной реабсорбцией белка и служить защитой от повреждающего действия протеинурии [9].
БТШ-72 — индуцибельный белок, экспрессирую-щийся и в нормальной почке вдоль кортикопапиллярных областей для адаптации клеток мозгового вещества к гипертоническому стрессу (высокой внеклеточной концентрации солей) [8]. Экспрессия этого белка в ткани почки резко возрастает при ишемической и токсической почечной недостаточности, показано его участие в процессах восстановления клеток после ишемии-реперфузии [10]. Иммуногистохимические исследования экспрессии БТШ-72 в ткани почки продемонстрировали выраженное накопление этого белка в эпителиоцитах дистальных канальцев, петли Генле и в подоцитах у больных ХГН (МИ, ФСГС, МН), волчаночным нефритом, а также при хроническом интерстициальном нефрите [5].
Мы изучали у пациентов с ХГН экскрецию с мочой общего БТШ-70, что, по-нашему мнению, отражает его локальную экспрессию в ткани почки. Отмечено увеличение уровня БТШ-70 в моче у больных с прогрессирующим нефритом, протекающим с НС и преходящим нарушением функции почек, в то время как у пациентов со стойкой
Рис. 2. Частота достижения ремиссии ХГН с НС в группах больных с разным исходным уровнем АТ к БТШ-70 в сыворотке крови (п=25).
ПН мы наблюдали уменьшение его уровня в моче до следовых количеств. Полученные результаты свидетельствуют об активации по мере нарастания воспаления в почке защитного механизма — локально-почечной экспрессии БТШ-70 как универсальной реакции, направленной на ограничение воспаления и уменьшение степени повреждения клеток. В подтверждение данного предположения мы выявили достоверную корреляцию между уровнем БТШ-70 в моче и выраженностью воспалительной инфильтрации ткани почек, которая не зависела от морфологической формы ХГН.
Известно, что БТШ-70, помимо повышения содержания внутри клеток, может высвобождаться во внеклеточную среду или экспрессироваться на поверхности клеток с помощью системы МСН [11], и в этом случае их особая протективная роль заключается в контроле хронического иммунного воспаления. Впервые протективная роль БТШ при воспалительных заболеваниях продемонстрирована при введении экспериментальным животным с аутоиммунным артритом БТШ-60, дававшим противовоспалительный эффект [12]. В дальнейшем показано, что расположенные внутриклеточно БТШ при воспалении и повреждении клеток могут экспрессироваться на их поверхности или выделяться во внеклеточное пространство [13]. Эпитопы собственных БТШ, экспрессируемых в очаге воспаления, распознаются Т-клетками, что приводит к формированию регуляторных противовоспалительных клонов реактивных Т-клеток [14], а именно регуляторных клеток CD4+CD25+ [15]. Противовоспалительный интер-лейкин (ИЛ)-10 одним из первых выделяется регулятор-ными клетками в очаге воспаления, он является основным противовоспалительным цитокином, опосредующим многие иммунорегуляторные эффекты БТШ. В результате отмечается «переключение» фенотипа ТЫ на ТИ2 с уменьшением секреции а-фактора некроза опухоли и интерферона-7 и повышением уровня противовоспалительных ИЛ-10 и ИЛ-4 [16] не только в Т-лимфоцитах, но также в мононуклеарных клетках — моноцитах и дендритных клетках. Переключение на спектр цитокинов ТИ2 отмечается не только в животных моделях хронического воспаления, но и у человека, например при бронхиальной астме [17].
Таким образом, уменьшение экспрессии БТШ в очаге воспаления и индуцированной БТШ продукции ИЛ-10 мононуклеарными клетками может снижать резистентность к хроническим воспалительным заболеваниям [18], а повышение экспрессии БТШ в ответ на повреждение, наоборот, способствует эффективной иммунорегуляции [19]. Активация экспрессии БТШ клетками почек выявлена у больных с различными морфологическими формами ХГН (МИ, ФСГС, МН), а также при остром интерсти-циальном нефрите в очагах инфильтрации [5]. Напротив, при прогрессирующем хроническом воспалении с развитием фиброза значительного повышения экспрессии БТШ клетками ткани почек не отмечено. В исследовании Ь. Макес и соавт. [20] выявлено снижение экспрессии БТШ-72 на поверхности моноцитов периферической крови у пациентов с хроническими заболеваниями почек по сравнению с контролем. При этом выраженное уменьшение моноцитарной экспрессии БТШ-72 отмечалось у больных с терминальной стадией хронической ПН, что сочеталось с развитием системного воспаления [20].
Можно предполагать, что адекватная воспалению экспрессия БТШ на поверхности клеток играет важную роль для самозащиты почек, особенно с учетом того, что эти белки оказывают протективный эффект при различных хронических воспалительных заболеваниях [21].
В ряде исследований продемонстрировано увеличение уровня АТ к БТШ, в том числе АТ к БТШ-70, при иммунных и аутоиммунных заболеваниях (системной красной волчанке, ревматоидном артрите, васкулитах и др.). Обсуждается значение этого показателя в оценке активности заболеваний; в некоторых случаях повышение уровня АТ к БТШ являлось предиктором неблагоприятного исхода заболевания [22]. Их патогенетическое значение и прогностическая роль при иммунной патологии до конца не изучены. В то же время некоторые исследования уровня АТ к БТШ-70 в сыворотке крови больных с сердечно-сосудистыми заболеваниями продемонстрировали более определенные результаты. Так, X. Zhanq и соавт. [23] показали, что высокое содержание БТШ-70 в сочетании с низким титром АТ к БТШ-70 в сыворотке крови отражает высокий риск прогрессирова-ния атеросклероза и сердечно-сосудистых осложнений в популяции. Согласно данным Е. Dulin и соавт. [24], снижение уровня циркулирующих АТ к БТШ имеет неблагоприятное прогностическое значение для развития осложнений ишемической болезни сердца, так как может отражать активный процесс потребления АТ в процессе формирования комплексов антиген—антитело (БТШ70-АГ—БТШ70-АТ).
Ранее Н.А. Мухин и соавт. [6] исследовали уровень АТ к БТШ-70 в сыворотке крови у больных ХГН и амило-идозом и показали их увеличение при развитии НС. По нашим данным, уровень АТ к БТШ-70 в сыворотке крови и экскреция БТШ-70 с мочой также были повышены в целом у больных с активными формами ХГН. Однако у больных с прогрессирующим течением нефрита мы отметили снижение титра АТ к БТШ-70. Кроме того, у пациентов с исходно более низкими титрами АТ к БТШ-70 в сыворотке крови НС характеризовался в дальнейшем тяжелым торпидным течением, несмотря на адекватную ИСТ.
Заключение
У больных активным ХГН в ответ на повреждение отмечается активация синтеза защитного БТШ-70, что сопровождается повышением его экскреции с мочой и увеличением выработки АТ к БТШ-70. Однако при наиболее тяжелом течении с выраженным НС и нарушением функции почек при высокой экскреции БТШ-70 с мочой уровень БТШ-70-АТ в сыворотке крови снижается. Мы полагаем, что такой спектр мочевых и сывороточных показателей БТШ-70 у больных ХГН отражает выраженность воспалительных изменений в почке и недостаточность защитных механизмов и может рассматриваться как предиктор неблагоприятного прогноза ХГН (торпидное течение заболевания, плохой ответ на терапию).
Необходимы дальнейшие изучения механизмов самозащиты почки и разработка диагностических тестов, информативно и комплексно отражающих изменения в этой системе, что очень важно с клинических позиций для оценки прогноза ХГН и выбора тактики лечения.
ЛИТЕРАТУРА
1. Kitamura M, Fine L.G. The concept of glomerular self-defense. Kidney Int 1999; 55: 1639—1671.
2. Beck F.-X, Neuhofer W., Muller E. Molecular chaperones in the kidney: distribution, putative roles and regulation. Am J Physiol Renal Physiol 2000; 279: 203—215.
3. Бобкова И.Н., Чеботарева Н.В., Козловская Л.В., Непринцева Н.В. Защитное действие белков теплового шока при заболеваниях почек. Клин нефрол 2011; 6: 59—66.
4. Mueller T, Bidmon B., Pichler P. et al. Urinary heat shock protein-72 excretion in clinical and experimental renal ischemia. Pediatr Nephrol 2003; 18: 97—99.
5. Venkataseshan V.S., Marquet E. Heat shock protein 72/73 in normal and diseased kidneys. Nephron 1996; 73: 442—449.
6. Мухин Н.А., Ляшко В.Н., Маргулис Б.А. и др. Амилоидоз и антитела к белкам теплового шока. Тер арх 1992; 64; 79—82.
7. Welch W.J. Mammalian stress response: Cell physiology, structure/function of stress proteins, and implication for medicine and disease. Physiol Rev 1992; 72: 1063—1081.
8. Dinda A.K., Mathur M, Guleria S. et al. Heat shock protein (HSP) expression and proliferation of tubular cells in end stage renal disease with and without haemodialysis. Nephrol Dial Nransplant 1998; 13: 99—105.
9. Komatsuda A., Wakui H, Imai H. et al. Renal localization of the constitutive 73-kDa heat-shock protein in normal and PAN rats. Kidney Int 1992; 41: 1204—1212.
10. Cowley B.D., Gudapaty S. Temporal alterations in regional gene expression after nephrotoxic renal injury. J Lab Clin Med 1995; 125: 187—199.
11. Basu S., Binder R, Suto R. et al. Necrotic, but not apoptotic cell death releases heat shock proteins, with deliver a partial maturation signal to dendritic cells and activate the NFkB pathway. Int Immunol 2000; 12: 1539—1546.
12. van Eden W., Tholet J.E.R., van der Zee R. et al. Cloning of the mycobacterial epitope recognized by T lymphocyte in adjuvant arthritis. Nature 1988; 331: 171—173.
13. Multhoff G., Hightower L.E. Cell surface expression of heat shock proteins and the immune response. Cell Stress Chaperones 1996; 1: 167—176.
14. Anderton S.M., van der Zee R., Prakken B. et al. Activation of T cells recognizing self 60-kDa heat shock protein can protect against experimental arthritis. J Exp Med 1995; 181: 943—952.
15. de Kleer I.M., Wedderburn L.R., Taams L.S. et al. CD4+CD25 bright regulatory T cells actively regulate inflammation in the joints of patients with the remitting form of juvenile idiopathic arthritis. J Immunol 2004; 172: 6435—6443.
16. WendlingU, Paul L, van der Zee R. et al. A conserved mycobacterial heat shock protein (hsp) 70 sequence prevents adjuvant arthritis upon nasal administration and induced IL-10-producing T cells that cross-react with the mammalian self-hsp70 homologue. J Immunol 2000; 164: 2711—2717.
17. Анисимова Н.Ю., Должикова Ю.М., Кокушков Д.В. и др. Особенности цитокинового профиля у больных бронхиальной астмой в стадии обострения. Сеченовский вестн 2011; 1 (3)— 2 (4): 26—29.
18. Rao D.V., Watson K., Jones G.L. Age-related attenuation in the expression of the major heat shock proteins in human peripheral lymphocytes. Mech Ageing Dev 1999; 107: 105—118.
19. Miyata M., Sato H, Sato Y. et al. Significance of endogenous heat shock protein in adjuvant arthritis. J Rheumatol 1999; 26: 2210—2214.
20. Marzec L, Zdrojewski Z, Liberek T. et al. Expression of Hsp 72 protein in chronic kidney disease patients. Scandinavian J Urol and Nephrol 2009; 43 (5): 400—408.
21. van Eden W., van der Zee R., Prakken B. Heat-shock proteins induce T-cell regulation of chronic inflammation. Nature 2005; 5: 318—330.
22. Wu T, Tanguay R.M. Antibodies against heat shock proteins in environmental stresses and diseases: friend or foe? Cell Stress and Chaperones 2006; 11 (1): 1—12.
23. ZhangX., Xu Z, Zhou L. et al. Plasma levels of Hsp 70 and anti-Hsp70 antibody predict risk of coronary syndrome. Cell Stress and Chaperones 2010; 15: 675—686.
24. Dulin E, Barreno P.G., Guisasola M.C. Extracellular heat shock protein 70 (HSPA1A) and classical vascular risk factors in a general population. Cell Stress and Chaperones 2010; 15: 929—937.
Поступила 11.02.2014
