CC BY
189
146
НАУЧНЫЕ ВЕДОМОСТИ
Серия Медицина. Фармация. 2015. № 22 (219). Выпуск 32
УДК: [6l6-00l.4-002.3-022.363.7:579.84l.ll]-085.33-085.363.7-076
ИССЛЕДОВАНИЕ АНТИБАКТЕРИАЛЬНОГО ДЕЙСТВИЯ МАЗЕЙ С ДИОКСИДИНОМ, ЛЕВОФЛОКСАЦИНОМ И ЛЕВОМИЦЕТИНОМ НА ВОДОРАСТВОРИМЫХ ОСНОВАХ В ОПЫТАХ IN VIVO НА МОДЕЛИ ГНОЙНОЙ РАНЫ, ИНФИЦИРОВАННОЙ ГОСПИТАЛЬНЫМ ШТАММОМ
P. AERUGINOSA
STUDY OF ANTIBACTERIAL ACTION OF OINTMENTS OF DIOXYDIN, LEVOFLOXACIN, AND CHLORAMPHENICOL IN THE WATER-SOLUBLE BASIS IN EXPERIMENTS IN VIVO ON MODEL OF PURULENT WOUND INFECTED WITH
HOSPITAL STRAIN OF P. AERUGINOSA
Е.А. Штанюк1, Е.П. Безуглая2, В.В. Минухин1, Н.А. Ляпунов2, Д.В. Минухин3 E.A. Shtanyuk1, E.P. Bezuglaya2, V.V. Minukhin1, N.A. Lyapunov2, D.V. Minukhin3
1Харьковский национальный медицинский университет Украина, 61022, г. Харьков, ул. Ленина, д. 4
2)Государственное научное учреждение «Научно-технологический комплекс« Институт монокристаллов »НАН Украины»
Украина,61178,, г. Харьков, прспектЛенина, д. 60 з>Государственное учреждение «Институт общей и неотложной хирургии АМН Украины»
Украина, 61103, г. Харьков, въезд Балакирева, д. 1
1>Kharkiv National Medical University
Ukraine, 61022, Kharkiv, Lenina St., 4
2)SSI "Scientific technological complex "Institute for Single Crystals"NAS of Ukraine"
Ukraine, 61178, Kharkov, Lenin Avenue, 60
3)SI "Institute of General and Emergency Surgery Academy of Medical Sciences of Ukraine"
Ukraine, 61103, Kharkiv, Balakeriva entry, 1
E-mail: [email protected]
Ключевые слова: мази с диоксидином, левофлоксацином, левомицетином, гнойные раны, местное лечение, синегнойная палочка.
Key words: ointments of Dioxydin, levofloxacin, chloramphenicol, purulent wounds, topical treatment, Pseudomonas aeruginosa.
Аннотация. Исследовано антибактериальное действие мазей, содержащих: 1) диоксидина 1.2% и лидокаина гидрохлорида 6.0% и 2) левофлоксацина 0.1%, натрия эдетата 0.5%, декаметоксина 0.5% и диметилсульфоксида 10% -на водорастворимых основах. Мазь с диоксидином показала высокоэффективное антибактериальное действие в опытах in vitro по отношению к клиническому штамму P. aeruginosa № 16 и обеспечила быструю элиминацию бактерий с гнойной раны, инфицированной этим штаммом в опытах in vivo. Мазь из левофлоксацином и препарат-аналог Левомеколь мазь показали эффективное антибактериальное действие в опытах in vitro по отношению к P. aeruginosa № 16 и уступили мази с диоксидином по эффективности антибактериального действия в опытах in vitro и in vivo. По результатам микробиологических, планиметрических и клинических исследований мазь диоксидина более эффективно сокращает переход 1-й фазы раневого процесса во вторую фазу по сравнению с мазью левофлоксацина и мазью Левомеколь. В процессе местного лечения мазями гнойных ран резистентность в P. aeruginosa № 16 к их антибактериальным составляющим (в частности, диоксидину) не развивалась. Мазь с диоксидином на водорастворимой основе перспективна для применения в 1-й фазе раневого процесса при местном лечении ран, инфицированных клиническими штаммами P. aeruginosa с полирезистентностью к антибиотикам.
Resume. Have been studied the antibacterial activity of ointments containing: 1) dioxydin 1.2% and lidocaine hydrochloride 6.0% and 2) levofloxacin 0.1%, sodium edetate 0.5%, and decametoxine 0.5%, DMSO 10% - onto water-soluble bases. Ointment with Dioxydin showed highly effective antibacterial activity in experiments in vitro in relation to the clinical strain of P. aeruginosa № 16 and provided a quick elimination of bacteria purulent wound infected with this strain in experiments in vivo. The ointment with levofloxacin and analog Levomekol ointment showed effective antibacterial effect in experiments in vitro against P. aeruginosa № 16 and conceded ointment with Dioxydin efficacy of antibacterial action in the experiments in vitro and in vivo. According to the results of microbiological, planimetric and clinical studies ointment of dioxidin more effectively reduces the passage of the 1st phase of wound healing process in the second phase in comparison with levofloxacin ointment and ointment Levomekol. In the process of local treatment of purulent wounds with ointments resistance in P. aeruginosa № 16 to their anti-bacterial components (eg, Dioxydin) did not develop. Dioxydin ointment onto water-soluble base is perspective for use in the 1st phase of the wound healing process in the topical treatment of wounds infected with clinical isolates of P. aeruginosa with multidrug-resistant to antibiotics.
Введение
Местное лечение раневой инфекции и преодоление резистентности микроорганизмов, которые ее вызывают, остается актуальной проблемой в современной медицине и микробиологии, несмотря на наличие множества антибактериальных препаратов [Блатун, 2007; Ковтонюк и др., 2010; Вильцанюк, Хуторянский, 2012]. В настоящее время в клиническую практику для лечения гнойных процессов любой локализации и генеза внедрены лекарственные препараты для местного лечения раневой инфекции с учетом стадии раневого процесса и видового состава микрофлоры ран.
НАУЧНЫЕ ВЕДОМОСТИ
Серия Медицина. Фармация. 2015. № 22 (219). Выпуск 32
147
Проводятся исследования и производство новых антибактериальных мазевых препаратов на гидрофильной основе для местного лечения гнойных раневых осложнений [Ляпунов и др., 2012]. Остается актуальным вопрос в целесообразности производства и использования новых мазей, действующей антимикробным веществом которых является антибиотик, и сравнения антибактериального действия этих мазей с мазями, в состав которых входит антисептик, в частности, диоксидин, который не потерял своей эффективности при его использовании на протяжении десятков лет.
Цель
Цель данной работы - сравнительное исследование антибактериальной активности экспериментальных образцов мазей, содержащих диоксидин или левофлоксацин на водорастворимых основах, и препарата-аналога Левомеколь мази в опытах in vitro и in vivo на модели локализованной гнойной раны у кроликов, инфицированной полирезистентным штаммом синегнойной палочки.
Для достижения этой цели нужно было решить следующие задачи:
1. Сравнить антибактериальное действие экспериментальных образцов мазей и препарата-аналога Левомеколь мази в опытах in vitro и in vivo по отношению к полирезистентному штамму P. aeruginosa.
2. Изучить влияние местного действия мазей на течение раневого процесса у экспериментальных животных, в частности, переход 1-й фазы раневого процесса во вторую фазу и клинические проявления заживления ран.
Экспериментальные исследования проводили в соответствии с методическими рекомендациями по экспериментальному изучению противомикробной активности лекарственных препаратов [Даценко и др., 1989; Волянский и др., 2004].
Материалы и методы исследования
Были использованы экспериментальные образцы двух мазей, содержащих: 1) диоксидин 1.2% и лидокаина гидрохлорид 6.0% на водорастворимой основе (далее - мазь диоксидина) 2) левофлок-сацин 0.1%, трилон Б (ДНЭ) 0.5%, декаметоксин 0.5% и диметилсульфоксид (ДМСО) 10% на водорастворимой основе (далее - мазь левофлоксацина). Для сравнения использовали препарат-аналог Левомеколь мазь (Борщаговский ХФЗ), содержащий 0.75% левомицетина (далее - мазь Левомеколь).
Моделирование местной гнойной инфекции (экспериментальной гнойной раны у кроликов) осуществляли в соответствии с методическими рекомендациями [Даценко и др., 1989]. В эксперименте было использовано 12 кроликов породы шиншилла; 4 группы по 3 кролика: 1 - исследовательская (лечение мазью диоксидина), 2 - исследовательская (лечение мазью левофлоксацина), 3 - исследовательская (лечение мазью Левомеколь), 4 - контрольная (без лечения). Объективность результатов исследования достигали одинаковыми для всех животных условиями их содержания и лечения, а также единой методикой оценки полученных результатов. Продолжительность лечения и наблюдения составила 34 суток. Перед лечением, через сутки, затем через каждые два, три и четыре дня проводили замеры площади ран и отбирали материал для определения их бактериального загрязнения. До начала эксперимента in vivo, а также на 10 и 18-сутки было проведено исследование антибактериального действия препаратов в отношении тест-культуры P. aeruginosa № 16 (клинического полирезистентного штамма), с помощью метода диффузии в агар (метод «колодцев») в соответствии с методическими рекомендациями [Волянский и др., 2004]. Каждый опыт повторяли 6 раз. Полученные результаты анализировали с помощью методов вариационной статистики. Достоверность определяли по критерию Стьюдента (при р<0.05) [Гланц, 1999].
Раны инфицировали клиническим штаммом P. aeruginosa № 16, выделенным из раны у больного хирургического отделения в лаборатории клинической патофизиологии и клинических лабораторных исследований ГУ «Институт общей и неотложной хирургии АМН Украины». Штамм P. aeruginosa № 16 был резистентный к ампициллину, гентамицину, амикацину, ванкомицину, ципро-флоксацину, офлоксацину, левофлоксацину, цефтриаксону, меропенему и цефепиму. Этот штамм в опытах in vitro был устойчивым к препарату Офлокаин-Дарница мазь 0.1% и образцу мази с 0.1% ле-вофлоксацином на водорастворимой основе. Он приобрел чувствительность к экспериментальному образцу мази с 0.1% левофлоксацином после включения в ее состав 0.5% ДНЭ, 0.5% декаметоксина и 10% ДМСО (зоны задержки роста 18.40±0.95 мм).
Скорость заживления ран оценивали по тесту Л.Н. Поповой [Даценко и др., 1989]. Качественный и количественный состав микрофлоры ран определяли в соответствии методических рекомендаций [Даценко и др., 1989], а идентификацию бактерий проводили по общепринятой методике [Во-лянский и др., 2004].
Результаты исследования и их обсуждение
Во время эксперимента поведение всех инфицированных животных соответствовало норме за исключением кроликов контрольной группы (без лечения), которые были беспокойные и раздражительные. В табл. 1 приведены результаты заживления ран и их микробной загрязненности (КОЕ/г).
148
НАУЧНЫЕ ВЕДОМОСТИ
Серия Медицина. Фармация. 2015. № 22 (219). Выпуск 32
Таблица 1 Table. 1
Динамика заживления и бактериальное загрязнение ран, инфицированных P. aeruginosa № 16, в процессе лечения мазями The dynamics of healing and bacterial contamination of wounds infected with P. Aeruginosa № 16, during treatment with ointments
Сроки наблюдения за животными, сутки Группа 1. Лечение мазью диоксидина (M±m) Група 2. Лечение мазью левофлоксацина (M±m) Группа 3. Лечение мазью Левомеколь (M±m) Группа 4. Контрольная (без лечения) (M±m)
Площадь раны, см2 Бактериаль- ное загрязнение раны, КОЕ/г Площадь раны, см2 Бактериаль- ное загрязнение раны, КОЕ/г Площадь раны, см2 Бактериаль- ное загрязнение раны, КОЕ/г Площадь раны, см2 Бактериаль- ное загрязнение раны, КОЕ/г
Исход- ные данные 2.76±0.73 2.2х109±0.15 2.65±0.02 1.9х109±0.85 2.70±0.02 2.1х109±0.25 2.82±0.84 2.0х109±0.31
i 2.76±0.73 1.9х109±0.15 2.65±0.02 1.8х109±0.15 2.70±0.02 1.7х109±0.67 2.82±0.84 2.0х109±0.21
3 2.72±0.72 1.8х108±0.67 2.52±0.07 1.6х109±0.95 2.60±0.02 1.6х109±0.31 2.81±0.86 1.9х109±0.40
5 2.64±0.68 5.5х106±0.15 2.46±0.08 5.7х108±0.90 2.55±0.02 5.3х108±0.61 2.87±0.85 1.9х109±0.45
7 2.14±0.74 3.0х106±0.31 2.44±0.35 4.4х108±0.56 2.33±0.02 3х108±0.51 2.98±0.68 1.8х109±0.20
10 1.59±0.36 9.1х104±0.89 2.40±0.09 2.3х107±0.46 2.19±0.05 1.4х107±0.36 3.00±0.63 4.2х108±0.87
14 1.27±0.29 2.7х104±0.59 2.20±0.05 5.1х106±0.25 2.04±0.02 3.2х106±0.71 2.65±0.22 3.1 х108±0.71
18 1.02±0.04 6.3х103±0.29 1.94±0.19 4.7х105±0.97 1.83±0.02 1.9х105±0.30 2.43±0.02 2.9х108±0.70
22 0.66±0.06 5.0х102±0 1.75±0.22 3.1х105±0.36 1.32±0.12 3.1х104±0.56 2.34±0.06 2.1х107±0.31
26 Заживление НО1 1.53±0.08 7.5х103±0.50 1.01±0.05 1.0х103±0 2.13±0.26 4.4х106±0.74
30 0.45±0.08 1.5х103±0.50 0.09±0.04 5.0х102±0 1.56±0.30 2.1 х105±0.40
34 Заживление НО1 Заживление НО1 1.24±0.20 2.7х104±0.55
Примечание: заживление - полное заживление раны. НО1 - не обнаружено жизнеспособных бактерий
P. aeruginosa № 16.
Данные планиметрии свидетельствуют о том, что сначала во всех группах животных раны оказались примерно равнозначными по площади от 2.65 см2 до 2.82 см2 (р>0.05). В процессе лечения различными мазями до 10-го дня достоверной разницы в динамике заживления ран в опытных группах животных и контрольной группе не наблюдалось (р>0.05). Начиная с десятых суток, и к концу эксперимента была обнаружена достоверная разница (р<0.05) между размерами ран всех четырех групп кроликов. Местное лечение ран мазью диоксидина было наиболее эффективным (раны зажили через 26 суток); при местном лечении ран мазью левофлоксацина и мазью Левомеколь раны зажили через 34 суток.
По данным литературы [Безуглая и др., 1995], критическое количество микробов, обусловливающее развитие раневого процесса, составляет >105 микробных тел в 1 г ткани раны. Поэтому в 1-й фазе раневого процесса очень важно снизить микробную обсемененность инфицированных ран ниже критического уровня. При использовании мази диоксидина снижение микробной загрязненности ран ниже критического уровня наблюдается на десятые сутки лечения, при лечении мазью Левоме-коль и мазью левофлоксацина - на 26-сутки, а в контрольной группе - на 34-сутки. Итак, можно сделать вывод, что мазь диоксидина проявляет выраженный антибактериальный эффект в опытах in vivo, способствуя элиминации из раны госпитального штамма синегнойной палочки с полирезистентностью к антибиотикам.
Во время лечения мазями резистентность штамма P. aeruginosa № 16 к их антибактериальным составляющим не развивалась. Так, в эксперименте in vitro было изучено антибактериальное действие образцов исследуемых мазей по отношению к клиническому штамму P. aeruginosa № 16 методом «колодцев» до начала лечения, на 10-й и 18-й дни лечения (табл. 2). Мазь диоксидина в течении всего эксперимента проявляла высокоэффективное антибактериальное действие; зоны задержки роста P. aeruginosa № 16 составляли 32.77±0.30 мм до лечения и - 32.23±0.66 мм на восемнадцатые сутки лечения (табл. 2). Мазь левофлоксацина и мазь Левомеколь в течении эксперимента проявляли эффективное антибактериальное действие; зоны задержки роста составили соответственно до лечения 17.58±0.50 мм и 18.97±0.87 мм, а на восемнадцатые сутки - 17.80±0.30 мм и 18.82±0.57 мм (табл. 2).
Результаты исследований, приведенные в табл. 3, показывают, что при лечении мазью диок-сидина экссудация, перифокальное воспаление (признаки 1-й фазы раневого процесса) уменьшаются после седьмого дня лечения; на 10-е сутки появляются признаки 2-й фазы раневого процесса, а именно - грануляции по краям раны ярко-розового цвета, поверхность их была блестящая, легко кровоточила при незначительном повреждении. Это свидетельствует о благоприятном течении раневого
НАУЧНЫЕ ВЕДОМОСТИ
Серия Медицина. Фармация. 2015. № 22 (219). Выпуск 32
149
процесса. При лечении мазью левофлоксацина и мазью Левомеколь признаки перехода раневого процесса во вторую фазу (в частности, появление краевых грануляций) появились на 14-е сутки. У контрольной группы животных (без лечения) гнойно-некротическая фаза ран продолжалась до двадцать шестого дня.
Таблица 2 Table.2
Диаметры зон задержки роста клинического штамма P. aeruginosa № 16, которые высевали из ран
до лечения и во время лечения мазями
The diameters of the zones of growth inhibition of clinical strain of P. aeruginosa number 16, which was plated from the wounds before the treatment time and treatment of ointments
Группа животных Мазь Сроки наблюдения животных, сутки Диметры зон задержки роста (мм) (М ± m, n = 6) тест-штамма P. aeruginosa № 16
i Мазь диоксидина Исходные данные 32.77±0.30
10 32.68±0.62
18 32.23±0.66
2 Мазь левофлоксацина Исходные данные 17.58±0.50
10 17.46±0.39
18 17.80±0.30
3 Мазь Левомеколь Исходные данные 18.97±0.87
10 18.92±0.78
18 18.82±0.57
Таблица 3 Table. 3
Клиническая характеристика ран, инфицированных P. aeruginosa № 16,
в процессе лечения мазями
Clinical characteristics of wounds infected with P. aeruginosa № 16, during treatment with ointments
Сутки Экссудация при лечении: Перифокальное воспаление при лечении Грануляция и эпителизация при лечении
Мазью диокси- дина Мазью левофлок- сацина Мазью Левоме- коль Контроль (без лечения) о s ^ 3 о S со « S d О S и 2 о g 3 3 э в £ § S ч О Щ 3 S Й » О 5 ев И 9 >д щ И 25 с; Контроль (без лечения) о s ^ 8 о S со « S d о S £ I 4 и 2 о g 3 3 э £ § S ч Мазью Левоме- коль Контроль (без лечения)
0 +++ + + + + + + + + + +++ + + + + + + + + + НО1 НО1 НО1 НО1
1 +++ + + + + + + + + + +++ + + + + + + + + + НО1 НО1 НО1 НО1
3 +++ + + + + + + + + + +++ + + + + + + + + + НО1 НО1 НО1 НО1
5 +++ + + + + + + + + + +++ + + + + + + + + + НО1 НО1 НО1 НО1
7 +++ + + + + + + + + + +++ + + + + + + + + + НО1 НО1 НО1 НО1
10 ++ + + + + + + + + + - + - + + + Кр. гр.2 НО1 НО1 НО1
14 + + + + + + + + + + - - - + + + Гр.3, кр. эп.4 Кр. гр. 2 Кр. гр. 2 НО1
18 + + + + + + + + - - - + + + Гр.3, кр. эп.4 Гр. 3, кр. эп. 4 Гр. 3, кр. эп. 4 НО1
22 - + + + + + + - - - + + Гр. 3, эп.5 Гр. 3, кр. эп. 4 Гр3., кр. эп. 4 НО1
26 - + + + + + - - - - Эп. 5 Гр. 3, кр. эп.4 Гр. 3, эп.5 Кр. гр. 2
30 - - - + + - - - - Эп. 5 Гр. 3, эп.5 Эп. 5 Кр. гр. 2, кр. эп. 4
34 - - - + + - - - - Эп. 5 Эп. 5 Эп. 5 Кр. гр. 2, кр. эп. 4
Примечание: (+++) сильно выраженные, (++) умеренно вираженные, (+) слабо выраженные признаки экссудации и перифокального воспаления, (-) отсутствие в ране экссудации или перифокального воспаления; НО1 - не обнаружено грануляции и эпителизации; кр. гр. 2 - краевые грануляции; гр.3 - грануляции по всей поверхности раны; кр. эп. 4 -краевая эпителизация; эп. 5 - эпителизация по всей поверхности раны.
150
НАУЧНЫЕ ВЕДОМОСТИ
Серия Медицина. Фармация. 2015. № 22 (219). Выпуск 32
Выводы
1. Мазь диоксидина 1.2% показала высокоэффективное антибактериальное действие в опытах in vitro по отношению к клиническому штамму P. aeruginosa № 16 и обеспечила быструю элиминацию бактерий с гнойной раны, инфицированной P. aeruginosa № 16, в эксперименте на кроликах (в опытах in vivo).
2. Мазь левофлоксацина 0.1%, в состав которой входят 0.5% ДНЭ, 0.5% декаметоксина и 10% ДМСО, а также мазь Левомеколь имеют эффективное антибактериальное действие в опытах in vitro по отношению к клиническому штамму P. aeruginosa № 16 и уступают мази диоксидина 1.2% по эффективности антибактериального действия в отношении этого штамма в опытах in vitro и in vivo.
3. По результатам микробиологических, планиметрических и клинических исследований мазь диоксидина 1.2% более эффективно сокращает переход 1-й фазы раневого процесса во вторую фазу по сравнению с мазью левофлоксацина 0,1% и мазью Левомеколь.
4. В процессе местного лечения мазями на водорастворимой основе гнойных ран, инфицированных P. aeruginosa № 16, резистентность этого штамма к их антибактериальным составляющим (в частности, диоксидину) не развивалась.
5. Мазь, содержащая 1.2% диоксидина и 6.0% лидокаина гидрохлорида на водорастворимой основе, перспективная для применения в 1-й фазе раневого процесса при местном лечении ран, инфицированных клиническими штаммами P. aeruginosa с полирезистентностью к антибиотикам.
Список литературы References
Безуглая Е.П. и.др. 1995- Теория и практика местного лечения гнойных ран. К., Здоров’я, 384.
Bezuglaya E.P.i dr. 1995- Teoriya i practika mestnogo lecheniya gnoynykh ran. K., Zdorov’ya, 384 (in Russian).
Блатун Л.А. 2007. Местное медикаментозное лечение ран. Проблемы и новые возможности их решения. Consilium Medicum. Хирургия. (1): 25-28.
Blatun Дюфю 2007. Mestnoe medicamentoznoe lechenie ran. Problemy I novye vozmozhnosti ikh resheniya. Consilium Medicum. Khirurgiya. (1): 25-28 (in Russian).
Волянский Ю.Л. и.др. 2010. Биологическая характеристика и микробиологическая идентификация неферментирующих грамотрицательных бактерий: учебное пособие. Х., 47.
Volyanskiy Yu. L. i dr. 2010. Biologicheskaya kharakterisyika I mikrobiologicheskaya identiphikatsiya nepher-mentiruyucshikh bacteriy: uchebnoe posobie. Kh.,47 (in Russian).
Гланц С. 1999. Медико-биологическая статистика. Москва, Практика, 360.
Glants S. 1999. Mediko-biologicheskaya statistika [Biomedical Statistics]. Moscow, Practika, 360 (in Russian).
Даценко Б.М. и др. 1989. Методические рекомендации по экспериментальному (доклиническому) изучению лекарственных препаратов для местного лечения ран. Москва: МЗ СССР, 47.
Datsenko B.M. i dr. 1989. Metodicheskie recomendatsiipo eksperimental’nomu (doklinichescomu) izucheniyu lekarstvennykh preparatov вднф mestnogo lecheniya ran. Moskow: MZ the USSR, 47 (in Russian).
Ляпунов Н.А. и др. 2012. Разработка препаратов с катионными антисептиками. Раны и раневые инфекции: тез. докл. I Международного конгресса, Москва 11-13 октября 2012 г. 210-212.
Lyapunov N.A. i dr. 2012. Razrabotka preparatov s kationnymi antiseptikami. Rany I ranevye inphektsii: tez. Dokl. I. Mezhdunarjdnogo kongressa, Moskow 11-13 October 2012. 210-212 (in Russian).
Вшьцанюк О.А., Хуторянський М.О. 2012. Характеристика збудниюв гншно-запальних процейв м’яких тканин та шсляоперацшних гншних ускладнень у хворих загально^рурйчного стацюнару. Харювська хiрургiч-на школа. (2): 84-88.
Vil’tsanyuk O.A., Khutoryanskiy M.O. 2012. Kharakterystyka zbydnykiv gniyno-zapal’nykh procesiv m’yakykh tkanyn ta pislyaoperaciynykh gnyynykh uskladnen’ г khvorykh zagal’no-khirurgichnogo stscionaru. Kharkivska khirur-gichna shkola. (2): 84-88 (in Ukraine).
Ковтонюк В. А. та шшй 2010. 1нфекцшний контроль та порiвняльна характеристика мжробюлопчних дослщжень гншних ран у вщдшеннях хiрургiчного профшю: матерiали наукового конгресу «IV Мiжнароднi Пи-роговськi читання»: присвячений 200^ччю М. I. Пирогова XXII з’1зд хiрургiв Украши, Вiнниця, 2-5 червня 2010
р. т. I, 213.
Kovtonyuk V.A. ta inshi. 2010. Inphektsiynyy kontrol’ ta porivnyal’na kharakterystyka mikrobiologichnykh doslidzhen’ gnsynukh ran u viddilennyakh khirurgichnogo prophilyu material naukovogo kongresu « IV Mizhnarodni pyrogovs’ki chitannya»: prysvyachenyy 200-richchyu M.I. Pyrogova XXII z’izdu khirurgiv Ukraine, Vinnytsa, 2-5 June 2010. T. I, 213 (in Ukraine).
Волянський Ю.Л. та iншi 2004. Вивчення специф!чно1 активност1 протим1кробних л1карських засоб!в: методичн1 рекомендаци. Ктв: МОЗ Украши, Державний Фармаколог1чний центр, 38.
Volyanskiy Yu. L. ta inshi. 2004. Vyvchennya spetsyphichnoyi aktyvnosti protyvicrobnykh likars’kykh zasobiv [Studying the specific activity of antimicrobial drugs]: metodychny rekomendatsiyi. Kyiv: MOZ Ukraine, Derzhavnuy Pharmakologichnuy tsentr, 38 (in Ukraine).
