CC BY
29
М1КР0Б10Л0Г1Я
© Ляпунов М. О., *Штанюк 6. A., *MiHyxiH В. В., Безугла О. П.
УДК 616. 31-022. 7-085. 281-085. 484. 1-092. 4:615. 015. 8
Ляпунов М. О., *Штанюк €. A., *MiHyxiH В. В., Безугла О. П.
Д0СЛ1ДЖЕННЯ АНТИБАКТЕР1АЛЬН0"|"АКТИВН0СТ1 МАЗЕЙ 3
ЛЕВ0ФЛ0КСАЦИН0М, 0ФЛ0КСАЦИН0М ТА Д10КСИДИН0М НА
П0Л1РЕ3ИСТЕНТНИХ КЛ1Н1ЧНИХ ШТАМАХ 3БУДНИК1В РАН0В01 1НФЕКЦП
Лабораторгя технологГГ та аналгзу лгкарських засобгв ДНУ «НТК «1нститут монокристалгв» НАН УкраГни (м. ХаркГв) *Харкгвський нацГональний медичний унГверситет (м. ХаркГв)
zhenjashtanjuk@rambler.ru
Дана робота пов'язана з науково-дослщною ро-ботою «Експериментальне мiкробiологiчне обфун-тування протимiкробноI терапи гнiйно-запальниx за-хворювань», № державно! реестраци 0114U003390.
Вступ. Сучасна ранова Ыфек^я виявляе пол^ резистентнiсть до антибггиюв у 35-45 % пащетчв xiрyргiчного профiлю [1, 3, 8, 10, 11, 14]. Селекци полiрезистентниx мiкроорганiзмiв сприяе нерацю-нальне призначення антибютиюв без достатнього контролю за видовим складом бактерм та Ix чутли-вiстю до антибактерiальниx препара^в [2, 6, 9, 12]. За даними науково! лiтератyри основними збудни-ками гнiйно-запальниx заxворювань е золотистий стафтокок, кишкова та синьогнiйна палички [8, 9]. Боротьба з рановою шфек^ею стае все бтьш складною проблемою i потребуе залучення пре-паратiв, що ефективнi або високоефективн до но-зокомiальноI iнфекцiI, зокрема, антибактерiальниx препаратiв для мiсцевого л^вання ран. Фармацев-тична розробка такиx препаратiв мае фунтуватися на резyльтатаx мiкробiологiчного скринiнгy iз залу-ченням кëiнiчниx штамiв бактерiй.
Мета даного дослгдження - обфунтуван-ня рацiонального складу лiкарського препарату у формi мазi на водорозчиннiй основi для мюцево-го лiкyвання гнiйниx ран, iнфiкованиx кJliнiчними штамами Staphylococcus aureus, Escherichia coli та Pseudomonas aeruginosa, за результатами мiкробiо-лопчного скриншгу в дослiдаx in vitro.
0б'ект i методи дослгдження. В експеримент використанi 3 зразки мазей з 0,1% офлоксацином або 0,1% левофлоксацином, або 1,2 % дюксиди-ном на водорозчиннм основi, що мютили полокса-мер, полiетиленоксиди та проптенглколь, а також 2 зразки мазей з 0,1 % офлоксацином або 0,1 % левофлоксацином на цм основi з додаванням 0,5 % динатрт едетату (ДНЕ), 0,5 % декаметоксину та 10 % диметилсульфоксиду (ДМСО). Aнтибактерiаль-ну активнють мазей до^джували вщносно клiнiчниx штамiв S. aureus, E. coli та P. aeruginosa, видiлениx вщ xвориx, якi л^валися у xiрyргiчниx вiдцiленняx
клiнiки ДУ «1нститут загально! та невiдкJlадноI xiрyргiI НАМН Укра!ни». Зразки мазей виготовлеы в лабора-тор^ теxнологiI та аналiзy лiкарськиx препаратiв ДНУ «Наyково-теxнологiчний комплекс «1нститут моно-кристалiв» НАН Укра!ни».
Видiлення та iдентифiкацiю культур проводили за загальноприйнятими методами. Чутливють клi-нiчниx штамiв до 14 антибютиюв (оксацилшу, ам-пiцилiнy, амоксицилшу, доксациклiнy, гентамiцинy, амiкацинy, ванкомiцинy, ципрофлоксацину, офлок-сацину, левофлоксацину, цефазолiнy, цефтрiаксонy, меропенему та цефепiмy) визначали диско-дифу-зiйним методом [4, 7].
Для визначення антибактерiальноI д^ мазей ви-користовували метод дифуз^ в агар (метод «колодя-зiв») за методичними рекоменда^ями [4, 7].
Кожний дослщ повторювали шiсть разiв. Отри-маы результати обробляли за допомогою методiв варiацiйноI статистики. Достовiрнiсть отриманиx результа^в визначали за критерieм Ст'юдента (при р < 0,05) [5].
Ефективнють препара^в та чyтливiсть до ниx бактерiй оцiнювали за такими критерiями [7]:
- вiдсyтнiсть зон затримку росту: неефективнють та нечyтливiсть;
- дiаметри зон до 15 мм: низька ефективнють та мала чутливють;
- дiаметр зон вщ 15 мм до 25 мм: ефективнють та чутливють;
- дiаметр зон вище 25 мм: висока ефективнють та висока чутливють.
Результати дослгджень та 'Гх обговорення. На
першому етат були вщбраы полiрезистентнi кгмыч-нi грампозитивнi та грамнегативнi штами, якi спри-чинили гнiйно-септичнy ранову Ыфекцт, та визна-чена Ix чутливють до антибютиюв.
Штам S. aureus № 13 був нечутливим до амт-цилЫу, амоксицилiнy, доксициклшу, ванкомiцинy; № 832 - до оксацилшу, ампщилЫу, амоксицилiнy, доксицикJliнy, гентамщину, амiкацинy, цефепiмy; № 844 - до ампщилшу та амоксицикJliнy, № 910 - до
Taö^Möq 1
3ohm 3aTpMMKM pocTy K^iHiHHMX mTaMiB S. aureus niA Bn.MBOM floc^ifl^yßaHMX aHTMÖaKTepia^bHMX Ma3eü
№ n/n TecT-0TaM AiaMeTpM 3oh 3aTpMMKM pocTy, mm (M ± m) npM n = 6
O* O** .n* n** A*
1 S. aureus № 13 28.25 ±0.92 29.10 ±0.50 30.20 ± 0.68 31.13 ± 0.56 26.03 ± 0.74
2 S. aureus № 832 27.57 ±0.49 29.37 ±0.80 28.50 ± 0.43 30.07 ± 0.88 27.10 ± 0.26
3 S. aureus № 844 27.15 ±0.49 29.50 ± 0.41 29.57 ± 0.78 30.38 ± 0.48 26.60 ± 0.65
4 S. aureus № 910 29.65 ±0.65 30.78 ±0.71 30.63 ± 0.45 32.30 ± 0.31 21.82 ± 0.28
5 S. aureus № 1175 30.53 ±0.31 31.05 ± 0.70 31.47 ± 0.32 32.55 ± 0.62 24.40 ± 0.51
npuMiTKa AO Ta6. 1, 2 Ta 3: O* - Ma3b o$.noKcau,MHy 0.1 %, n* - Ma3b /eBo$.noKcau,MHy 0.1 %; fl* - Ma3b flioKCHflHHy 1.2 %; O** a6o n** - Ma3b o$.noKcau,MHy 0. 1 % a6o Ma3b /eBo$.noKcau,MHy 0.1 % BiflnoBiflHO 3 floflaBaHHAM 0. 5 % AHE, 0.5 % AeKaMeTOKcMHy Ta 10 % flMCO.
oKcaöM.iHy, aMniöM.iHy, aMOKCMöM/imy, AOKcMiiMK/iiHy, reHTaMiöMHy, aMlKaiiMHy, UMnpo^/ioKcaiiMHy, o^jiok-caöMHy Ta .neBo^/ioKcaiiMHy; № 1175 - äo oKcaiiM/ilHy, aMniöM.lHy, aMOKCMöM.iHy, AOKcMiiMK/ilHy, reHTaMliiM-Hy, BaHKOMiöMHy, ue0a3o.iHy, ie^TplaKcoHy Ta Mepo-neHeMy. Bohm Ma.M pi3Hy HyxriMBlcTb äo o^/ioKcaiiM-Hy Ta .eBo^.oKcaöMHy: niTaM № 1175 6yB HyxriMBMM, a LUTaM № 832 - Ma/ioHyT.nMBMM äo o^/ioKcaiiMHy Ta nyT.MBMM äo zieBo^/ioKcaiöHHy, 0TaMM № № 13, 844 -Ma/ioHyT/iHBHMH, a iiiTaM № 910 - HeHyT/iMBMM äo imx
^TOpxlHOJIOHlB.
TpaMHeraTMBHi 3ÖyäHMKM paHOBoi iH^eKiil E. coli 6y/iM HenyT.MBMMM Manxe äo bcIx 3a3HaHeHMX aHTM-6IotmkIb, BK/iioHaioHM o^.oKcaiMH Ta .neBo^/ioKcaiiMH. LUTaM E. coli № 6 l3 12 aHTMÖloTMKlB 6yB HyrnMBMM äo aMlKaiMHy, MeponeHeMy Ta ue^enlMy; № 19 - äo aMl-KaiiMHy, |Mnpo0.oKca|MHy, o^.oKcaiMHy Ta /ieBo0-.oKcaiMHy; № 65 6yB Ma/ioHyT.nMBMM äo aMlKaiMHy Ta MeponeHeMy; № 88 - Ma/ioHyrnHBHM äo MeponeHeMy; № 284 - Ma.onyTJiMBMM äo äOKCM|MK.lHy, iMnpo^.oK-caiMHy, o^.oKcaiMHy Ta .eBo^.oKcaiMHy Ta HyT/iM-bmm äo MeponeHeMy; № 292 - HyxriMBMM äo aMOKCM-öM.lHy Ta aMlKaiMHy.
LLlTaMM P. aeruginosa 6y/iM HeHyT/iMBMMM äo bcIx 9 aHTMÖloTMKlB, 3a bmhhtkom WTaMy № 17, hkmm 6yB Ma-.onyT.MBMM äo aMlKaiMHy.
B Ta6.. 1 HaBeäeHl pe3y.bTaTM äoc.läxeHb HyT/iM-boctI 5 no.lpe3McTeHTHMX LUTaMiB S. aureus äo Ma3eM
Ta6.Möq 2
3ohm 3aTpMMKM pocTy K.iHiMHMX mTaMiB E. coli niA Bn.MBOM AOc.iA^yBaHMX aHTM6aKTepia.bHMX Ma3eü
№ TecT- fliaMeTpM 3oh 3aTpMMKM pocTy, mm (M ± m) npM n = 6
n/n 0TaM O* O** n* n** A*
1 E. coli № 6 21.58 ± 0.97 23.62 ± 0.99 22.58 ± 0.90 25.67 ± 0.78 36.85 ± 0.70
2 E. coli № 19 29.73 ± 0.78 30.47 ± 0.85 31.13 ± 0.90 32.45 ± 0.98 31.10 ± 0.69
3 E. coli № 65 17.40 ± 0.84 20.27 ± 0.72 19.07 ± 0.78 20.90±0.73 38.10 ± 0.86
4 E. coli № 88 20.60 ± 0.64 25.38 ± 0.66 23.15 ± 0.63 27.15 ± 0.34 41.00 ± 0.81
5 E. coli № 284 27.77 ± 0.82 29.08 ± 0.93 29.13 ± 0.87 29.97 ± 0.72 30.18 ± 0.81
6 E. coli № 292 17.68 ± 0.38 20.88 ± 0.35 20.97 ± 0.55 21.92 ± 0.68 33.63 ± 0.57
3 0,1 % o^/ioKcaiiMHOM, 0,1 % .eBo^.oKcaiMHOM Ta
1,2 % äloKcMäMHOM.
BiäHocHo bcIx k/iIhIhhmx 0TaMlB S. aureus, BK/iioHa-IOHM 0TaMM MRSA, Ma3i 3 o^.oKcaiMHOM Ta /ieBo0-.oKcaiMHOM bmhbm.m bm-coKoe^eKTMBHy äli (3OHM 3aTpMMKM pocTy öl.bme 25 mm), He3a.exHo Blä pe3y.b-TaTlB, oäepxaHMX amcko-äM0y3lMHMM MeTOäOM. 3a
öMMM pe3y.bTaTaMM IiiTaM
№ 910 6yB HeHyT.MBMM äo
|MX OÖOX ^TOpxiHOJIOHiB,
0TaMM № 13 Ta № 844 - Ma/ioHyrriMBl, a LUTaM № 832 -Ma.oHyT.MBMM äo o^.oKcaiMHy. BMcoKa e^eKTMBHlcTb Ma3eM 3 o^/ioKcaiiMHOM Ta .neBo^/ioKcaiiMHOM bIa-hocho |MX 0TaMlB, HaneBHo, oöyMOB/ieHa npMpoäoio Ma3eBoI ochobm. Y noplBHHHHl 3 Ma33i o^.oKcaiMHy Ma3b .eBo^.oKcaiMHy BMHBM.a TeHäeHöli äo 6l.bm e^eKTMBHoI aHTMÖaKTepla/ibHoi ä" BläHocHo k/IhIhhmx 0TaMlB cTa^l/oKOKy (Ta6.. 1), y cepeäHbOMy äiaMe-TpM 3oh 3aTpMMKM pocTy 6y/M öI/iüiummm Ha 1,20 mm.
BBeäeHHH äo cK/aäy Ma3eM 3 ^TopxlHo/ioHaMM
AHE, äeKaMeTOKcMHy Ta flMCO cnpM^e HeBe/MKOMy nläBM^eHHi älaMeTplB 3oh 3aTpMMKM pocTy k/IhIhhmx 0TaMlB S. aureus y cepeäHbOMy Ha 1,33 mm a/h Ma3eM 3 o^/oKcaiMHOM Ta Ha 1,21 mm a/h Ma3eM 3 /eBo0-/oKcaiMHOM. TaK, y pa3i Ma3eM 3 o^.oKcaiMHOM äia-MeTpM 3oh 3aTpMMKM pocTy 3poc.M 3 27,15-30,53 mm äo 29,10-31,05 mm, a y pa3i Ma3eM 3 .eBo^.oKcaiM-hom - 3 28,50-31,47 mm ao 30,07-32,55 mm. Toöto, 3a-MlHa o^.oKcaiMHy Ha .neBo^/ioKcaiiMH Ta BBeäeHHH äo cK/iaäy Ma3eM 3 ^TopxlHo.oHaMM KOMn.eKcoyTBopi-BaHa, aHTMcenTMKa Ta nläcM.iBaHa npoHMKHeHHH He e BMplma.bHMMM 0aKTopaMM a/h niäBMi^eHHa e^eKTMB-hoctI Ma3eM bIahocho k.IhIhhmx 0TaMlB S. aureus.
E^eKTMBHlcTb aHTMÖaKTepla.bHoI äü Ma3l 3 aiokcm-Amhom bIahocho k.IhIhhmx 0TaMlB S. aureus BMHBM.acb äeio HMXHoi Hlx y Ma3eM 3 ^TopxlHo/oHaMM. BIahocho Tpbox 0TaMlB S. aureus № 13, № 832 Ta № 844 Ma3b äioKcMäMHy 1,2 % bmhbjIhg BMcoKoe^eKTMBHy äli, io
e noplBHiBaHoi 3 e^eKTMBHlc-
Ti Ma3i o^/oKcaiMHy. biahocho 0TaMlB № 910 Ta № 1175 äia-MeTpM 3oh 3aTpMMKM pocTy bm-hb/hitüch MeH0MMM BlänoBlä-ho Ha 7,83 mm Ta 6,13 mm. A/ie HaBlTb älaMeTpM 3oh 21,82 mm Ta 24,40 mm cBiäHaTb npo e^eK-TMBHy äli Ma3l 3 aIokcmamhom I äO3Bo.HiTb nporHO3yBaTM ao-
6pMM TepaneBTMHHMM e^eKT npM MlcieBOMy .iKyBaHHl thImhmx paH y 1-m 0a3l paHOBoro npoiecy.
C.lä 3a3HaHMTM, |o Ma3b älOKcMäMHy BMHBM.a
високоефективну та ефективну дю вщносно штам1в MRSA (№ 832, № 910 i № 1175) (табл. 1). Тобто, мазь дюксидину може застосовуватись при лiкуваннi ран, шфкованих клiнiчними штамами S. aureus, поряд з мазями, що мiстять фторхшолони.
В табл. 2 наведенi результати доогмджень чут-ливостi 6 полiрезистентних штамiв E. coli до мазей з 0,1% офлоксацином, 0,1 % левофлоксацином та 1,2 % дюксидином.
Вiдносно всiх штамiв E. coli мазi з офлоксацином та левофлоксацином виявили ефективну дю (зони затримки росту бтьше 15 мм) або високоефективну дю (зони затримки росту бтьше 25 мм). Найбть-ший дiаметр зон затримки росту близько 29-32 мм спостер^ався для штаму E. coli № 19, що виявився чутливим до фторхЫолоыв за результатами, одер-жаними диско-дифузiйним методом. Штам E. coli № 284, малочутливий до фторхЫолоыв, виявився також високочутливим до мазей з офлоксацином та левофлоксацином. Для штамiв E. coli № 6, № 65, № 88 та № 292, що були нечутливi до фторхЫолоыв, зони затримки росту виявилися значно меншими на рiвнi вщ 17,68 мм до 21,58 мм. Ефективнють та висока ефективнють мазей з офлоксацином та левофлоксацином вщносно ктычних штамiв E. coli, нечутливих до фторхшолоыв, напевно, обумовле-на гщрофтьною природою мазево! основи, що дозволяв створити високу концентрацю антибiотику в зонi затримки росту та забезпечуе його транспорт в мiкробнi кJliтини.
У порiвняннi з маззю офлоксацину мазь левоф-локсацину виявила бтьш ефективну антибактер^ альну дю вiдносно кJliнiчних штамiв E. coli (табл. 2), дiаметри зон затримки росту були бтьшими на 1,03,3 мм.
Введення до складу мазей з фторхшолонами ДНЕ, декаметоксину та ДМСО сприяе пщвищенню дiаметрiв зон затримки росту ктычних штамiв E. coli у середньому на 2,49 мм для мазей з офлоксацином та на 2,00 мм для мазей з левофлоксацином. Так, у
pa3i Ma3eM 3 o^/ioKcauMHOM äiaMeTpM 30H 3aTpMMKM
pocTy rnTaMiß E. coli № 6, № 65, № 88 Ta № 292 3poc-.m BiflnoßiflHO Ha 2,04 mm, 2,87 mm, 4,78 mm Ta 3,20 mm, a y pa3i Ma3eM 3 zieBo^/ioKcauMHoM - Ha 3,09 mm, 1,83 mm, 4,00 mm Ta 0,95 mm. Toöto, 3aMiHa o^jiok-caöMHy Ha zieBo^/ioKcauMH Ta BBefleHHH äo cinaäy Ma3eM 3 0TopxiHo.noHaMM KoMn.eKcoyTBopioBaHa, aH-TMcenTMKa Ta niäcM/iioBaHa npoHMKHeHHH MoxyTb 6yTM BaxnMBMMM 0aKTopaMM atia niäBMi^eHHH e^eKTMBHoc-Ti Ma3eM BiäHocHo iniHiHHMx WTaMiB E. coli, HenyTnMBMx äo ^TopxiHo.oHiB.
E^eKTMBHicTb aHTMÖaKTepiajibHoi äü Ma3i 3 äioicM-äMHoM BiäHocHo K.iHiHHMx 0TaMiB E. coli BM^BM/iacb bmi^oio Hix y Ma3eM 3 ^TopxiHo/ioHaMM. BiäHocHo ycix 6 LUTaMiB E. coli Ma3b äioKcMäMHy 1,2 % bmab/ihg bmco-Koe^eKTMBHy äii (Ta6. 2). npM öboMy 3ohm 3aTpMMKM pocTy 0TaMiB E. coli № 6, № 65, № 88 Ta № 292, HenyT-.mbmx äo ^TopxiHo.oHiB, niä äiei Ma3i i3 äioicMäMHoM
BHHB/iHioTbcfl öi.bmMMM nopiBH^Ho 3 Ma33i o^/ioica-
öMHy BiänoBiäHo Ha 15,27 mm, 20,70 mm, 20,40 mm Ta 15,95 mm, a nopiBHHHo 3 Ma33i zieBo^/ioKcauMHy BiänoBiäHo Ha 14,27 mm, 19,03 mm, 17,85 mm Ta 12,66 mm.
TaKMM hmhom, BMiopMcTaHHH Ma3i äioKcMäMHy 1,2 % 3aMicTb Ma3eM 3 ^TopxiHo.oHaMM BM^B.^eTbca BMpima.bHMM 0aKTopoM niäBMi^eHHH e^eiKTMBHocTi MicueBoro .iiyBaHH^ miMiHMx paH, ¡H^iioBaHMx ini-HiHHMMM 0TaMaMM km0koboI na.MHKM 3 no.ipe3Mc-TeHTHicTi äo aHTMÖioTMKiB (Ta6.. 2). npM öboMy bm-KopMcTaHH^ Ma3i äioKcMäMHy HaöaraTo e^eKTMBHime, Hix BBeäeHH^ äo cinaäy Ma3eM 3 o^.oicauMHoM aöo .eBo^.oicauMHoM KoMn.eKcoyTBopiBana, aHTMcen-TMKa Ta niäcM.iBana npoHMKHeHHR Tai, 3ohm 3aTpMM-km pocTy LUTaMiB E. coli № 6, № 65, № 88 Ta № 292, HenyTriMBMx äo ^TopxiHo.oHiB, Ma33i äioKcMäMHy BMAB/IHIOTbcfl 6i.Tlbl±IMMM nopiBH^Ho 3 KoMÖiHoBaHoro
Ma33i o^.oicauMHy BiänoBiäHo Ha 13,23 mm, 17,83 mm, 15,17 mm Ta 12,75 mm, a nopiBH^Ho 3 KoMÖiHoBa-hoi Ma33i .eBo^.oicauMHy BiänoBiäHo Ha 11,18 mm, 18,20 mm, 13,85 mm Ta 11,71 mm.
B Ta6.. 3 HaBeäeHi
Таблиця 3
Зони затримки росту клш1чних штамш P.aeruginosa пщ впливом дослщжуваних антибактертльних мазей
№ п/п Тест-штам Д1аметри зон затримки росту, мм (M ± m) при n = 6
О* О** Л* Л** Д*
1 P.aeruginosa № 16 Зони вщсутш 17.98 ± 0.99 Зони вщсутш 18.40 ± 0.95 34.47 ± 0.46
2 P.aeruginosa № 17 Зони вщсутш 18.28 ± 0.72 Зони вщсутш 19.30 ± 0.49 35.02 ± 0.92
3 P.aeruginosa № 242 Зони вщсутш 16.42 ± 0.33 11.72 ± 0.35 17.73 ± 0.40 21.47 ± 0.38
4 P.aeruginosa № 246 Зони вщсутш 17.77 ± 0.54 Зони вщсутш 18.03 ± 0.50 18.75 ± 0.36
5 P.aeruginosa № 252 Зони вщсутш 17.85 ± 0.60 Зони вщсутш 17.95 ± 0.18 33.90 ± 0.47
6 P.aeruginosa № 253 Зони вщсутш 17.10 ± 0.63 14.08 ± 0.47 18.02 ± 0.46 21.68 ± 0.58
7 P.aeruginosa № 254 Зони вщсутш 18.47 ± 0.62 11.82 ± 0.53 19.65 ± 0.45 33.03 ± 0.39
8 P.aeruginosa № 266 Зони вщсутш 16.53 ± 0.43 13.00 ± 0.17 18.8 ± 0.69 21.30 ± 0.30
9 P.aeruginosa № 1144 27.52 ± 0.81 29.45 ± 0.63 30.08 ± 0.20 31.58 ± 0.52 33.88 ± 0.26
10 P.aeruginosa № 1241 Зони вщсутш 17.43 ± 0.63 11.93 ± 0.81 18.58 ± 0.39 28.97 ± 0.57
результати досл1джень чутливост 6 пол1ре-зистентних штам1в P. aeruginosa до мазей з 0,1 % офлоксацину, 0,1% левофлоксацину та 1,2 % дюксидину.
Дев'ять кгмычних штам1в P. aeruginosa з 10 були нечутливими до маз1 офлоксацину, а один штам P. aeruginosa № 1144 виявив до не! високу чутливють. До маз1 левофлоксацину чотири штами були нечутливими, п'ять кт-ычних штам1в малочут-ливими (зони затримки
pocTy MeH0e 15 mm), oamh niTaM P. aeruginosa № 1144 bmhbmb ao Hei BMcoKy HyTJMBlcTb (Ta6.. 3). Toöto, 3a-MlHa o^.oKcaiMHy Ha jeBo^/oKcaiMH y Ma3HX Ha rlä-po^l.bHlM ochobI He e 3HaHyi|MM 0aKTopoM nläcM/eH-hh Ix aHTMÖaKTepla.bHoi äli bIahocho kjIhIhhmx LUTaMiB P. aeruginosa, |o oöyMOB/eHo Ix nepexpecHoi pe-
3McTeHTHlcTI äO pl3HMX ^TOpxlHO/OHlB.
0TaM P. aeruginosa № 1144, HeHyTJMBMM ao o^.oKcaiMHy Ta jeBo^/oKcaiMHy 3a pe3y/bTaTaMM AMcKO-äM0y3lMHOrO MeTOäy, BMHBMBcH BMcOKOHyT-jmbmm ao Ma3eM o^/oKcaiMHy Ta jeBo^/oKcaiMHy (Ta6.. 3). Pe3McTeHTHlcTb öaKTeplM ao o^/oKcaiMHy Ta Ihihmx ^TopxlHo.oHlB po3BMBaeTbcH 3a äBOMa Mexa-Hl3MaMM [13]. Y pa3i MOäM^lKauli kjItmhhoI MeMÖpaHM nopywyeTbcH TpaHcnopT o^/oKcaiMHy ao öaKTeplajb-hmx kjItmh. npM ibOMy äonoMlxHl peHOBMHM (HanpM-K/aä, nponl.eHrnlKo.b, |o nläcMJiG npoHMKHeHHH) MoxyTb noTeHiliBaTM Moro aHTMÖaKTeplajbHy äli, hk ie Bläöy.ocH y pa3i WTaMy P. aeruginosa № 1144. ßKio MexaHl3M pe3McTeHTHocTl noB'H3aHMM 3l cnoH-TaHHoi MyTailero AHK-rMpa3M, to öaKTepll 3a.M0a-itüch HeHyrnMBMMM ao Ma3l 3 o^jOKcaiMHOM, iio, Ha-neBHO, M OÖyMOBMJO BiäcyTHicTb 3OH 3aTpMMKM pocTy Ihihmx kjIhIhhmx 0TaMlB P. aeruginosa.
BBeäeHHH AO cK/aäy Ma3eM 3 ^TopxlHOJOHaMM
AHE, äeKameTokcmHy Ta flMCO poÖMTb Ma3l o^jok-caiMHy Ta jeBo^/oKcaiMHy e^eKTMBHMMM (3ohm 3aTpMMKM pocTy 6ljbi±ie 15 mm) bIahocho kjIhIhhmx LuTaMiB P. aeruginosa, |o Öy/M ao hmx HeHyTJMBl aöo Ma/oHyT/iMBl (Ta6.. 3). Öe TaKox cnpMHe niä-BMieHHi älaMeTplB 3oh 3aTpMMKM pocTy KjlHlHHoro 0TaMy P. aeruginosa № 1144 Ha 1,93 mm a/h Ma3eM 3 o^.oKcaiMHOM Ta Ha 1,50 mm a/h Ma3eM 3 jeBo^-/oKcaiMHOM. Y pa3l KOMÖlHOBaHMX Ma3eM 3 3aMlHoi o^.oKcaiMHy Ha jeBo^/oKcaiMH noMlTHa TeHäeHilH äo 6ljbl±l BMcOKMX 3OH 3aTpMMKM pocTy yclx kjIhIhhmx 0TaMlB P. aeruginosa. Toöto, 3aMlHa o^/oKcaiMHy Ha
.eBo^.oKcaiMH, I BBeäeHHH AO cK/aäy Ma3l 3 jeBo^-.oKcaiMHOM KOMn.eKcoyTBopiBaHa, aHTMcenTMKa Ta nläcM.iBaHa npoHMKHeHHH MoxyTb öyTM BaxnMBM-
mm ^aKTopaMM a/h nläBMiieHHH II e^eKTMBHocTl biahocho kjIhIhhmx LuTaMiB P. aeruginosa, HeHyTJMBMX ao
^TOpxiHOJIOHiB.
E^eKTMBHlcTb aHTMÖaKTeplajbHo'i äli Ma3l 3 äi-okcmamhom bIahocho kjIhIhhmx LUTaMiB P. aeruginosa BMHBM.acb BM|oi Hlx y Ma3eM 3 ^TopxlHOJOHaMM. BIahocho 6 LUTaMiB P. aeruginosa Ma3b äloKcMäMHy 1,2 % bmhbjhg BMcoKoe^eKTMBHy äli, a bIahocho 4 LUTaMiB - e^eKTMBHy äli (Ta6.. 3). npM noplBHHHHl e^eKTMBHocTl Ma3l äloKcMäMHy Ta KOMÖlHOBaHo'i Ma3l
.eBo^.oKcaiMHy OAHaKOBMMM MoxHa BBaxaTM 3ohm 3aTpMMKM pocTy tIjükm oäHoro WTaMy P. aeruginosa № 246 (BiänoBiäHo 18,75 ± 0,36 mm Ta 18,03 ± 0,50 mm). BIahocho Ihihmx 9 LUTaMiB P. aeruginosa № 16, № 17, № 242, № 252, № 253, № 254, № 266, № 1144 Ta № 1241 Ma3b äloKcMäMHy bmhbjhgtüch 6ljbi±i e^eK-tmbhoi, a äiaMeTpM 3oh 3aTpMMKM pocTy 6ljbi±iMMM BiänoBiäHo Ha 16,07 mm, 15,72 mm, 3,74 mm, 15,95 mm, 3,66 mm, 13,38 mm, 2,50 mm, 2,30 mm, 10,39 mm (y ce-peäHbOMy Ha 9,30 mm).
TaKMM hmhom, BMKopMcTaHHH Ma3l äloKcMäMHy 1,2 % Moxe bmhbmtmch BMplwajbHMM 0aKTopoM nläBMiieH-hh e^eKTMBHocTl MlcieBoro JlKyBaHHH rHlMHMX paH, Ih-0lKOBaHMX kjIhIhhmmm 0TaMaMM cMHborHlMHo'i na.MH-km 3 no/iipe3McTeHTHicTio ao aHTMÖloTMKlB (Ta6.. 3). CyTTGBMM 0aKTopoM a/h nläBMiieHHH e^eKTMBHocTl Ma3eM, |o mIcthtü ^topxIhojohm, bIahocho kjIhIhhmx 0TaMlB P. aeruginosa, e BBeäeHHH ao Ix cK/aäy AHE, AeKaMeTOKcMHy Ta flMCO. A/e Ma3b äloKcMäMHy bmhb-jhgtüch b 90 % BMnaäKlB e^eKTMBHlwoi 3a TaKi komöI-HoBaHl Ma3l.
Bmchobkm.
1. Ma3i Ha boaopo3hmhhmx ocHOBax 3 o^/oKcaiM-hom Ta .eBo^.oKcaiMHOM bmhbjhitü BMcoKoe^eK-TMBHy äli ioäo kjiIhIhhmx LUTaMiB S. aureus (b t. h. LUTaMiB MRSA), e^eKTMBHy aöo BMcoKoe^eKTMBHy äli |oäo kjiIhIhhmx 0TaMlB E. coli Ta b ocHOBHOMy He-e^eKTMBHl aöo Majoe^eKTMBHl |Oäo kjIhIhhmx LUTaMiB P. aeruginosa, |o Moxe oÖMexyBaTM Ix 3acTocyBaH-hh a/h MlcieBoro jlKyBaHHH rHlMHMX paH. B ii/oMy 3a cneKTpoM Ta e^eKTMBHicTi aHTMÖaKTeplajbHoi äli Ma3l c ^TopxiHo/oHaMM nocTynaiTbcH Ma3l äloKcMäMHy.
2. BMKopMcTaHHH Ma3i äloKcMäMHy 1,2 % Moxe bmhbmtmch BMplmajbHMM 0aKTopoM nläBMieHHH e^eK-
TMBHOcTl MlcieBOrO JlKyBaHHH rHlMHMX paH, iH^lKOBa-hmx kjIhIhhmmm LUTaMaMM rpaMHeraTMBHMX öaKTeplM E. coli Ta P. aeruginosa 3 nojlpe3McTeHTHlcTi ao aH-tmöIotmkIb b MOHOKyjbTypax Ta mIkpoöhmx acoilailHX, 3OKpeMa, 3 kjIhIhhmmm 0TaMaMM rpaMno3MTMBHMX öaKTeplM S. aureus, BK/iHaiHM 0TaMM MRSA.
3. CyTTGBMM ^aKTopoM ajh nläBMieHHH e^eKTMB-hocti Ma3eM, |o micthtü ^topxihojohm (o^/oKca-imh aöo jeBo^jOKcaiMH), bIahocho kjIhIhhmx LUTaMiB E. coli Ta P. aeruginosa e BBeäeHHH ao Ix cK/aäy äMHa-Tpli eäeTaTy, AeKaMeTOKcMHy Ta AMMeTM/cy/b^oKcM-äy, a/e Ma3b äloKcMäMHy bmhbjhgtüch b 90 % BMnaäKlB
e^eKTMBHlmoi 3a TaKi KOMÖlHOBaHl Ma3l.
nepcneKTMBM noAa.bmMX Aoc.iA^eHb. B no-
äajbmoMy n/aHyGTbcH aocjIamtm äli Ma3eM Ha boao-po3hmhhmx OcHOBax 3 o^jOKcaiMHOM Ta jeBo^jOKca-imhom I aIokcmamhom Ha TBapMHax.
^iTepaTypw
1. AöaeB O. K. CoBpeMeHHbie ocoöeHHocTM XMpyprMHecKOM MH^eKUMM / IO. K. AöaeB // BecTHMK XMpyprMM mm. M. M. TpeKOBa. - 2005. - T. 164, № 3. - C. 107-111.
2. AHTMÖMOTMKope3McTeHTHocTb ÖMon/eHOHHbix öaKTepMM / M. B. HeöoTapb [m äp.] // K/MHMHecKaH mmkpoömojotmh m aHTM-MMKpoÖHaH XMMMOTepanMH. - 2012. - T. 14, № 1. - C. 51-58.
3. BpMaH n. E. BaKTepMa/bHaH pe3McTeHTHocTb m HyBcTBMTe/bHocTb k XMMMonpenapaTaM : nep. c aHr/. / n. E. BpMaH. -M. : MeäMiMHa, 1984. - 272 c.
4. BMBHeHHH cneiM^lHioi' aKTMBHocTl npoTMMlKpoÖHMX jlKapcbKMX 3aco6lB : MeTOäMHHi peKOMeHAairi / O. n. Bojhhcükmm, I. C. TpMieHKo, B. n. l±lMpo6oKOB [Ta Ih.]; MO3 YKpai'HM. - K. A.: flepxaBHMM OapMaKOJorlHHMM ieHTp, 2004. - 38 c.
5. Гланц С. Медико-биологическая статистика / Стентон Гланц. - Москва : 1999. - 360 с.
6. Ермакова Т. С. Видовая структура и антибиотикорезистентность возбудителей гнойно-септической инфекции / Т. С. Ермакова, В. А. Горбунов, Л. П. Титов // Здравоохранение. - 2011. - № 10. - С. 16-25.
7. Методические рекомендации по экспериментальному (доклиническому) изучению лекарственных препаратов для местного лечения ран / Даценко Б. М., Бирюкова С. В., Тамм Т. И. [и др.]. - М. : МЗ СССР, 1989. - 47 с.
8. Раневая инфекция. Состояние проблемы / А. В. Фролова, А. Н. Косинец, В. К. Окулич // Вестник ВГМУ. - 2014. - Т. 13, № 2. - С. 62-68.
9. Характеристика збудниюв гшйно-запальних процеав м'яких тканин та тсляоперацмних гшйних ускладнень у хво-рих загально-х1рурпчного стацюнару / О. А. Втьцанюк, М. О. Хуторянський // Харювська х1рурпчна школа. - 2012. -№ 2 (53). - С. 84-88.
10. An in vitro model of bacterial infections in wounds and other tissues / M. Werthen [et al.] // APMIS. - 2010. - Vol. 118, № 2. - P. 156-164.
11. Bacteria isolated from surgical infections and its susceptibilities to antimicrobial agents - special references to bacteria isolated between April 2002 and March 2003 / N. Shinagawa [et al.] // Jpn. J. Antibiot. - 2004. -Vol. 57, № 1. - P. 33-69.
12. Desrosiers M. Effectiveness of topical antibiotics on Staphyloccocus aureus biofilm in vitro / M. Desrosiers, Z. Bendauah, J. Barbeau // Am. J. Rhinal. - 2007. - Vol. 21, № 2. - P. 149-153.
13. Increase in community-acquired methicillin-resistant Staphylococcus aureus at a Naval Medical Center / K. Kallen [et al.] // Infect. Contr. Hesp. Epidem. - 2000. - Vol. 21, № 3. - P. 223-226.
14. Webster J. S. Osborne. Meta-analysis of preoperative antiseptic bathing in the prevention of surgical site infection // British Journal of Surgery. - 2006. - Vol. 93, № 11. - P. 1335-1341.
УДК 616. 31-022. 7-085. 281-085. 484. 1-092. 4:615. 015. 8
Д0СЛ1ДЖЕННЯ АНТИБАКТЕР1АЛЬН0'|' АКТИВН0СТ1 МАЗЕЙ 3 ЛЕВ0ФЛ0КСАЦИН0М, 0ФЛ0К-САЦИН0М ТА Д10КСИДИН0М НА П0Л1РЕ3ИСТЕНТНИХ КЛ1Н1ЧНИХ ШТАМАХ 3БУДНИК1В РАН0В0Т 1НФЕКЦП
Ляпунов М. 0., Штанюк €. А., Мшухш В. В., Безугла 0. П.
Резюме. В дослщах in vitro методом дифузи в агар встановлено, що маз1 на водорозчинних основах з офлоксацином та левофлоксацином виявляють високоефективну дю щодо ктычних штам1в S. aureus (в т. ч. штам1в MRSA), ефективну або високоефективну дю щодо ктычних штам1в E. coli та в основному неефектив-н або малоефективн щодо ктычних штам1в P. aeruginosa, що може обмежувати !хзастосування для мюце-вого л1кування гнмних ран. В цтому за спектром та ефективнютю антибактер1ально! дм маз1 з фторхшолона-ми поступаються маз1 ¡з дюксидином. Суттевим фактором для пщвищення ефективност мазей, що мютять фторхшолони (офлоксацин або левофлоксацин), вщносно кJliнiчних штамiв E. coli та P. aeruginosa е введен-ня до !х складу динатрю едетату, декаметоксину та диметилсульфоксиду, але мазь дюксидину виявляеться в 90 % випадюв ефективнiшою за таю комбЫоваы мазi, що робить такий препарат перспективним для мю-цевого л^вання ран, iнфiкованих кJliнiчними штамами бактерiй в монокультурах та мiкробних асоцiацiях.
Ключовi слова: мазi, левофлоксацин, офлоксацин, дюксидин, полiрезистентнi збудники раново! iнфекцií.
УДК 616. 31-022. 7-085. 281-085. 484. 1-092. 4:615. 015. 8
ИССЛЕД0ВАНИЕ АНТИБАКТЕРИАЛЬН0Й АКТИВН0СТИ МАЗЕЙ С ЛЕВ0ФЛ0КСАЦИН0М, 0ФЛ0К-САЦИН0М И ДИ0КСИДИН0М НА П0ЛИРЕ3ИСТЕНТНЫХ КЛИНИЧЕСКИХ ШТАММАХ В03БУДИТЕЛЕЙ РАНЕВ0Й ИНФЕКЦИИ
Ляпунов Н. А., Штанюк Е. А., Минухин В. В., Безуглая Е. П.
Резюме. В опытах in vitro методом диффузии в агар установлено, что мази на водорастворимых основах с офлоксацином и левофлоксацином имеют высокоэффективное действие на клинические штаммы S. aureus (в т. ч. штаммов MRSA), эффективное или высокоэффективное действие на клинические штаммы E. coli и в основном неэффективны или малоэффективны в отношении клинических штаммов P. aeruginosa, что может ограничивать их применение для местного лечения гнойных ран. В целом по спектру и эффективности антибактериального действия мази с фторхинолонами уступают мази с диоксидином. Существенным фактором для повышения эффективности мазей, содержащих фторхинолоны (офлоксацин или левофлоксацин), относительно клинических штаммов E. coli и P. aeruginosa является введение в их состав трилона Б, декаметоксина и диметилсульфоксида, но мазь с диоксидином оказывается в 90 % случаев эффективнее таких комбинированных мазей, что делает такой препарат перспективным для местного лечения ран, инфицированных клиническими штаммами бактерий в монокультурах и микробных ассоциациях.
Ключевые слова: мази, левофлоксацин, офлоксацин, диоксидин, полирезистентные возбудители раневой инфекции.
UDC 616. 31-022. 7-085. 281-085. 484. 1-092. 4:615. 015. 8
Study of Antibacterial Activity of Ointments with Levofloxacin, Ofloxacin and Dioxidine against Polyre-sistant Clinical Strains of Pathogens of Wound Infection
Lyapunov M. O., Shtanyuk YE. A., Minukhin V. V., Bezugla O. P.
Abstract. Introduction. Modern wound infection manifests multiresistance to antibiotics in 35-45 % surgical patients. According to scientific literature, the main causative agents of inflammatory diseases are Staphylococcus aureus, Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa. The fight against wound infection is becoming more comple x problem and requires the use of drugs that are effective or highly effective for nosocomial infections, particularly antibacterial drugs for the topical treatment of wounds.
The purpose of the study. Justification of rational structure-based water-soluble ointments for topical treatment of purulent wounds, infected clinical polyresistant strains Staphylococcus aureus, Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa.
Materials and methods. We used in the e x periment 3 samples of the ointments with ofloxacin 0.1 % or 0.1 % levofloxacin, or 1.2 % dioxidine containing poloxamer, polyethyleneglycol and propyleneglycol and 2 samples of ointments with ofloxacin 0.1 % or 0.1 % levofloxacin with an addition of 0.5 % disodium edetate (trilon B), 0.5 % decametoxine and 10 % dimethylsulfoxide (DMSO). The antibacterial activity of ointments was investigated regarding clinical multiresistant strains of S. aureus, E. coli and P. aeruginosa. The sensitivity of clinical strains to antibiotics was determined by disco-diffusion method.
Determining of antibiotic action of ointments performed by agar diffusion method ("wells"). Each e x periment was repeated si x times. Reliability of the results was determined by Student's t test (p < 0.05).
Results and discussion. For all clinical strains of S. aureus, including strains of MRSA, ointments with ofloxacin and levofloxacin found highly effective action (the zone of growth inhibition is greater than 25 mm).
Adding to the ointments with fluoroquinolones disodium edetate, decamethoxin and DMSO promotes a slight increase in the diameters of the zones of growth inhibition of clinical strains of S. aureus. The effectiveness of antibacterial action of ointment with dioxidine against clinical strains of S. aureus was slightly lower than in ointments with fluoroquinolones.
For all E. coli strains ointments with levofloxacin and ofloxacin found effective activity (growth inhibition zone is more 15 mm) or highly effect (growth inhibition zone is more 25 mm).
The effectiveness of antibacterial action of ointment with dioxidine against clinical strains of E. coli was higher than in ointments with fluoroquinolones.
The effectiveness of antibacterial action of ointment with dioxidine against clinical P. aeruginosa strains was higher than in ointments with fluoroquinolones.
Conclusions. In e x periments in vitro ointments on water-soluble bases with ofloxacin and levofloxacin are highly effective against the clinical strains of S. aureus (including strains of MRSA), effective or highly effective against the clinical strains of E. coli and largely inefficient or ineffective against clinical strains of P. aeruginosa. In general, adding to the ointments with fluoroquinolones (ofloxacin or levofloxacin) trilon B, dimethylsulfoxide and decametoxine increases their activity against clinical isolates of E. coli and P. aeroginosa. Ointment wth dioxidine is effective in 90 % of cases, in comparison with such combined ointments, which makes such drug promising for the local treatment of wounds infected with clinical isolates of bacteria in monocultures and microbial associations.
Keywords: ointments, levofloxacin, ofloxacin, dioxidine, polyresistant pathogens of wound infection.
Рецензент - проф. Лобань Г. А.
Стаття надшшла 04. 03. 2015 р.
