CC BY
31
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ» 65
М.А. Салмова1, Д.А. Бондаренко1, Г.А. Слащева1, введение. Полифенольные соединения растительного С.Г. Семушина1, И.А. Пахомова1, Л.А. Скобцова1, происхождения являются перспективным источником Е.А. Калабина1, П.А. Руденко1, А.Н. Мурашев1,2 для скрининга соединений, проявляющих потенциальную испытание ЭФФЕктивноСти антиангиогенную и противоопухолевую активность. ПротивооПУХолЕвой вакцины Цель исследования. Изучение активности димерного на основе обработанных синтетическим макроциклического танина (ДМТ), выделенного из соцве-рЕтиноидом CD437 АУТОлогачныХ тий или побегов Chamerion angustifolium (L.). оПУХолЕвыХ клЕток материалы и методы. Для оценки антиангиогенной Филиал ИБХРАН, Пущино, Московская область, Россия; активности применяли методы изучения миграционной 2Пущинский научный центр РАН, Пущино, Московская активности и дифференциации эндотелиальных клеток область, Россия мыши (SV-EC-4-10) и человека (HUVEC, Lonza) на субвведение. В последние 30 лет неуклонно растет число страте матригель (Corning). Антиангиогенная активность диагностированных случаев онкологических заболеваний. ДМТ in vivo была изучена на гистологических срезах аде-Такая тенденция побуждает исследовать новые вещества нокарциномы Льюис после внутрибрюшинного введения и подходы, оказывающие противоопухолевый эффект. Од- иммуногистохимическим методом с использованием ан-ним из направлений являются исследования по созданию тител к CD31 и VEGF (Abcam), а также проявочной Envi-противоопухолевых вакцин, поскольку они обладают вы- sion+ (Dako). сокой селективностью действия. Вариацией такого подхода результаты. При изучении миграционной активности является терапия аутологичными опухолевыми клетками, клеток методом «заживления раны» было показано, что и для увеличения иммунного ответа организма опухолевые культивирование эндотелиальных клеток в присутствии клетки подвергаются различным обработкам. Нами был ис- ДМТ в концентрации 10 мкг/мл снижает их миграционную следован вариант обработки веществом CD437, синтетиче- активность в 2 раза по сравнению с контрольными группа-ским аналогом ретиноевой кислоты. ми (прирост клеток 43 ± 4 % против 95 ± 3 % в контроль-Цель исследования. Проведение пилотного испытания ной группе). Добавление ДМТ в концентрации 1 мкг/мл эффективности противоопухолевой вакцины на основе не оказывало выраженного действия на миграцию эндо-аутологичных опухолевых клеток, обработанных вещест- телиальных клеток. При изучении дифференциации эн-вом CD437. дотелиальных клеток в сосудоподобные структуры (СПС) материалы и методы. Эксперименты были проведены на субстрате матригель было показано, что добавление на самцах и самках мышей C57B1/6. Животные SPF-стату- ДМТ в концентрации 10 мкг/мл снижает площадь СПС, са были получены из питомника лабораторных животных что выражается в уменьшении общей длины на 37 ± 4 % «Пущино» ФИБХ РАН. Все процедуры с животными в ис- и количества узлов на 51 ± 7 % ветвления микротрубочек следовании были рассмотрены и утверждены институтской по сравнению с контролем. При изучении антиангиоген-комиссией по уходу и использованию животных на пред- ной активности in vivo на аденокарциноме было показано, мет соответствия этическим требованиям. Обработка опу- что введение мышам ДМТ вызывает снижение числа ми-холевых клеток (меланома, линия В16) осуществлялась крососудов в ткани опухоли: общее число микрососудов в условиях in vitro. В качестве контроля использовался но- снижалось в 2 раза (11 ± 4) по сравнению с контрольной ситель — ДМСО. Введение нативных и/или обработанных группой (23 ± 5) на поле зрения. Также было установлено, опухолевых клеток осуществлялось подкожно латерально что экспрессия VEGF повышена в контрольной группе в количестве 1 млн. по сравнению с опытной. результаты. В результате исследований было показано, Заключение. Таким образом, полученный нами ДМТ что одновременное введение животным нативных и обра- хаменерин I обладает антиангиогенным действием, под-ботанных опухолевых клеток замедляет темпы развития твержденным на модельных системах in vitro и in vivo. новообразований. Отмечена значительная зависимость эффективности вакцины от пола. Эффект торможения роста Е. И. Селезнев1, Э. Ю. Ямансаров1, Р.А. Петров1, опухоли значительно сильнее выражен у самцов (57,3 %), О.Н. Метелкина1, И.В. Салтыкова1, Е.В. Дейнека2, в отличие от самок (15,6 %). Е.К. Белоглазкина1, А.Г. Мажуга1,3,4 Заключение. Проведенное исследование продемон- СинтЕЗ новых ГликоконЪЮГАТОв стрировало перспективность применения вещества CD437 АллоБЕтУлинА и N-АЦЕтилГАМкТОЗАминА в создании эффективной противоопухолевой клеточной 1МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия; вакцины. Необходимы дальнейшие исследования для уве- 2Московский физико-технический институт личения эффективности препарата. (государственный университет), Москва, Россия; 3НИТУ«МИСиС», Москва, Россия; С.А. Сасов, Д.А. Хоченков, Т.А. Алиева, Е.Н. Бедрина, 4РХТУим. Д.И. Менделеева, Москва, Россия Н.Н. Тотоева, В.Н. Толкачев введение. В настоящее время наиболее значимым спо-иЗУчЕниЕ Активности димЕрноГо собом оптимизации фармакологических свойств противо-мАкроЦикличЕСкоГо тАнинА опухолевых препаратов является их адресная доставка ХАмЕнЕринА I к различным биологическим мишеням (рецепторам, био-ФГБУ «НМИЦонкологии им. Н.Н. Блохина» маркерам, антигенам и др.). В области изучения таргети-Минздрава России, Москва, Россия рования лекарственных средств в печень метод создания
Спецвыпуск / том 17 / 2018 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
66 МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
специфичных к асиалогликопротеиновому рецептору (ASGP- нической онкологии сопутствующие заболевания (порфи-R) веществ занимает ключевое место. Данные исследова- рии) и сосудистые нарушения (кровоизлияния внутри ния активно ведутся для создания лекарств против гепато- опухоли) могут быть источником эндогенных МП (FePPIX, клеточной карциномы. Создание гликоконъюгированных ZnPPIX) и создавать условия, влияющие на лечебный эф-систем позволяет существенно улучшить фармакологиче- фект АА. ский профиль исходных молекул, что особенно актуально Цель исследования. Выяснить, является ли ZnPPIX, в целях внедрения дешевых и доступных природных три- эндогенный метаболит, модулятором токсичности АА да-терпеноидов в клиническую практику. унорубицина (DNR) относительно опухолевых клеток че- Цель исследования. Синтез и идентификация новых ловека. конъюгатов аллобетулина и N-ацетилгалактозамина с ис- материалы и методы. В работе были использованы ли-пользованием методов и подходов клик-химии. нии опухолевых клеток человека, растущие in vitro: эритро-материалы и методы. Структура конъюгатов была уста- лейкоза (К562) и аденокарциномы молочной железы новлена с помощью методов ЯМР и масс-спектрометрии. (MCF-7). Цитотоксичность АА для клеток в присутствии Спектры ЯМР 'H и 13C были получены на приборе Bruker и без МП оценивали с помощью МТТ-метода, способность DPX-300 и Agilent 400 MR. Масс-спектры высокого разре- клеток накапливать АА в этих условиях — с помощью ра-шения регистрировали на приборе Thermo Scientific Or- диометрического метода. bitrap Elite методом электрораспылительной ионизации (ESI). результаты. По нашим данным, в присутствии ZnPPIX результаты. В настоящей работе были синтезированы (10 мкМ) цитотоксичность DNR снижается в 4 раза и охарактеризованы 2 новых коньюгата аллобетулина и N- для эритробластов и клеток аденокарциномы молочной ацетилгалактозамина. Предложенная схема синтеза вклю- железы человека. Эффективность ZnPPIX как модулятора чала в себя 3 стадии и 2 основных этапа. Первоначально токсичности DNR оказалась в 2 раза выше по сравнению из бетулина с помощью реакции перегруппировки Вагне- с FePPIX для клеток обеих линий. Установлено, ра—Меервейна нагреванием в CHCl3/p-TsOH был получен что ZnPPIX, как и FePPIX, не влияет на цитотоксичность аллобетулин. Затем селективной этерификацией синтези- акларубицина, неклассического АА. В присутствии ZnPPIX ровали предшественник конъюгата — сложный эфир алло- регистрируется снижение накопления C14DNR опухолевы-бетулина и 5-гексиновой кислоты. Синтез осуществляли ми клетками К562 и MCF-7 на 70 и 50 % соответственно, с использованием карбодиимидной системы EDC—Cl/DMAR а в условиях комбинирования с FePPIX величина накопления Взаимодействием пентаацетата P-D-галактозамина с TMSN3 C4DNR клетками обеих линий снижается на 30 %. Уровень в присутствии FeCl3 с последующим снятием ацетоксильных накопления АА в присутствии 2 модуляторов соответствует групп MeOH/MeONa был получен ^ацетил-1-азидо-Р^- величине, характерной для ZnPPIX, что свидетельствует галактозамин. Синтез 2-го специфичного азидомоносаха- о конкуренции МП с АА в клетках за общие белки-мишени. рида проводили с помощью реакции гликозилирования Заключение. В присутствии ZnPPIX снижается токсич-пентаацетата P-D-галактозамина и азидоэтанола в при- ность АА для опухолевых клеток человека. Эффективность сутствии TMSOTf. Заключительное взаимодействие ази- ZnPPIX, модулятора токсичности АА, зависит от химиче-допроизводных N-ацетилгалактозамина с терминальной ской структуры АА. В защите эндогенных МП (ZnPPIX, тройной связью линкера в условиях катализа CuI позволи- FePPIX) от цитоксичности АА участвует один и тот же мело селективно получить новые гликоконъюгаты аллобету- ханизм, который связан со снижением способности клеток лина. накапливать АА в присутствии модуляторов. Заключение. В результате работы были получены и оха-растеризованы конъюгаты, в которых биоактивная моле- А.Ю. Симонов, С.А. Лакатош кула аллобетулина выступает в качестве основы для созда- разработка мЕТОдА СинтЕЗА ния адресного моновалентного лиганда ASGP-R. Данные индоло[1',7':1,2,3]Пирроло[3',4':6,7] вещества представляют большой интерес для дальнейшего АЗЕПино[4,5-Д|индол-1,3(2.Н,10.Н)-дионА, биологического тестирования in vitro. Предшественника ПрЕПАрАтА ПиминА Работа выполнена при поддержке РНФ (грант ФГБНУ НИИНА, Москва, Россия № 17-74-10204) и Министерства образования и науки РФ введение. Важным направлением поиска эффектив-(правительственный грант №20.9907.2017/VU). ных лекарственных средств, в частности противоопухолевых препаратов таргетного действия, является создание Т.А. Сидорова, Н.К. Власенкова и изучение новых ингибиторов протеинкиназ. Ранее нами Цинк-ПроТоПорФирин (ZNPPIX), была показана высокая активность 6-(4-метил-И-пипе-ЭндоГЕнный мЕТАБолиТ, СниЖАЕТ разинил)метильного производного индоло[1',7':1,2,3] чувствительность оПУХолЕвыХ клЕТок пирроло[3',4':6,7]азепино [4,5-6]индол-1,3(2Я,10Д)-дио-к АнТрАЦиклиновым АнТиБиоТикАм на как селективного ингибитора протеинкиназы Pim-1 ФГБУ«НМИЦонкологии им. Н.Н. Блохина» (proviral integration Moloney virus), перспективной мишени Минздрава России, Москва, Россия таргетной химиотерапии, защищающей клетки крови введение. Антрациклиновые антибиотики (АА) широ- от апоптоза. В процессе работы по синтезу препаративных ко используются в клинической онкологии. Известно, что количеств ключевого соединения индоло[1',7':1,2,3]пир-цитотоксичность АА снижается в присутствии гемина роло[3',4':6,7]азепино[4,5-b]индол-1,3(2H,10H)-диона для (FePPIX), эндогенного металлопорфирина (МП). В кли- синтеза Пимина были выявлены трудности масштабирования,
Спецвыпуск / том 17 / 2018 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ» 67
что привело к изменению схемы синтеза предшествен- веществ определяли в МТТ-тесте (72 ч инкубация) на клет-ника. ках лейкоза К562. Для установления механизма действия Цель исследования. Разработка нового метода синтеза полученных соединений была исследована их активность индоло[1',7':1,2,3]пирроло[3',4':6,7]азепино[4,5-Ь]индол- в отношении ряда протеинкиназ: AKT1, ARK5, Aurora B, 1,3(2Н,10Н)-диона для получения противоопухолевого AXL, B-Raf, СК2-альфа, FAK, IGFR, INS, Met, PIM-1, препарата Пимина. PLK1, PRK1, SRC, TRK-B, VEGFR2. материалы и методы. При дегидрировании 5,6,10,14b- результаты. Ряд аминометильных производных ин-тетрагидроиндоло[1',7':1,2,3]пирроло[3',4':6,7]азепино доло[1',7':1,2,3]пирроло[3',4':6,7]азепино[4,5-Ь]индол-[4,5-Ь]индоло-1,3(2Н,9ЬН)-диона при помощи 2,3-дициа- 1,3(2Н,10Н)-диона проявили высокую селективную но-5,6-дихлоробензохинона с образованием целевого про- активность в отношении протеинкиназы Pim-1 (IC50 — дукта индоло[1',7':1,2,3]пирроло[3',4':6,7]азепино[4,5-Ь]- 53 нмоль): показатели цитотоксичности на клеточной индол-1,3(2Н,10Н)-диона было отмечено появление линии К562 для всего ряда аминометильных производ-значительных количеств димерного побочного продукта ных составляли в среднем 15 ± 3 мкМ, для 6-[(пирро-с сопутствовавшим этому низким выходом, а также затруд- лидин-1 - ил)метил]индоло[1',7':1,2,3]пирроло[3',4':6,7] нительной очисткой целевого вещества азепино[4,5-Ь]индоло-1,3(2Н,10Н)-диона — 12 ± 2 мкМ. результаты. Общий выход индоло[1',7':1,2,3]пирроло Цитотоксические активности новых производных су-[3',4':6,7]азепино[4,5-Ь]индол-1,3(2Н,10Н)-диона составил щественно не различались. По показателям раствори-57 % по схеме с синильной защитой и 58 % — с ацетильной, мости в фармакологически приемлемых водных средах что более чем в 2 раза превышает выход при получении для дальнейших биологических испытаний был отобран этого вещества известными на настоящий момент спосо- метансульфонат 6-[(4-метил-1-пиперазинил)метил]ин-бами. доло[1',7':1,2,3]пирроло[3',4':6,7]азепино[4,5-Ь]индо- Заключение. Разработан метод синтеза индо- ло-1,3(2Н,10Н)-диона. ло[1',7':1,2,3]пирроло[3',4':6,7]азепино[4,5-Ь]индол- Заключение. Получена серия производных индо-1,3(2Н,10Н)-диона для получения противоопухолевого ло[1',7':1,2,3]пирроло[3',4':6,7]азепино[4,5-Ь]индол-препарата пимина. 1,3(2Н,10Н)-диона с высокой активностью в отношении Подана заявка на патент по новому методу получения. протеинкиназы Pim-1. А.Ю. Симонов, С.А. Лакатош В.В. Синайко1, Ю.Г. Шанько2, Э.А. Жаврид1, П.Д. Демешко1, ЦиТОТОкСичноСТЬ и активность Н.А. Артемова1, П.М. Бычковский3, Т.Д. Юркштович4 в отношении протеинкиназ человека интраоперационная локальная таргетного противоопухолевого препарата химиотерапия препаратом цисплацел производного индоло[1,7:1,2,3] в лечении пациентов с глиобласгомой ПирроЛо[3',4':6,7]АЗЕПино[4,5-Д|индоЛ- 1РНПЦ онкологии и медицинской радиологии 1,3(2Н,10Д)-ДионА им. Н.Н. Александрова, Минск, Беларусь; ФГБНУ НИИНА, Москва, Россия 2РНПЦневрологии и нейрохирургии, Минск, Беларусь; введение. Низкая селективность лекарств против опу- 3УП«Унитехпром БГУ», Минск, Беларусь; холевых клеток и высокая общерезорбтивная токсич- 4НИИФХПБГУ, Минск, Беларусь ность — основные проблемы современной химиотерапии Цель исследования. Оценить эффективность интрао-опухолей, в силу которых терапевтическая эффективность перационной локальной химиотерапии препаратом ци-остается недостаточной. Преодоление указанной проблемы сплацел в лечении пациентов с глиобластомой (Grade IV) возможно при создании новых поколений лекарств, важ- в зависимости от наличия или отсутствия признаков уда-нейшая особенность которых — направленное воздействие ленной во время операции опухоли. на мишени, важные для жизнедеятельности опухолевых материал и методы. В исследование включено 445 па-клеток. В России наиболее распространенными формами циентов с глиобластомой головного мозга в возрасте злокачественных новообразований являются гемобластозы 16—78 лет и клиническим статусом по шкале Карновского (лейкозы), рак молочной железы и рак толстой кишки. >50 %, которым после хирургического лечения был прове-Цель исследования. Получение соединения, ингибиру- ден курс послеоперационной лучевой либо химиолучевой ющего конкретную мишень, важную для жизнедеятельно- терапии с темозоломидом, причем у 51 (11,5 %) из них ис-сти опухолевых клеток, — серин-треониновую протеинки- пользовался препарат цисплацел. Оценка объема удаления назу Pim-1. Протеинкиназы семейства Pim активированы опухоли у всех пациентов проводилась на основании дан-при онкогематологических заболеваниях. Следовательно, ных послеоперационного КТ- либо МРТ-исследования. ингибирование этих белков может увеличить эффектив- Статистическая обработка результатов проводилась с ис-ность противоопухолевого воздействия пользованием программы SPSS Statistics v. 19. Для анализа материалы и методы. Серия аминометильных произ- влияния основных клинических факторов на выживае-водных индоло[1',7':1,2,3]пирроло[3',4':6,7]азепино[4,5-Ь] мость пациентов использовали модель пропорциональных индол-1,3(2Н,10Н)-диона получена аминометилированием рисков Кокса, выживаемость оценивали по методу Капла-аннелированного с индольными и малеимидным ядрами на—Мейера с использованием log-rank-теста, различия азепина в присутствии различных аминов и формальдеги- в выживаемости считали статистически значимыми при да в уксусной кислоте. Цитотоксическую активность р <0,05.
Спецвыпуск / том 17 / 2018 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
