CC BY
14
охлаждают, остаток растворяют в 1 мл 0,2 н. раствора соляной кислоты и количественно переносят в мерную колбу емкостью 50 мл, куда предварительно налито 20 мл боратного буферного раствора (рН 9,2—9,3) и 2 мл 0,05 % раствора ПАР. После перемешивания и 5-минутной выдержки фотометрируют раствор при 490 нм ( в кюветах с толщиной поглощающего слоя 5 мм по сравнению с контролем, который готовят аналогичной обработкой чистого фильтра.
Количество иона цинка в анализируемой пробе определяют по градунровочному графику, для построения которого готовят серию растворов, содержащих от 0,5 до 7 мл стандартного раствора ацетата цинка (концентрации 10 мкг/мл) в мерных колбах емкостью 50 мл, куда предварительно прилиты 20 мл боратного буфера и 2 мл раствора ПАР.
Концентрацию стеарата цинка в воздухе (X, мг/м3) вычисляют по формуле:
а 9,073 Х- У0
где С — количество цинка в пробе, мкг, найденное по градунровочному графику; У0 — объем воздуха, л, отобранный для определения (у. н.); 9,673 — фактор пересчета на стеарат цинка.
Предел измерения 5 мкг 2п2+ в анализируе-к мом объеме пробы, предел измерения в воздухе 0,20 мг/м3 (при отборе 300 л воздуха). Диапазон измеряемых концентраций 0,20—2,25 мг/м3 без ^разбавления пробы. Время определения 2,5 ч.
Метрологическая оценка метода проведена по
искусственным пылевоздушным смесям постоянного состава, полученным на дозирующей установке (при п = 6, а = 0,95) в интервале концентраций от 0,36 до 7,22 мг/м3. Найдено, что суммарная погрешность определения не превышает 20 % •
Опытная проверка методики проводилась на участках изготовления баллонов методом холодной экструзии на стадии ожиривания алюминиевых рондолей ПО «Новомосковскбытхнм» и Ужгородского завода бытовой химии. Полученные данные подтверждают возможность использования разработанной методики при санитарном контроле воздуха при изготовлении алюминиевых баллонов и туб для упаковки товаров народного потребления.
Литература
1. Вредные вещества в промышленности: Справочник / Под ред. Лазарева Н. В.—Л., 1977.— Т. 3. —С. 370—375.
2. Выдра Ф„ Штулик К., Юлакова Э. Инверсинная вольт-амперометрня: Пер. с чеш. — М., 1980.— С. 221—230.
3. Камасва Л. В., Подчайнова В. Н., Федорова Н. Д. / / Завод, лаб. — 1971. — № 3. — С. 258—263.
4. Сонгина О. А., Захаров Б. А. Амперометрическое титрование.—М„ 1979. —С. 296—300.
5. Умланд Ф., Янсен А., Тириг Д.. Вюнш Г. Комплексные соединения в аналитической химии: Пер. с нем. — М., 1975. — С. 418—423.
6. Чубарь Л. В. //Гиг. труда. — 1982. — № 9. — С. 57—58.
7. Anermann £., Jacobi J.. Cumbrowskl J. // Z. ges. Hyg. — 1978. — Bd 24, —S. 180.
8. Käthe ].// Z. Chem. — 1982. — Bd 22. — S. 340.
9. Poncet M.. Chazot R„ Engellmann Ch. //J. Radioanal. Chem. — 1977. — Vol. 41. — P. 81.
Поступила 10.01.87
УДК 615.9.0!5.3.015.4:616-(ИЖ.66-07
В. H. Ракитский
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МЕТОДА НАИМЕНЬШИХ КВАДРАТОВ ДЛЯ ПРОБИТ-АНАЛИЗА КРИВЫХ ВОССТАНОВЛЕНИЯ
ВНИИ гигиены и токсикологии пестицидов,
СССР
Оценка скорости восстановления нарушенных функций организма после воздействия химических веществ является одной из важных характеристик их токсического действия. Однако в настоящее время вопросы количественной оценки процессов восстановления при токсиколого-гигиеническом изучении химических веществ разработаны недостаточно. При этом следует отметить, что более широко эти подходы используются в радиационной гигиене [2].
Нами предлагается использовать метод наименьших квадратов для пробит-анализа кривых » восстановления нарушенных под воздействием химических веществ различных функций организма. Как известно, указанный метод наряду с другими методами пробит-анализа широко используется в токсикологии для анализа кривых
полимеров и пластических масс Минздрава , Киев
летальности и расчета среднесмертельных доз [1, 3]. Анализ собственных материалов и данных литературы позволил установить, что кривые восстановления различных биологических показателей, как и кривые летальности при воздействии ксенобиотиков, имеют, как правило, S-образный характер. При пробит-анализе кривых восстановления рассчитываются следующие величины: Т50 — период полувосстановления, т. е. время, в течение которого нарушения восстанавливаются на 50%; Т|6 — соответственно на 16%; Т84 —на 84% и T97,s — на 97,5%. Расчет этих величин проводится аналогично вычислению величин LD50, LD|6, LD84, LD97,5, которые соответствуют пробитам 4, 5, 6 и 7. Вместо доз веществ используются величины времени восстановления (Х3), а вместо летальности — про-
Таблица 1
Динамика восстановления количества ретикулоцитов в крови крыс (в %) после однократного перорального воздействия
реглона в минимальной летальной дозе (М±т)
Группа крыс Фом Срок исследования, сут
1 1.5 5 10 .5 30 45
Контрольная Опытная 3,0±0.05 3,0±0,08 3,0±0,05 7,5±0,21 * 3,0±0,05 7,3±0,21* 3,0±0,08 6,1 ±0,22* 3,06±0,08 4,2±0,13* 3,06±0,08 3,8±0,35* 3,0±0,05 3,1 ±0,16 3,0±0,08 3,0±0,16
Примечание. Звездочка — изменения достоверны при /><0,05.
цент восстановления (Уа). Показатель У3 вычисляется по следующей формуле:
^исх — и»с\
(1)
где Кисх — исходная величина регистрируемого показателя в контрольной группе; 0„сх — исходная величина регистрируемого показателя в опытной группе; Кг — величина регистрируемого показателя в контрольной группе в /'-й момент времени; О, — величина регистрируемого показателя в опытной группе в тот же момент временн.
Формула (1) используется при условии, что /С11сх>0„сх- в случае, если Л'Исх<Опсх, Уэ вычисляется следующим образом:
О,- - К,
Уя = 100-
0ЦСХ - "и
•100.
(2)
Процессы восстановления количественно могут оцениваться как после однократного, так и после многократного воздействия различных ксенобиотиков. При однократном воздействии вещества в качестве 0„сх принимается величина регистрируемого показателя в момент его максимального, гигиенически значимого, достоверного изменения, после которого наблюдается процесс восстановления, при многократном воздействии — после прекращения воздействия. С гигиенических позиций наиболее важным является определение параметров восстановления для специфических показателей интоксикации.
Проиллюстрируем применение указанного ме-
тода на примере определения параметров восстановления количества ретикулоцитов в крови крыс после однократного перорального введения гербицида реглона (1,1-этилен-2,2-дипириди-лий-дибромида) на уровне минимальной летальной дозы Ь02,5. В этой дозе препарат вызывает достоверное увеличение количества ретикулоцитов в крови крыс, при этом максимум изменений наблюдается в 1-е сутки после введения, после чего показатель постепенно нормализуется (табл. 1).
В СВЯЗИ С тем ЧТО Кисх (3,0±0,05) < Оисх (7,5±0,21), Уэ рассчитываем по формуле (2) для сроков наблюдения 0,5, 4,9, 14 и 29 сут. В группах, где процент восстановления составил 6,7 и 93,3, Уя принимаем соответственно равным 0 и 100 %. Значения процента восстановления и 4 времени, в течение которого регистрировались показатели Ха, представлены в табл. 2. На основании проведенных вычислений получаем: Т5о = 8,01 ±1,92 сут, Т8Ч= 16,37 сут и Т97,5 = = 26,4 сут. Учитывая Б-образный характер кривых восстановления, величину Т5о±51 следует считать статистически более надежной, однако в практическом отношении не менее важное значение имеет и величина Т97,5, характеризующая период полного восстановления нарушенных функций и соответствующая уровню вероятности 0,05, принятому в биологии. Следует отметить, что важной характеристикой скорости процессов восстановления является также величина угла наклона прямой время — эффект восстановления, которую можно выражать через его тангенс. Для того чтобы величина тангенса
Таблица 2
Расчет показателей восстановления количества ретикулоцитов после однократного перорального воздействия реглона
Время, сут (*•>) Процент восстановления (У^) Место времени (X) Пробиты (У) Весовой коэффициент (В) хв Х'В УВ ХУВ
0,5 0 1 3,27 1,6 1,6 1,6 5,23 5,23
ч 31,1 2 4,5 4,5 9,0 18,0 20,25 40,5
9 73,3 3,43 5,61 4,3 14,75 50,59 24,12 82,73
14 82,2 4,86 5,92 3,7 17,98 87,39 21,9 106,43
¿9 1С0 9,14 6,73 1,6 14,62 133,66 10,77 98,44
Сумма — — — 15,7 57,95 ¿91,24 82,27 333,33
угла наклона не зависела от принятого масштаба, установление зависимости время — эффект восстановления должно проводиться с использованием пробитнон сетки. В нашем примере тангенс угла наклона составил 0,2401.
Таким образом, предложенные количественные критерии скорости процессов восстановления (Т50 и Т9715) и тангенс угла наклона пря-* мои время — эффект восстановления, рассчитанные с помощью пробит-анализа, могут быть
использованы при проведении токсиколого-ги-гиенических исследований химических веществ.
Литература
1. Беленький М. Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта.—Л., 1963.
2. Бурназян А. И. Руководство по медицинским вопросам противорадиационной защиты. — М., 1975.
3. Прозоровский В. Б. // Фармакол. и токсикол — 1962. — № 1. —С. 115—120.
Поступила 30.09.86
Обзоры
УДК 614.72-07:1816.36-008.931:377.152.199.2
С. И. Долинская, Н. Н. Литвинов
РОЛЬ Р-450-ГИДРОКСИЛАЗНОЙ СИСТЕМЫ В ОЦЕНКЕ ВЛИЯНИЯ ФАКТОРОВ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ НА ОРГАНИЗМ
НИИ общей и коммунальной гигиены им. А. Н. Сысина АМН СССР. Москва
В настоящее время можно считать установленным, что большинство химических факторов » окружающей среды реализует свое токсическое действие путем глубоких нарушений деятельности биокаталитическнх систем организма. Известно, что метаболизм ксенобиотиков носит главным образом двухфазный характер: первая фаза — метаболическое превращение, включающее гндроксилированне ароматических и алифатических соединений, образование оксидов, окислительное дезаминирование, десульфурирование и дегалогенирование; вторая фаза — конъюгация, посредством которой происходит соединение метаболитов с эндогенными молекулами или группировками, такими, как глюкуроновая, серная кислоты, алкильные группы и др. ^ Гндроксилированне чужеродных соединений протекает при активном участии особой системы ферментов эндоплазматического ретикулума, названной «оксидазами смешанной функции, или монооксигеназной системой, основным ферментным белком которой является цнтохром Р-450 (КФ 1.14.14.1). В последнее время изучение свойств, строения, биологической ролн цитохром Р-450-гндрокснлазной системы привлекает все большее внимание исследователей и развивается в основном по трем направлениям: 1) изучение особенностей функционирования цитохром Р-450-зависимых ферментов; 2) исследование структурной избирательности действия моноок-* сигеназ; 3) регуляция монооксигеназных активностей [4]. Рассмотрению различных аспектов деятельности этой системы была посвящена Всесоюзная конференция «Цнтохром Р-450 и охра-
на внутренней среды человека», проходившая в августе 1985 г. в Москве. Как подчеркивалось в ряде сообщений, монооксигеназные системы человека являются основными системами, защищающими его внутреннюю среду от накопления чужеродных соединений, что свидетельствует о значимости изучения функционального состояния этих систем при оценке влияния факторов окружающей среды на организм.
Цнтохром Р-450-гидроксилазная система содержится в печени, коже, легких, почках и других органах. Появились работы, в которых приводятся данные по изучению монооксигеназных систем лимфоцитов и моноцитов крови человека, селезенки и тканевых макрофагов [4, 5]. Недавно цитохром Р-450 был обнаружен также в слизистой носа [24], где его содержание составило 12 % от содержания в печени и было в 1,6 раза больше, чем в легких. Однако наибольшее содержание цитохрома Р-450 обнаружено в печени, причем наиболее активными в метаболизме ксенобиотиков являются центроло-булярные гепатоциты [18].
Особый интерес для гигиенических исследований, связанных с изучением влияния факторов окружающей среды на организм, представляет, на наш взгляд, высказываемая в последнее время гипотеза о существовании тесной взаимосвязи между цитохром Р-450-гидроксилазной и иммунной системами, в связи с чем их можно рассматривать как единую систему защиты организма от чужеродных соединений [1, 13]. Нарушение функционального состояния монооксигеназной системы может сопровождаться наруше-
