CC BY
20
УДК: 636.4:591.11
Огородник Н.З., к.вет.н., старший науковий ствроб^ник © 1нститут бюлогп тварин НААН, Львгв
ВПЛИВ ПРЕПАРАТ1В «Л1ПОВ1Т» ТА «ТРИВ1Т» НА ПОКАЗНИКИ ЛЕЙКОЦИТАРНОГО I Б1ОХ1М1ЧНОГО ПРОФ1ЛЮ КРОВ1 ПОРОСЯТ
РАННЬОГО В1КУ
Вивчено морфофункщональш особливост1 кровг та окрем1 бюхгмгчт показники у поросят раннього постнатального перюду онтогенезу за умов введення гм препарат1в "Тривт" та "Лтовт". Встановлено, що введення поросятам втамтв А, Э3, Е у форм1 лтосомального препарату сприяе збшьшенню у кровI поросят у критичний перюд розвитку тлькостг лейкоцит1в та зниженню ктькостг сегментоядерних нейтрофшв. ПроведенI дослгдження показали, що препарат "Лтовт" пор1вняно гз Тривтом ефективтше впливае на зростання вм1сту еритроцит1в, гемоглобту, загального бтка та зниження вм1сту молекул середньог маси у кровI поросят раннього вшу.
Ключовi слова: поросята, ¡муттет, втамти, лтосомальний препарат.
Вступ. Одним iз найбшьш перспективних напрямюв сучасно! медицини та фармакологи, який дозволяе пщвищити бюдоступшсть лжарських засобiв, е розробка та використання нових препараив на основi лшосом. Вони володшть рядом позитивних властивостей: вщсутшстю токсичного впливу, спрямованою специфiчнiстю за рахунок селективно! проникност iз кровi у тканини, бiодеградацiею, при певних умовах вони поглинаються кл^инами i можуть зливатися iз мембранами кл^ин, здатнi пiдвищувати фармакологiчну ефектившсть препаратiв [1]. Важливою перевагою лшосом при !х використаннi у бiологiчних системах е здатнiсть до шпбування або стимулювання ферментативно! активностi кл^инно! мембрани, що дозволяе на тривалий час захистити !хнш вмiст вщ швидко! деструкци у бiологiчних рщинах та забезпечуе внутрiшньоклiтинну доставку лшарського засобу [2]. Особливостi будови лшосом дозволяють створювати водорозчинну форму будь-якого лжарського засобу, що пiдвищуе його доступшсть для органiзму. Свiтова фармацевтична промисловють виробляе понад 20 лщензованих лiпосомальних препаратiв [3]. Переважно вс вони знайшли широке використання у медициш, зокрема в офтальмологi!, пульмонологи, нефропатологи, кардiологi!, гастроентерологi! i геннш терапi!, деякi препарати проходять апробащю в онкологi!. Проте, стосовно ветеринарно! медицини, незважаючи на можливiсть створення ефективних бюдоступних та активнодiючих лшарських форм, лiпосомальнi препарати практично не застосовуються.
Враховуючи вищесказане метою нашо! роботи було дослiдження впливу препараив "Тривiт" та мЛiповiтм, на динамжу змiн показникiв лейкоцитарного i бiохiмiчного профiлю кровi у органiзмi поросят раннього вшу.
© Огородник Н.З., 2011
Матер1ал i методи. Дослщження проводились на поросятах велико1 бшо1 породи, якi були роздшеш на контрольну i двi дослщш групи по 5 тварин у кожнш. Тваринам контрольно1 групи на 5-й день вщ народження вводили внутршньом'язово двiчi з iнтервалом у 15 дшв iзотонiчний розчин NaCl, тваринам першо1 групи — препарат "Трив^", а тваринам друго1 групи — препарат "Лшов^". Кров для дослщжень вiдбирали з кранiальноï порожнисто1 вени поросят5-ти, 12-ти, 20-ти та 28-добовому вiцi. У зразках кровi визначали вмiст загального бiлку за методом Лоур^ кiлькiсть лейкоцитiв та еритроциив шляхом пiдрахунку у лiчильнiй камерi Горяева, спiввiдношення окремих форм лейкоциив (Козловская Л.В., Николаев А.Ю., 1984), концентрацiю гемоглобiну гемоглобiн-цiанiдним методом (Drabkin D., 1946), вмiст молекул середньоï маси (Габриэлян Н.И. и др., 1985). Одержат цифров1 дат опрацьовували статистично з використанням программ Microsoft Excel.
Результати дослщження. Як вщомо, кров завдяки функщонуванню складного мехашзму нейрогуморальноï регуляцiï характеризуеться вщносним гомеостазом, проте пiд впливом внутршшх та зовнiшнiх факторiв ïï морфолопчний та бiохiмiчний склад може пом^но змiнюватись. Одним iз найважливiших чинниюв, який впливае на склад кровi е вiк тварин. Аналiз лейкограми кровi поросят показав, що сшввщношення окремих форм лейкоцитiв суттево змшюеться у рiзнi вiковi перiоди дослщжень (табл. 1). Найбшьш яскраво виражеш вiковi змiни у спiввiдношеннi кл^ин кровi стосуються сегментоядерних нейтрофiлiв. Так, у поросят у 20-ти добовому вщ спостерiгаеться рiзке зростання ix кiлькостi у кровi. У той же час, у 28-добовому вщ поросят, порiвняно iз початком дослщжень, вщбуваеться помiтне збiльшення у кровi кiлькостi лейкоцитiв.Таке вiдчутне збшьшення числа сегментоядерних нейтрофiлiв (порiвняно iз 5-добовим вiком майже у 1,5 раза), очевидно обумовлено настанням критичного перюду. За даними деяких авторiв перший вiковий iмунодефiцитний стан у поросят виникае зразу ж тсля народження i характеризуеться низьким вмютом у кровi iмуноглобулiнiв, лейкоцитiв та лiмфоцитiв [4, 5]. Наступний критичний перюд припадае на 1721-й день життя поросят. У цей перюд у тварин на фош низького рiвня iмунобiологiчноï резистентностi спостер^аеться зростання вiдсотку респiраторниx захворювань та шлунково-кишкових розладiв, при цьому вщбуваеться посилений викид у кров'яне русло значно].' кшькост нейтрофiльниx гранулоцитiв [6].
Як показали проведет дослщження, застосування жиророзчинних вiтамiнiв у формi лшосомального препарату чинить iмуномодулюючий вплив на кл^ини кровi тварин. При його введенш спостерiгалось зниження кiлькостi лейкоциив (р<0,05) у кровi поросят другоï дослiдноï групи до фiзiологiчноï норми, що вказуе на специфiчний регулювальний вплив лiпосомальноï форми вiтамiнiв А, D3, Е на вмiст головних елеменив iмунноï системи. Введення поросятам препараив "Лiповiт" та "Тривiт" позначилось й на спiввiдношеннi окремих форм лейкоциив. Так, у кровi поросят першоï дослiдноï групи спостерiгалось збшьшення кшькост паличкоядерних нейтрофiлiв у 12-ти добовому вщ (р<0,01) та зменшення ïx кiлькостi у 20-ти добовому вщ (р<0,001).
Таблиця 1.
Лейкоцитарний профиль кров1 поросят (М±т, п=3-5)_
Показники Групи тварин Вiк тварин, днi
5 12 20 28
Лейкоцити, Г/л контроль 11,66±0,80 12,05±0,30 13,25±1,19 16,62±0,89
I дослвдна 11,08±0,48 13,72±0,38 13,40±1,41
II дослвдна 14,97±1,72 12,93±0,49 13,12±0,68*
Лiмфоцити, % контроль 70,75±0,85 72,67±1,45 62,0±3,63 65,67±1,76
I дослвдна 69,67±2,60 65,67±4,91 65,25±1,65
II дослвдна 68,0±2,08 71,33±1,45* 68,67±2,33
Еозинофiли, % контроль 1,0±0,01 3,33±0,33 1,75±0,48 2,0±0,58
I дослвдна 2,67±0,33 2,33±0,33 3,50±0,60
II дослвдна 2,67±0,33 1,67±0,33 2,33±0,33
Моноцити, % контроль 2,75±0,25 2,33±0,33 2,50±0,29 2,0±0,58
I дослвдна 2,67±0,33 2,33±0,33 2,75±0,48
II дослвдна 2,67±0,33 2,0±0,58 1,33±0,33
Нейтроф™
Юш, % контроль 1,50±0,29 1,33±0,33 1,0±0,10 1,0±0,10
I дослвдна 1,0±0,10 1,0±0,10 1,0±0,10
II дослвдна 1,0±0,10 1,0±0,10 1,33±0,33
Паличко- ядерш, % контроль 2,50±0,25 1,33±0,18 2,25±0,25 3,33±0,20
I дослвдна 2,67±0,28** 1,0±0,08*** 3,25±0,48
II дослвдна 2,0±0,18* 2,0±0,13 3,0±1,0
Сегменто- ядернi, % контроль 21,75±0,18 19,0±1,53 30,50±2,50 26,33±2,67
I дослвдна 21,33±1,86 28,0±2,13 24,50±2,65
II дослвдна 24,0±1,73 22,67±1,20* 23,33±2,88
Прим1тка. Рiзницi до контролю: * — р<0,05; ** — р<0,01; *** — р<0,001. При введенш поросятам друго! дослщно! групи препарату "Лшов1т" у 20-ти добовому вщ1 у кров1 збшьшилась кшькють л1мфоцит1в та зменшилась кшькють сегментоядерних нейтрофшв (р<0,05), а у 12-ти добовому вщ1 збшьшилась кшьюсть паличкоядерних нейтрофЫв (р<0,05). Отримаш даш свщчать про позитивну дш застосованих препарат1в на стввщношення окремих форм лейкоцит1в, зокрема, нейтрофшв \ л1мфоцит1в. Як вщомо, л1мфоцити - це кл1тини, що виконують не лише функцш специф1чного !мунного захисту, але й е елементами едино! шформацшно! системи, яка вщображае стан оргашзму у певний перюд часу, або за ди тих чи шших фактор1в та дозволяе ощнити терапевтичну ефектившсть застосованого препарату [7]. В1рогщне збшьшення у 20-ти добовому вщ1 кшькост л1мфоцит1в у кров1 тварин друго! дослщно! групи може свщчити про пщвищення захисних можливостей оргашзму поросят за умов введення препарату "Лшов1т", а зниження кшькост сегментоядерних нейтрофшв вказуе на здатшсть даного препарату певним чином протистояти у цей критичний перюд розвитку !мунодефщитного стану.
Таблиця 2.
БшхЬпчш показники кров1 поросят (М±т, п=3-5)_
Показники Групи тварин В1к тварин, дт
5 12 20 28
Еритроцити, Т/л контроль 2,681± 0,321 2,593±0,048 2,915±0,306 3,949±0,458
I дослвдна 2,897±0,224 3,146±0,305 4,128±0,329
II дослвдна 3,681±0,254 4,459±0,251* 4,901±0,493
Гемоглобш, г/ контроль 69,30± 1,12 70,15±1,42 71,88±1,34 77,33±0,42
I дослвдна 72,23±1,56 74,55±1,03 79,91±1,24
II дослвдна 75,71±0,51* 78,26±1,06* 83,82±0,93**
Загальний бшок, г/л контроль 42,68± 0,43 42,85±0,12 47,04±0,10 50,96±0,84
I дослвдна 42,64±0,81 48,28±0,14*** 53,70±0,79*
II дослвдна 44,52±1,21 51,21±0,33*** 55,98±1,21*
Молекули середньо!' маси ум. од. контроль 0,109± 0,005 0,129±0,005 0,193±0,006 0,240±0,005
I дослвдна 0,126±0,003 0,192±0,004 0,231±0,004
II дослвдна 0,130±0,006 0,199±0,006 0,219±0,006*
Введення поросятам вiтамiнiв А, D3, Е у формi лшосомально! емульсi! вплинуло й на бiохiмiчнi показники кровi (табл. 2). Так, на 12-ту та 20-ту добу життя у поросят друго! дослщно! групи у кровi спостерiгався бшьший вмiст еритроцитiв (р<0,05-0,01). Протягом всього перюду дослiджень у поросят друго! групи вiдмiчалось пiдвищення концентрацi!' гемоглобiну (р<0,05-0,01). Як вiдомо, еритроцити кровi е носiями гемоглобiну, який здатний легко зв'язувати та переносити кисень, тим самим забезпечуючи окисно-вщновш процеси у тканинах. Збшьшення кiлькостi еритроциив та зростання вмiсту гемоглобiну у кровi поросят при введеннi препарату "Лшов^" свiдчить про пiдвищення штенсивност дихально! функцi! в тканинах оргашзму. Введення поросятам вiтамiнiв А, D3, Е викликало також зростання вмшту загального бiлка у кровi поросят на 20-ту i 28-му добу життя (р<0,05). Встановлено, що бшки кровi за умов активацi! процеав накопичення вiльних радикалiв пiддаються процесам пероксидно! модифiкацi!, яка в свою чергу, призводить до пiдвищення !х розщеплення пiд впливом протеолiтичних ферменив до молекул середньо! маси [8]. Введення поросятам препарату "Лшов^" сприяло вiрогiдному зниженню у 28-добовому вщ у кровi вмiсту молекул середньо! маси (р<0,05), що вказуе на здатшсть лiпосомально! форми вiтамiнiв А, D3, Е ефективно протидiяти накопиченню в органiзмi продуктiв ендогенно! штоксикаци. Редукцiя вмiсту молекул середньо! маси може бути зумовлена зниженням процеав токсичного гiстопротеолiзу завдяки мембраностабiлiзуючiй i антиоксидантнiй дi! жиророзчинних вiтамiнiв у складi застосованого лiпосомального препарату, а також тдвищенням детоксикуючо! функцi! печшки за рахунок структурно! нормалiзацi! (стабшзащя клiтинних i субклiтинних мембран, активащя бiосинтезу функцiональних бiлкiв) та штенсифжацп метаболiчних процесiв (нейтралiзацi! амiаку, ксенобютиюв) [8].
Висновки. Введення поросятам раннього в^ препарату "Лiповiт" сприяе зменшенню кiлькостi лейкоцитiв та сегментоядерних нейтрофшв i збiльшенню
кшькост лiмфоцитiв (р<0,05). Встановлено, нижчий вмют молекул середньо! маси та бшьший вмшт еритроциив i загального бiлка та вищу концентрацiю гемоглобiну (р<0,05-0,01) у кровi поросят, яким вводили препарат "Лшовгт".
Л1тература
1.Григор'ева Г.С. Реальна нанофармаколопя: становлення, мiфи та ycnix лшосомофармакологп / Г.С. Григор'ева // Фармаколог. та лжарська токсикоз. — 2008. — № 4 (5). — С. 83-88.
2.Ульберг З. Нанотехнологп в медициш: роль колоiднохiмiчних процеав / З. Ульберг, Т. Грузша, О. Карпов // Вiсник НААН.—2008. —№8. —С.28-41.
З.Чекман 1.С. Нанотехнологп: перспективи застосування нанопрепаратiв в офтальмологи / 1.С. Чекман, Л.1. Казак, С.О. Риков, Н.Д. Реплянчук, О.В. Жданова // Укр. мед. часопис. — 2009. — № 4 (72). — С. 125-127.
4. Федоров Ю.Н. Препараты и ранняя постнатальная иммунокомпетентность свиней / Ю.Н. Федоров // С.-х. за рубежом. — 1998. — № 10. — С. 44-49.
5.Першин Б.Б. Система лимфоидной ткани пищеварительного тракта животных и перорально индуцированная иммунная толерантность / Б.Б. Першин, А.Б. Гелиев, Д.В. Толстов, Л.В. Ковальчук // Иммунология. — 2001. — № 6. — С. 10-12.
6.Маянский Д.Н. Патогенетические аспекты нейтрофилзависимых реакций / Д.Н. Маянский // Патол. физ. и экспер. терап. — 1989. — № 6. — С. 66-72.
7.Meirom R. Changes in the cellular subpopulations of peripheral blood leukocytes during the reproductive cycle of dairy cows / R. Meirom, I. Samina, J. Brenner // J. of Veterinary medicine. — 1999. — Vol. 54 (4). — P. 4-47.
8.Корякина Е.В. Молекулы средней массы как интегральный показатель метаболических нарушений / Е.В. Корякина, С.В. Белова // Клин. лаб. диагн. — 2004. — № 3. — С. 3-8.
Summary Ohorodnyk N.Z.
Institute of Animal Biology of NAANU, Lviv INFLUENCE OF PREPARATIONS OF "LIPOVIT" AND "TRIVIT" ON INDEXES OF LEUCOCYTAR AND BIOCHEMICAL PROFILE OF BLOOD
IN PIGLETS' OF EARLY AGE
The morphofunctional features of blood and separate biochemical indexes are studied for the piglets' of early postnatal period of ontogenesis at the terms of introduction to them of preparations of "Trivit" and "Lipovit". It is set that introduction to the piglets of vitamins A, D3, Е in form of liposomal preparation assists an increase in blood of piglets in a critical period of development of amount of leucocytes and decline of amount of segmentonuclear neutrophils. The conducted researches showed that preparation of "Lipovit" by comparison to Trivit more effective influences on the increase of content of red corpuscles, haemoglobin general squirrel and decline of content of molecules of middle mass in blood ofpiglets'.
Key words: piglets', immunity, vitamins, liposomal preparation.
Стаття надшшла до редакцИ 7.04.2011
