CC BY
5взаимосвязь классов опасности микроорганизмов и требованиями безопасности к ним, категории ограничения OECD, применяемыми как в лабораториях, так и на биотехнологических производствах (табл. 3).
Сопоставление классификаций выявляет их соответствие по классам опасности, однако отечественная классификация определяет таксономическую структуру используемых штаммов-продуцентов и содержит количественные показатели оценки патогенности и опасности новых штаммов, что свидетельствует о большей детализации и ее достоинстве. За отсутствием конкретных данных в отечественной классификации не выделена группа микроорганизмов, более опасных для окружающей среды, чем для человека.
Таким образом, на основе собственных результатов исследования и анализа данных информационного банка предложена классификация микроорганизмов по степени опасности воздействия на организм, адаптированная для целей гигиенического нормирования и унифицированная с международными рекомендациями.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Пивоваров Ю.П., Мялина Л.И., Королик В.В. Критерии оценки патогенных свойств штаммов-продуцентов, предлагаемых для использования в промышленности микробиологического синтеза: Методические рекомендации. М., 1992.
2. Постановка исследований для обоснования предельно допустимых концентраций производственных штаммов микроорганизмов и на их основе готовых форм препаратов в воздухе рабочей зоны: Методические указания. М.: МЗ
СССР, 1983. № 2955—83.
3. Предельно допустимые концентрации (ПДК) микроорганизмов-продуцентов, бактериальных препаратов и их компонентов в атмосферном воздухе и воздухе рабочей зоны: Сб. гиг. нормативов с участием Н.Г. Иванова, М.В. Далина, Н.П. Сергеюк, Н.И. Шеиной и др. М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2007.
4. Скрябина Э.Г., Шеина Н.И. // Russian J. of Immunology. 2004. Vol. 9. Suppl. Объединенный иммунологический форум. P. 123.
5. Шеина Н.И. // Материалы IV Всероссийского конгресса «Профессия и здоровье». М., 25—27 октября
2005. С. 164—165.
6. Шеина Н.И. // Вестн. Российского гос. мед. университета. 2007. № 3 (56). С. 66—71.
7. Шеина Н.И. // Мед. труда. 2007. № 11. С. 21—26.
8. Шеина Н.И., Буданова Е.В. // Токсикол. вестн.
2005. № 5. С. 23—27.
9. Шеина Н.И., Скрябина Э.Г., Иванов Н.Г. // Там же. 2005. № 3. С. 12—15.
10. Environmental health criteria program. Agreed terms on health effects evolution, risk and hazard assessment of environmental agents. Preliminary draft. Brussels: WHO, 1994.
Поступила 11.12.08
УДК 612.017.1-056.43:636.5/.6-057
И.Д. Рыбаков, А.Б. Бакиров, Л.М. Масягутова
ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ФОРМИРОВАНИЯ АЛЛЕРГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ У РАБОТНИЦ СОВРЕМЕННЫХ ПТИЦЕФАБРИК
ФГУ науки Уфимский научно-исследовательский институт медицины труда и экологии человека Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, г. Уфа
Представлены результаты изучения иммунологических показателей у работниц современных птицефабрик. Показано, что под воздействием профессиональных факторов страдают все звенья иммунитета. Предложен коэффициент для диагностики латентной сенсибилизации.
Ключевые слова: промышленное птицеводство, факторы аллергизации организма работниц, иммунный статус.
I.D. Rybakov, A.B. Bakirov, L.M. Masyagutova. Immunologic aspects of allergic conditions formation in female workers of contemporary poultry factories. The article presents results of studies covering immune parameters in female workers of contemporary poultry factories. Occupational factors were proved to affect all immunity divisions. The authors suggested coefficient for latent sensitization diagnosis.
Key words: poultry farming industry, sensitizing factors of female workers, immune state.
В агропромышленном комплексе Республики Башкортостан занято около 300 тыс человек, из них работники промышленного птицеводства представляют одну из многочисленных профессиональных групп. Литературные данные свидетельствуют, что показатели заболеваемости птицеводов остаются более высокими, по сравнению со многими профессиональными группами в сельском хозяйстве [2]. Это связано с многофакторностью воздействия профессиональной среды на организм работниц [3]. В последние годы во всем мире расширяются исследования иммунной системы — как мишени токсического воздействия различных соединений [6].
Цель работы — изучить состояние иммунной системы у работников промышленного птицеводства для оценки патогенетической значимости развития аллергической патологии верхних дыхательных путей.
Работа выполнена в рамках темы «Разработка и совершенствование методических подходов по снижению риска развития донозологических и патологических состояний организма от воздействия факторов среды обитания» (руководитель: д. м. н., проф. А.Б. Бакиров) отраслевой научно-исследовательской программы Федеральной службы в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека «Гигиеническая безопасность России: пути обеспечения» (на 2006—2010 гг.) и контракта с Министерством труда и социальной защиты № 1 от 30.06.2006 г. «Исследование условий и охраны труда, состояния здоровья женщин-работниц агропромышленного комплекса Республики Башкортостан. Разработка мероприятий по сохранению здоровья работниц агропромышленного комплекса».
М а т е р и а л ы и м е т о д и к и. В основу работы положены результаты обследования 132 работниц птицеводческих хозяйств, находившихся на обследовании и лечении в клинике Уфимского НИИ медицины труда и экологии человека. Возраст обследованных — от 20 до 63 лет, средний возраст — 50 лет. Поскольку основной контингент на птицефабриках составляют женщины, для репрезентативности выборки основную (102 человека) и контрольную (30 человек) группы составили лица женского пола. Основная группа — лица, имеющие непосредственный контакт с производственными вредностями — птичницы, работницы убойного цеха. В качестве контрольной группы рассматривались работницы администрации, вахтеры и др. На момент взятия крови, обследованные были здоровы, не имели аллергических прояв-
лений и были госпитализированы в клинику для углубленного обследования.
Оценку различных звеньев иммунитета работающих и лиц контрольной группы проводили с использованием иммунологических тестов I — II уровней. Иммунофенотипирование лимфоцитов проводили методом непрямой иммунофлюо-ресценции с использованием моноклональных антител с определением основных субпопуляций
^3+, СD4+, СD8+, СD16+, СD19+ ,
CD95, HLA DR). Концентрацию иммуноглобулинов классов G, A, M определяли по методу Манчини. Фагоцитарную активность грану-лоцитов периферической крови оценивали по их способности к восстановлению нитросинего тетразолия в спонтанном (НСТ-сп.) и стимулированном (НСТ-ст.) вариантах.
Р е з у л ь т а т ы и и х о б с у ж д е н и е. В условиях работы на птицефабрике имеет место комбинированное действие нескольких производственных факторов: пера и пуха птицы, компонентов кормов, формальдегида, хлорамина и др. Риск развития аллергических заболеваний повышается за счет формирования статуса поливалентной сенсибилизации, раздражающего действия воздействующих агентов и неблагоприятных физических факторов производственной среды (нагревающего микроклимата и повышенной влажности).
Состояние иммунного статуса работников птицефабрик приведено в табл. 1.
Дефицит неспецифического клеточного иммунитета — снижение активности фагоцитов (ФАЛ), и их функциональной активности (слабый ответ на стимуляцию в НСТ), с большой степенью вероятности связан с длительной антигенной нагрузкой. Наибольшие изменения отмечаются в гуморальном звене. Прежде всего, как и следовало ожидать, это высокое содержание общего определяющего атопические реакции. В то же время достаточно низкий процент клинических проявлений аллергических реакций в анамнезе можно объяснить значительным в 2—2,5 раза повышением подклассов IgG, прежде всего IgG1, IgG4. Так как, в связи общими механизмами их синтеза с IgE наличие в сыворотке крови повышенных уровней IgG1, IgG4 может препятствовать эффективному связыванию ^ с аллергеном.
Основным маркером немедленной аллергической реакции I типа является выявление иммуноглобулинов класса Е. В результате воздействия производственных факторов, происходит супрессия Т-хелперов первого типа, сопровождающаяся угнетением и снижением противовоспалительных
факторов защиты. По принципу обратной связи происходит активация Т-хелперов второго типа и выработка комплекса интерлейкинов — 1Ь-4 и 1Ь-2, под действием которых происходит активация и дифференцировка В-лимфоцитов с последующей гиперпродукцией ими специфических ^Е. Поступающие в сыворотку крови ^Е перемещаются от плазматических клеток к базофилам и тучным клеткам, с последующей секрецией медиаторов аллергии (гистамин, лейкотриены и др.). ^Е может присутствовать в организме как в свободной форме в сыворотке крови, так и в прочной связи с Fc-участком гистаминпродуци-рующих клеток (тканевые ^Е).
Однако под воздействием инициирующего агента В-лимфоциты могут избирательно продуцировать не только ^Е, но и IgG, прежде всего IgG1, IgG4. У человека ^ G составляют 75 % от общего количества антител . В зависимости от строения тяжелых цепей ^ G подразделяются на 4 подкласса: ^ G1- Ig G4 . При многих аллергических заболеваниях антитела, специфические к аллергенам, представлены у больных ^Е , ^ G1
и ^ G4 [5].
Отсроченная аллергическая реакция немедленного типа обусловлена именно переключением
этого синтеза. При этом аллергенспецифиче-ские IgG могут конкурировать с IgE за антигенные детерминанты альбуминно-гаптенного комплекса. В этом случае клетками-мишенями выступают в большей степени эозинофильные и нейтрофильные лейкоциты, так как базофилы и мастоциты имеют менее аффинные рецепторы к IgG.
Как видно из табл. 1, не имеющие непосредственного контакта с основным производством, не имеют значительных изменений показателей иммунитета, кроме увеличения содержания в сыворотке крови IgG1, G3, которые, скорее всего, носят протективный характер. А у контактирующих с птицей работников изменения затрагивают практически все звенья иммунитета.
Как известно из современной литературы, доказательства опасности промышленного аллергена для человека предусматривают установление его этиологической роли в развитии аллергического заболевания. Специфическими маркерами воздействия промышленного аллергена на организм человека и развития к нему повышенной чувствительности являются антигаптенные антитела, выявляемые в реакциях in vitro [4]. С целью повышения точности диагностики аллерги-
Т а б л и ц а 1
Показатели иммунитета у работников птицефабрик
Показатель Основная группа, n = 38 Контрольная группа, n = 30 Литературные нормы
Лейкоциты, х 109 7,08 ± 0,51 7,09 ± 0,5 4,0—9,0
Лимфоциты, х 103 3,72 ± 0,18 3,66 ± 0,43 1,8—2,4
Фагоцитарная активность лейкоцитов (ФАЛ), % 38 ± 3,2** 46 ± 5,4 50—60
НСТ Спонтанная, у. е. 0,34 ± 0,11 0,56 ± 0,12 0,4—0,7
Стимулированная, у. е. 0,54 ± 0,15** 0,72 ± 0,18 0,85—1,2
IgM, г/л 1,38 ± 0,2 1,12 ± 0,14 0,8—2,5
IgA, г/л 2,04 ± 0,16 2,17 ± 0,41 1,5—3,5
IgG, г/л 12,0 ± 0,39 11,3 ± 0,88 7,0—16,0
G1, мг/мл 26,56 ± 1,27* 18,82 ± 1,57* 4,9—11,4
G2, мг/мл 13,81 ± 1,63* 6,94 ± 0,55 1,5—6,4
G3, мг/мл 2,98 ± 0,15* 2,12 ± 0,15* 0,2—1,1
G4, мг/мл 2,36 ± 0,28* 1,55 ± 0,25 0,08—1,4
^Еобщ., Ед./мл 140,4 ± 27,53** 59,0 ± 16,2 < 100
CD3, % 36,0 ± 2,5 38,0 ± 1,2 50—70
CD4, % 35,0 ± 1,0 41,0 ± 3,0 40—45
CD8, % 24,0 ± 1,0 23,0 ± 1,0 21—25
CD16, % 16,0 ± 1,0 12,0 ± 3,0 17—20
CD19, % 9,0 ± 1,0 11,0 ± 0,8 10—15
CD95, % 3,0 ± 1,0 3,0 ± 1,0 3—5
HLA DR, % 14,0 ± 1,7 13,0 ± 1,0 < 30
ЦИК, у. е. 53,4 ± 5,62 85,7 ± 8,59 < 100
* p < 0,001, ** p < 0,05.
ческих поражений, вызванных промышленными аллергенами, нами предложен способ выявления сенсибилизации к водорастворимым промышленным аллергенам за счет раздельного определения подклассов специфических IgG [7]. Технический результат достигается определением уровней аллергенспецифических иммуноглобулинов подклассов IgG1 и IgG4, с последующим расчетом коэффициента специфической аллергизации (Ко-САЛЛ). При его значении меньше 2,5 диагностируют наличие сенсибилизации к конкретному промышленному аллергену. Определение концентрации иммуноглобулинов подклассов IgG1 и IgG4 проводится при помощи коммерческих наборов для иммуноферментного анализа фирмы «Вектор-Бест» , подклассы IgG — ИФА-Бест (ЗАО «Вектор-Бест», Новосибирск, Россия). Нами предложено принципиально новое использование данного набора, заключающееся в инкубации исследуемой сыворотки с конкретным водорастворимым аллергеном. Рабочие разведения аллергенов соответствуют 0,001% на физиологическом растворе [1]. Завышенные дозы химических аллергенов могут давать ложноположи-тельные результаты вследствие их токсического действия. В данной работе в качестве аллергена использован хлорамин, как наиболее широко распространенное дезинфицирующее средство, использующееся в процессе производства птицы.
Коэффициент специфической аллергизации (КоСАЛЛ) рассчитан у 37 человек:
1-я группа (15 человек), непосредственно контактирующие с хлорамином и имеющие в анамнезе различные аллергические реакции (крапивница, ринит и др.), в том числе профессионального характера,
2-я группа (11 человек), работники, имеющие производственный контакт с хлорамином, но без клинических и анамнестических проявлений аллергических заболеваний.
3-я группа — контрольная, состояла из работников администрации, также без аллергических проявлений (11 человек).
Установлено, что величина КоСАЛЛ в 1-й группе составила от 0,88 до 1,2 условных единиц, во 2-й — от 2,0 до 2,48 и в 3-й — от 3,8 до 4,4 (табл. 2):
При сопоставлении показателей специфической аллергизации к хлорамину обнаружено, что у лиц с клиническими проявлениями аллергической патологии (даже в анамнезе), наиболее выражена IgG зависимая сенсибилизация, что выражается в низком уровне КоСАЛЛ, за счет
Т а б л и ц а 2
Коэффициент специфической аллергизации у работников птицефабрик
1-я группа 2-я группа 3-я группа
КоСАЛЛ, у. е. 1,04 ± 0,16 2,24 ± 0,24 4,1 ± 0,3
специфической диссоциации. В группе работников, имеющих производственный контакт с хлорамином, но без клинических проявлений аллер-гопатологии данный коэффициент повышен в два раза. В группе административных работников, не имеющих аллергических проявлений КоСАЛЛ достоверно выше, чем в первой и второй.
В ы в о д ы. 1. У работников птицефабрик обнаружены изменения всех звеньев иммунитета: дефицит неспецифического клеточного иммунитета — снижение функциональной активности фагоцитов, высокое содержание общего IgE, определяющего атопические реакции, повышение подклассов IgG (IgG1, IgG4). 2. Полученные данные убедительно свидетельствуют о том, что о наличии латентной сенсибилизации к промышленному аллергену можно судить по величине коэффициента специфической аллергизации. Значение его менее 2,5 по модулю позволяет предположить развитие аллергопатологии и требует проведения соответствующих профилактических мероприятий.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Алексеева О.Г. Аллергия к промышленным химическим соединениям / О.Г. Алексеева, Л.А. Дуева. М.: Медицина, 1978.
2. Артамонова В.Г. // Мед. труда. 2005. № 4. С. 6—12.
3. Артамонова В.Г. Профессиональные болезни / В.Г. Артамонова, Н.Н. Шаталов М.: Медицина, 1996.
4. Классификатор промышленных аллергенов: критерии и перечень-классификатор: Методические рекомендации / Л.А. Дуева, Н.И. Измерова, Н.П. Головкова и др. М., 2004.
5. Офицеров В.И. Подклассы иммуноглобулина G: возможности использования в диагностической практике. Кольцово, 2004.
6. Пат. 2323441 РФ, МПК GO 1N 33|52, GO 1N
33/543. Способ диагностики сенсибилизации к водорастворимым промышленным аллергенам. Опубл. 27.04.2008. Бюл. № 12.
7. Фрейдлин И.С. Иммунодефицитные состояния / И.С. Фрейдлин, В.С. Смирнов С.-Пб.: Фолиант, 2000.
Поступила 22.06.09
