CC BY
51
cardiomyopathy in 356,222 men screened for the Multiple Risk Factor Intervention Trial. Am. J. Epidemiol. 1994; 139: 166-172.
4. Coughlin S. S. et al. What explain black-white differences in survival in idiopathic dilated cardiomyopathy? Dilated Cardiomyopathy Study. J. Natl. Med. Assoc. 1997; 89: 277-282.
5. Fu L.-X. et al. Localization of a functional autoimmune epitope on the muscarinic acetylcholine receptor-2 in patients with idiopathic dilated cardiomyopathy. J. clin. Invest. 1993; 91: 1964-1968.
6. Lappe J. M. et al. Recent insights into the roie of autoimmunity in idiopathic dilated cardiomyopathy. J. Card. Fail. 2008; 14: 521-530.
7. Magnusson Y. et al. Mapping of a functional autoimmune epitope
on the beta 1-adrenergic receptor in patients with idiopathic dilated cardiomyopathy. J. Clin. Invest. 1990; 5: 1658-1663.
8. Magnusson Y. et al. Autoimmunity in idiopathic dilated cardiomyopathy. Characterization of antibodies against the beta 1-adrenoceptor with positive chronotropic effect. Circulation. 1994; 89 (6): 27602767.
9. Wallukat G., Wollenberger A. Effects of the serum gamma globulin fraction of patients with allergic asthma and dilated cardiomyopathy on chronotropic beta adrenoceptor function in cultured neonatal rat heart myocytes. Biomed. Biochim. Acta. 1987; 8-9: 634-639.
Поступила 05.04.12
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2013 УДК 616.31-018.73-02:613.6]-078.33
Л. м. масягутова, А. Б. Бакиров, И. Д. Рыбаков
специфическая сенсибилизация и местный иммунитет полости рта в условиях хронической аэрогенной нагрузки
Федеральное бюджетное учреждение науки Уфимский научно-исследовательский институт медицины труда и экологии человека
Изучено содержание IgA, IgM, IgG, IgE, slgA, sICAM-1 в нестимулированной смешанной слюне работниц птицеводческой отрасли, которые подвергались аэрогенному воздействию комплекса производственных факторов. Проанализированы изменения показателей в зависимости от выраженности сенсибилизации. Показано, что наибольшие изменения уровня .sICAM-1 определяются преимущественно при грибковой сенсибилизации.
Ключевые слова: показатели местного иммунитета, уровень sICAM-1, специфическая сенсибилизация L.M. Masyagutova, A.B. Bakirov, I.D. Rybakov
THE SPECIFIC SENSITIZATION AND LOCAL IMMUNITY OF ORAL CAVITY IN CONDITIONS OF CHRONIC AEROGENIC LOAD
The article considers the results of analysis of concentration of IgA, IgM, IgG, IgE, sIgA, sICAM-1 in non-stimulated saliva of female workers ofpoultry sector who underwent aerogenic impact of complex of occupational factors. The changes in indicators are analyzed depending on intensity of sensitization. The study demonstrated that the greatest changes in concentration of sICAM-1are detected primarily in case of fungous infection.
Key words: indicator, local immunity, concentration of sICAM-1, specific sensitization
Слизистая оболочка верхних дыхательных путей представляет собой один из первых защитных барьеров организма человека при взаимодействии с разнообразными патогенными факторами окружающей среды. В ряде работ показано, что иммунитет слизистых оболочек не является простым отражением общего иммунитета, а обусловлен функцией самостоятельной системы, оказывающей важное воздействие на формирование общего иммунитета [2].
Как известно, развитие аллергического заболевания -это сложный каскад иммунных и неиммунных реакций, приводящий не только к развитию местных симптомов, но и к формированию системного аллергического воспалительного ответа [4]. Острая и хроническая фазы аллергического ответа и аллергические изменения в различных тканях опосредуются аллергическим каскадом
Для корреспонденции:
Масягутова Ляйля Марселевна, канд. мед. наук, зав. лаб. Адрес: 450106, Уфа, ул. Степана Кувыкина, 94 Телефон: (347)255-19-48 E-mail: [email protected]
путем активации 1Ъ2-клеток, базофилов и эозинофилов под влиянием цитокинов и хемокинов. Эти реакции включают также повышение экспрессии молекул адгезии, в том числе молекул межклеточной адгезии 1-го типа (intracellular adhesion molecule 1 - ICAM-1). ICAM-1 относится к суперсемейству иммуноглобулинов, обнаруживается на эндотелиальных, эпителиальных клетках, активированных лейкоцитах, лимфоцитах, моноцитах, фибробластах. ICAM-1 участвует в контактных взаимодействиях клеток в иммунных реакциях: Т-лимфоцитов с моноцитами, цитотоксических Т-лимфоцитов с клетками-мишенями. Описано, что ICAM-1 передает внутриклеточные сигналы, приводящие к перестройке актинового цитоскелета эндотелиальных клеток и способствует миграции лейкоцитов [9]. Связывание ICAM-1 индуцирует продукцию провоспалительных цитокинов и хемокинов и способствует поддержанию воспаления [7]. sICAM-1 (сокр. от англ. soluble - растворимый) представляет собой экстрацеллюлярную часть клеточно-связанной ICAM-1. Секреция sICAM-1 осуществляется моноцитами, эпителиальными клетками, гладкомышечными клетками сосудов, клетками ге-
КЛИНИЧЕСКАЯ ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА, № 4, 2013
мопоэза. При изучении молекул межклеточной адгезии при аллергических заболеваниях установлен их высокий уровень в крови у больных бронхиальной астмой [6, 10]; кроме того, оказалось, что содержание sICAM-1 в назальном секрете у больных аллергическим ринитом значительно выше, чем у здоровых лиц [8]. Многие патогенетические аспекты действия молекул межклеточной адгезии остаются еще неясными, хотя, возможно, именно они играют ведущую роль в прогрессировании и характере течения заболевания.
По данным современной литературы [1], специфика технологических процессов в промышленном птицеводстве не исключает неблагоприятного влияния на организм работающих комплекса производственных факторов: пера и пуха птицы, компонентов кормов, формальдегида, хлорамина и др. Ряд авторов отмечают высокую микробиологическую обсемененность воздуха рабочей зоны птицеводческих комплексов [3]. Согласно классификации промышленных аллергенов, сенсибилизирующая активность категории 2 - "умеренно опасных" промышленных аллергенов - доказана в отношении белково-витаминного концентрата (по белку) и пыли растительного и животного происхождения с примесью диоксида кремния от 2 до 10% [5]. Совокупность длительного воздействия неблагоприятных факторов воздуха рабочей зоны даже на уровне предельно допустимых концентраций повышает риск формирования статуса поливалентной сенсибилизации.
На сегодняшний день имеется ряд работ, свидетельствующих о необходимости использования неинвазив-ных методов оценки показателей, особенно при проведении массовых обследований в условиях периодических медицинских осмотров работающего населения.
Цель работы - изучить особенности нарушения местного иммунитета, адгезивной системы в зависимости от выраженности сенсибилизации к факторам производственного процесса у работников современного птицеводства.
Материалы и методы. Работа выполнена в рамках научно-исследовательской темы "Оптимизация региональной профпатологической помощи работникам сельского хозяйства" (руководитель темы - д-р мед. наук, проф. Гайнуллина М. К.). В условиях периодического медицинского осмотра выполнено углубленное обследование 46 работниц крупного птицеводческого хозяйства, работающих в условиях аэрогенной антигенной нагрузки не менее 7 ч в день (основная группа). На момент осмотра женщины были здоровы, серьезных жалоб не предъявляли. В качестве контроля обследовали лиц, не
Таблица 1
Содержание гуморальных факторов в слюне работниц, подвергающихся аэрогенной нагрузке
Показатель Основная группа (n = 46) Контроль (n = 30)
sICAM-1, нг/мл 8,88±0,45* 7, 37±0,50
IgG, г/л 0,55±0,12* 0,04±0,02
IgM, г/л 0,04±0,01 0,07±0,01
IgA, г/л 0,95±0,18* 0,08±0,03
sIgA, мг/л 10,16±0,13 18,7±0,28
IgE, ME/мл 1,04±0,38* Следы
Примечание. Здесь и в табл. 2: * -p < 0,01 относительно показателей в контрольной группе.
подвергающихся воздействию неблагоприятных производственных факторов (инженеры, работники бухгалтерии). Для изучения местного иммунитета полости рта использовали не стимулированную смешанную слюну пациентов. Перед взятием материала пациенту предлагали прополоскать рот кипяченой водой комнатной температуры. Забор материала в каждом случае осуществляли в стерильные флаконы. Пациент набирал слюну путем сплевывания. До проведения исследования материал хранили в морозильной камере при температуре -20oC.
Определяли содержание IgA, IgM, IgG, IgE, секреторного IgA (sIgA), аллергоспецифических IgE, sICAM-1 на автоматическом иммуноферментном анализаторе "Lazurit" тест-системами производства ЗАО "Вектор-Бест" (пос. Кольцово Новосибирской области) и "eBioscience®" (Австрия). Специфическую сенсибилизацию работниц птицефабрик к наиболее часто встречающимся аллергенам воздуха рабочей зоны эпи-дермальным (куриный помет, оперение кур), грибковым (Aspergillus flavus, Aspergillus niger, Candida albicans) оценивали по содержанию в МЕ/мл в сыворотке крови специфических IgE:
от 0 до 0,68 МЕ/мл - нет сенсибилизации; I класс;
0,69 - 0,89 МЕ/мл - умеренное содержание IgE; II класс;
0,90 - 1,8 МЕ/мл - высокое содержание IgE; III класс;
свыше 1,8 МЕ/мл - очень высокое содержание IgE; IV класс.
Результаты и обсуждение. Результаты определения содержания гуморальных факторов в слюне у об-
IV класс сенсибилизации (4%)
III класс сенсибилизации (26%)
0 -1 класс сенсибилизации (48%)
II класс сенсибилизации (22%)
Рис. 1. Частота сенсибилизации к эпидермальным аллергенам.
IV класс сенсибилизации (9%)
класс
сенсибилизации (20%)
0 -1 класс сенсибилизации (41%)
II класс сенсибилизации (30%)
Рис. 2. Частота сенсибилизации к грибковым аллергенам.
Таблица
Анализ показателей местного иммунитета в зависимости от вида и степени сенсибилизации
Показатель Степень сенсибилизации
0-I II III IV
Грибковая сенсибилизация
^М слюны, г/л 0,04±0,02 0,03±0,02 0,69±0,66 0,08±0,03**
IgG слюны, г/л 0,46±0,17 0,46±0,18 0,54±0,24 0,94±0,34**
^А слюны, г/л 0,59±0,09 1,22±0,39** 1,76±0,24** 1,43±0,35**
^Е слюны, МЕ/мл 0,86±0,43 0,78±0,71 0,48±0,17 2,07±0,81**
sIgА слюны, мг/л 19,31±2,02 15,94±3,01* 15,99±3,98** 21,61±4,85*
sICАМ-1 слюны, 8,55±0,63 7,60±0,54 10,28±0,93* 10,63±1,63*
нг/мл
Эпидермальная сенсибилизация
^М слюны, г/л 0,036±0,16 0,04±0,02 0,04±0,01 0,06±0,01
IgG слюны, г/л 0,36±0,15 0,61±0,22 0,5±0,24 0,76±0,45
^А слюны, г/л 0,7±0,11 1,37±0,51 0,8±0,32 1,2±0,92
^Е слюны, МЕ/мл 0,72±0,3 1,26±0,92 1,04±0,71 0,3±0,01
sIgА слюны, мг/л 17,05±0,33 17,23±3,82** 18,7±3,43** 23,54±7,62*
sICАМ-1 слюны, 8,27±0,55 7,62±0,82 10,73±0,75** 8,75±3,75*
нг/мл
Примечание. ** - p < 0,05 относительно показателей в контрольной группе
следованных лиц представлены в табл. 1. Как видно из приведенной табл. 1, у лиц, работающих в условиях аэрогенной антигенной нагрузки, выявили достоверное повышение концентрации в слюне общего ^А, сопровождающееся дефицитом секреторного ^А. Данное явление, по-видимому, можно объяснить дефектом синтеза секреторного компонента эпителиальными клетками при сохраняющейся функции В-лимфоцитов. В связи с этим увеличивается адгезия патогенов воздушной среды и развивается ответная реакция по воспалительному или аллергическому типу. Обнаруженный нами рост концентрации острофазовых иммуноглобулинов (^М) и реагинов (^Е) подтверждает данную теорию.
При проведении анализа на содержание специфических ^Е в сыворотке крови у обследованных основной группы в зависимости от степени реакции выявили очень высокий и высокий уровень ^Е к эпидермальным аллергенам у 30% (п = 14), умеренное содержание у 22% (п = 10). Отсутствие сенсибилизации отметили у 48% (п = 22) (рис. 1). Очень высокую и высокую степень реакции к грибковым антигенам наблюдали у 29% (п = 13) пациентов, умеренную - у 30% (п = 13); сенсибилизации не выявили у 41% (п = 18) (рис. 2).
В табл. 2 представлены результаты определения показателей местного иммунитета в зависимости от вида и степени сенсибилизации. Как видно из табл. 2, наличие
2 микогенной сенсибилизации сопровождается ростом концентрации основных классов иммуноглобулинов, а также молекул межклеточной адгезии в слюнной жидкости в зависимости от выраженности аллергической реакции. Выявленные изменения можно объяснить как прямой инвазией самих грибов, так и развитием местной аллергической реакции, развивающейся в основном по III типу. У лиц с эпи-дермальной сенсибилизацией отметили преимущественно I тип аллергической реакции, соответственно уровень основных классов IgA, IgM, IgG остался без особых изменений. Кроме того, повышение концентрации IgE в ротовой жидкости при умеренной (II степень) и высокой (III степень) сенсибилизации сменяется резким снижением данного показателя у лиц, имеющих IV степень, вследствие срыва адаптационных механизмов. Достоверные отличия содержания sIgA и sICAM-1 выявили только для высокосенсибилизированных лиц (III-IV степень).
Выводы: 1. У лиц, работающих в условиях антигенной нагрузки, наблюдаются изменения гуморального звена местного иммунитета, выражающиеся в дисиммуноглобулине-мии нестимулированной смешанной слюны.
2. Уровень молекул межклеточной адгезии обусловлен степенью и типом производственной сенсибилизации. 3) Изучение состава нестимулированной смешанной слюны является перспективным направлением как не-инвазивный и безопасный способ отбора биоматериала, особенно в условиях массового обследования работающего населения.
ЛИТЕРАТУРА
1. Артамонова В. Г., Баянов Э. И. Медицина труда и промышленная экология. 2005; 4: 6-12.
2. Беляева Н. Н., Шамарин А. А., Петрова И. В., Малышева А. Г. Гигиена и санитария. 2001; 5: 62-4.
3. ВоробьевМ. В. Автореф. дис. ... канд. мед. наук. Иваново; 2006.
4. Лолор Г.-мл., Фишер Т., Адельман Д., ред. Клиническая иммунология и аллергология: Пер. с англ. М.; 2000.
5. Классификация промышленных аллергенов: критерии и перечень-классификатор: Методические рекомендации. М.; 2004.
6. BijanzadehM., RamachandraN. B. Lung. 2009; 187 (5): 315-20.
7. Cook-Mills J. M., Deem T. L. J. Leukoc. Biol. 2005; 77 (4): 487-95.
8. Gilain L, Guichard C., Beaujon G. et al. Ann. Otolaryngol. Chir. Cervicofac. 2000; 2: 91-7.
9. Lawson C., WolfS. Pharmacol. Rep. 2009; 61 (1): 22-32.
10. LeeX. C., Cheon K. T., Rhee Y. K. J. Asthma. 1997; 34 (5): 405-12.
11. Zhang Q., Li W., ZhengD., Ji G. Lin Chuang Er Bi Yan Hou Ke Za Zhi. 2004; 18 (5): 261-3.
Поступила 26.09.12
