CC BY
0
| ГЕМАТОЛОГИЯ И ТРАНСФУЗИОЛОГИЯ | RUSSIAN JOURNAL OF HEMATOLOGY AND TRANSFUSIOLOGY (GEMATOLOGIYA I TRANSFUSIOLOGIYA) | 2022; ТОМ 67; №2 |
Бренинг К. Р., Итов А. Б., Казакова А. Н., Тимофеева Н. М., Солдаткина О. И., Зеркаленкова Е. А., Волчков Е. В., Абугова Ю. Г., Мякова Н. В.
ПРОГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ МУТАЦИЙ ГЕНА ТР53 У ПАЦИЕНТОВ ДЕТСКОГО ВОЗРАСТА С ЛИМФОМОЙ БЕРКИТТА
ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр детской гематологии, онкологии и иммунологии имени Дмитрия Рогачева» Минздрава России
Введение. Лимфома Беркитта (ЛБ) — агрессивная зрелоклеточ-ная B-клеточная лимфома, являющаяся самой частой неходжкинской лимфомой (НХЛ) у детей и подростков. Несмотря на высокую про-лиферативную активность, ЛБ является одной из наиболее химио-чувствительных опухолей. Общая и бессобытийная (OB и БСВ) выживаемость в России при использовании современных протоколов достигает 90%, однако в случае рецидива прогноз остается крайне неблагоприятным. Хотя основным цитогенетическим маркером ЛБ является транслокация гена c-MYC, имеющиеся данные свидетельствуют о том, что мутации в гене ТР53 встречаются более чем в 40— 50% всех случаев ЛБ у детей. Убедительные данные, показывающие прогностическое значение статуса гена ТР53 у детей с Л Б, были представлены на собрании группы EICNHL с участием ведущих европейских групп по изучению НХЛ у детей в ноябре 2019 года в Гетеборге. Так, однонуклеотидные замены (SNVs) с изменением функции белка р53, а также потеря гетерозиготности (LOH) данного гена достоверно ассоциировано с неблагоприятным прогнозом у детей с ЛБ. В связи с этим представляет большой интерес проанализировать статус гена ТР53 в собственной когорте пациентов с последующей корреляцией с клиническими данными.
Цель работы. Выявить функционально значимые изменения в последовательности 5—8-го экзонов гена ТР53 в опухолевой ткани лимфомы Беркитта и определить их взаимосвязь с прогнозом течения заболевания.
Материалы и методы. В исследование было включено 79 пациентов детского возраста с верифицированным диагнозом лимфомы Беркитта, проходивших лечение в НМИЦ ДГОИ им. Дмитрия
Рогачева и получавших терапию по протоколу В-НХЛ2010маб с 2013 по 2020 г. Биопсийный материал в виде парафинизированных блоков (FFPE) был предоставлен из архива патолого-анатомического отделения НМИЦ ДГОИ. Статус гена ТР53 исследовался по протоколам IARC (International Agency for Research on Cancer) методом прямого секвенирования по Сенгеру с использованием геномных баз данных открытого доступа (ENSEMBLE, COSMIC, IARC и т.д.). Нуклеотидная последовательность определялась в 5, б, 7 и 8-м экзо-нах гена ТР53.
Результаты и обсуждение. Получить удовлетворительные результаты секвенирования удалось у 66 пациентов (84% успешности). Медиана возраста составила 9 лет, соотношение по полу (м:ж) — 6:1. 1 человек имел первую, 18 — вторую, 21 — третью, 26 — четвертую стадии заболевания по St Jude. 2 пациента имели I группу риска, 14 — II, 49 — III и 1 — IV. Общая выживаемость в исследуемой группе составила 86,5% (95%С1=78,3-94,8%), что существенно ниже, чем в целом по протоколу, что можно объяснить высокой селективностью выборки. У 17 пациентов (26%) из 66 обнаружена как минимум одна патогенная мутация в гене ТР53. БСВ и OB у пациентов с мутацией в гене ТР53 и без нее составила 45,3% (95%С1=21-69,6%) против 97,9% (93,9-100%) соответственно (р<0,001), 47,1% (95%С1=21,8-72,4%) против 97,9% (93,9-100%) соответственно (р<0,001).
Заключение. Таким образом, была продемонстрирована клиническая значимость патологических изменений в гене ТР53 у пациентов с ЛБ как потенциального биомаркера, который можно использовать для оценки прогноза или дополнительной стратификации на группы риска.
Бутина Е. В., Шерстнев Ф. С., Максимов О. Д.
ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ПРЕДРАСПОЛОЖЕННОСТЬ К РАЗВИТИЮ НЬА-АЛЛОИММУНИЗАЦИИ У РЕЦИПИЕНТОВ КОМПОНЕНТОВ КРОВИ
ФГБУН «Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови ФМБА России»
Введение. Иммунная рефрактерность к трансфузиям тромбоцитов относится к угрожающим жизни больного состояниям, при котором увеличивается кратность переливаний тромбоцитов и возникает опасность фатального кровотечения. Аллоиммунизация к антигенам НЬА является основной причиной иммунной рефрак-терности. Наиболее эффективным методом профилактики образования анти-НЬА антител считается лейкофильтрация компонентов крови, однако даже при уровне лейкоцитов 1 х 106 на трансфузию не удается предотвратить аллоиммунизацию у всех пациентов. Генетическая предрасположенность к выработке антител может быть одним из факторов, повышающих риск развития НЬА-аллоиммунизации.
Цель работы. Оценить генетическую предрасположенность реципиентов к развитию НЬА-аллоиммунизации.
Материалы и методы. Иммуногематологические и генетические исследования выполнены у 61 пациента — 22 мужчин и 39 женщин, получавших от 4 до 32 трансфузий компонентов крови в течение одной госпитализации (медиана — 11) в гематологической клинике института в 2019—2021 гг. Возраст пациентов от 3 до 78 лет (медиана — 49 лет). Острый лейкоз диагностирован у 34 больных, ми-елодиспластический синдром— у 10, апластическая анемия — у 8, лимфома Ходжкина — у 3, хронический миелолейкоз — у 2, саркома — У 2, неходжкинская лимфома — у 1, множественная мие-лома — У Г Исследование антилимфоцитарных антител проводили в стандартном микролимфоцитотоксическом тесте. Типирование генов НЬА локусов DRB1, ООА1, ООВ1 выполняли методом поли-меразной цепной реакции в режиме реального времени с использованием оборудования и реактивов ООО «ДНК-технология» (Россия).
ПРИЛОЖЕНИЕ 1
Статистическое сравнение осуществляли с помощью критерия хи-квадрат.
Результаты и обсуждение. На основании результатов исследования антилимфоцитарных антител пациенты, которым проводилась интенсивная гемокомпонентная терапия, разделены на две группы: неаллоиммунизированные (п=31) и алоиммунизированные (п=30). Широта спектра реагирования антител у 3 из 30 аллоиммунизи-рованных пациентов составила 25—49%, у 12 — 50—74%, у 15 — 75— 100%. В результате иммуногенетического обследования реципиентов установлено, что в генотипах аллоиммунизированных больных достоверно чаще, чем в генотипах неиммунизированных, встречались НЬА аллели ОКБ1°04, ООА1*03:01, ООА1*05:01; реже - ОЯВГПб, ООА1*01:02, 00в1*05:02. У НЬА-аллоиммунизированных больных достоверно чаще, чему неиммунизированных, встречался трехлокус-ныйгаплотип ОКВ1*04-ООА1*03:01-ООВ1*03:02; реже - ОКВ1*16-ООА1*01:02-ООВ1*05:02 (таблица).
Заключение. Установлена генетически обусловленная предрасположенность к развитию НЬА-аллоиммунизации, ассоциированная с наличием в генотипах реципиентов НЬА-аллелей ОВВ1*04, ООА1*03:01, ООА1*05:01 и трехлокусного гаплотипа
DRBP04-DOAP03:01-DOBrf03:02. Риск образования антилимфоцитарных антител снижен у пациентов с HLA аллелями DRB1V16, DOA1®01:02, DOB1®05:02 и HLA-гаплотипом DRBr516-DOAP01:02-DOB1®05:02.
Таблица. Частота встречаемости гаплотипов HLA-DRB1-DQA1-DQB1 у HLA-аллоиммунизированных и неаллоиммунизированных пациентов
Частота встречаемости HLA гаплотипов
Гаплотипы HLA-DRB1-DQA1-DQB1 Неаллоиммунизированные больные, n=31 Аллоиммунизирован-ные больные, п=30 Р
абс. % абс. %
DRBl*15-DQAl*01:02-DQBl*06:02-8 14 45,2 7 23,3 0,12
DRB1*01-DQA1*01:01-DQB1*05:01 12 38,7 9 30,0 0,65
DRB1*03-DQA1*05:01-DQB1*02:01 2 6,5 8 26,7 0,07
DRB1*04-DQA1*03:01-DQB1*03:02 1 3,2 9 30,0 0,01
DRB1*07-DQA1*02:01-DQB1*02:01 4 12,9 6 20,0 0,69
DRBl*13-DQAl*01:03-DQBl*06:02-8 3 9,7 7 23,3 0,27
DRB1*16-DQA1*01:02-DQB1*05:02 6 19,4 0 0,0 0,03
DRB1*11-DQA1*05:01-DQB1*03:01 3 9,7 4 13,3 0,96
Бутолина М. А., Целоусова О. М., Попонина Е. А., Пестрикова А. О.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОЛОНИЕОБРАЗУЮЩЕЙ СПОСОБНОСТИ КЛЕТОК КОСТНОГО МОЗГА ПРИ НЕЙТРОПЕНИИ У ДЕТЕЙ
ФГБУН «Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови ФМБА России»
Введение. Патогенетически выделяют 3 группы нейтропений: гипопластические, перераспределительные и иммунные. В диагностике гипопластического варианта в настоящее время востребован культуральный метод оценки колониеобразующей способности клеток костного мозга. Данный вид лабораторного анализа позволяет определить патогенез нейтропении у конкретного пациента с последующим индивидуальным подходом к терапии.
Цель работы. Оценить колониеобразующую способность клеток костного мозга при нейтропенияху детей.
Материалы и методы. Исследована колониеобразующая способность клеток костного мозга у 18 пациентов с нейтропенией (12 мальчиков, 6 девочек), получавших лечение в ФГБУН «КНИИГиПК ФМБА России» в 2016—2021 гг. Возраст детей — от 2,5 до 17 лет (медиана — 9,5). Критерием постановки диагноза считали абсолютное число нейтрофилов менее 1,5 тыс. в 1 мкл периферической крови. Для культивирования кроветворных клеток-предшественников костного мозга использовали питательную среду на основе метилцел-люлозы (MethoCult Human №4434, StemCell Technologies, Канада), посев выполняли по стандартной методике на чашки Петри диаметром 35 мм. Культивирование осуществляли в условиях условиях 5%-го углекислого газа при температуре 37 0С. Определение пролифератив-ного потенциала и дифференцировочной способности гемопоэтиче-ских клеток костного мозга осуществляли путем подсчета количества гранулоцитарно-эритроцитарно-маркофагально-мегакариоцитарных
(норма 0—8 колоний на стандартную чашку Петри диаметром 35 мм), гранулоцитарных (7—35), макрофагальных (1—18), эозинофильных (0— 20) и эритроидных колоний (20—74) в 14-дневной культуре. Суммарное количество колоний в норме составляет 49—166 на чашку. Количество образовавшихся колоний считали равным содержанию соответствующих колониеобразующих единиц (КОЕ) в анализируемом образце костного мозга. Все работы с исходным материалом, реактивами и клеточными культурами выполняли в условиях стерильного бокса (чистые помещения) в ламинарном шкафу (класс безопасности НА).
Результаты и обсуждение. У 4 (22%) пациентов с нейтропенией кроветворение в костном мозге не нарушено (общее число КОЕ — от 54 до 115 (медиана — 76), гранулоцитарных (КОЕ-Г) — от 9 до 34 (медиана — 11). У 5 (28%) больных общая пролиферативная способность клеток костного мозга определена в пределах нормы, общее количество КОЕ — от 54 до 158 (медиана — 74). Количество КОЕ-Г снижено до 2—6 (медиана — 3). У 7 (39%) детей суммарное количество колоний оказалось меньше нижней границы нормы — от 12 до 45 КОЕ (медиана — 34). У 6 из них определено сниженное количество КОЕ-Г — от 1 до 4 (медиана — 4) КОЕ. Следовательно, у 11 (61%) детей выявлена гипоплазия гранулоцитарного ростка костного мозга.
Заключение. Использование культурального метода при обследовании детей с нейтропениями дает ценную информацию о патогенезе нейтропенического синдрома, что необходимо для определения индивидуальной тактики ведения больного.
Виноградова О. Ю.1, Черников М. В.4, Неверова А. Л.2, Кочкарева Ю. Б.1, Катрышева Н. Д.3, Птушкин В. В.1
ДИНАМИКА ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ МНОЖЕСТВЕННОЙ МИЕЛОМЫ И ХРОНИЧЕСКОГО ЛИМФОЛЕЙКОЗА
В МОСКВЕ В ПЕРИОД ПАНДЕМИИ СОУ1Б-19
Московский городской гематологический центр ГБУЗ «Городская клиническая больница им. С.П. Боткина Департамента здравоохранения города Москвы», 2ФГБУ «НМИЦ детской гематологии, онкологии и иммунологии имени Дмитрия Рогачева» Минздрава России, 3ГБОУ ВПО «Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н.И. Пирогова» Минздрава России, кафедра гематологии, онкологии и лучевой терапии, 4Научно-исследовательский институт организации здравоохранения и медицинского менеджмента Департамента здравоохранения города Москвы
Введение. Опыт терапии онкогематологических заболеваний в период пандемии СОУГО-19 показал, что у больных целого ряда но-зологий течение инфекции и исход терапии крайне неблагоприятны. Наибольшую опасность представляет развитие СОУГО-19 у пациентов при нозологиях, вызывающих вторичный иммунодефицит.
Цель работы. Оценить динамику эпидемиологических показателей у больных множественной миеломой (ММ) и хроническим лимфолейкозом (ХЛЛ) при пандемии СОУГО-19 в сравнении с предшествующими периодами.
Материалы и методы. Проанализирована база данных Московского городского гематологического центра с января 2011 г. по ноябрь 2021 г., в которой 5229 пациентов с ММ (в настоящее время живы 2212) и 4318 пациентов с ХЛЛ (живы 1937).
Результаты и обсуждение. С 2011 по конец 2019 г. ежегодный показатель регистрируемой распространенности ММ вырос в 2 раза. Ежегодный прирост составил от 0,3 в 2011—2013 гг. до 1,4 на 100 тысяч населения (т.н.) в последующие годы. В 2020 г. при пандемии СОУШ-19 такой динамики не было (16,9 в 2019-м и 17,0 в 2020-м г.).
