CC BY
29
K'M'AiX
www.antibiotic.ru/cmac/
КЛИНИЧЕСКАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ И АНТИМИКРОБНАЯ ХИМИОТЕРАПИЯ
Тем 20 N°2
2018
Формирование биопленок у изолятов Candida spp., выделенных из гемокультуры от больных с опухолями и без опухолей системы крови
Мальчикова А.О., Клясова Г.А.
ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Минздрава России, Москва, Россия
Контактный адрес:
Анна Олеговна Мальчикова
Эл. почта: [email protected]
Ключевые слова: кандидемия, Candida spp., биопленки, опухоли системы крови.
Цель. Определить способность к формированию биопленок у изолятов Candida spp., выделенных из гемокультуры от больных с опухолями и без опухолей системы крови.
Материалы и методы. Определение способности Candida spp. к формированию биопленок проводили в соответствии с методикой, предложенной Pierce C. и Tumbarello M. Изоляты Candida spp., имеющие значение оптической плотности от 0,1 и более, оценивали как образующие биопленки. Результаты: Всего было исследовано 109 изолятов Candida spp.: C. albicans (n=22), C. parapsilosis (n=22), C. tropicalis (n=22), C. krusei (n=21), C. glabrata (n=22). Из них 55 изолятов было выделено от больных с опухолями системы крови и 54 - от больных без опухолей системы крови. Формирование биопленок было определено у 54% (n=59) Candida spp. Частота образования биопленок была выше среди Candida не-albicans (60%) в сравнении с C. albicans (32%, p=0,02). Изоляты C. tropicalis (82%) и C. krusei (81%) достоверно чаще формировали биоплёнки в сравнении с C. parapsilosis (50%), C. albicans (32%) и C. glabrata (27%) (p<0,05). Ведущими продуцентами биопленок в обеих группах были C. krusei и C. tropicalis. C. parapsilosis, выделенные от больных с опухолями системы крови, достоверно чаще образовывали биопленки, чем в группе сравнения (73% против 27%, p=0,03). Минимальная продукция биопленок среди Candida spp, выделенных от больных с опухолями системы крови, выявлена у C. albicans (18%), а в группе сравнения - у C. glabrata (18%). Выводы: Формирование биопленок было неодинаковым у разных видов Candida и преобладало у C. tropicalis и C. krusei. Выявлены различия в частоте образования биопленок у разных видов Candida spp, выделенных от больных с опухолями и без опухолей системы крови.
Biofilm formation by Candida spp. isolated from blood culture in patients with or without hematological malignancies
Malchikova A.O., Klyasova G.A.
National Medical Research Center of Hematology, Moscow, Russia
Objective: To evaluate the biofilm formation by isolates of Candida spp. obtained from blood culture in patients with or without hematological malignancies.
Materials and methods: Biofilm formation by Candida spp. was determined by the method of Pierce C. and Tumbarello M. Isolates with optical density (OD) >0.1 were considered as biofilm-forming. Results: A total of 109 isolates of Candida spp. (C. albicans [n=22], C. parapsilosis [n=22], C. tropicalis [n=22], C. krusei [n=21], C. glabrata [n=22]) obtained from patients with or without hematological malignancies (55 and 54 isolates, respectively) were studied. Biofilm formation was determined in 54% of Candida spp. isolates (n=59). Biofilm production was observed more often in non-albicans species compared to C. albicans (60% versus 32%, p=0.02). The incidence of biofilm formation was significantly higher in isolates of C. tropicalis (82%) and C. krusei (81%) compared to isolates of C. parapsilosis (50%), C. albicans (32%), and C. glabrata (27%) (p<0.05). The leading biofilm-forming species were C. tropicalis and C. krusei in the both patient cohorts. Biofilm production was more frequent in C. parapsilosis isolated from patients with hematological malignancies compared to patients without hematological malignancies (73% versus 27%, p=0.03). The lowest incidence of biofilm formation was found in C. albicans (18%) isolated from patients with hematological malignancies and C. glabrata (18%) isolated from patients without hematological malignancies.
Conclusions: Biofilm formation varied among the Candida spp., with the highest incidence in C. tropicalis (82%) and C. krusei (81%). There were differences in the biofilm formation incidence among Candida spp. isolated from patients with or without hematological malignancies.
Введение
Кандидемия остается одним из тяжелых инфекционных осложнений у больных, находящихся на лечении в отделениях гематологии и реанимации [1]. Ведущими возбудителями кандидемии являются C. albicans, C. parapsilosis, C. tropicalis, C. krusei и C. glabrata [2, 3].
Мальчикова А.О. и соавт.
Contacts:
Anna O. Malchikova
E-mail: [email protected]
Key words: candidemia, Candida spp., biofilm, hematological malignancies.
Разные виды Candida spp. обладают неодинаковой способностью к развитию инфекции, и одним из параметров, оказывающих влияние на это, является способность к формированию биопленок [4].
Активное внедрение в практику инвазивных медицин-
ских устройств, таких как сосудистые катетеры, стенты, шунты, протезы, эндотрахеальные трубки, привело к увеличению выделения из гемокультуры Candida spp., образующих биопленки. Так, по результатам ретроспективного исследования, проведенного в многопрофильном стационаре г. Рима и включавшего 294 пациента, выделение Candida spp. в составе биопленок при кандидемии увеличилось с 36% до 67% в период с 2000 г. по 2004 г. [5]. Определено, что разные виды Candida spp. имеют неодинаковую способность к формированию биопленок.
Летальность при кандидемии, вызванной Candida spp. в составе биоплёнок, достоверно выше в сравнении с возбудителями инфекции, неспособными формировать биопленки (51,2% против 31,7%, р=0,004) [6]. Более высокая частота летальных исходов при кандиде-мии, вызванной продуцентами биопленок, наблюдалась у тяжелой категории больных при лечении азолами и составила 76,9% [7].
Целью настоящего исследования было определение способности к формированию биопленок среди изоля-тов Candida spp., выделенных из гемокультуры от больных с опухолями и без опухолей системы крови.
Материалы и методы
Материалом для исследования были изоляты C. albicans, C. parapsilosis, C. tropicalis, C. krusei и C. glabrata, выделенные из гемокультуры от больных с опухолями и без опухолей системы крови. Основная доля Candida spp. (80%), выделенных от больных без опухолей системы крови, была получена из гемокультуры пациентов, находящихся в отделениях реанимации. Изоля-ты для исследования были взяты из коллекции Candida spp., собранной в ходе многоцентрового проспективного исследования. В исследование включали первый изолят Candida spp., выделенный из гемокультуры. Идентификация всех изолятов была проведена методом времяпролет-ной масс-спектрометрии (MALDI-TOF MS) на анализаторе Microflex (Bruker Daltonics, Германия) в автоматическом режиме с использованием программы MALDI Biotyper RTC, версия 3.0 (Bruker Daltonics, Германия). Для идентификации полученных изолятов до вида изолированные колонии Candida spp. получали на агаризованных средах Сабуро с хлорамфениколом (Sigma-Aldrich, США). Исследуемую культуру в двух повторностях наносили на ячейки слайда (мишени), после чего немедленно добавляли 1 мкл специального реагента - матрицы (а-циано-4-гидроксикорич-ная кислота и раствор, содержащий 50% ацетонитрила и 2,5% трифторуксусной кислоты). Исследование изолятов перед нанесением матрицы включало в себя дополнительный этап экстракции белков муравьиной кислотой. После высушивания слайда с нанесенными образцами при комнатной температуре его помещали в вакуумную камеру MALDI-TOF масс-спектрометра, после чего с каждого образца снимали до 100 белковых масс-спектров, при соотнесении которых с компьютерной базой данных выдавался результат идентификации микроорганизма. В качестве критерия надежной видовой идентификации использовали рекомендуемые значения коэффициента совпадения (Score) от 2,0 и выше. До проведения исследования изо-
Мальчикова А.О. и соавт.
ляты хранили при температуре -70°С в триптиказо-соевом бульоне с добавлением 20% глицерина.
Определение способности Candida spp. к формированию биопленок проводили в соответствии с методикой, предложенной Pierce C. и Tumbarello M. и соавт. [6, 8]. Способность изолятов Candida к формированию биопленок определяли количественно, используя соль тетразо-лия - 2,3-би-(2-метокси-4-нитро-5-сульфофенил]-2Н-тет-разолиум-5-карбоксианилид (XTT, Sigma-Aldrich, США). Для этого изолированные колонии Candida spp. получали на агаризованных средах, содержащих глюкозу и дрожжевой пептон (YPD, Sigma-Aldrich, США). Суточную культуру переносили в жидкую среду YPD (20 мл среды в колбе Эрленмейера объёмом 150 мл) и инкубировали на шейкере (BioSan, Латвия) при 160 об/мин и температуре 30°С в течение 12-16 ч. Далее дрожжевые клетки центрифугировали при 3000 g в течение 5 мин, трёхкратно отмывали холодным стерильным 0,1 М фосфатным буфером и суспендировали в жидкой среде Сабуро, содержащей 8% глюкозы, до количества 3х107 КОЕ/мл (подсчет осуществляли в камере Горяева). Суспензию в количестве 100 мкл переносили в стерильные 96-луночные плоскодонные планшеты в двух повторностях. В лунки 12-го ряда суспензию не вносили и использовали как контроль фона. После 24 ч инкубации при температуре 37°С планктонные клетки удаляли и трёхкратно отмывали лунки планшетов стерильным 0,15 М фосфатным буфером.
Раствор ХТТ готовили в 0,01 М фосфатном буфере с последующим фильтрованием через фильтр с диаметром пор 0,22 мкм. Непосредственно перед исследованием к раствору ХТТ добавляли 1 мкМ раствора менадио-на, приготовленного в ацетоне. В лунки с исследуемыми изолятами Candida spp. вносили 100 мкл раствора «ХТТ-менадион» и инкубировали при температуре 37°С в течение 5 ч в темноте. Учет результатов выполняли спектрофотометрически с помощью микропланшетного ридера IMark (Bio-Rad, США) при длине волны 490 нм. Изоляты Candida spp., имеющие оптическую плотность (ОП) >0,1, расценивали как формирующие биоплёнки; <0,1 - не способные к формированию биопленок. В качестве положительного контроля использовали C. parapsilosis ATCC 22019 в каждом эксперименте [9], в качестве отрицательного контроля - C. albicans 2215.
Для анализа результатов исследования была создана база данных. Статистически значимыми считали различия при вероятности безошибочного прогноза 95% (p<0,05).
Результаты
Способность к формированию биопленок была исследована у 109 изолятов Candida spp., включая C. albicans (n=22), C. parapsilosis (n=22), C. tropicalis (n=22), C. glabrata (n=22) и C. krusei (n=21). Изоляты были получены из гемокультуры от больных с опухолями (n=55) и без опухолей системы крови (n=54) (Таблица 1).
При изучении способности к формированию биопленок было выявлено неоднородное распределение ОП у изолятов Candida spp. (Рисунок 1). Значения ОП варьировали от 0,001 до 1,403 (медиана - 0,131), у 6% изолятов они были >1,0, а у одного изолята (C. albicans)
соответствовали нулевому значению. Наиболее выраженный диапазон колебаний ОП от 0,019 до 1,403 с медианой 0,771 был определен у C. krusei, из которых 24% изолятов имели значения ОП >1,0. Медиана значений ОП у других видов Candida spp. была ниже и составила 0,216 у C. tropicalis, 0,108 - C. parapsilosis, 0,063 - C. albicans, 0,059 - C. glabrata. Значения ОП других видов Candida spp. были от 0,001 до 0,577 и варьировали в меньшей степени, за исключением одного изолята C. glabrata, имевшего значение ОП 1,077.
Формирование биопленок было определено у 54% (n=59) исследованных Candida spp. Различия в частоте образования биопленок были выявлены между C. albicans и Candida не-albicans, а также внутри видов (Таблица 2). Изоляты Candida не-albicans достоверно чаще образовывали биопленки в сравнении с C. albicans (60% против 32%, p=0,02). Образование биопленок преобладало среди C. tropicalis (82%, n=18) и C. krusei (81%, n=17) и определялось достоверно чаще в сравнении с C. parapsilosis (50%, n=11), C. albicans (32%, n=7) и C. glabrata (27%, n=6), p<0,05 (Рисунок 2). Продукция биопленок была минимальной у C. glabrata (27%) и C. albicans (32%).
Далее был проведен анализ образования биопленок среди Candida spp., выделенных из гемокультуры от больных с опухолями и без опухолей системы крови (Таблица 2). Формирование биоплёнок было выявлено у 60% Candida spp., выделенных от больных с опухолями системы крови, и у 48% Candida spp., полученных от больных без опухолей системы крови (p=0,2). C. albicans образовывали биопленки реже при выделе-
Таблица 1. Распределение Candida spp., включенных в исследование
Изоляты Candida spp., выделенные из гемокультуры от больных
Всего,n С опухолями системы крови, n Без опухолей системы крови, n
C. albicans 22 11 11
C. parapsilosis 22 11 11
C. tropicalis 22 11 11
C. glabrata 22 11 11
C. krusei 21 11 10
Всего 109 55 54
I 1,4
I \i
Г'!
S; 0.9
О
¥ 0,5
f 0,4
Jr Г> 1
С. albicans С. parapsilosis С. tropicalis С. glabrata С. krusei
Рисунок 1. Распределение значений ОП изолятов Candida spp., выделенных из гемокультуры от больных с опухолями и без опухолей системы крови
нии их от больных с опухолями системы крови и составили всего 18% против 46% в группе сравнения (p=0,17), в то время как среди Candida не-albicans этот показатель был сходным (71% и 72%). Формирование биопленок было сопоставимо высоким в анализируемых группах для C. tropicalis (82% в обеих группах) и C. krusei (91% и 70%), Рисунок 3. Статистически значимые различия в частоте образования биопленок были получены для C. parapsilosis. Изоляты C. parapsilosis, выделенные от больных с опухолями системы крови, достоверно чаще были продуцентами биопленок в сравнении с C. parapsilosis, полученными от больных без опухолей системы крови (73% против 27%, p=0,03).
При анализе частоты формирования биопленок внутри анализируемых групп было выявлено, что среди Candida spp., выделенных от больных с опухолями системы крови, образование биопленок преобладало у изолятов Candida не-albicans в сравнении с C. albicans (71% против 18%, p=0,002) и наблюдалось достоверно чаще среди изолятов C. krusei (91%) и C. tropicalis (82%) в сравнении с C. glabrata (36%) и C. albicans (18%, р<0,05), а также у C. parapsilosis (73%) в сравнении с C. albicans (18%, р<0,05) (Таблица 2, Рисунок 3). Минимальная частота образования биопленок была зафиксирована у C. albicans (18%).
При изучении Candida spp., выделенных от больных без опухолей системы крови, не было выявлено различий в частоте формирования биопленок у Candida не-albicans и C. albicans (72% и 46%, р=0,8) (Таблица 2). Так же, как и в группе сравнения, образование биопленок преобладало среди изолятов C. tropicalis (82%) и C. krusei (70%) и наблюдалось достоверно чаще в сравнении с C. glabrata (18%, р<0,05), а у C. tropicalis (82%) в сравнении с C. parapsilosis (27%, р<0,05). Самая низкая частота формирования биопленок была определена у C. glabrata (18%) и, в отличие от группы сравнения, у C. parapsilosis (27%).
Обсуждение
Способность к формированию биопленок является одним из важнейших факторов вирулентности возбудителей кандидемии [9, 11]. В нашем исследовании частота образования биопленок у исследуемых изолятов Candida spp., выделенных из гемокультуры от больных с опухолями и без опухолей системы крови, составила 54% (n=59). По данным литературы, продукция биоплёнок среди Candida spp. является вариабельной. В исследовании, проведенном в Швеции [12], биопленки образовывали 58,8% Candida spp. из 393 изолятов, выделенных из гемокультуры; в исследовании, проведенном в Турции - 20,2% (20 из 99) [13]. При анализе Candida spp., выделенных из гемокультуры (n=36) и мазков из зева (n=22), этот показатель составил 82,75% [14].
Наше исследование продемонстрировало различия в способности к формированию биопленок среди C. albicans и Candida не-albicans. Так, достоверно чаще биопленки образовывали изоляты Candida не-albicans (60%) в сравнении с C. albicans (32%, p=0,02). Эти различия сохранились при анализе Candida spp., выделен-
Мальчикова А.О. и соавт.
82
81
50
27
С. albicans С. parapsilosis С. tropilcalis С. glabrata
С. krusei
Рисунок 2. Частота образования биопленок у разных видов Candida spp.
ных от больных с опухолями системы крови (71% против 18%, p=0,002), при этом не было получено различий у больных без опухолей системы крови (72% против 46%, р=0,8). Другие исследователи также отмечали более высокую частоту формирования биопленок среди Candida не-albicans, которая составляла от 54% до 77%, в то время как этот показатель среди C. albicans варьировал от 26,7% до 30,6% (p<0,05) [6, 15, 16].
Нами были выявлены различия в частоте образования биопленок у разных видов Candida spp. Образование биопленок преобладало у изолятов C. tropicalis (82%) и C. krusei (81%) в сравнении с C. parapsilosis (50%), C. albicans (32%) и C. glabrata (27%, p<0,05) и
Таблица 2. Частота образования биопленок среди C. albicans и не-albicans видов Candida, выделенных из гемокультуры от больных с опухолями и без опухолей системы крови
Изоляты Candida spp., образующие биопленку (ОП >0,1) и выделенные от больных
Всего, n (%) С опухолями системы крови, n (%) Без опухолей системы крови, n (%)
C. albicans (n=22) 7 (32)* 2 (18)* 5 (46)
Candida не-albicans (n=87) 52 (60)* 31 (71)* 21 (72)
Всего (n=109) 59 (54) 33 (60) 26 (48)
* p<0,05.
Рисунок 3. Частота образования биопленок среди изолятов
Candida spp. (ОП >0,1), выделенных из гемокультуры от больных с опухолями и без опухолей системы крови
было минимальным у изолятов C. glabrata (27%). Другими исследователями были получены сходные результаты. Так, в исследование, проведенное в Швеции [12], были включены помимо изолятов C. albicans (n=243), C. glabrata (n=81), C. parapsilosis (n=33), C. tropicalis (n=8) и C. krusei (n=5) и более редкие виды Candida spp. (14 изолятов C. dubliniensis, 8 изолятов C. lusitaniae, и 1 изолят C. pelliculosa), выделенные из гемокультуры. Лидерами в продукции биопленок, помимо C. tropicalis (100%) и C. krusei (100%), были C. lusitaniae (100%). Формирование биопленок было определено у 95% C. glabrata, у 66,7% C. parapsilosis и только у 11% C. albicans. По данным другого исследования [17], включавшего 108 изолятов Candida spp., выделенных из мочи (n=34), дыхательных путей (n=27), крови (n=22), мазков из половых органов (n=16) и других локусов, образование биопленок преобладало также среди C. krusei (80,7%) и C. tropicalis (72,7%). Биопленки реже выявляли у C. glabrata (62,5%), C. albicans (55,1%) и C. parapsilosis (50%). У таких редких видов, как C. dubliniensis и C. kefyr, этот показатель составил 66,7% и 57,1% соответственно.
Наряду с изучением частоты формирования биоплёнок у Candida spp., имеются публикации, в которых оцениваются разные категории способности к образованию биопленок. В исследовании Rajendran R. и соавт. из Швейцарии [18], включавшем 280 изолятов Candida spp., выделенных из гемокультуры, все исследуемые изо-ляты по способности формирования биопленок были разделены на 3 категории в зависимости от значений ОП: высокая (>0,3), средняя (0,15-0,3) и низкая (<0,15). Изо-ляты С. tropicalis были отнесены к категории высокой и средней способности формирования биопленок (по 50% в каждой категории), в то время как все изоляты C. glabrata имели низкую способность к формированию биопленок. C. albicans в равных долях попали в 3 исследуемые категории (33%, 34% и 33% соответственно), а среди C. parapsilosis 55% изолятов обладали высокой способностью к формированию биопленок и 45% - низкой.
В нашей работе не было получено статистически значимых различий в частоте образования биоплёнок среди всех Candida spp., выделенных от больных с опухолями и без опухолей системы крови (60% против 48%, p=0,2). Ведущими продуцентами биопленок в обеих группах были C. krusei и C. tropicalis. Различия были выявлены у C. parapsilosis, которые достоверно чаще образовывали биопленки у больных с опухолями системы крови в сравнении с C. parapsilosis, выделенными от больных без опухолей системы крови (73% против 27%, p=0,03). В исследовании Girmenia C. и соавт. [19] также была показана высокая частота формирования биопленок среди 29 изолятов C. parapsilosis, выделенных из гемокультуры от больных с опухолями системы крови, которая составила 93%. В то же время, по данным литературы, изоляты C. parapsilosis, полученные от больных без опухолей системы крови, образуют биопленки с частотой от 22,7% до 100% [20, 21]. Можно предположить, что кроме видовой принадлежности, на способность образования биопленок Candida spp. оказывают влияние дополнительные факторы.
При анализе внутри групп была выявлена минимальная частота формирования биопленок у разных видов
Мальчикова А.О. и соавт.
Candida spp. Так, наиболее низкий процент образования биопленок среди Candida spp., выделенных от больных с опухолями системы крови, был определен у C. albicans (18%), а в группе сравнения (больные без опухолей системы крови) - у C. glabrata (18%). В литературе представлено ограниченное число исследований по изучению способности к формированию биопленок у изолятов Candida spp., выделенных у разных категорий больных. Результаты исследования, проведенного в Венгрии [15], в которое было включено 93 изолята Candida spp. из гемокультуры от больных многопрофильного стационара, в том числе от больных с опухолями системы крови, показали высокую частоту образования биопленок среди C. parapsilosis (75%) и C. tropicalis (67%). Минимальная частота формирования биопленок наблюдалась у C. albicans (30,6%), C. glabrata (29%) и C. krusei (25%). В исследовании, проведенном в Италии [21], в которое было включено 297 изолятов Candida spp., выделенных из гемокультуры (n=276) и других стерильных локусов (n=42) от больных, находящихся в отделении реанимации, частота образования биопленок среди исследуемых изолятов составила 30% и была минимальной у C. albicans (34%), C. glabrata (26%) и C. parapsilosis (23%).
Литература
1. Klyasova G.A., Ohmat V.A., Vasilyeva V.A., et al. Invasive mycoses in patients with acute leukemia and in recipients of hematopoietic stem cells. Results of a multicenter prospective observational study in Russia (RIFI). Gematologija i transfuziologija. 2016;61:19. Russian. (Клясо-ва Г.А., Охмат В.А., Васильева В.А. и соавт. Инвазивные микозы у больных острыми лейкозами и у реципиентов гемопоэтических стволовых клеток. Результаты многоцентрового проспективного наблюдательного исследования в России (RIFI). Гематология и трансфузиология. 2016;61:19.).
2. Klyasova G.A., Blokhina E.V., Gracheva A.N., et al. Factors influencing recovery in patients with hemoblastoses and candidemia. Terapevticheskij arhiv. 2015;7:77-87. Russian. (Клясова Г.А., Блохи-на Е.В., Грачева А.Н. и соавт. Факторы, влияющие на излечение у больных гемобластозами и кандидемией. Терапевтический архив.
2015;7:77-87.).
3. Veselov A.V., Klimko N.N., Kretchikova O.I., et al. In Vitro Activity of Fluconazole and Voriconazole Against More Than 10000 Yeast Strains: Results of 5-years Prospective ARTEMIS Disk Study in Russia. Klinicheskaja mikrobiologija i antimikrobnaja himioterapija. 2008;10(4):345-354. Russian. (Веселов А.В., Климко Н.Н., Кре-чикова О.И. и соавт. In vitro активность флуконазола и ворико-назола в отношении более 10000 штаммов дрожжей: результаты 5-летнего проспективного исследования ARTEMIS Disk в России. Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. 2008;10(4):345-354.).
4. Kojic E.M., Darouiche R.O. Candida infections of medical devices. Clin Microbiol Rev. 2004;17:255-267.
5. Tumbarello M., Posteraro B., Trecarichi E.M., et al. Biofilm Production by Candida Species and Inadequate Antifungal Therapy as Predictors of Mortality for Patients with Candidemia. J Clin Microbiol. 2007;45(6):1843-1850.
6. Tumbarello M., Fiori B., Trecarichi E.M., et al. Risk factors and outcomes of candidemia caused by biofilm-forming isolates in a tertiary care hospital. PLoS One. 2012;7:e33705.
7. Tascini C., Sozio E., Corte L., et al. The role of biofilm forming on mortality in patients with candidemia: a study derived from real world data. Infect Dis (Lond). 2018;50(3):214-219.
8. Pierce C.G., Uppuluri P., Tristan A.R., et al. A simple and reproducible 96 well plate-based method for the formation of fungal biofilms and its application to antifungal susceptibility testing. Nat ProtoC. 2008;3(9):1494-1500.
9. Melo A.S., Bizerra F.C., Freymuller E., Arthington-Skaggs B.A.,
Заключение
Частота формирования биопленок среди изолятов Candida spp., выделенных из гемокультуры от больных с опухолями и без опухолей системы крови, составила 54% и различалась у C. albicans, C. parapsilosis, C. tropicalis, C. krusei и C. glabrata. Образование биопленок преобладало у C. tropicalis (82%) и C. krusei (81%). Выявлены различия в частоте образования биопленок у разных видов Candida spp., выделенных от больных с опухолями и без опухолей системы крови. Минимальная частота формирования биопленок среди Candida spp., выделенных от больных с опухолями системы крови, была выявлена у C. albicans (18%), в группе сравнения (больные без опухолей системы крови) - у C. glabrata (18%).
Финансирование
Исследование не имело спонсорской поддержки.
Конфликт интересов
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Colombo A.L. Biofilm production and evaluation of antifungal susceptibility amongst clinical Candida spp. isolates, including strains of the Candida parapsilosis complex. Med Mycol. 2011;49:253-262.
10. Nett J., Lincoln L., Marchillo K., et al. Beta-1,3 Glucan as a Test for Central Venous Catheter Biofilm Infection. J Infect Dis. 2007;195(11):1705-1712.
11. Silva S., Rodrigues C. F., Araújo D., et al. Candida Species Biofilms' Antifungal Resistance. J Fungi (Basel). 2017;3(1). pii:E8.
12. Pannausorn S., Fernandez V., Romling F. Prevalence of biofilm formation in clinical isolates of Candida species causing bloodstream infection. Mycoses. 2012;56:264-272.
13. Gokce G., Cerikcioglu N., Yagci A. Acid proteinase, phospholipase, and biofilm production of Candida species isolated from blood cultures. Mycopathologia. 2007;164:265-269.
14. Kumar C.P.G., Menon T. Biofilm production by clinical isolates of Candida species. Med Mycol. 2006;44:99-101.
15. Pongrácz J., Benedek K., Juhász E., Iván M., Kristóf K. In vitro biofilm production of Candida bloodstream isolates: any association with clinical characteristics? J Med Microbiol. 2016;65:272-277.
16. Shilpa D., Nitika J., Neerja G., Shipra G. Speciation, biofilm formation and antifungal susceptibility of Candida isolates. Int J Res Dev Pharm L Sci. 2017;6(2):2517-2521.
17. Golia S., Hittinahalli V., Sangeetha K.T., Vasudha C.L. Study of biofilm formation as a virulence marker in Candida species isolated from various clinical specimens. J Evol Med Dent Sci. 2012;1(6):1238-1246.
18. Rajendran R., Sherry L., Nile CJ., et al. Biofilm formation is a risk factor for mortality in patients with Candida albicans bloodstream infection - Scotland, 2012-2013. Clin Microbiol Infect. 2016;22: 87-93.
19. Girmenia C., Martino P., De Bernardis F., et al. Rising Incidence of Candida parapsilosis Fungemia in Patients with Hematologic Malignancies: Clinical Aspects, Predisposing Factors, and Differential Pathogenicity of the Causative Strains. Clin Infect Dis. 1996;23:506-514.
20. Agwan V., Butola R., Madan M., et al. Comparison of biofilm formation in clinical isolates of Candida species in a tertiary care center, North India. Indian J Pathol Microbiol. 2015;58:475-478.
21. Tobudic S., Kratzer C., Lassnigg A., et al. Biofilm formation of Candida spp. isolates from patients at a cardiothoracic intensive care unit. Int J Artif Organs. 2011;9:818-823.
22. Prigitano A., Dho G., Lazzarini C., et al. Biofilm production by Candida isolates from a survey of invasive fungal infections in Italian intensive care units. J Chemother. 2012;24(1):61-63.
Мальчикова А.О. и соавт.
