CC BY
4
В связи с этим нами было предложено идентификацию выросших колоний начинать с определения родовой принадлежности выделенных культур путем посева их на среду Симмонса, среду Олькеницкого, пептонную воду с триптофаном (на индол), среду с мочевиной и МПА для серологического типирования. Эти основные родовые признаки позволяют намного сократить число изучаемых в дальнейшем колоний.
Исследования, проведенные нами по отработке некоторых методических приемов выделения ЭПКП из воды поверхностных водоемов, сточных вод городской канализации и почвы земледельческих полей орошения, показали, что из 309 колоний, выросших на среде Эндо и сходных по культуральным свойствам с кишечными палочками, к роду эшерихий относилось только 21,7%. Применяемая первичная идентификация выросших колоний путем изучения некоторых родовых признаков почти в 4 раза сокращает время, затрачиваемое на агглютинацию культур, а также позволяет экономить дорогостоящие аг-Цглютинирующие эшерихиозные сыворотки.
Для сокращения времени исследования, упрощения анализа и экономии питательных сред нами также предлагается ускоренный метод выявления индолообразования микроорганизмами. Принцип метода заключается в нанесении бактериологической петлей на полоску индикаторной бумаги стандартной прописи микробной взвеси с МПА или суспензии клеток с мясопептонным бульоном либо 2 % пептонной воды. Наиболее рационально использовать культуру на скошенном МПА, подготовленную к высеву на пестрый ^ряд. При способности культуры образовывать Щиндол микробная взвесь на индикаторной полоске тотчас или в первые минуты окрашивается в розово-сиреневый цвет; также изменяется цвет индикаторной бумаги при нанесении жидких культур. При отсутствии способности к индоло-образованшо цвет микробной массы не изменя-
УДК 614.71:546.491-073.75 *
Ртуть является одним из наиболее опасных загрязнителей окружающей среды, однако методы ее определения разработаны недостаточно.
^Фотометрические методы определения ртути неспецифичны [7, 8]. Так, при определении ртути в воздухе при взаимодействии с йодом в поглотительном растворе йодида калия определению мешают многие распространенные металлы, в первую очередь железо. При этом органические
ется, а после подсыхания она приобретает желтую окраску. Реакцию следует учитывать в первые минуты постановки пробы до подсыхания культуры. Предлагаемый метод испытан нами на 86 культурах микроорганизмов, изолированных из сточных вод, и 8 музейных штаммах патогенных эшерихий. Одновременно образование индола проверялось известным способом посева в 2 % пептонную воду с закрепленными в пробирках индикаторными полосками, выращиванием при 37 °С и учетом результатов через 24 ч. При сравнении предлагаемого и известного методов получены однозначные результаты выявления индолообразования как у культур из внешней среды, так и у музейных штаммов, что позволяет рекомендовать разработанный нами метод для практического использования.
Выводы. 1. Для выделения энтеропатоген-ных кишечных палочек из различных объектов окружающей среды целесообразно в качестве сред накопления использовать глюкозопептон-ную среду и 10 % желчный бульон.
2. С целью экономии агглютинирующих сывороток и времени персонала первичную идентификацию культур следует начинать с определения родовой принадлежности выросших колоний.
3. Предложенный ускоренный метод выявления индолообразования у микроорганизмов позволяет сократить время исследования и экономить питательные среды.
Литература
1. Информ. бюл. Всесоюз. центра по эшерихиям. 1972, вып. I.
2. Методические указания по обнаружению возбудителей кишечных инфекций бактериальной и вирусной природы в воде. М., 1980.
3. Методические указания по санитарно-микрпбролщ-мческо-му исследованию почвы. М, 1977.
4. Сидоренко Г. И., Багдасарьян Г. А.. Дмитриева Р. А. — Гиг. и сан., 1981, № 11, с. 4—7.
Поступила 26.11.84
соединения ртути, имеющие важную гигиеническую значимость, не определяются.
Чувствительность электрохимических методов определения ртути не превышает 10—20 мкг [11], гравиметрических — 30—50 мкг [10]. Надежное определение ртути может быть проведено атомно-абсорбционным методом, однако необходимые для этого модели атомно-абсорбцион-ных спектрофотометров весьма сложны, дорого-
М. Т. Дмитриев, Б. И. Фрадкин
ФЛЮОРЕСЦЕНТНОЕ РЕНТГЕНОРАДИОМЕТРИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ РТУТИ В ВОЗДУХЕ И ДРУГИХ ОБЪЕКТАХ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ
НИИ общей и коммунальной гигиены им. А. Н. Сысина АМН СССР, Москва
стоящи и мало доступны [3, 6]. Таким образом, применение для определения ртути недорогих доступных приборов и использование в них эффективных физических методов исследования, в первую очередь рентгеновской флуоресценции [2, 9], представляются весьма актуальными.
Нами разработан флюоресцентный рентгено-радиометрический метод определения ртути в в воздухе и других объектах окружающей среды, основанный на возбуждении вторичного характеристического излучения атомов ртути с помощью радиоизотопа 238Ри и последующем измерении интенсивности этого излучения полупроводниковым или сцинтилляционным детектором. Энергия излучения ™Ри значительно превышает энергию К-связи электронов ртути.
Для регистрации излучения использовали реитгенорадиометрический анализатор РПСЧ-01. Прибор рассчитан на работу с источниками излучения, имеющими активность от 0,5 до 30 мКи, и представляет собой одноканальпый амплитудный анализатор с двумя блоками детектирования, в которых использованы пропорциональный счетчик рентгеновского излучения СЧ-ОР для регистрации излучения энергии в диапазоне 325 кэВ и сцинтилляцнонный детектор для регистрации излучения энергии в диапазоне 10—100 кэВ. Максимум счета находили при различных уровнях дискриминатора и ширине щели.
При выбранном уровне дискриминатора и ширине щели проводили определение интенсивности рентгеновской флюоресценции. Длительность измерения задавали таймерным устройством в зависимости от программы. Результаты измерения выводились на люминесцентное табло в цифровом виде [1]. Содержание ртути в пробе регистрировали в течение 3—5 мин. Варьирование высокого напряжения позволяет снизить влияние фона и флюоресценции других элементов [4]. Перед анализом проб прибор необходимо прогревать в течение не менее 30 мин для повышения стабильности работы.
Адсорбцию паров и органических соединений ртути проводили на активированный силикагель марки КС К или АСМ с дисперсностью 0,25— 0,30 мм, который предварительно обрабатывали соляной кислотой (3—5 раз) при нагревании и промывали дистиллированной водой до отрицательной реакции на С1~ (с AgNOs). Затем силикагель прокаливали в муфельной печи до 300— 400°С, активировали промыванием дистиллированной водой и сушили при 150°С в течение 2 ч.
Навеску активированного снликагеля 2 г насыпали в поглотительный прибор Зайцева, Рых-тера или Полежаева. Исследуемый воздух аспи-рировалн со скоростью 5—20 л/мин. Отобранные пробы помещали в пластмассовые кюветы и устанавливали в прибор. Стандартную шкалу готовили из навески окиси ртути особой чистоты (10 мг), которую тщательно смешивали с си-
ликагелем. Общая навеска составляла 100 мг. Счет импульсов проверяли не менее 5 раз по 10 с, затем пластмассовую кювету со стандартом поворачивали на 180° и снова проверяли счет импульсов при той же ширине щели и уровне дискриминации [5]. Калибровочный графц^ строили за вычетом фона.
При определении ртути, входящей в состав < аэрозолей, пробы воздуха отбирали на фильтр, который помещали в прибор, затем регистрировали интенсивность рентгеновской флюоресценции. Аналогично определяли содержание ртути в почве и других сыпучих материалах (с учетом 1 массы проб). Анализируемые биологические материалы, пробы пищевых продуктов предварительно высушивали, измельчали и прессовали в виде таблеток.
Главными достоинствами флюоресцентного рентгенорадиометрического определения ртути являются высокая специфичность и экспрес-сность. • Чувствительность анализа составляет 0,05 мкг. При объеме пробы 50—500 л минимальные определяемые концентрации ртути воздухе составляют 0,0001—0,001 мг/м3. Точность определения 2—3 %. На результаты анализа свойства химических соединений, в состав которых входит ртуть, не влияют.
Другие элементы и токсичные соединения определению ртути не мешают, за исключением свинца и платины, которые несколько завышают определяемые количества при их значительном содержании в пробах (в 104—105 раз больше, чем содержание ртути). Характеристическое излучение мешающих элементов (свинца и платины) близко по энергии к аналитической линни~ ртути, однако оно может быть устранено повы-^ шением уровня дискриминации. Разработанный метод определения ртути прошел проверку и широко используется в гигиенических исследованиях.
Литература
1. Анализатор рентгенорадиометрический РПСЧ-01. Инструкция по эксплуатации. М., 1980. ^
2. Дмитриев М. Т. — В кн.: Физико-химические метод® исследования окружающей среды. М., 1980, с. 15.
3. Дмитриев М. Т.. Грановский Э. И. — Гиг. и сан., 1983, № 9, с. 50.
4. Дмитриев М. Т., Григорьева Ф. М. — Там же, 1978, № 7, с. 65.
5. Дмитриев М. Т., Григорьева Ф. М. — Там же, 1980, № 12, с. 52.
6. Кох О. Г. и др. — Журн. аналит. химии, 1984, т. 39, № 6, с. 1135.
7. Руководство по контролю загрязнения атмосферы. Л., 1979, с. 161.
8. Унифицированные методы определения атмосферные» загрязнений / Под ред. Г. И. Сидоренко, М. Т. ДмитЧ риева. М., 1976, с. 221.
9. Якубович А. Л. и др. Ядерно-физические методы анализа минерального сырья. М., 1963.
10. Fernander J. В. — Analyt. Chcm., 1951, vol. 23, p. 899.
11. Overman R. F.— Ibid., 1971, vol. 43, p. 616.
Поступила 27.02.85
