ЕЛЕКТРОННОМ1КРОСКОП1ЧШ ДОСЛ1ДЖЕННЯ ПАРОДОНТА ПРИ Д11 ОП1О1ДУ ВПРОДОВЖ ШЕСТИ ТИЖН1В
Кандидат медичних наук, доцент Фш В. Б. Кандидат медичних наук, доцент Савка 1.1. Кандидат медичних наук, доцент Пальтов С. В. Доктор медичних наук, професор Кривко Ю. Я.
Львгвський нацгональний медичний утверситет гмеш Данила Галицького, кафедра нормальног анатомИ, м. Льв1в, Украгна
DOI: https://doi.org/10.31435/rsglobal_wos/31082019/6651
ABSTRACT
The following work is aimed at studying the features of the restructuring of the structural components of periodontal tissues under the conditions of a six-week experimental effect of an opioid analgesic at the ultrastructural level. Destructive changes were found in all cellular components of the mucous membrane of the gums, the periodontium and in the links of the microcirculatory bed. The ultrastructural manifestations in periodontal tissues that occur with the action of an opioid analgesic for six weeks may serve as a morphological basis for further study of the dynamics of submicroscopic changes in the later stages of opioid exposure in the experiment.
Citation: Фш В. Б., Савка I. I., Пальтов £. В., Кривко Ю. Я. (2019) Elektronnomikroskopichni Doslidzhennia Parodonta pry Dii Opioidu Vprodovzh Shesty Tyzhniv. International Academy Journal Web of Scholar. 8(38), Vol.1. doi: 10.31435/rsglobal_wos/31082019/6651
Copyright: © 2019 Фк В. Б., Савка L L, Пальтов С. В., Кривко Ю. Я. This is an open-access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution License (CC BY). The use, distribution or reproduction in other forums is permitted, provided the original author(s) or licensor are credited and that the original publication in this journal is cited, in accordance with accepted academic practice. No use, distribution or reproduction is permitted which does not comply with these terms.
Результата статп вщповщають плану наукових дослщжень Львiвського нацюнального медичного ушверситету iменi Данила Галицького i е частиною науково-дослщно! теми кафедри нормально! анатомй «Структурна оргашзащя, ангюархтектошка та антропометричш особливосп оргашв у внутршньо та позаутробному перюдах розвитку, за умов екзо- та ендопатогених факторiв», № держреестрацп 0115Ш00041.
Вступ. Вивчення безпосередньо! реакцп тканин пародонта на рiзноманiтнi етюлопчш чинники е об'ектом пильного защкавлення науковщв всього свггу [1 - 3]. Темпи руйнування тканин пародонта, ураження оргашв ротово! порожнини при рiзноманiтних захворюваннях залежать не лише вщ продукування лггичних ферменпв мiкроорганiзмiв, але i вiд анатомо^зюлопчних особливостей пародонта та стану ештелда слизово! оболонки ясен [3 - 5]. Слщ зазначити, що до несприятливих чинниюв, яю здiйснюють безпосередню ушкоджувальну дiю на тканини i органи порожнини рота, безсумнiвно вщносяться ошо!дш середники [6 - 8]. На цьому фонi останнiм часом зростае стурбованють незаконним використанням наркотичних речовин, а також тривалим зловживанням ошо!дних препаратiв пацiентами з хрошчними болями, що пов'язано з серйозними ризиками, зокрема, передозуванням чи стшким звиканням [9 - 13]. У зв'язку з чим, детальне вивчення ознак ультраструктурно! органiзацi! у пародонп, що виникають в результатi дп опiо!ду, в перспективi дадуть змогу розробити заходи iмовiрного лiкувального коригуючого впливу, що буде мати не лише теоретичне, але i практичне застосування.
Матерiали i методи. Дослщження здiйснили на 23 бiлих статевозрших щурах-самцях лiнi! "Вiстар", початковою масою 160 г, вiком 4,5 - 6 мюящв. В умовах експерименту тварин подiлили
ARTICLE INFO
Received: 22 June 2019 Accepted: 15 August 2019 Published: 31 August 2019
KEYWORDS
periodontal, rats,
ultrastructural research, opioid.
на двi групи. Перша група - штактш (10). У другш груш щурам (8) протягом 42 дiб вводили щоденно внутрiшньом'язево ошощний аналгетик групи агошспв-антагошспв опiатних рецепторiв Налбуфiн. Початкова доза становила 0,212 мг/кг. Впродовж 5 i 6 тижнiв середню разову терапевтичну дозу збiльшили до 0,252 мг/кг, враховуючи середнiй показник маси тiла щурiв тддостднох групи [14]. В якосп контролю було використано 5 бiлих щурiв-самцiв зрiлого в^. яким вводили внутрiшньом'язево ш'екцп фiзiологiчного розчину. Експериментальнi тварини знаходились в умовах вiварiю i забiр матерiалу проводили згiдно загальноприйнятих правил. Для електронно-шкроскошчного дослiдження використали фрагменти м'яких тканин пародонта в дiлянцi ясенного краю щелеп. Шматочки тканини фшсували в 2,5 % розчинi глютаральдепду, та в 1 % розчиш тетраокису осмiю на фосфатному буферi рН 7,2-7,4, зневоднювали в спиртах i пропiленоксидi та заливали в сумш епоксидних смол з аралдитом. На ультрамiкротомi УМПТЗм виготовляли ультратоню зрiзи, яю контрастували уранiлацетатом та цитратом свинцю i вивчали в електронному мiкроскопi ПЕМ-100-01.
Результати дослщження. Субмiкроскопiчно в епiтелiальнiй пластинцi слизово! оболонки ясен тварин через шють тижнiв отощного впливу спостерiгали виражеш структурнi змiни. В ештелп вшьно! частини ясен у клiтинах базального шару наявнi суттево змiненi ядра, неправильно! форми за рахунок значних швапнацш карiолеми. У свiтлiй карiоплазмi мало рибосомальних гранул, вiдсутнi ядерця. Карiолема ядер мiсцями нечiтко контурована, перинуклеарний простiр незначних розмiрiв, наявш дiлянки його вогнищевого потовщення. Цитоплазма ештелюцилв базального шару об'емна, з безструктурними дiлянками, де нечiтко контуруються тонофiламенти. Проте вiдмiчаегься !х щшьне розташування пучками. Мiтохондрiй небагато, вони мають електронносвiтлий матрикс та мало крист. Мiжклiтиннi контакти нечiткi, мiжклiтиннi простори нерiвномiрнi, вiдмiчаються дiлянки !х потовщення (рис. 1).
Рис. 1. Ультраструктура еттелт выьног частини ясен щура через шжть тижмв при застосуванм отогду. Мтрофотограф1я. Зб. х12000. Еттелюцит базального шару. Неправильно! форми з твагтащями ядро (1), цитоплазма з пучками тонофтамент1в (2), мтохондр1я (3).
Ультраструтурно в ештелп ясенно! борозни виявили також значш змши його кштин. У бiльшостi ештелюцш!в порушуються структурнi компоненти ядер. Характерними ознаками е змiна !х форми, нерiвностi карiолеми з утворенням швапнацш, окремi з них досить глибою. Карiоплазма нерiвномiрноl електронно! щiльностi, наявш свгтш дiлянки, пiдвищена осмiофiлiя. Ядерця вщсутш, або присутнi !х невелию фрагменти. У цитоплазмi клiтин базального шару виявляються i пошкодженi органели, мiтохондрil зi свiтлим матриксом i залишками крист. Тонофiламентiв мало, вони або фрагментоваш, або лiзованi. Мiжклiтиннi контакти нечiткi, нерiвномiрно збiльшенi мiжклiтиннi простори. Для цитоплазми епiтелiоцитiв шипуватого шару характерна наявнiсть осмiофiльних конгломерапв, що утворились внаслiдок пiдвищення кератишзацп (рис. 2).
У клiтинах ештелда прикрiпленоl частини ясен виявляються ядра з глибокими iнвагiнацiями, локалiзацiя гетерохроматину бiля карiолеми. Мiжклiтиннi простори нечпта, широк1.
Рис. 2. Ультраструктура еттелт ясенног борозни щура через шгсть тижнгв при застосуванн отогду. Мжрофотограф1я. Зб. х9000. Неправильног форми ядро (1), електронносв1тла дыянка карюплазми (2), осм1офыьм включення у цитоплазм7 (3).
Рис. 3. Ультраструктура еттелт прикртленог частини ясен щура через ш1сть тижшв при застосуванм отогду. Мжрофотограф1я. Зб. х9000. Ядро (1) 7 цитоплазма (2) еттел1оцита базального шару, твагтащя кар1олеми (3), пошкоджен м1тохондрИ (4).
Ультраструктурш дослщження перюдонта виявили виражеш змши його компонент. В складi пучюв порушене упорядковане розшарування колагенових волокон, спостериаеться !х фрагментащя. Наявний виразний набряк аморфного компоненту мiжклiтинно! речовини сполучно! тканини (рис. 4).
Рис. 4. Ультраструктура перюдонта щура через шгсть тижшв при застосуваннг отогду. Мшрофотограф1я. Зб. х17000. Зм1нен1 пучки колагенових волокон (1), набряк сполучног тканини (2).
Значно змшюеться ультраструктура фiбробластiв. 1х ядра мають неч^ю контури карiолеми, у карiоплазмi значну площу займае гетерохроматин. У цитоплазмi багато пошкоджених органел, нерiвномiрно потовщенi i фрагментованi канальцi ендоплазматично! сiтки, цистерни комплексу Гольдж1. М^охондри набряклi, 3i свiтлим матриксом та зруйнованими кристами, наявш первиннi i вториннi лiзосоми (рис. 5).
Рис. 5. Ультраструктура пергодонта тварини експериментальног групи через шгсть тижнгв при застосувант отогду. Мжрофотограф1я. Зб. х15000. Осмюфтьна карюплазма ядра (1) та зм1нена цитоплазма (2) ф1бробласта, пучок колагенових волокон (3), набрякла сполучна тканина (4).
Електронномшроскошчш дослщження слизово! оболонки ясен тварин проведеш через шють тижшв при застосуванш ошо1ду встановили значш змши структурних компонентiв мiкроциркуляторного русла. В розширених кровонаповнених просвiтах кровоносних капiлярiв вiдмiчаеться сладж-ефект. Ядра ендотелюцитсв приймають неправильну форму внаслiдок швагшацш карiолеми, у карiоплазмi вiдмiчаються скупчення гетерохроматину. У цитоплазмi клiтин наявш гомогенш, безструктурнi дiлянки, у яких наявш зруйноваш органели. У цитоплазматичних дшянках ендотелiю вiдмiчаються нечисельнi шноцитозш пухирцi. Базальна мембрана нерiвномiрна, мюцями потовщена, контури И нечiткi. Периваскулярш простори широкi внаслiдок набряку адвентицй (рис. 6).
Рис. 6. Ультраструктура гемокапгляра власног пластинки слизовог оболонки ясен тварини експериментальног групи через ш1сть тижшв при застосуванм отогду. Мжрофотограф1я. Зб. х12000. Широкий просвт з еритроцитами (1), ядро (2) 7 цитоплазма (3) ендотел1оцита, базальна
мембрана (4).
Субм^оскошчш змши венул проявляються кровонаповненням просвтв, значним набряком цитоплазми ендотелюципв та деструкщею органел. В ендотелюцитах переважають суттево змшеш осмiофiльнi ядра, розширений перинуклеарний проспр, в цитоплазмi наявнi вакуолi та шноцитозш пухирщ. Базальна мембрана погано контуруеться, переважно набрякла, розширенi периваскулярш простори (рис. 7).
Рис. 7. Ультраструктура венули власног пластинки слизовог оболонки ясен тварини експериментально! групи через 6 тижшв при застосувант отогду. Мжрофотограф1я. Зб. х12000.
Ядро (1) i цитоплазма (2) ендотелюцита, просвт з еритроцитами (3), базальна мембрана (4).
Висновки. При шеститижневому введенш отощного аналгетика виявляли деструктивт змши у вах клiтинних компонентах пародонта з поступовим наростанням проявiв запального процесу, що зумовлено розвитком компенсаторно-пристосувальних процеав в данiй д1лянщ. Ультраструктурно в ештелп ясен виявляли ушкодження цитоплазми епiтелiоцитiв, суттево змшеш ядра, вiдсутнiсть ядерцiв, дiлянки потовщення мiжклiтинних просторiв, пошкодженi органели, мггохондрп iз залишками крист. У перюдонп визначали субмiкроскопiчнi змiни фiбробластiв, фрагментащю iз розшаруванням пучив колагенових волокон, виразний набряк аморфного компоненту м1жкштинно1 речовини. В розширених кровонаповнених просвггах кровоносних капiлярiв вiдмiчаеться сладж-ефект, в ендотелп - нечисельнi пiноцитознi пухирщ. Ультраструктурнi прояви в тканинах пародонта, яю виникають при ди отощного анальгетика впродовж шести тижнiв можуть слугувати морфологiчним базисом для подальшого вивчення динамiки субмiкроскопiчних змiн на шзшх термiнах отощного впливу в експерименп.
Л1ТЕРАТУРА
1. Brauchle F., Noack, M., & Reich, E. (2013). Impact of periodontal disease and periodontal therapy on oral health-related quality of life. Int. Dental J, 63, 306-311. PMID: 24716244
2. Rosier BT, de Jager M, Zaura E, Krom BP. (2014) Historical and contemporary hypotheses on the development of oral diseases: are we there yet? Front Cell Infect. Microbiol. 4:92 doi: 10.3389/fcimb.2014.00092.
3. Слинько Ю.А. Морфофункциональные особенности строения эпителия десны крыс при разном двигательном режиме их матерей в период вынашивания / Ю.Я. Слинько, Г.И. Губина-Вакулик, Е.Н. Рябоконь, И.И. Соколова // Укра1нський стоматолопчний альманах. 2013. № 6 С. 6 - 9
4. Бакунин И.И. Ультраструктурный анализ слизистой оболочки десны при хроническом гингивите / И.И.Бакулин: Автореф. дис. на соиск. науч. степ. кандмеднаук Спец. 14.03.02 "Патологическая анатомия". 2010. 95 с.
5. Подгаецкая О.Е. Этиология и патогенез хронического генерализованного пародонтита (обзор литературы) / О.Е. Подгаецкая, С.А. Шнайдер // Буковинський медичний вкник. 2007. 11 (1). С. 127-130.
6. Зубачик В.М. Стан оргашв порожнини рота в оаб, яю зловживають наркотичними речовинами. Огляд лгтератури / В.М.Зубачик, 1.Р.Федун // Новини стоматологii. 2015. №3. С. 71-74.
7. Фш В.Б. Морфолопя тканин пародонта щурiв при шеститижневiй дii опiоiду / В.Б.Фж // Свiт медицини та бюлогп. 2018. 4 (66). С. 218-222. DOI 10.26724/2079-8334-2018-4-66-222-226
8. Fik VB, Paltov EV, Lohash MV, Kryvko YuYa (2017) Pecularities of morphological manifestation of the periodontal tissue in experimental animals against the ground of a short-term effect of opioid analgesic. Deutsch. Wissenscaftsch. Jul 25; 2: 54-8. D0I:10.19221/2017215
9. Berna C, Kulich RJ, Rathmell JP. (2015) Tapering long-term opioid therapy in chronic noncancer pain: Evidence and recommendations for everyday practice. Mayo Clin Proc. 90:828-42. doi: 10.1016/j.mayocp.2015.04.003.
10. Dowell D, Haegerich TM, Chou R. (2016) CDC guideline for prescribing opioids for chronic pain—United States. MMWR Recomm Rep. 65(1). DOI: 10.1001/jama.2016.1464
11. Jamison RN, Sheehan KA, Scanlan E, Matthews M, Ross EL. (2014) Beliefs and attitudes about opioid prescribing and chronic pain management: survey of primary care providers. J Opioid Manag. 10:375-82. doi: 10.5055/jom.2014.0234.
12. Garg RK, Fulton-Kehoe D, Franklin GM (2017). Patterns of opioid use and risk of opioid overdose death among Medicaid patients. Med Care 55: 661-68. doi: 10.1097/MLR.0000000000000738.
13. Garg RK, Fulton-Kehoe D, Franklin GM (2017). Patterns of opioid use and risk of opioid overdose death among Medicaid patients. Med Care 55: 661-668. doi: 10.1097/MLR.0000000000000738.
14. Paltov, YV, Fik, VB, Vilchova, IV, Onisco, RM, Fitkalo, OS., Kryvko Y.Ya (2013) Ukraine. Patent No. 76565. Kyiv: Ukrainian Institute of Intellectual Property (Ukrpatent).