Экспериментальная модель острого жирового гепатоза на беременных крысах Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

ФУНДАМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

83

а повышенное содержание микрочастиц NK-клеток связано с нарушением механизмов развития иммунологической толерантности, а именно дефектом в индукции гибели активированных NK-клеток. Установлено, что микрочастицы женщин с физиологической беременностью снижают экспрессию рецептора для ^-8 (р < 0,05) и повышают экспрессию адгезионных молекул CD18 (р < 0,05) и CD54 (р< 0,05) клетками линии ТНР-1. Микрочастицы женщин с гестозом по сравнению с микрочастицами женщин с физиологической беременностью повышают экспрессию CD181 (р < 0,05) клетками линии ТНР-1.

выводы

Гестоз по сравнению с физиологической беременностью характеризуется повышенной экс-

прессией отдельных адгезионных рецепторов и повышенной способностью лимфоцитов и моноцитов периферической крови к адгезии к активированным эндотелиальным клеткам линии Ea.Hy926, что определяет предрасположенность лимфоцитов и моноцитов к интенсификации миграции в децидуальную оболочку при гестозе. Развитие гестоза сопровождается увеличением количества микрочастиц плазмы крови, образованных нейтрофилами и моноцитами, что отражает развитие воспалительной реакции при данной патологии. Микрочастицы плазмы периферической крови женщин с физиологической беременностью и с гестозом обладают разнонаправленными эффектами на клетки в условиях in vitro, что указывает на возможность существования регуляторной функции микрочастиц.

экспериментальная модель острого жирового гепатоза на беременных крысах

© л.С. полянских, н. с., н.н. Балашова, м. н. с.

ФГБНУ «НИИ акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта», г. Санкт-Петербург, Россия

Актуальность проблемы

Острый жировой гепатоз (ОЖГ) является одним из самых тяжелых осложнений беременности (1 на 13 000 родов), приводящих к высокой материнской и перинатальной смертности. Успех лечения определяется прежде всего своевременным распознаванием этого заболевания и ранним родоразрешением, а также совершенствованием методов интенсивной фармакотерапии.

В настоящее время существует около 20 моделей печеночной патологии. У животных наиболее близкие к человеку морфологические изменения паренхимы печени возникают в экспериментальных условиях при введении гепатотоксинов. Это наиболее эффективный способ индуцирования патологии печени у лабораторных животных.

К наиболее распространенным гепатотоксинам для создания моделей повреждения печени относятся: четыреххлористый углерод, ацетаминофен, ацетон, D-галактозамин гидрохлорид, этанол, а-нафтилизотиоцианат и др. Оральное, внутри-брюшинное, подкожное или ингаляционное введение этих гепатотоксинов приводит к острому, обратимому повреждению печени, дистрофическим изменениям печени, почек и других органов, поражению ЦНС.

В литературе также имеются данные о моделировании липемии, вызываемой введением препаратов тритон WR-1339 (тилоксапол) и поликса-мер-407 у мышей. Преимуществами этих моделей являются простота воспроизведения, низкая токсичность полимеров, дозозависимый эффект со-

единений при воспроизведении липемии разной степени выраженности.

Цель исследования: создать экспериментальную модель ОЖГ на беременных самках крыс.

Материалы и методы исследования

Моделирование ОЖГ проводили на крысах линии Вистар на 15-18-й день беременности. Всего в эксперименте было использовано 24 самки крыс, из которых были сформированы две группы животных:

• контрольная группа (п = 8) получала с 15-го по 18-й день беременности инъекции растворителя (стерильная вода для приготовления лекарственных форм для инъекций);

• подопытная группа (п = 16) получала в те же сроки беременности инъекции препарата тритон WR-1339 ^та-АЫйЛ, США).

Ранее проведенные пилотные исследования показали, что стабильный гепатотоксический эффект наблюдается только в случае ежедневного назначения препарата в дозе не менее 300 мг/кг более 3 дней. Основываясь на этих данных, с целью моделирования ОЖГ животным подопытной группы внутрибрюшинно вводили препарат тритон WR-1339 в дозе 300 мг/кг ежедневно в течение 4 дней. О развитии токсического поражения печени судили по изменениям биохимических показателей крови. При биохимических исследованиях определяли 12 основных показателей: активность трансаминаз (АСТ, АЛТ), содержание желчных кислот, билирубина, активность

ЖУРНАЛЪ АКУШЕРСТВА и ЖЕНСКИХЪ БОЛМНЕЙ

ТОМ LXVСПЕЦВЫПУСК 2016

ISSN 1684-0461

Международная конференция «Репродуктивная медицина: взгляд молодых — 2016» International conference "Reproductive medicine: young scientists' overlook — 2016"

холинэстеразы, глутаматдегидрогеназы (ГлДГ), лактатдегидрогеназы (ЛДГ), концентрацию общего белка, мочевины, триглицеридов, холестерина, активность щелочной фосфатазы (ЩФ). На протяжении эксперимента животных обеих групп ежедневно осматривали, определяли массу тела для расчета дозы вводимого препарата и сравнительной оценки относительной массы печени. Эвтаназию всех животных осуществляли на 19-й день беременности. Далее готовили гистологические срезы толщиной 8-10 мкм. Препараты исследовали при помощи микроскопа (ув. ><400).

Результаты исследования

За время эксперимента случаев гибели животных зафиксировано не было. Однако на фоне препарата в подопытной группе отмечались вялость и апатия животных. При биохимических исследованиях сыворотки крови определяли 12 основных показателей. Наиболее значительные изменения были отмечены для показателей липидного обмена — триглицеридов и холестерина, уровень которых вырос в 80 и 15 раз соответственно (р < 0,002 и 0,02; здесь и далее, если не указано иначе, критерий Манна-Уитни с поправками на множественные сравнения и на непрерывность). Также значительно увеличилась активность ЛДГ — в 5,4 раза (р < 0,002), концентрация желчных кислот и активность ГлДГ — в 3 раза (р < 0,001 и 0,05), АСТ — в 2 раза (р < 0,001), АЛТ — в 1,3 раза (р < 0,01). При этом наблюдалось снижение в сыворотке крови экспериментальных животных концентрации холинэстеразы и уровня общего белка (в 1,5 раза) (р < 0,001 и 0,002). Вместе с тем активность ЩФ, уровни билирубина и мочевины оставались без значимых изменений (р > 0,05).

При макроскопическом исследовании печень подопытных крыс была бледная, рыхлая, с оливковым оттенком и наличием вкраплений. При этом масса органа соответствовала результатам в контрольной группе (медианы в контрольной и подопытной группах составили 4,32 и 4,30 г на 100 г массы животного соответственно р = 1,00).

Гистологическое исследование образцов печени экспериментальной группы показало, что балочное строение сохранено лишь в половине исследуемых случаев — 50 % Дистрофические изменения гепатоцитов выявлены во всех исследуемых образцах. Паренхиматозная жировая дистрофия печени присутствовала в 44 % случаев. Выявлялись ожирение с некробиозом гепатоцитов и ожирение с мезенхимально-клеточной реакцией без перестройки дольковых структур печени. В 100 % случаев (у всех 16 животных) присутствовала жировая дистрофия (вероятность формирования жировой дистрофии выше 0,75 с р = 0,01, посчитано точным биномиальным критерием). При этом превалировала мелкокапельная и крупнокапельная жировая дистрофия, определяющаяся в 75 и 25 % случаев соответственно.

Выводы

По совокупности результатов биохимических и гистологических исследований можно сделать вывод о том, что 4-дневное внутрибрюшинное введение беременным крысам (15-18-й день беременности) препарата тритон WR-1339 в дозе 300 мг/кг приводит к токсическому поражению печени по типу ОЖГ. Данная модель печеночной патологии может быть использована для проведения скрининга как вновь синтезированных, так и применяющихся в клинике фармакологических средств, обладающих гепатотропной активностью.

иммуногистохимическая верификация системы kiss 1/kiss 1r в органах плода человека © В.Р. Родичкина 1, студ., А.О. Дробинцева 2, с. н. с.

1 Санкт-Петербургский государственный университет, г. Санкт-Петербург, Россия;

2 ФГБНУ «НИИ акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта», г Санкт-Петербург, Россия

Актуальность проблемы

По результатам многочисленных исследований последнего десятилетия известно, что кис-спептины (КП) и их рецепторы (KISS1R) играют ключевую роль во многих физиологических процессах организма, таких как половое созревание, нормальное функционирование репродуктивной системы, секреция инсулина и пищевой статус, вазоконстрикция. Экспрессия кисспептинов и их рецепторов была выявлена в различных тканях организма, причем не только в центральных орга-

нах (гипофиз, гипоталамус), в которых изначально была определена их функция, но и в органах репродуктивной системы, поджелудочной железе, пищеводе, почках и др. До сих пор идет определение роли и значимости кисспептинов в периферических тканях и органах. Функциональная значимость и локализация системы KISS1/KISS1R при внутриутробном развитии до сих пор не изучена.

Цель исследования: выявление системы KISS1/KISS1R в органах плода человека на разных сроках развития (23-42 недели).

■ ЖУРИАЛЪ АКПИЕРСШ " ЖЕНСШХЪ БОЛМНЕЙ

ТОМ LXVСПЕЦВЫПУСК 2016

ISSN 1684-0461