Исследование белка кисспептина в эндометрии человека при эндометриозе Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

ГИНЕКОЛОГИЯ

39

казавших повышение экспрессии фактора роста нервов в очагах эндометриоза, способствующего развитию нейропатической боли. Для эндометриоза, особенно для его глубокой инфильтративной формы, характерны два потенцирующих друг друга процесса: усиление иннервации (нейрогенез) и васкуляризации (неоангиогенез) в местах прикрепления эндометриоидных имплантов. Важная роль в обнаружении нервных волокон отводится белку PGP 9.5, являющемуся общим нейрональ-ным маркером, который окрашивает миелиновые и слабомиелинизированные нервы а-, Р-, у-, 5-, B- и C-волокна.

Цель исследования: изучить уровень экспрессии маркера нервных волокон белка PGP 9.5 в эн-дометриоидном инфильтрате у женщин с различной степенью тяжести болевого синдрома.

Материалы и методы исследования

Обследованы 28 больных с инфильтративной формой эндометриоза. Интенсивность боли определялась в соответствии с 10-балльной визуально-аналоговой шкалой (ВАШ); при количестве баллов от 1 до 3 боль считали легкой; от 4 до 6 — средней степени интенсивности; от 7 до 10 — тяжелой. Для определения характера боли, систематизации симптомов нейропатической боли и анализа ее интенсивности была использована шкала оценки нейропатической боли Pain Detect. Сумма баллов более 19 означает вероятное наличие у пациента нейропатического компонента боли. Получение эндометриоидного инфильтрата для иммуногистохимического исследования осуществляли во время операционной лапароскопии. Иммуноморфологическое исследование

проводили на серийных парафиновых срезах толщиной 2 мкм по стандартной методике с применением маркера нервных волокон белка PGP 9.5. Исследование проводили при увеличении 40. Долю занимаемой нервной ткани и плотность распределения нервных волокон рассчитывали с помощью программы ВидеоТест-Морфология 5,0 (ВИДЕОТЕСТ, ООО, Россия) при одинаковых настройках камеры и микроскопа. Статистическая обработка материала проводилась с использованием пакета прикладных программ Microsoft Excel 2013 и Statistica 10.0 for Windows.

Результаты исследования

Средняя площадь относительной экспрессии нейронального маркера белка PGP 9.5 в группе 28 пациенток с эндометриоидным инфильтратом составила 10,5 ± 1,8, средняя оптическая плотность — 0,23 ± 0,01. При этом площадь экспрессии увеличивалась с утяжелением степени болевого синдрома. Имеется значимая корреляция площади экспрессии белка PGP 9.5 с обеими шкалами боли. Корреляция площади экспрессии со шкалой ВАШ (R = 0,7, p < 0,05) и сильная корреляция со школой Pain Detect (R = 0,59, p< 0,05). Оптическая плотность нейронального маркера белка PGP 9.5 в исследуемых инфильтратах не коррелирует ни с одной шкалой боли.

Выводы

У женщин с нейропатической болью имеется прямая зависимость тяжести болевого синдрома от площади экспрессии нейронального маркера PGP 9.5, что связано с патологическим нейрогене-зом в эндометриоидном инфильтрате.

ИССЛЕДОВАНИЕ БЕЛКА КИССПЕПТИНА В ЭНДОМЕТРИИ ЧЕЛОВЕКА ПРИ ЭНДОМЕТРИОЗЕ

© Т.С. Клейменова, студ., А.О. Дробинцева, с. н. с.

ФГБНУ «НИИ акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта», г. Санкт-Петербург, Россия

Актуальность проблемы

Эндометриоз — это одно из самых загадочных и актуальных заболеваний в современной гинекологии. Частота заболеваемости эндометриозом составляет около 10 % от всех остальных гинекологических заболеваний. Наружный генитальный эндометриоз (НГЭ) характеризуется бесплодием, нарушением менструального цикла, тазовыми болями, которые могут существенно ухудшать качество жизни пациенток, требовать длительного и дорогостоящего лечения. Белок кисспептин (KISS1) кодируется геном К1ББ1, первоначально известным как ген, супрессирующий метастази-рование меланомы. В данный момент отсутству-

ют исследования, отвечающие на вопрос о роли кисспептина при НГЭ.

Цель исследования: оценить экспрессию KISS1 в ткани эндометрия у пациенток с НГЭ.

Материалы и методы исследования

В иммуногистохимическое (ИГХ) исследование было включено 23 пациентки с НГЭ в возрасте от 24 до 36 лет (средний возраст — 27,6 ± 1,3 года). Диагноз НГЭ устанавливался с помощью лапароскопии. Объектом морфометрического исследования была выбрана ткань эндометрия из полости матки, полученная из архива отделения патомор-фологии ФГБНУ «НИИ АГиР им. Д О. Отта».

ЖУРНАЛ! АКУШЕРСТВА - ЖЕНСКИХЪ БОЛМНЕЙ

ТОМ LXVСПЕЦВЫПУСК 2016

ISSN 1684-0461 ■

Международная конференция «Репродуктивная медицина: взгляд молодых — 2016» International conference "Reproductive medicine: young scientists' overlook — 2016"

Для ИГХ-исследования использовались первичные моноклональные антитела к кисспептину (1 : 140, Abcam, Великобритания). В качестве вторичных антител и проявителя использовали En Vision detection System Pedoxidose DAB Rabbit/ Mouse (Dako, Дания). В качестве негативного контроля производилась ИГХ-реакция без использования первичных антител. Для оценки результатов ИГХ-окрашивания проводили мор-фометрическое исследование с использованием системы компьютерного анализа микроскопических изображений, состоящей из микроскопа Olympus (Япония), цифровой камеры Olympus-BX46 и программного обеспечения CellSens Entry. Морфометрический анализ проводился в программе Vidеotest Morphology 5.2 (Россия). В каждом случае анализировали 5 полей зрения при увеличении ><400. Статистическая обработка проводилась при помощи аналитического программного комплекса Statistica 7.0.

Результаты исследования

Проведенное иммуногистохимическое исследование выявило экспрессию кисспептина у 22 пациенток, страдающих НГЭ. У одной пациентки не был выявлен белок кисспептин. В нашем исследовании изучались II (n = 19) и III (n = 3) степени НГЭ, при

этом было показано, что уровень экспрессии KISS1 у пациенток с более тяжелой формой заболевания был достоверно ниже, чем у пациенток с более легкой степенью. Анализ полученных данных показал, что KISS1 в большей степени экспрессиру-ется цилиндрическими клетками эндометриальной железы, а не соединительнотканными клетками стромы. Наблюдалась тенденция к уменьшению экспрессии KISS1 с возрастом, однако она не была статистически достоверной, коэффициент корреляции кисспептина с возрастом составил — 0,37. Это может свидетельствовать о том, что с возрастом организм более восприимчив к возникновению эндометриоза.

выводы

Кисспетин влияет на экспрессию матриксных металлопротеиназ (ММР-2,9), которые в свою очередь играют важную роль в процессе инвазии эндометриальных клеток в различные ткани и органы. Известно, что система кисспептина и его рецептора подавляет активность ММР, нами была показана сниженная экспрессия KISS1 при НГЭ, таким образом, можно предположить, что ММР не подавляются, что может приводить к активной миграции (инвазии клеток) и к агрессивному течению эндометриоза.

экспрессия рецепторов прогестерона и эстрадиола в эндометрии у женщин с нарушениями в репродуктивной системе

© к.ю. пономаренко, асп., А.в. Мороцкая, инт., в.А. грекова, студ.

Северо-Западный государственный медицинский университет имени И.И. Мечникова, педиатрический факультет; Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова, лечебный факультет, г Санкт-Петербург, Россия

Актуальность проблемы

Патология репродуктивной системы является одной из актуальных проблем женского здоровья. Каждый шестой-седьмой брак является бесплодным; до 20 % желанных беременностей прерывается досрочно. У женщин с бесплодием при регулярном менструальном цикле (м. ц.) в половине случаев имеет место недостаточность лютеиновой фазы, а в 10-15 % случаев определяется ановуляция. Неудачи имплантации бластоцисты повышают процент репродуктивных потерь при вспомогательных репродуктивных технологиях. В настоящее время окончательно неясна роль эндометриального фактора в генезе нарушений в репродуктивной системе.

Цель исследования: изучить экспрессию рецепторов прогестерона и эстрадиола в функциональном слое эндометрия у женщин с патологией репродуктивной системы.

Материалы и методы исследования

Обследовано 44 женщины от 24 до 40 лет. Критериями включения были: возраст 18- 40 лет; отягощенный репродуктивный анамнез (привычная потеря беременности до 12 недель, бесплодие, неудачные попытки экстракорпорального оплодотворения); хроническая ановуляция и/или недостаточность лютеиновой фазы м. ц.; нормальный уровень гонадотропи-нов, пролактина и андрогенов в периферической крови; эутиреоз. Критериями исключения являлись: тяжелые соматические заболевания; злокачественные новообразования; тромбофилия; аномалии развития матки; эндометриоидная болезнь; клинически значимая миома матки (суб-мукозный узел, интрамуральный узел 5 см и более, размеры матки 12 недель и более); инфекции урогенитального тракта; прием гормональных препаратов в течение 3 месяцев до включения в исследование.

■ ЖУРИАЛЪ АКПИЕРСШ " ЖЕНСШХЪ БОЛМНЕЙ

ТОМ LXVСПЕЦВЫПУСК 2016

ISSN 1684-0461