CC BY
42
© Коллектив авторов, 2017 УДК 618.145-007.415-07
DOI - https://doi.org/10.14300/mnnc.2017.12124 ISSN - 2073-8137
МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА НЕЙРОЭНДОКРИННЫХ КЛЕТОК ПРИ ГЕНИТАЛЬНОМ ЭНДОМЕТРИОЗЕ
Г. А. Демяшкин 12, М. Р. Оразов 3, Я. Р. Закирова 3, Н. В. Жарков 1, М. А. Батов 4, Я. С. Борисов 4
1 Научный клинический центр ОАО «Российские железные дороги», Москва
2 Первый Московский государственный медицинский университет им. И. М. Сеченова, Россия
3 Российский университет дружбы народов, Москва
4 Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н. И. Пирогова, Москва
MORPHOFUNCTIONAL CHARACTERISTICS OF NEUROENDOCRINE CELLS IN GENITAL ENDOMETRIOSIS
Demyashkin G. A. 1 2, Orazov M. R. 3, Zakirova Ya. R. 3, Zharkov N. V. 2, Batov M. A. 4, Borisov Ya. S. 4
1 Scientific Clinical Center JSC «Russian Railways», Moscow
2 I. M. Sechenov First Moscow State Medical University, Moscow
3 The People's Friendship University of Russia, Moscow
4 Pirogov Russian National Research Medical University, Moscow
Изучен нейроэндокринный компонент нейроиммунногенного воспаления при генитальном эндометрио-зе. В клиническом исследовании проводили анализ фрагментов эндометриоидных кист и биоптатов эндометрия у женщин с генитальным эндометриозом в двух группах: I - без болевого синдрома; II - с болевым синдромом. Использованы методы: световой микроскопии, иммуногистохимии, ПЦР-РВ. Результаты: количество нейроэндокринных клеток (увеличение экспрессии NSE) выше во II группе у пациенток с болевым синдромом почти в 2 раза (28,7±3,1 %) по сравнению с I группой - без болевого синдрома (15,6±2,4 %). Экспрессия S100: I группа - 0,11±0,09, II группа - 0,36±0,11. Экспрессия PGP 9.5: I группа - 0,8±0,21; II группа -1,26±0,01. Экспрессия TAC1, TRPV1, SCN9A, SCN11A в образцах эндометриоидной кисты значительно превышала пороговый уровень (р<0,05). Экспрессия TRPA1 и P2RX3 отличалась незначительно по сравнению с контролем. Заключение: увеличение количества нейроэндокринных клеток в очаге нейроиммунногенного воспаления при эндометриоидных кистах яичника является одним из ключевых триггеров в патогенезе эндо-метриоз-ассоциированных тазовых болей. NSE следует рассматривать в качестве перспективного маркера генитального эндометриоза.
Ключевые слова: генитальный эндометриоз, NSE, S100, PGP 9.5, хроническая тазовая боль
Objective: to study the neuroendocrine component of neuroimmunogenic inflammation in genital endometriosis. Materials: in the clinical study, fragments of endometrioid cysts and endometrial biopsy specimens were analyzed in women with genital endometriosis in two groups: I group - without pain syndrome; II group - with pain syndrome. Methods: light microscopy, immunohistochemistry, PCR-RT. Results: The number of neuroendocrine cells (increased NSE expression) was higher in the II group in patients with pain syndrome by almost 2 times (28.7±3.1 %) compared to group I without pain syndrome (15.6±2.4 %). Expression of S100: Group I - 0.11±0.09, Group II - 0.36±0.11. Expression of PGP 9.5: Group I - 0.8±0.21; Group II - 1.26±0.01. Expression of TAC1, TRPV1, SCN9A, SCN11A in endometrioid cyst samples was significantly higher than the threshold level (p<0.05). Expression of TRPA1 and P2RX3 differed insignificantly compared with the control. Conclusion: an increase in the number of neuroendocrine cells in the focus of neuroimmunogenic inflammation in endometrioid ovarian cysts is one of the key triggers in the pathogenesis of endometriosis-associated pelvic pain. NSE should be considered as a promising marker of genital endometriosis.
Key words: genital endometriosis, NSE, S100, PGP 9.5, chronic pelvic pain
оригинальные исследования
Морфология
Зндометриоз - хроническое, доброкачественное, эстроген-зависимое, мультифак-ториальное гинекологическое заболевание, при котором за пределами матки происходит разрастание элементов дифферонов эндометрия, в частности клеток железистого эпителия, образующего маточные железы, и соответствующих клеток стромы [1, 3, 4, 11, 18]. Эндометриоз обнаруживают у 10-15 % женщин репродуктивного возраста с пиком в интервале от 25 до 35 лет [2, 3, 11, 18].
В зависимости от локализации различают ге-нитальный (внутренний и наружный) и экстраге-нитальный типы эндометриоза [1, 4]. Первый тип характеризуется наличием очагов поражения в пределах половых органов, в частности в яичниках с образованием эндометриоидных кист - наиболее часто встречающаяся форма генитального эндометриоза, также называемая «шоколадная киста» [1, 3, 4]. При этом самым распространенным и в то же время специфическим симптомом является эн-дометриоз-ассоциированная хроническая тазовая боль (ХТБ), патогенез которой, как и механизм развития овариального эндометриоза в целом, остается неясным и требует дальнейшего изучения. При этом одним из ключевых механизмов развития хТб являются регенерация и миелинизация нервных волокон в очаге эндометриоидного поражения [6,10, 11, 16] со специфическими провоспалительными изменениями [9, 15].
Несмотря на то что достоверно установлена взаимосвязь между плотностью нервных волокон и ней-рогенным воспалением, остаются малоизученными специфические регуляторы активации роста этих волокон в зоне эндометриоидного поражения при действии воспалительных факторов [9, 13].
Детальное изучение типовых процессов иннервации в местах эндометриоидных очагов стало возможным с применением некоторых специфических функциональных маркеров. Белок Protein Gene Product 9.5 (PGP 9.5) является высокоспецифичным пан-нейрональным маркером. Так, обнаружение этого белка указывает на наличие миелиновых и безми-елиновых нервных волокон [16]. Выявление группы кальций-связывающих белков S100 нейроэктодер-мальной природы необходимо для верификации отдельных миелиновых волокон, в том числе леммоци-тов [9, 13].
Рост нервных волокон напрямую связан с изменением экспрессии ключевых генов, ответственных за ноцицептивную чувствительность [12]. К таким продуктам экспрессии относятся катионные каналы с транзиторным рецепторным потенциалом (TRP channels), в частности TRPA1 (анкириновые) и TRPV1 (ванилоидные). Эти каналы необходимы для формирования гиперчувствительности к тепловым и механическим раздражителям в условиях хронического воспаления. Выявленное повышение уровня имму-нореактивности TRPV1 в эндометриоидных очагах сопровождается синдромом ХТБ [7]. Другие гены, кодирующие потенциал-зависимые натриевые каналы SCN9A, SCN11A, также влияют на ноцицепцию, обеспечивая более активный ответ на раздражитель при ряде болевых состояний воспалительного характера [12]. Считается, что развитие механической гиперал-гезии путем метаботропного ответа на выделяющийся из окружающих клеток АТФ в условиях воспаления связано с семейством потенциал-зависимых пури-
нергических рецепторов P2X [17]. Не менее важным геном-регулятором ноцицепции является ТAC1, который кодирует субстанцию P и осуществляет передачу болевого сигнала в центральной нервной системе (ЦНС) [12].
Несмотря на наличие множества белков-участников ХТБ, остается малоизученной роль нейроэн-докринного компонента. Существует предположение, что выделяемые нейроэндокринными клетками биогенные амины и пептидные гормоны участвуют в патогенезе ХТБ. Для обнаружения нейроэндокрино-цитов используют специфический маркер - нейрон-специфическая енолаза (NSE) [20].
Цель исследования: изучение нейроэндокринного компонента воспаления при генитальном эндометри-озе, сопровождаемого болевым синдромом.
Материал и методы. Выборочную совокупность составили женщины в возрасте 35±5 лет (n=42). Критерием включения в исследование было наличие эн-дометриоидной кисты яичника. Пациентки были ран-домизированы на 2 группы. Первая группа включила 11 человек с бесплодием и наружным генитальным эндометриозом (НГЭ) без тазовой боли. Вторая группа - 31 пациентку с наружным генитальным эндометриозом, выраженным тазовым болевым синдромом, не получавших предварительно гормональной терапии.
Всем пациенткам было выполнено оперативное лечение в объеме лапароскопической цистэктомии и/или резекции яичника, а также аспирационная биопсия эндометрия. Материалом для исследования были капсула эндометриоидной кисты, прилежащие к ней ткани яичника и аспират эндометрия. Исследование проводилось методами световой микроскопии, иммуногистохимии и ПЦР-диагностики.
Морфологическое исследование. Для гистологического исследования фрагментов стенок эндо-метриоидных кист использовали стандартный метод (фиксация формалином, заливка в парафин, окраска гематоксилином и эозином).
ИГХ-исследование проводили по стандартному протоколу в автоматическом режиме в иммуногисто-стейнере Bond-Max («Leica», Германия). Первичные антитела (в готовом к использованию разведении), их классы Ig и клоны приведены в таблице. Вторичные антитела (антимышиные) - кроличьи Cell Marque. Для каждого маркёра выполнялись контрольные исследования с целью исключения псевдопозитивных и псевдонегативных результатов. Ядра клеток докрашивали гематоксилином Mayer. Интенсивность окрашивания срезов оценивали согласно рекомендациям [4, 8] (ve): «-» - отсутствие экспрессии; «+» - слабая экспрессия (1-10 % клеток); «++» - умеренная экспрессия (11-50 % клеток); «+++» - выраженная экспрессия (высокоинтенсивная иммунопероксидазная реакция, >51 % клеток).
Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени (ПЦР-РВ). Исследование фрагментов эндометриоидных кист и биоптатов эндометрия проводили согласно стандартному протоколу (стабилизация, гомогенизация, экстракция РНК, синтез и выделение кДНК). Нормирование выполнено относительно референсных генов домашнего хозяйства 18S, B2M, GAPDH. Гены и последовательность праймеров: TRPA1, forward, 5'-tggacaccttcttcttgcatt-3', reverse, 5'-teatccatttcatgcagcac-3';TfîPU1,forward,5'-agagtcacg-ctggcaacc-3', reverse, 5'-ggcagagactctccatcacac-3'; SCN9A, forward, 5'-caacttttaagggatggacga-3', reverse,
5'-tcatatttgggctgcttgtct-3'; SCN11A, forward, 5'-acctgag-cctgaacaacagg-3', reverse, 5'-tttgaactctctggctcgtg-3'; P2RX3, forward, 5'-ggcctttacttctgtgggagt-3', reverse, 5'-aaacttcttggctttgtactggtc-3'; TAC1, forward, 5'-gcctcag-cagttctttggat-3', reverse, 5'-agcctttaacagggccactt-3'.
Полученные результаты статистически обрабатывали с использованием программного пакета SPSS
Результаты. Микроскопическое описание эн-дометриоидных кист яичников I и II групп. Кисты выстланы кубическим эпителием с единичными реснитчатыми клетками; имеются частицы сплющенных эндометриоидных желез, а также отложения гема-тина и гемосидерина (локальный экстравазальный гемосидероз). Индекс васкуляризации высокий (рис. 1).
Данные иммуногистохимического исследования. В группе пациенток с болевым синдромом отмечается стабильно высокая (<^е+/3») положительная реакция на антитела к NSE в эпителиальной выстилке эндометриоидных желез, а также в нейроэндокринных клетках, которые лежат маленькими группами, сопровождая аденоматозный компонент и кровеносные сосуды. Мелкодисперсные гранулы визуализируются в нейроэндокринных клетках, образующих островки в
7.5 for Windows (IBM Analytics, США). Рассчитывали среднеарифметические и среднеквадратичные отклонения. Количественные данные, полученные в ходе ПЦР-РВ, были проанализированы с использованием рангового дисперсионного анализа ANOVA. Для сравнения двух выборок использовали t-критерий с уровнем значимости p<0,05.
интерстициальной ткани (<^е+/2»). Средний уровень цитоплазматической иммунной реакции с антителами на NSE присутствует в эпителии эндометрио-идных желез и нейроэндокринных клеток в группе с безболевым синдромом (рис. 1). S100 в биоптатах II группы демонстрирует положительную реакцию в леммоцитах миелиновых нервных волокон (<^е+/3»), тогда как в леммоцитах и мантийных клетках нервных волокон I группы уровень иммунной реакции снижен (<^е+/2»). Следует отметить разницу в плотности занимаемого волокнами ареала (в разных полях зрения при одинаковом увеличении микроскопа), а также в толщине нервных волокон: у пациенток II группы в эндометриоидных кистах эти показатели в два раза выше по сравнению с аналогичными показателями у пациенток I группы. На увеличение плотности на единицу площади, занимаемой миелиновыми и
Таблица
Иммуногистохимическая реакция (используемые антитела)
Антитела (фирменное название) Клон, Ig класс, фирма, разведение Специфичность и характеристика
БЕЛКИ КОМПОНЕНТОВ НЕРВНОЙ ТКАНИ
Mouse Monoclonal Antibody Neurospecific Enolase (NSE) Clone MRQ-55, IgG2b Cell Marque Цитоплазматический маркер. В норме: тело нейрона, нейроэндокринные клетки
Mouse Monoclonal Antibody S100 Protein Clone EP186, IgG1 Bio SB Цитоплазматический маркер. В норме: клетки, производные ганглиозной пластинки (шванновские клетки, меланоциты и т. д.)
Mouse Monoclonal Antibody Protein Gene Product 9.5 (PGP 9.5) Clone BSB-46, Ig2b Bio SB Цитоплазматический маркер. В норме: нейроны, ми-елиновые и безмиелиновые нервные волокна ЦНС и ПНС
ФАКТОРЫ ВОСПАЛЕНИЯ
Mouse Monoclonal Antibody CD10 Clone 56C6, IgG1 Novocastra™ Трансмембранный маркер. В норме: предшественники В-лимфоцитов; миоэпителиоциты протоков молочных желез и желчных канальцев, микроворсинки эпителия проксимального отдела нефрона
Mouse Monoclonal Antibody IL-1ß Clone E7-2-hIL1ß, IgG2b Santa Cruz Biotechnology, Inc Цитоплазматический маркер. Продуцируется активированными макрофагами. Провоспалительный цитокин способствует активации лимфоцитов и их делению
РЕЦЕПТОРЫ ЖЕНСКИХ ПОЛОВЫХ ГОРМОНОВ
Mouse Monoclonal Antibody Estrogen receptor (ER) Clone 6F11, IgG1 Novocastra™ Ядерный маркер. В норме: клетки эндометрия, яичника и миометрия, а также клетки протоков молочных желез. Клетки-мишени: матка, влагалище, мочеиспускательный канал, молочные железы, печень, гипоталамус, гипофиз
Mouse Monoclonal Antibody Progesterone receptor (PRG) Clone 16, SAN27, IgG1 Novocastra™ Ядерный маркер. В норме: клетки эндометрия, яичника и миометрия, а также клетки протоков молочных желез. Клетки-мишени: матка, влагалище, мочеиспускательный канал, молочные железы, печень, гипоталамус, гипофиз
Примечание. ПНС - периферическая нервная система.
и ГРУППЫ Аспират из полости матки (контроль)
a. s Si О I (Безболевой синдром) II (Болевой синдром)
Гематоксилин-эозин JJJj ... 4
х20 „т. ¿met х20 х20
NSE ,» .1, , ; Л У . * 1 s*•• vvr ¿'Л- 1 -v Г, . ' Л. v - ' ■ х20 * 'Я iV»'^*\ -л* ' * .J J Г Ч * х40 aVASliltv - ; JUL гл х20
S100 * f t ■ > , . '" - V / / х20 Wm • ''Уу- 'f( • 'Ь if • . i-% ' Л . "У -.-. '¿-'ify, if, ъШъМЖ. х20 х40
PGP 9.5 :• s-.у»'-? .• ", • . •• .: "i, V-v ЩшФтшШт х20 11 «г* » - i -г- k-i « .4 у"->» Л/'.-г-■щ -* > ' * х20 '
CD10 Л 5 * ' -л - ▼ < ' »Jf thf' , i^bjA ^^ lyB^ ¡Ж}- ЙЯ'w ir-ff
х20 х20 х20
Рис. 1. Эндометриоидные кисты яичников (n=42). Окраска: гематоксилин и эозин; иммуногистохимические реакции с антителами к NSE, S100, PGP 9.5 и CD10, докрашивание - гематоксилином
безмиелиновыми волокнами, также указывает пан-нейрональный маркер PGP 9.5. Тем не менее имму-номечение в исследуемых группах определяется как «ve+/3». Положительная реакция на CD10 в обеих группах («ve+/3») доказывает эндометриоидную природу происхождения кист яичника, а также указывает на миграции лимфоидных элементов в очаг локального воспаления. Провоспалительный цитокин IL-1р демонстрирует высокую реакцию в эпителии эндоме-триоидных кист у пациенток II группы по сравнению с I группой. Эндокринная функция в обеих группах в пределах возрастной физиологической нормы, что подтверждается положительной нуклеарной реакцией с антителами к рецепторам эстрогенов и прогестеронов («ve+/3»).
Статистические данные позволяют утверждать, что количество нейроэндокринных клеток с положительной реакцией с антителами к NSE выше у пациенток с болевым синдромом почти в 2 раза (28,7±3,1 %) по сравнению с I группой (15,6±2,4 %). Анализ уровня экспрессии S100 в миелиновых нервных волокнах (леммоцитах) и их плотности (волокна/мм2) в выборочной совокупности указывает на неоднородность по данному признаку (p<0,05) в исследуемых группах: I группа - 0,11±0,09; II группа - 0,36±0,11. При этом общая плотность миелиновых и безмиелиновых нервных волокон (ИГХ-реакция с PGP 9,5) в группах имеет следующие значения: I группа - 0,8±0,21; II группа - 1,26±0,01.
Анализ экспрессии генов посредством ПЦР-РВ. Входе оценкиуровня экспрессии геновноципетивных ионных каналов и TAC1 с помощью измерения количества мРНК соответствующих генов во фрагментах эндометриоидных кист и эутопического (контроль) эндометрия были выявлены существенные статистические различия между исследуемыми образцами. Экспрессия TAC1, TRPV1, SCN9A, SCN11A в образцах эндометриоидной кисты значительно и достоверно превышала пороговый уровень контроля (р<0,05). В это же время экспрессия TRPA1 и P2RX3 отличалась незначительно по сравнению с контролем.
Обсуждение. Результаты данного исследования позволили определить новую патогенетическую концепцию формирования тазового болевого синдрома у женщин с НГЭ (с эндометри-оидными кистами яичников). Учитывая тот факт, что нейро-эндокринные клетки являются многофункциональными медиаторами, регулирующими функциональную активность различных органов [4, 5, 13, 19], локальное увеличение количества нейроэн-докриноцитов в участке эндоме-триоидного поражения (высокий уровень экспрессии NSE) при ХТБ способствует секреции большего количества биологически активных веществ, в том числе различных провоспалительных медиаторов, нейтрофинов, нейропептидов и др. [2, 5]. Опосредованно, через активные хемоаттрактан-ты нейроэндокринные клетки способствуют повышению миграции макрофагов и других элементов воспаления. Наряду с этим происходит стимуляция
роста и ветвления нервных волокон. Тем самым усиливается нейроиммуногенное воспаление в очаге эндометриоидного поражения с развитием гиперчувствительности и гипералгезии, что в итоге приводит к появлению болевого синдрома. Таким образом, нейроэндокринные клетки являются одним из триггеров в патогенезе ХТБ при эндометриоидных кистах яичника.
Обнаруженные PGP 9.5- и S100-ИГХ-позитивные нервные волокна в интерстициальной ткани яичника с эндометриоидным поражением свидетельствуют о выраженном разрастании миелиновых и безми-елиновых нервных волокон у женщин, страдающих эндометриозом, и их способности иннервировать не только здоровые ткани яичника, но и ткани эндоме-триоидной кисты [9, 10]. Результаты статистического анализа также показывают высокую степень корреляции между плотностью выявленных нервных волокон и присутствием болевого синдрома у женщин с эндометриоидными кистами яичников. В эпителии эктопического эндометрия наблюдается стабильно высокий уровень провоспалительного цитокина IL-1 р и CD10 с присутствием прогестероновых и эстроге-новых рецепторов в клетках покровного эпителия и маточных желез, что свидетельствует о нейрогенном воспалении в очагах поражения.
На основании проведенного ретроспективного исследования можно утверждать, что выраженный рост нервных волокон в очагах эндометриоза у женщин, страдающих ХТБ, зависит от активности цитокинов и факторов роста, обусловливающих локальное воспаление на фоне гормонального статуса пациенток.
Так, на основании проведенного анализа (ПЦР-РВ) экспрессии генов [19], ответственных за ноци-цепцию и проведение сигнала в ЦНС, можно считать, что патогенез ХТБ связан с развитием гиперчувствительности и гипералгезии на фоне развившегося нейроиммуногенного воспаления (рис. 2).
ХТБ
Рис. 2. Роль нейроэндокринных клеток в патогенезе хронических тазовых болей при наружном генитальном эндометриозе
Заключение. Увеличение количества нейроэндокринных клеток в очаге нейроиммунного воспаления при эндометриоидных кистах яичника является одним из ключевых триггеров в патогенезе эндомет-риоз-ассоциированных тазовых болей.
Литература
1. Адамян, Л. В. Генитальный эндометриоз. Современный взгляд на проблему / Л. В. Адамян, С. А. Гаспа-рян. - Ставрополь, 2004. - С. 228.
2. Боровая, Т. Г. Источники и возрастные особенности эндометриоидных кист / Т. Г. Боровая // Морфология. - 2016. - № 3. - С. 41.
3. Демяшкин, Г. А. Иммуногистохимическая характеристика эндометриоза стенки кишки / Г. А. Демяшкин, И. М. Терлоев, М. Н. Касанова, Я. С. Борисов // Крымский журнал экспериментальной и клинической медицины. - 2017. - № 7 (4). - С. 40-45.
4. Борисова, А. В. Сравнительный анализ липидного состава перитонеальной жидкости и плазмы крови у пациенток с наружным генитальным эндометрио-зом и миомой матки / А. В. Борисова, В. В. Чаговец,
A. В. Козаченко [и др.] // Акушерство и гинекология. - 2017. - № 6 - С. 74-82.
5. Телегина, И. В. Особенности репарации раны на матке после операции кесарева сечения / И. В. Телегина, И. Г. Нежданов, Р. В. Павлов [и др.] // Медицинский вестник Северного Кавказа. - 2013. - Т. 8, № 2. - С. 89-92.
6. Arnold, J. Neuroimmunomodulatory alterations in non-lesional peritoneum close to peritoneal endometriosis / J. Arnold, G. F. Vercellino, V. Chiantera [et al.] // Neuroimmunomodulation. - 2013. - 20(1). - P. 9-18.
7. Basbaum, A. I. Cellular and Molecular Mechanisms of Pain / A. I. Basbaum, D. M. Bautista, G. Scherrer,
D. Julius // Cell. - 2009. - Vol. 139. - P. 267-284.
8. Dabbs, D. J. Diagnostic immunohistochemistry. Forth edition / D. J. Dabbs. - Philadelphia, PA: Elsevier/ Saunders, 2014. - 960 р.
9. Donato, R. Functions of S100 Proteins / R. Donato,
B. Cannon, G. Sorci, F. Riuzzi [et al.] // Curr. Mol. Med. -2012. - Vol. 13. - P. 24-57.
10. Greaves, E. Elevated peritoneal expression and estrogen regulation of nociceptive ion channels in endometriosis /
E. Greaves, K. Grieve, A. W. Horne, P. T. Saunders // J. Clin. Endocrinol. Metab. - 2014. - Vol. 99. - P. E1738-1743.
11. Joseph, E. K. Vascular Endothelial Cells Mediate Mechanical Stimulation-Induced Enhancement of Endothelin Hyperalgesia via Activation of P2X2/3 Receptors on Nociceptors / E. K. Joseph, P. G. Green, O. Bogen [et al.] // J. Neurosc. - 2013. - Vol. 33. -P. 2849-2859.
12. Markham, S. M. Extrapelvic endometriosis / S. M. Mark-ham, S. E. Carpenter, J. A. Rock // Obstet. Gynecol. Clin. North Am. - 1989. - Vol. 16. - P. 193-219.
13. Miller, E. J. The importance of pelvic nerve fibers in endometriosis / E. J. Miller, I. S. Fraser // Women's health. - 2015. - Vol. 11, № 5. - P. 611-618.
14. Missmer, S. A. The epidemiology of endometriosis / S. A. Missmer, D. W. Cramer // Obstet. Gynecol. Clin. North Am. - 2003. - Vol. 30. - P. 1-19.
15. Morotti, M. Peripheral changes in endometriosis-associated pain / M. Morotti, K. Vincent, J. Brawn [et al.] // Hum. Reprod. Update. - 2014. - Vol. 20. -P. 717-736.
16. Poli-Neto, O. B. Increased capsaicin receptor TRPV1 in the peritoneum of women with chronic pelvic pain / O. B. Poli-Neto, A. A. Filho, J. C. Rosa e Silva [et al.] // Clin. J. Pain. - 2009. - Vol. 25. - P. 218-222.
17. Tokushige, N. Nerve fibers in ovarian endometriomas / N. Tokushige, R. Markham, P. Russell, I. S. Fraser // Fertil Steril. - 2010. - Vol. 94 (5). - P. 1944-1947.
18. Vercellini, P. Endometriosis: pathogenesis and treatment / P. Vercellini, P. Viganö, E. Somigliana, L. Fedele // Nature Rev. Endocrinol. - 2014. - Vol. 10 (5). -P. 261-275.
19. Viganö, P. Endometriosis: epidemiology and aetiological factors / P. Viganö, F. Parazzini, E. Somigliana, P. Vercellini // Best Pract. Res. Clin. Obstet. Gynaecol. -2004. - Vol. 18. - P. 177-200.
20. Wang, G. Neuroendocrine cells in eutopic endometrium of women with endometriosis / G. Wang, N. Tokushige, P. Russell [et al.] // Hum. Reprod. - 2010. - Vol. 25. -P. 287-291.
21. Zhang, X. Nerve fibres in ovarian endometriotic lesions in women with ovarian endometriosis / X. Zhang, H. Yao, X. Huang [et al.] // Hum. Reprod. - 2010. - Vol. 25. -P. 392-397.
References
1. Adamyan L. V., Genital endometriosis. A modern view of the problem. Stavropol. 2006.
2. Borovaya T. G. Morfologiya. - Morphology. 2016;3:41.
3. Demyashkin G. A., Terloyev I. M., Kasanova M. N., Bori-sov I. S. Krymskij zhurnal jeksperimental'noj i klinicheskoj mediciny. - Crimean Journal of Experimental and Clinical Medicine. 2017;7(4):40-45.
4. Borisova A. V., Chagovets V. V., Kozachenko A. V., Starodubtseva N. L., Kononikhin A. S., Salimova D. F., Kogan E. A., Adamyan L. V., Frankevich V. E., Suk-hikh G. T. Akusherstvo i ginekologiya. - Obstetrics and gynecology. 2017;6:74-82.
5. Telegina I., Nezhdanov I., Pavlov R., Aksenenko V., Demyashkin G. Meditsinskii vestnik Severnogo Kavkaza. - Medical News of the North Caucasus. 2013;8(2):89-92.
6. Arnold J., Arnold J., Vercellino G. F., Chiantera V., Schneider A., Mechsner S. Neuroimmunomodulation. 2013;20(1):9-18.
7. Basbaum A. I., Bautista D. M., Scherrer G., Julius D. Cell. 2009;139:267-284.
8. Dabbs D. J. Diagnostic immunohistochemistry. Forth edition. Philadelphia, PA: Elsevier/Saunders. 2014.
9. Donato R., Cannon B., Sorci G., Riuzzi F., Hsu K., Weber D., Geczy C. Curr. Mol. Med. 2012;13:24-57.
10. Greaves E., Grieve K., Horne A. W., Saunders P. T. J. Clin. Endocrinol. Metab. 2014;99:E1738-1743.
11. Joseph E. K., Green P. G., Bogen O., Alvarez P., Levi-ne J. D. J. Neuroscience. 2013;33:2849-2859.
12. Markham S. M., Carpenter S. E., Rock J. A. Obstet. Gynecol. Clin. North Am. 1989;16:193-219.
13. Miller E. J., Fraser I. S. Women's health. 2015;11(5):611-618.
14. Missmer S. A., Cramer D. W. Obstet. Gynecol. Clin. North Am. 2003;30:1-19.
15. Morotti M., Vincent K., Brawn J., Zondervan K. T., Becker C. M. Hum. Reprod. Update. 2014;20:717-736.
16. Poli-Neto O. B., Filho A. A., Rosa e Silva J. C., Barbosa H. F., Candido Dos Reis F. J., Nogueira A. A. Clin. J. Pain. 2009;25:218-222.
17. Tokushige N., Markham R., Russell P., Fraser I. S. Fertil Steril. 2010; 94(5):1944-1947.
18. Vercellini P., Viganö P., Somigliana E., Fedele L. Nature Rev. Endocrinol. 2014;10(5):261-275.
19. Viganö P., Parazzini F., Somigliana E., Vercellini P. Best. Pract. Res. Clin. Obstet. Gynaecol. 2004;18:177-200.
20. Wang G., Tokushige N., Russell P., Dubinovsky S., Markham R., Fraser I. S. Hum. Reprod. 2010;25:287-291.
21. Zhang X., Yao H., Huang X., Lu B., Xu H., Zhou C. Hum. Reprod. 2010;25:392-397.
Сведения об авторах:
Демяшкин Григорий Александрович, врач-патологоанатом, старший преподаватель кафедры патологической анатомии; тел.: 89262755302; е-таИ: dr.dga@mail.ru
Оразов Мекан Рахимбердыевич, доктор медицинских наук, профессор кафедры акушерства и гинекологии с курсом перинатологии; тел.: 89152375292; е-таИ: omekan@mail.ru
Закирова Яна Рявхатевна, аспирант кафедры акушерства и гинекологии с курсом перинатологии; тел.: 89060931028; е-т^И: bikmaeva90@mail.ru
Жарков Николай Владимирович, кандидат биологических наук, ведущий научный сотрудник; тел.: 89653368683; е-mail: nickzharkov@mail.ru
Батов Максим Александрович, студент 6 курса; тел.: 89261024871; е-mail: m.batov112@gmail.com Борисов Ярослав Сергеевич, студент 6 курса; тел.: 89175500946; е-mail: yarik_si_94@mail.ru
