CC BY
2
ТЕЗИСЫ ПОСТЕРНЫХ ДОКЛАДОВ И ПРИНЯТЫЕ К ПУБЛИКАЦИИ
Экспериментальная онкология
на путь VEGF/VEGFR, требует выявления дополнительных мишеней для повышения терапевтической эффективности. В этом аспекте перспективным является параллельное нацеливание на сигнальный путь цитокина TRAIL — важный компонент иммунной системы, принимающий участие в иммунобиологическом надзоре за опухолями, отслеживании и избирательном устранении трансформированных клеток. Цель исследования заключалась в разработке стратегии двойного нацеливания на злокачественные клетки и сосудистое микроокружение опухоли с помощью мультивалентного рекомбинантного белка на основе цитокина TRAIL.
Материалы и методы: Был разработан мультивалентный гибридный белок SRH-DR5-B-ÍRGD, содержащий антиан-гиогенный VEGFR2-специфичный пептид SRH на N-конце и опухоле-специфичный пептид iRGD на С-конце рекомбинантного рецептор-селективного варианта цитокина TRAIL DR5-B, специфичного к рецептору DR5. Сродство гибридного мультитаргетного лиганда к рецепторам-мишеням определяли методом иммуноферментного анализа. Изменение скорости интернализации рецептора DR5 при связывании с гибридным лигандом определяли с помощью проточной цитофлуориметрии. Противоопухолевую эффективность оценивали in vitro на клеточных линиях карциномы поджелудочной железы, глиобласто-мы и первичных нейросферах глиобластомы человека, и in vivo на ксенотрансплантатной модели на основе линии глиобластомы человека U87 в иммунодефицитных мышах Nude. Действие гибридного лиганда на сосудистую сеть опухоли оценивали с помощью иммуногистохимического окрашивания на маркер эндотелия CD31. Результаты: Показана аффинность мультитаргетного лиганда SRH-DR5-B-iRGD к целевым рецепторам VEGFR2, DR5 и интегрину avp3 в наномолярном диапазоне. Гибридный лиганд SRH-DR5-B-iRGD стимулировал DR5-опосредо-ванную гибель опухолевых клеток по каспазо-зависимому механизму, и способствовал ускоренной интернализации рецептора DR5. SRH-DR5-B-iRGD оказывал повышенное цитотоксическое действие in vitro на опухолевые клеточные линии и первичные нейросферы глиобластомы человека. Торможение роста опухолевых ксенотрансплантатов глиобластомы U87 in vivo под действием SRH-DR5-B-iRGD составило в среднем 80%, при этом продолжительность жизни животных с опухолевыми ксенотрансплантатами увеличивалась вдвое. Важно отметить, что SRH-DR5-B-iRGD ингибировал васкуляризацию опухоли: была отмечена неравномерность распределения капилляров среди клеток опухоли с образованием бессосудистых участков, уменьшение скоплений сосудов, снижение степени их ветвления и неполноценное формирование сосудистых стенок.
Заключение: Параллельное нацеливание на рецептор VEGFR2 посредством эффекторного пептида SRH, а также на интегрин avp3/NRP-1 посредством пептида iRGD наряду с активацией рецептора DR5 обусловило выраженный двойной противоопухолевый и антиангиогенный эффект.
Таким образом, одновременное воздействие на молекулярные пути DR5 и VEGFR2 с помощью мультивалентного гибридного белка SRH-DR5-B-iRGD может послужить основой нового терапевтического подхода для лечения солидных опухолей.
Исследование выполнено за счет гранта Российского научного фонда № 21-14-00224, https://rscf.ru/project/ 21-14-00224/.
ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ МОЛЕКУЛЯРНО-НАПРАВЛЕННОЙ ТЕРАПИИ У ПАЦИЕНТОВ С РАСПРОСТРАНЕННЫМИ ФОРМАМИ СОЛИДНЫХ ОПУХОЛЕЙ НА ОСНОВАНИИ ДАННЫХ ГЕНОМНОГО ПРОФИЛИРОВАНИЯ
П.С. Шило1, М.Л. Степанова2, А.А. Захаренко3
Место работы: 1. ООО «Лахта клиника», Санкт-Петербург, Россия; 2. ГБУЗ «Санкт-Петербургский клинический научно-практический центр специализированных видов медицинской помощи (онкологический) им. Н.П. Напалкова», Санкт-Петербург, Россия; 3. ФГОУ ВО «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова» Минздрава России, Санкт-Петербург, Россия Эл. почта: [email protected]
Цель: Одной из возможностей улучшения прогноза у онкологических пациентов с исчерпанными терапевтическими опциями является применение методик геномного профилирования опухоли с помощью таргетного секвенирования (NGS) и назначение молекулярно-направленной терапии на основании результатов тестирования. Целью данной работы является оценка эффективности данного подхода в условиях реальной клинической практики на примере в рамках одной клиники.
Материалы и методы: Была проведена ретроспективная оценка данных пациентов, которым было выполнено таргетное секвенирование в условиях онкологического подразделения клиники Лахта. Проанализированы результаты выполненного таргетного секвенирования и терапия, назначенная пациентам с сентября 2019 по август 2023 года. Были рассмотрены клинические характеристики пациентов, ответ на лечение и мутационный профиль. Основными интересующими параметрами были факт выявления таргетируемых альтераций, назначение молекулярно-направленной терапии и частота контроля над заболеванием.
Результаты: В исследование были включены данные 83 пациентов с распространенными формами солидных опухолей, которым было выполнено таргетное секвенирование. Превалирующей категорией оказались пациенты с опухолями ЖКТ (п = 29, 34,9%), раком молочной железы (п = 16, 19,3%), гепатобилиарными опухолями (п = 14, 16,9%), гинекологическими опухолями (п = 10, 12,0%). У 27% паци-
ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫЕ ОПУХОЛИ Российское общество клинической онкологии
том/vol. 13 #3s1 • 2023
MALIGNANT TUMOURS
Russian Society of Clinical Oncology
РОССИЙСКИЙ Willi НШОШЕСКШ 11VII ШГРЕСС 2D23 АЛ III
Экспериментальная онкология
ентов была выявлена по меньшей мере одна клинически значимая альтерация, и у 53% (п = 40) из них альтерации оказались потенциально таргетируемыми. Лечение на основе обнаруженных альтераций было проведено в 9,6% случаев (п = 8), и у 4 пациентов (2 пациента с раком яичников, 2 пациента с раком толстой кишки и 1 пациентка с раком молочной железы) был зарегистрирован клинически значимый ответ.
Заключение: Геномное профилирование выявило потенциально таргетируемые альтерации примерно у четверти пациентов с распространенными солидными опухолями, и у половины этих пациентов на основании данных теста были идентифицированы дополнительные терапевтические опции.
ОЦЕНКА НЕФРОТОКСИЧЕСКОГО ПОТЕНЦИАЛА ГИБРИДНЫХ ОЛОВООРГАНИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ ПРИ ОДНОКРАТНОМ ВНУТРИЖЕЛУДОЧНОМ ВВЕДЕНИИ
М.С. Алхусейн-Кулягинова1, М.А. Додохова1, О.В. Воронова1,2, М.В. Гулян1, Н.Д. Власова1, И.М. Котиева1
Место работы: 1. ФГБОУ ВО «Ростовский государственный медицинский университет Минздрава России, Ростов-на-Дону, Россия; 2. ЧУЗ «Клиническая больница «РЖД-Медицина», Ростов-на-Дону, Россия Эл. почта: [email protected]
Цель: Целью данного исследования является сравнительная оценка влияния бис-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидрокси-фенилтиолат) диметилолова (Ме-3) в суммарной дозе 375 мг/кг на изменение экспрессии сосудистого эндоте-лиального фактора роста (VEGF) при иммуногистохими-ческом (ИГХ) исследовании в первичном опухолевом узле при десятикратном внутрибрюшинном введении мышам-самкам линии С57ВL/6 с перевивной меланомой В16 в классическом и отсроченном введении. Материалы и методы: Исследование было выполнено на мышах-самках линии С57ВL/6 в возрасте 8 недель, массой 21-22 г. Субстанция Ме-3 в суммарной дозе 375 мг/кг вводилась десятикратно внутрибрюшинно в классическом (через 48 ч после перевивки) и в отсроченном (после пальтапорного определения первичных узелков опухоли на месте введения, на 8 сутки после перевивки) режимах. Контрольной группе 1% раствор желатина вводился в эквивалентных режимах и объемах. Эвтаназию производили на гильотине на 18 сутки после перевивки опухолевых клеток. Оценку ИГХ-реакции проводили с использованием полуколичественного метода, по интенсивности реакции: 0 баллов — отсутствует, 1 балл — слабая, 2 балла — умеренная, 3 балла — выраженная. Подсчет позитивно окрашенных клеток выполняли в 10 полях зрения при увеличении 200 и рассчитывали среднее арифметическое.
Результаты: В результате изучения экспериментального материала установлено: в 100% полей зрения при введении носителя экспрессия VEGF в опухолевых клетках и эндотелии сосудов первичного узла являлась выраженной (3 балла), в 73% полей зрения при классическом варианте введения — слабо выраженной (1 балл), в 57% полей зрения при метрономном варианте введения — умеренно выраженной (2 балла) с увеличением площади некроза первичной опухоли на 24%.
Заключение: На основании полученных результатов проведенного исследования можно сделать вывод, что изучаемый кандидат в лекарственные средства противоопухолевой группы бис-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидр-оксифенилтиолат) диметилолова (Ме-3) в суммарной дозе 375 мг/кг обладает влиянием на процессы неоангио- и нео-васкулогенеза при длительном классическом и отсроченном введении, что является основанием для продолжения исследований гибридных оловоорганических соединений.
ВЛИЯНИЕ БЕЛКА ТЕПЛОВОГО ШОКА 27 НА СОСТОЯНИЕ СИСТЕМЫ ГЛУТАТИОНА ПРИ ДЕКСАМЕТАЗОН-ИНДУЦИРОВАННОМ АПОПТОЗЕ ОПУХОЛЕВЫХ КЛЕТОК ЛИНИИ JURKAT
О.Л. Носарева, Е.А. Степовая
Место работы: ФГБОУ ВО «Сибирский государственный медицинский университет» Минздрава России, Томск, Россия Эл. почта: [email protected]
Цель: Оценить роль белка теплового шока 27 в изменении состояния системы глутатиона при дексаметазон-инду-цированном апоптозе опухолевых клеток линии Jurkat. Материалы и методы: Объектом исследования служила опухолевая клеточная линия Jurkat, полученная из Института цитологии РАН (Россия). Культивирование опухолевых клеток линии Jurkat проводили суспензионным методом в полной питательной среде RPMI-1640. Для достижения поставленной цели использовали ингибитор ^р27-5-(5-этил-2-гидрокси-4-метоксифенил) (ШВВ3) ("Sigma-AldNch", США) в конечной концентрации 0,1 мкМ и/или индуктор апоптоза дексаметазон рЕХ) ("Sigma-АШпсЬГ" США) в конечной концентрации 10 мкМ в течение 18 ч при 37°С и в 5%-й атмосфере СО2. Количество апоптозных клеток оценивали методом проточной цито-метрии с применением FITC-меченного аннексина V и про-пидия йодида. Используя первичные моноклональные антитела к фосфорилированной форме ^р27 ("Sigma-АШпсЬГ', США) в разведении 1:2000, определяли содержание ^р27 с помощью вестерн-блотт анализа. Внутриклеточную концентрацию восстановленного и окисленного глутатиона методом каталитической рециркуляции и блокирования SH-группировок трипептида 2-винилпириди-ном ('^ако", Япония), с дальнейшим взаимодействием
ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫЕ ОПУХОЛИ Российское общество клинической онкологии
том/vol. 13 #3s1 • 2023
MALIGNANT TUMOURS
Russian Society of Clinical Oncology
