CC BY
13УДК: 612.112.3+612.119-612.119+612.017
ЭФФЕКТ ЦЕРЕБРОСПИНАЛЬНОЙ ЖИДКОСТИ НА ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ ЛЕЙКОЦИТОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ ОБЛУЧЕННЫХ КРЫС
Кривенцов М. А., Девятова Н. В.
Кафедра патологической анатомии с секционным курсом, Медицинская академия имени С. И. Георгиевского ФГАОУ ВО «Крымский федеральный университет имени В. И. Вернадского», 295051, бул. Ленина, 5/7, Симферополь, Россия
Для корреспонденции: Кривенцов Максим Андреевич, доктор медицинских наук, доцент, заведующий кафедрой патологической анатомии с секционным курсом Медицинской академии имени С. И. Георгиевского ФГАОУ ВО «КФУ имени В. И. Вернадского», е-mail: maksimkgmu@mail.ru
For correspondence: Kriventsov M.A., MD, Head of the department of pathological anatomy with sectional course, Medical Academy named after S. I. Georgievsky of Vernadsky CFU, Simferopol, Russia
Information about authors:
Kriventsov M. A., orcid 0000-0001-5193-4311 Devyatova N. V., orcid 0000-0003-3928-5448
РЕЗЮМЕ
Изучено воздействие ксеногенной цереброспинальной жидкости на некоторые параметры белой крови крыс, которые подверглись лучевому воздействию. Убедительно подтвержден отрицательный эффект воздействия радиации на кровь. Отмечаются количественные и качественные изменения в виде лейкопении, нарушения лейкоцитарной формулы с увеличением числа нейтрофилов и уменьшением лимфоцитов, функциональная активность нейтрофилов резко уменьшается. Разные дозы ликвора оказывают неодинаковое воздействие на пораженную кровь. Так, однократное введение ликвора в дозе 10 мл/кг не оказывает гемопротективного воздействия. Многократное введение цереброспинальной жидкости в дозе 2 мл/кг один раз в три дня способствует нормализации количества лейкоцитов и восстановлению лейкоцитарной формулы. Одновременно восстанавливается функциональная активность нейтрофилов.
Ключевые слова: крысы; облучение; ликвор; периферическая кровь.
EFFECT OF CEREBROSPINAL FLUID ON THE FUNCTIONAL STATE OF PERIPHERAL BLOOD LEUKOCYTES OF IRRADIATED RATS
Kriventsov M. A., Devyatova N. V.
Medical Academy named after S. I. Georgievsky of Vernadsky CFU, Simferopol, Russia
SUMMARY
The effect of xenogenic cerebrospinal fluid on some parameters of white blood cells of rats exposed to radiation was studied. The negative effect of radiation on the blood was convincingly confirmed. There are quantitative and qualitative changes in the form of leukopenia, violation of the leukocyte formula with an increase in the number of neutrophils and a decrease in lymphocytes. In addition, the functional activity of neutrophils sharply decreases. Different doses of cerebrospinal fluid have an unequal effect on the affected blood. Thus, a single injection of cerebrospinal fluid in a dose of 10 mL/kg does not have a protective effect. Schedule of cerebrospinal fluid multiple administrations in a dose of 2 mL/kg once every three days helps normalize the number of leukocytes and restore the leukocyte formula. At the same time, the functional activity of neutrophils is restored.
Keywords: rats, radiation, cerebrospinal fluid, peripheral blood.
Ответ живого организма на радиационное воздействие проявляется не изолированными нарушениями тех или иных функций и структур, а комплексной реакцией различных функциональных систем [5, 8]. Особую роль среди интегральных систем играют центральные и периферические органы кроветворения, отсюда и неустанный научно-практический интерес к изучению морфологического состава крови, особенно популяции лейкоцитов, отвечающих за защиту организма [10, 13]. В доступной нам отечественной и зарубежной литературе, посвященной ответной реакции кровяных клеток на
облучение, имеющиеся данные иногда содержат противоположную информацию. Так, у гибнущих от высоких доз радиации экспериментальных животных с несовместимыми с жизнью нарушениями гомеостаза и внутренних органов некоторые авторы отмечают минимальные изменения со стороны периферической крови [8, 15]. Другие авторы, в том числе А. В. Яблоков [14], в исследованиях приходят к выводу, что даже пороговые дозы облучения могут вызывать лейкоцитоз с последующей лейкемией. Часть авторов считают, что лимфоциты периферической крови крайне чувствительны к облучению,
КРЫМСКИЙ ЖУРНАЛ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ И КЛИНИЧЕСКОЙ МЕДИЦИНЫ
их содержание после поражения сразу резко уменьшается [12]. По другим данным, лимфоциты не имеют высокой радиочувствительности, их процентное и абсолютное содержание после облучения значительно повышается [6, 13].
Радиоэкологическая ситуация в современном мире требует продолжать поиск новых средств противорадиационной защиты, так как по разным причинам большинство классических радиопротекторов оказались малоэффективными и непригодными в сложившихся нынешних условиях [2, 3, 6]. Одним из направлений поиска антирадиационных средств длительного действия являются препараты животного и растительного происхождения. На кафедре анатомии человека Медицинской академии КФУ длительное время изучаются биологические эффекты парентерально введенной ксеногенной цереброспинальной жидкости (ЦСЖ) [7, 11]. По данным ученых, ЦСЖ благоприятно влияет на большинство метаболических процессов в организме, проницаемость гистогематических барьеров, свертывающую систему крови, микрогемоциркуляторное русло, эндокринную, иммунную, нервную системы [3, 7, 9]. Доказана защитная роль ЦСЖ при неблагоприятных воздействиях внешних факторов на органы дыхания, иммунной системы.
Среди имеющихся работ по исследованию радиопротективного действия ЦСЖ на показатели периферической крови и функциональную активность защитных клеток также нет однозначного мнения. Так, по некоторым литературным данным, введение подопытным животным ЦСЖ способствовало сохранению на высоте лучевой болезни (15-20 сутки) более высокого уровня лейкоцитов, преимущественно за счет нейтрофилов. При этом происходит усиление фагоцитарной реакции и интенсивность ее проявления [13]. По другим данным, доказано, что введение ЦСЖ животным перед облучением отягощало течение острой лучевой болезни, поскольку усиленная пролиферация гемопоэти-ческих клеток в результате введения ЦСЖ приводила к появлению большого количества молодых, более радиочувствительных клеток [6].
Целью нашего исследования было изучение возможности использования ЦСЖ для восстановления защитных механизмов крови, для чего изучали реакцию лейкоцитов периферической крови крыс и функциональную активность нейтрофилов после облучения и введения различных доз ЦСЖ.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Экспериментальное исследование проведено на базе кафедры анатомии человека Медицин-
ской академии КФУ Использовали белых крыс-самцов линии Вистар, возрастом 3,5-5 месяцев и массой тела на момент эксперимента 150-170 гр. Содержание подопытных животных проводилось в стандартных условиях вивария. При этом поддерживалась постоянная температура и влажность воздуха, обеспечивался свободный доступ к воде и пище. Обязательным условием было соответствие с Женевской конвенцией International Guiding Principles for Biomédical Research Inroling Animais (Geneva, 1990).
Облучение проводили на линейном ускорителе Clinac-2100 фотонного излучения: энергия линейного ускорителя - 6 МэВ, время экспозиции - 50 сек., разовая доза - 5 Грей, размер поля
- 40 см х 40 см, глубина проникновения - 2,5 см. После облучения животные случайным образом были распределены на три группы (по 18 особей в каждой). Первая группа была контрольная. Крысам этой группы вводили физиологический раствор в дозе 10 мл/кг однократно. Крысам второй группы вводили ликвор однократно в дозе 10 мл/кг. Крысам третьей группы ликвор вводили один раз в три дня в дозе 2 мл/кг. Для сравнения показатели крови изучали у интакт-ных животных (6 особей). Взятие крови производили из хвостовой вены на 7, 14, 30 сутки после облучения. В каждой серии насчитывалось по 6 крыс. Полученную кровь в количестве 1 мл помещали в стерильные пробирки, содержащие 3,8 % цитрата натрия (соотношение цитрата и крови и 1:10). Подсчет лейкоцитов производили в камере Горяева, а подсчет лейкоцитарной формулы осуществлялся в окрашенных по Романовскому мазках, лейкограмму рассчитывали из расчета на 200 клеток. Оценку фагоцитарной активности нейтрофилов периферической крови давали методом завершенного фагоцитоза. Для оценки параметров фагоцитарной реакции нейтрофилов периферической крови крыс определяли их поглотительную и переваривающую способность по отношению к тест-культуре стафилококка (штамм С-52) после совместной инкубации. Оценивали результаты микроскопически. Производился расчет комплекса показателей: фагоцитарное число (ФЧ) - процент фагоцитов из числа посчитанных ней-трофилов (у. е.), фагоцитарный индекс (ФИ)
- среднее число бактерий, поглощенных одним активным нейтрофилом [1, 4]. Все полученные результаты исследований подвергались статистической обработке с помощью пакета лицензированных программ Microsoft Office Excel.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Как показали наши исследования, предложенная доза облучения оказала существенное
влияние как на весь организм в целом, так и на картину крови крыс. К концу срока наблюдения у животных как первой, так и второй групп отмечались поведенческие расстройства: крысы были вялые, малоподвижные, пугливые, у многих на шкуре были трофические нарушения. Животные третьей группы внешне и поведенчески практически не отличались от контроля.
У необлученных (контрольных) крыс уровень лейкоцитов составил 10,2 ± 1,9 х 109, что соответствует и литературным данным. Лейкоцитарная формула напоминает картину крови новорожденного ребенка: преобладают лимфоциты - до 70-80 %, нейтрофилы составляют не более 30 %, из них палочкоя-дерных - до 2 %. Содержание эозинофилов в норме в среднем 0,1 %, моноцитов - 2,2 %.
В 1-й группе эксперимента во все сроки наблюдения нами отмечено значительное снижение количества лейкоцитов: содержание лейкоцитов на 7-е сутки составляло 2,5 ± 1,4 х 109, на 14-е - 0,85 ± 0,8 х 109, на 30-е - 2,4 ± 1,0 х 109. Лейкопения отмечается во все сроки эксперимента, достигая минимума ко второй неделе. И даже к максимальному сроку наблюдения (месяц после облучения), количество лейкоцитов не восстанавливается, достигая лишь четверти от контроля. Лейкоцитарная формула также менялась во все периоды наблюдения. Облучение приводило к значительному и достоверному снижению процентного соотношения лимфоцитов. К 7-м суткам они составляли 42,1 % (р < 0,01), к 14-м - 30,7 % (р < 0,01), к 30-м - 33,8 % (р < 0,01). Параллельно с лимфопенией отмечался относительный нейтрофилез. К 7-м суткам после облучения количество нейтрофилов достигало 56,2 % (р < 0,01), к 14-м - 58,4 % (р < 0,01), к 30-м несколько снижалось - до 54,3 % (р < 0,01). По нашим данным, нейтрофилез во всех случаях сопровождался увеличением числа незрелых нейтрофилов за счет палочкоядерных форм до 13-14% (р < 0,05), (у интактных крыс не более 2 %). Более заметны были изменения со стороны эозинофилов. Хотя они и менее выражены количественно, но в процентном соотношении число эозинофилов увеличивалось к 7-м суткам до 0,8 % (р < 0,01), к 14-м - до 1,6 % (р < 0,01), к 30-м - до 1,1 % (р < 0,05). Таким образом, процентное содержание эозинофилов увеличивалось в 20 раз, достигая максимума на 14-е сутки. На 7-е сутки начала эксперимента нами отмечено снижение моноцитов до 0,9 % (р < 0,01). Моно-цитопения в дальнейшем сменилась моноци-тозом. На 14-е сутки моноциты составляли 9,3 % (р < 0,01), на 30-е сутки - 10,8 % (р < 0,05).
Нами изучена также поглотительная способность фагоцитирующих нейтрофилов пери-
ферической крови. У контрольных животных фагоцитарное число (ФЧ) составляло 4,0 ± 0,4 у. е., а фагоцитарный индекс (ФИ) - 99 ± 2,7 %. Результат эксперимента продемонстрировал снижение обоих показателей во всех сроках. ФЧ на 7-е сутки равнялось 2,6 ± 0,8 у. е., а ФИ - 72 ± 1,9 % (р < 0,02). На 14 сутки ФЧ 2,2 ± 0,3 у. е., ФИ - 79 ± 1,7 % (р < 0,02), на 30-е, соответственно, 1,9 ± 0,2 у. е. и 76 ± 1,8 % (р < 0,02).
Таким образом, реакция лейкоцитов крови крыс на облучение отличается от классического ответа на стрессовые факторы. Сравнивая наши данные с результатами других авторов, мы отмечаем некоторые особенности. Во-первых, классическая стресс-реакция, описанная в литературе, сопровождается лейкоцитозом [5, 10]. По нашим же результатам, лучевое воздействие проявлялось лейкопенией во все сроки эксперимента. Во-вторых, по данным литературы, экстремальные внешние и внутренние воздействия приводят к нейтрофилезу и лимфопении в течение первых дней и сохраняются не более 6 суток после прекращения агрессии [1]. Мы наблюдали нарушение нейтрофильно-лимфоцитарного соотношения на протяжении всего срока эксперимента. Лейкопения и выраженные лимфопения и нейтрофилез подтверждают факт мощного воздействия облучения на систему крови, что не подтверждает устоявшийся постулат о том, что кровяная ткань более реликтовая и не так чувствительна к внешним, в том числе лучевым воздействиям, как высокодифференцирован-ная нервная ткань или паренхиматозные органы. Описанные негативные изменения и недостаточность адаптивных перестроек организма имеют последствия в виде нарушения клеточного звена иммунитета и не дают организму противостоять другим агрессивным факторам.
Во второй серии эксперимента животным после облучения вводили однократно ЦСЖ в дозе 10 мл/кг. При этом на 7-е сутки содержание лейкоцитов хотя и снижалось, но было выше, чем в 1-й серии, составляя 3,8 ± 1,7 х 109 (р < 0,05). На 14-е сутки количество лейкоцитов еще более снизилось - до 1,2 ± 1,5 х 109 (р < 0,05), на тридцатые же сутки показатели опустились даже ниже, чем в 1-й группе - 0,4 ± 0,2 х 109 (р
< 0,05). Изменения затронули и формулу крови. На 7-е сутки лимфоциты составляли 49,3 % (р < 0,05), на 14-е - 34,0 % (р < 0,01), на 30-е - 29,4 % (р < 0,05). Содержание нейтрофилов к 7-м суткам составило 46,8 % (р < 0,01), к 14-м - 59,4 % (р
< 0,01), на 30-е - 63,0 % (р < 0,01). Эозинофилы в начальный срок наблюдения выросли до 1,5 %, в последующие сроки, практически не выявлялись. Моноцитов на 7-е сутки было в среднем 2,4 % (р < 0,02), что практически не отличалось от
КРЫМСКИЙ ЖУРНАЛ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ И КЛИНИЧЕСКОЙ МЕДИЦИНЫ
контрольных значений. Затем, как и в 1-й группе, содержание моноцитов увеличивалось в количестве, составляя, соответственно, 5,6 % и 7,6 % (р <0,01). Функциональная активность ней-трофилов уменьшалась. ФИ равнялся на 7-е сутки 76 ± 1,8 % (р < 0,02), а ФЧ - 3,6 ± 0,9 у. е., на 14-е сутки наблюдения ФИ составлял 68,4 ± 1,4 % и ФЧ - 2,0 ± 0,3 у. е. (р < 0,02) и на 30-е сутки, соответственно, ФИ - 76 ± 1,8 % и ФЧ - 1,9 ± 0,2 у. е.
Таким образом, однократное введение ЦСЖ в начале эксперимента оказывало стимулирующий, гемопротекторный эффект, показатели крови были лучше, чем в 1-й серии, а в конце наблюдения, особенно к 30-м суткам, наоборот, содержание лейкоцитов, формула крови и показатели иммунной активности были ниже, чем в первой группе. На наш взгляд, депрессивные изменения показателей нейтрофильного фагоцитоза и изменения лейкоцитов объясняются разнонаправленным действием облучения и ЦСЖ. Происходит начальное истощение депо костного мозга и использование всех резервов, которые в дальнейшие сроки не восстанавливаются.
В третьей серии эксперимента производили многократное введение ЦСЖ один раз в три дня в дозе 2 мл/кг. На 7-е сутки наблюдения количество лейкоцитов составляет 1,9 ± 1,2 х 109, на 14-е - 4,8 ± 1,1 х 109, на 30-е - 8,4 ± 1,6 х 109 (р < 0,05). Растет количество лимфоцитов (в соответствии со сроками - 31,2 %, 43,8 % и 64,9 %, р < 0,01). Соответственно увеличению лимфоцитов происходит уменьшение содержания нейтрофи-лов. Последние составляют на 7-е сутки 56,7 %, на 14-е - 50,2 % и на 30-е - 31,6 % (р < 0,01). На 7-е сутки эксперимента, как и в предыдущих сериях, отмечали увеличение эозинофилов до 1,3 % (р < 0,01) и моноцитоз - 10,8 % (р < 0,01). После многократного введения ЦСЖ, на 14-е сутки, эозинофилов было 0,8 % (р < 0,01) и моноцитов - 5,2 % (р < 0,01), на 30-е сутки - 0,3 % (р < 0,01) и 3,2 % (р < 0,01) соответственно. Содержание эозинофилов и моноцитов практически не отличалось от контроля. ФИ составил к 7-м суткам 79 ± 1,6% (р < 0,02), а ФЧ - 3,9 ±0,7 у. е., к 14-м суткам - 88,4 ± 1,9 % и 2,9 ± 0,2 у. е. (р < 0,02) и на 30-е, соответственно, 94,1 ± 2,5 % и 3,7 ± 0,4 у. е.
Таким образом, введение ЦСЖ оказывает гемопротективное действие, что приводило к значительному улучшению показателей крови, восстановлению лейкоцитарной формулы. И хотя абсолютное содержание лейкоцитов несколько меньше, чем в контроле, их функциональная активность восстанавливается, что дает возможность клеткам крови выполнять свою защитную функцию. Полученные результаты дают основание продолжать наше исследование с целью дальнейше-
го внедрения применения ЦСЖ для защиты от последствий радиационного облучения.
ВЫВОДЫ
1. После лучевого воздействия происходят значительные изменения со стороны периферической крови у экспериментальных животных: отмечается лейкопения, происходят значительные нарушения лейкоцитарной формулы, угнетаются показатели клеточного иммунитета.
2. Однократное введение ликвора в дозе 10 мл/кг после облучения является недостаточным. Протекторный эффект проявляется незначительным, проявляется только в начальные сроки эксперимента и в последующие сроки наблюдения полностью нивелируется.
3. Введение ЦСЖ многократно один раз в три дня в дозе 2 мл/кг способствует улучшению показателей периферической крови облученных животных. К 30-м суткам эксперимента количество лейкоцитов, лейкоцитарная формула и некоторые показатели клеточного иммунитета приближаются к показателям контрольных животных. Наши данные обосновывают целесообразность применения ЦСЖ и препаратов на ее основе при лучевых поражениях.
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Бринкевич В. Н., Мяделец О. Д. Количественные изменения периферической крови при пролонгированной гипотермии. Проблемы криобиологии. 1991;3:51-56.
2. Даренская Н. Г., Короткевич А. О., Малютина Т. С. и др. Возможности прогнозирования индивидуальной тяжести поражения при лучевых воздействиях в сверхлетальных дозах. Прогнозирование по ранней реакции на облучение. Радиационная биология. Радиоэкология. 2001 ;41 (2): 165-170.
3. Кривенцов М. А., Пикалюк В. С., Де-вятова Н. В. Пролиферативный потенциал тимуса в постлучевом периоде при введении ксеногенной спинномозговой жидкости. Крымский журнал экспериментальной и клинической медицины. 2016;6(3):63-68.
4. Кудрявицкий А. И. Оценка киллерной бак-терицидности нейтрофилов периферической крови здоровых доноров и больных в прямом визуальном тесте. Лабораторное дело. 1985;1:45-47.
5. Кузьменко О. В. Стан деяких показниюв кл^инного iмунiтету щурiв з рiзною реакщею на стрес залежно ввд часу опромшення. Ученые записки Таврического национального университета им. В. И. Вернадского. Серия «Биология, химия». 2012;25; 64( 1): 132-141.
6. Куприянов С. Н., Мамиева М. Ф. Влияние инъекций ликвора на течение острой лучевой болезни. Здравоохранение Туркменистана. 1986;2:21-26.
7. Ликвор как гуморальная среда организма. Под ред. Пикалюк В. С. Симферополь: ИТ «Ариал». 2010:192.
8. Москвин С. В. Буйлин В. А. Основы лазерной терапии. Тверь: «Триада», 2006:256.
9. Новый инъекционный биопрепарат «Лик-ворин» и его лечебные свойства при острой лучевой болезни у животных. Под ред. Ткач В. В. Актуальные вопросы развития инновационной деятельности в государствах с переходной экономикой. Симферополь. 2006:266.
10. Пикалюк В. С. Абсеттарова А. И. Шай-марданова Л. Р. Изменения миелограммы животных после облучения с последующей коррекцией ксеногенной цереброспинальной жидкостью. Таврический медико-биологический вестник. 2013;16, 1-1(61):183-186.
11. Пикалюк В. С., Ткач В. В., Чопикян А. А. Ликворотерапия: развитие и современные аспекты. Крымский журнал экспериментальной и клинической медицины. 2016;6(3):167-175.
12. Корягин А. С., Ерофеева Е. А., Якимов В. Н. и др. Сравнительная оценка противолучевых свойств животных ядов по состоянию системы крови в условиях многократного гамма-облучения. Поволжский экологический журнал. 2005;2:137-146.
13. Шаймарданова Л. Р. Изменения картины крови под действием ксеногенной спинномозговой жидкости. В^ник проблем бюлогп i медицини. 2011;1:223-226.
14. Яблоков А. В. Миф о безопасности малых доз радиации. М.: Книга по требованию, 2003. 302с.
15. Sarraf C.E., Otto W.R., Eastwood M. In vitro mesenchymal stem cell differentiation after mechanical stimulation. Cell. Prolif. 2011;44(1):99-108.
REFERENCES
1. BrinkevichV.N., Myadelets O.D. Quantitative changes in peripheral blood during prolonged hypothermia. Problemy kriobiologii. 1991;3:51-56. (In Russian)
2. Darenskaya N.G., Korotkevich A.O., Malyutina T.S. The predictive ability of the individual the severity of the lesion in radiation effects in Severleasing doses. Forecasting for early reaction to irradiation. Radiatsionnaya biologiya. Radioekologiya. 2001;41(2):165-170. (In Russian)
3. Kriventsov M.A., Pikalyuk V.S., Devyatova N.V. Proliferative potential of the thymus at postradiation period with administration
of xenogenic cerebrospinal fluid. Krymskii zhurnal eksperimental'noi i klinicheskoi meditsiny. 2016;6(3):63-68. (In Russian)
4. Kudryavitskii A.I. Killer assessment of the bactericidal activity of neutrophils of peripheral blood of healthy donors and patients in direct visual test. Laboratornoe delo. 1985;:45-47. (In Russian)
5. Kuz'menko O.V. The state of some indicators of cellular immunity of rats with different stress responses depending on the time of exposure. Uchenye zapiski Tavricheskogo natsional'nogo universiteta im. V.I. Vernadskogo. Seriya «Biologiya, khimiya» 2012;25-64(1):132-141. (In Ukrain)
6. Kupriyanov S.N., Mamieva M.F. Effect of injection of liquor on the course of acute radiation sickness. Zravookhranenie Turkmenistana. 1968;2:21- 26. (In Russian)
7. Pikalyuk V.S. Likvor kak gumoralnaya sreda. Simseropol: IT «Arial»; 2010. (In Russian)
8. Moskvin S.V., Builin V.A. Osnovy lazernoi terapii. Tver': Triada;2006:256. (In Russian)
9. Tkach V.V., Atamanov O.M., Chertkov K.S. Novyi in»ektsionnyi biopreparat «Likvorin» i ego lechebnye svoistva pri ostroi luchevoi bolezni u zhivotnykh/ Aktual'nye voprosy razvitiya innovatsionnoi deyatel'nosti v gosudarstvakh s perekhodnoi ekonomikoi. Simferopol'; 2006:266. (In Russian)
10. Pikalyuk V.S., Absettarova A.I., Shaimardanova L.R. Changes of animal's myelogram after an irradiation with a consequent correction by the xenogenic cerebrospinal fluid / // Tavricheskii mediko-biologicheskii vestnik. 2013;16.1-1(61):183-186. (In Russian)
11. Pikalyuk V.S., Tkach V.V., Chopikyan A.A. Cerebrospinal fluid therapy: development and modern aspects. Krymskii zhurnal eksperimental'noi i klinicheskoi meditsiny. 2016;6(3):167-175. (In Russian)
12. Koryagin A.S., Erofeeva E.A., Yakimov V.N. Comparative evaluation of the antiradiating properties of some animal venoms by the blood system status under conditions of repeated gamma irradiation. Povolzhskii ekologicheskii zhurnal. 2005;2:137-146. (In Russian)
13. Shaimardanova L.R. Changes in the blood picture under the influence of xenogenic cerebrospinal fluid. Visnyk problem biologii i medytsyny. 2011;1:223-226. (In Russian)
14. Yablokov A.V. Mif o bezopasnosti malykh dokz radiatsii. M.: Kniga po trebovaniyu. 2003:302 (In Russian)
15. Sarraf C.E., Otto W.R., Eastwood M. In vitro mesenchymal stem cell differentiation after mechanical stimulation. Cell. Prolif. 2011;44(1):99-108.
