CC BY
23ФАРМАКОЛОГИЯ, КЛИНИЧЕСКАЯ ФАРМАКОЛОГИЯ
В.М. Насек, Д.И. Демид, Е.В. Санько-Счисленок, О.В. Винникова, П.Т. Петров
ДОКЛИНИЧЕСКОЕ ТОКСИКОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОЙ ДОБАВКИ К ПИЩЕ «ПАТРИНИЯ»
Государственное научное учреждение «Институт биоорганической химии
Национальной академии наук Беларуси», г. Минск, Республика Беларусь
Проведено доклиническое токсикологическое исследование безопасности биологически активной добавки к пище «Патриния» (ТУ BY 1001185129.131-2014). Исследуемое средство, полученное на основе тонкоизмельченных корней и корневищ патринии средней (Patrinia intermedia) семейства валериановым белорусской интродукции, не вызывает летальности у самцов и самок мышей и крыс при однократном интрагастральном (per os) и внутрибрюшинном (в/б) введении в дозах до 5,0 г/кг (VI класс токсичности по классификации OECD), не вызывает патологических изменений органов и тканей при длительном (60 дней) per os введении грызунам обоего пола, не обладает местным раздражающим и аллергизирующим действием.
Ключевые слова: патриния средняя, интродукция, токсичность острая, субхроническая, хроническая, аллергенность, иммунотоксичность, сенсибилизация.
ВВЕДЕНИЕ
Разработка лекарственных средств на основе растительного сырья является актуальной задачей. Согласно данным ВОЗ, предпочтение лекарственным средствам растительного происхождения отдают до 80% пациентов, а повышение приверженности к лекарственной терапии способствует скорейшему выздоровлению пациентов. Известен ряд лекарственных средств на основе растительного сырья валерианы, направленных на лечение расстройств тревожно-депрессивного спектра. Такие средства оказывают влияние не только на психические, но и на соматические симптомы, облегчая состояние пациента [1]. Однако средства на основе Valeriana officinalis в виде монопрепаратов и в сочетании с другим растительным сырьем обладают недостатками, существенно ограничивающими возможности их широкого применения [2].
Альтернативой валерианы является представитель семейства Валериановых рода Патриния, в частности Патриния средняя (Patrinia intermedia) [1]. Ареал произрастания патринии средней - предгорья Тянь-Шаня, Средняя Азия, Алатау. Усилиями ученых Центрального ботанического сада НАН Беларуси под руководством канд. биол. наук Л.В. Кухаревой осу-
ществлена интродукция данного растения в условиях Беларуси [3].
Биологически активная добавка (БАД) к пище, разработанная на основе патринии средней, обладает выраженной анксиоли-тической активностью и рядом таких фармакологических свойств, как: седативные, антиагрегационные, антикоагуляционные, гиполипидемические [4]. Результаты, полученные в данной работе, могут быть использованы при дальнейшей разработке лекарственного средства на основе патри-нии средней.
БАД к пище на основе патринии представлена в виде твердых желатиновых капсул, содержащих 250 мг тонкоизмель-ченного порошка корней и корневищ па-тринии средней. Используемая технология позволяет сохранить весь комплекс биологически активных веществ и исключить стадии экстракции и термической обработки. Порошок патринии содержит до 14% сапонинов [5], 5 инулиноподобных полисахаридов, микроэлементы. Сапонины, содержащиеся в патринии, представлены 6 - 7 индивидуальными веществами [6]. Они принадлежат к группе олигозидов - тритерпеновых гликозидов, включающих более четырех-пяти моносахаридных единиц [7]. Агликоны сапонинов представляют собой олеаноловую кислоту [8].
Целью настоящего исследования является оценка токсического действия БАД к пище «Патриния» в остром, субхроническом и хроническом опыте, гистологические исследования внутренних органов и тканей, а также изучение местно-раздра-жающего и аллергизирующего действия.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Опытные образцы БАД к пище «Патриния» (с. 010110) в форме твердых желатиновых капсул массой 400 мг с содержанием в каждой капсуле 150 мг порошка корневищ с корнями Patrinia intermedia, вспомогательные вещества (лактоза, по-ливинилпирролидон, крахмал картофельный, магния стеарат) - до 0,4 г. изготовлены в соответствии с Временной технологической инструкцией (ВТИ 18-2011).
Исследования общей токсичности (острой, субхронической и хронической, местно- раздражающего и аллергезирую-щего действия) БАД к пище «Патриния» проводили в соответствии с существующими требованиями GLP на половозрелых аутбредных животных обоего пола - мышах ICR (n=120, 2,0 - 2,5 мес., масса 20,0±2,0 г) и крысах Wistar (n=360, 1,5 - 2 мес., масса 180 - 200 г) [9]. Оценку острой токсичности осуществляли с использованием 2-х путей введения (в/б, в/ж); патри-нию при в/ж введении применяли в дозах 100, 500, 1000, 2500 и 5000 мг/кг (по 5 самцов и 5 самок на дозу), соответствующих превышению суточной терапевтической дозы (СТД) (21,4 - 42,8 мг/кг) в 2 - 125 раз, а при парентеральном (внутрибрю-шинном) введении назначали подопытным крысам-самцам и самкам в дозах 100, 200, 400, 800 и 1300 мг/кг, с использованием растворителя (вода очищенная) в объемах до 0,5 мл - мышам и 5,0 мл - крысам. В опытах по изучению субхронической и хронической токсичности БАД к пище «Патриния» вводили интрагастрально ежедневно (1 раз в сутки) крысам Wistar (по 10 самцов и 10 самок на дозу) в дозах 40 (СТД), 400 и 800 мг/кг в эквивалентном объеме растворителя, превышающих СТД соответственно в 1, 10 и 20 раз; животные контрольной группы получали растворитель в том же режиме. До начала исследования, через 1 и 2 месяца ежедневного введения изучаемого средства оценивались следующие показатели: общее состояние
животных, поведение, динамика массы тела, потребление воды и корма; общий неврологический статус; функциональное состояние ЦНС, сердца, печени, почек. В конце экспериментов проводили биохимический анализ крови и аутопсию после эвтаназии животных (трёхкратной передозировкой тиопентала натрия), гистологическое исследование органов с определением индексов по отношению к массе тела. Изучение местно-раздражающего действия и сенсибилизирующей активности проводили в процессе выполнения патолого-анатомического исследования в период оценки хронической токсичности и методом накожных аппликаций крысам (для доз БАД к пище «Патриния» 40, 400 и 800 мг/кг, по 5 крыс-самцов на дозу) [10]. Оценку аллергизирующего, иммуно-токсического действия проводили на мышах линии BALB/C путем внутрикожной сенсибилизации с иммуностимулятором (полным адъювантом Фрейнда, Sigma), в опытные и контрольные группы включали по 5 особей обоего пола. О величине отека судили по разнице в толщине левой и правой лап, измеряемой через 24 ч после тестирования цифровым плетизмометром LE7500 («Panlab S.L.», Италия) [11].
Оценку статистической значимости результатов проводили с использованием методов параметрической и непараметрической статистики для множественных сравнений с помощью программного обеспечения Statistica 6.0.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Как острое интрагастральное введение в максимально возможных (технически) дозах, так и длительное применение средства в течение 2 месяцев не приводило к гибели и не оказывало значимого токсического действия на организм грызунов (таблица 1). Полученные данные позволяли отнести БАД к пище «Патриния» к относительно безвредным лекарственным средствам (VI класс токсичности по классификации OECD) и свидетельствовали о большой широте терапевтического действия, хорошей переносимости и безопасности средства [8]. Субхроническое (28 дней) и хроническое (60 дней) в/ж введение БАД к пище «Патриния» животным в дозах, в 10 и 20 раз превышающих СТД для человека, не оказывало вредного воздействия на
показатели адаптационных систем (ЦНС, ССС, дыхательную, кроветворную, антитоксическую, выделительную), обмена веществ, общего состояния и развития, а также на основные гомеостатические параметры организма (таблица 1). Макроскопические патолого-анатомические исследования и определение относительных коэффициентов массы внутренних органов показали, что БАД к пище «Па-триния» не вызывала токсических дегенеративных изменений лимфоидных и важнейших внутренних органов (таблица 1),
не обладала местно-раздражающим, сенсибилизирующим действием и аллергизи-рующими свойствами, не влияла на формирование гиперчувствительности замедленного типа (таблица 1).
Макроскопическое изучение органов и тканей экспериментальных животных было выполнено после окончания 28- и 60-дневного ежедневного внутрижелу-дочного введения изучаемого средства и в восстановительный период после отмены введения. Животных вывели из эксперимента мгновенной декапитацией, вскрыли
Таблица 1 - Результаты оценки острой и хронической токсичности,
местно-раздражающего и аллергезирующего действия БАД к ^ пище «Патриния»
Исследование Изменения в сравнении с контролем
- общее состояние; - общий неврологический статус (по S. Irwin (1959) в модификации C. Morpurgo (1971): состояние простых и сложных моторных рефлексов, абдоминальный тонус, мышечная сила (хватательный рефлекс), мышечный тонус, нарушения позы, координации движений, наличие каталептоидных явлений, гипотермии, состояние дыхания, наличие мидриаза или миоза, реакция на звуковой стимул, роговичный рефлекс); - состояние вегетативных функций (наличие пилоэрекции, птоза, экзофтальма, нарушений дефекации и диуреза); - функциональное состояние: - ЦНС (спонтанная двигательная активность, исследовательское поведение в тесте «открытое поле»); - сердца (ЭКГ во II стандартном отведении); - печени (гексеналовая проба, содержание в сыворотке крови АЛТ, АСТ, ЩФ); - почек (спонтанный диурез, удельный вес, рН мочи, содержание в моче глюкозы, белка, кетоновых тел, билирубина, проба с феноловым красным, микроскопия осадка) отсутствуют
- состояние периферической крови (гематокрит, гемоглобин, эритроциты, цветовой показатель, лейкоциты, лейкоцитарная формула, тромбоциты, СОЭ) отсутствуют
- макроскопическое и гистологическое исследование органов и тканей (кожа, молочные железы, лимфатические узлы, подчелюстные железы, грудина, бедро, костный мозг, тимус, трахея, легкие, сердце*, щитовидная железа, паращитовидная железа, язык, пищевод, желудок, 12-перстная кишка, тонкий кишечник, толстый кишечник, печень*, поджелудочная железа, селезенка*, почки*, надпочечники*, мочевой пузырь, семенные пузырьки, простата*, яички*, яичники*, матка, влагалище, головной мозг*, гипофиз*, спинной мозг, глазное яблоко) отсутствуют
- местно-раздражающее действие и сенсибилизирующая активность (по данным патолого-анатомического исследования и методом накожных аппликаций) отсутствуют
- аллергизирующее, иммунотоксическое действие (тест опухания лапы) отсутствуют
Примечание: * - органы, для которых определяли индексы по отношению к массе тела.
и провели макроскопическую оценку внутренних органов, после чего органы удалили, взвесили и определили относительные индексы внутренних органов.
Результаты осмотра показали, что все животные в опытных группах крыс-самцов и самок Wistar, получивших терапевтические и максимальные дозы БАД к пище «Патриния», введение которых было технически осуществимо, к концу эксперимента были правильного телосложения. Все крысы имели сплошной волосяной покров, опрятный вид, гладкую блестящую шерсть, зубы сохранены, видимые слизистые оболочки и кожные покровы нормальной окраски, очагов облысения не определялось. Половые органы самцов развиты правильно, деформации или отека конечностей нет. Молочные железы самок без уплотнений на ощупь, выделения из сосков отсутствовали.
При макроскопическом исследовании видовых и половых отличий, а также влияния пути введения на состояние внутренних органов не установлено.
При осмотре грудной и брюшной полостей нарушений в расположении внутренних органов не отмечалось.
Подчелюстные лимфатические узлы и слюнные железы имели овальную или округлую форму, однородный розоватый или желтоватый цвет и умеренную плотность.
Щитовидная железа плотно прилежала к гортани, имела обычные размеры и плотность, розовато-красноватый цвет. Тимус имел треугольную форму, беловатый цвет и умеренно плотную консистенцию.
Величина и форма сердца изменений не представляли. Мышца сердца была коричневатой, плотной.
Поверхность легких имела бледно-розовую окраску; легкие спадались при вскрытии грудной клетки. Ткань на разрезе также имела однородную бледно-розовую окраску. Слизистая оболочка внелегочных бронхов была гладкой, блестящей, бледно-розовой.
Желудок имел обычную форму и размеры, просвет был заполнен кашицеобразным пищевым содержимым. Слизистая тела желудка была бледно-розовой, блестящей, складчатой. Слизистая тонкой и толстой кишки была блестящей, гладкой.
Величина и форма печени изменений не представляли. Капсула печени была
тонкой, прозрачной. Ткань печени имела коричневатый цвет и умеренно плотную консистенцию.
Поджелудочная железа была бледно-розовой, дольчатой.
Величина и форма почек не отличались от контроля, капсула легко снималась. Поверхность органа была гладкой, однородной коричневато-сероватой окраски. На разрезе почек отчетливо различались корковое и мозговое вещества.
Форма, размеры и плотность надпочечников, яичников или семенников не отличались от контрольных.
Селезенка имела темно-вишневый цвет, гладкую поверхность и плотноватую консистенцию.
Оболочки головного мозга были тонкими, прозрачными. Вещество головного мозга имело умеренную плотность. Расширения желудочков мозга не наблюдалось.
Массовые коэффициенты внутренних органов животных, получавших БАД к пище «Патриния», не имели каких-либо существенных отклонений как по отношению к контролю, так и по сравнению с видовой нормой, что можно расценить как результат отсутствия хронического токсического действия БАД к пище «Патриния».
Гистологически исследованы внутренние органы и ткани крыс Wistar трех групп по изучению субхронической (б.), хронической токсичности (в.) и восстановительного периода (г.) хронической токсичности БАД к пище «Патриния». В каждую группу входили 10 экспериментальных животных, получавших максимальную дозу, и 10 животных контрольной группы (а).
Проведенное сравнительное морфологическое исследование внутренних органов крыс контрольной и подопытных групп не выявило каких-либо различий их гистологического строения. Полученные результаты свидетельствовали в пользу отсутствия у БАД к пище «Патриния» па-томорфологических эффектов, указывающих на наличие субхронической и хронической токсичности.
На рисунках 1 - 6 (см. обложку журнала) приведены результаты гистологических исследований, указывающие на отсутствие у БАД к пище «Патриния» мест-но-раздражающего действия при длительном внутрижелудочном введении исследуемого фитопрепарата в дозе 800 мг/кг.
Желудок (рисунок 1, см. обложку журнала). Слизистая желудка выстлана многослойным плоским эпителием с признаками ороговения и железистым эпителием. Железистая оболочка покрыта однослойным эпителием без признаков повреждения и десквамации. Желудочные ямки обычной глубины, выстланы уплощенным эпителием. Железы подслизистой по размеру и клеточному составу соответствуют норме, содержат обычные по строению главные и обкладочные клетки. В подслизистой отмечается умеренно выраженное венозное полнокровие сосудов, определяются единичные лимфоциты, плазматические клетки, эозинофильные лейкоциты, местами формирующие мелкие групповые скопления. Мышечная оболочка состоит из трех слоев гладкомышечных клеток и имеет нормальное строение.
Тонкий кишечник (рисунки 2, 3, см. обложку журнала). Слизистая оболочка складчатая, ворсинки выстланы однослойным цилиндрическим эпителием с хорошо различимыми бокаловидными и каемчатыми клетками. Ворсинки без признаков структурных изменений. Строма ворсинок представлена нежно-волокнистой соединительной тканью с полнокровными кровеносными сосудами. Крипты не расширены, без патологического содержимого. Диффузно расположены лимфоидные и плазматические клетки, эозинофилы. Очагово определяются единичные лимфоидные фолликулы с реактивными центрами. В собственной пластинке слизистой оболочки большое количество углублений выстланных крипто-трубчатым эпителием, имеющих сходство с эпителием ворсинок, определяются клетки с ацидофильной зернистостью (клетки Па-нета). Мышечная оболочка состоит из двух слоев гладкомышечной ткани: внутреннего циркулярного и наружного продольного нормального строения.
Двенадцатиперстная кишка (рисунок 4, см. обложку журнала). Слизистая оболочка складчатая, ворсинки выстланы однослойным цилиндрическим эпителием с хорошо различимыми бокаловидными и каемчатыми клетками. Ворсинки без признаков структурных изменений. Строма ворсинок представлена нежно-волокнистой соединительной тканью с полнокровными кровеносными сосудами. Крипты не расширены, выстланы крипто-трубчатым эпителием, имеющим сходство с эпите-
лием ворсинок, определяются клетки с ацидофильной зернистостью (клетки Па-нета). Просвет крипт без патологического содержимого. Диффузно расположены лимфоидные и плазматические клетки, эо-зинофилы. В подслизистой определяются бруннеровы железы, имеющие дольчатое строение. Ацинарные отделы представлены кубическим секреторным эпителием, встречаются единичные бокаловидные клетки и клетки Панета. Мышечная оболочка состоит из двух слоев гладкомы-шечной ткани: внутреннего циркулярного и наружного продольного нормального строения.
Толстый кишечник (рисунок 5, см. обложку журнала). Слизистая с выраженной складчатостью, выстлана призматическим эпителием с большим количеством бокаловидных клеток. Крипты обычных размеров и глубины, свободные. В подслизистой определяются очаговые скопления лимфо-идных элементов, местами формирующие лимфоидные фолликулы с реактивными центрами. Мышечная оболочка состоит из двух слоев гладкомышечных клеток. Ганглии подслизистого и межмышечного нервных сплетений хорошо различимы.
Печень (рисунок 6, см. обложку журнала). Строение печени не нарушено. Центральные вены широкие, свободные или заполненные свободнолежащими и агрегированными эритроцитами. Печеночные балки состоят из одного ряда гепатоцитов, формирующих радиарные структуры. Ге-патоциты полигональной формы со слабо-эозинофильной или амфофильной гранулярной цитоплазмой, содержат центрально-расположенные овальные ядра. В части гепатоцитов имеется два ядра. Синусоиды долек узкие, выстланы уплощенным слоем эндотелиоцитов и звездчатых ретикуло-эндотелиоцитов, в просвете - форменные элементы крови. Портальные тракты треугольной или полигональной формы, содержат в составе триад мелкие артериальные и венозные сосуды, а также желчные протоки, количество которых в составе индивидуальных портальных трактов варьирует от одного до трех. Определяется скудная круглоклеточная инфильтрация с примесью единичных эозинофильных лейкоцитов.
Изучение возможного сенсибилизирующего действия по тесту опухания лапы мышей показало, что показатели аллерги-
зации мышей линии ВАЬВ/С при внутри-кожном введении БАД к пище «Патриния» подопытным животным статистически значимо не различались от таковых показателей у контрольных животных по абсо-
лютному показателю ТОЛМ (таблица 2). Уровень сенсибилизации составил 2%; р > 0,05 и 5%; р > 0,05 соответственно у самцов и самок по сравнению с контрольными значениями.
Таблица 2 - Показатели аллергизации мышей линии ВАЬВ/С при внутрикожном тестировании БАД к пище «Патриния» ( х ± ; п=10)
Показатель ТОЛМ Пол Контроль БАД к пище «Патриния»
Правая лапа (не иммунизированная) Левая лапа (опытная) Правая лапа (не иммунизированная) Левая лапа (опытная)
Абсолютные значения, мл Самцы 0,062 ± 0,002 0,064 ± 0,002 3% (по сравнению с правой лапой) 0,059 ± 0,003 5% (по сравнению с контролем) 0,063 ± 0,002 2% (по сравнению с контролем) 7% (по сравнению с правой лапой)
Самки 0,060 ± 0,003 0,059 ± 0,002 2% (по сравнению с правой лапой) 0,060 ± 0,003 0% (по сравнению с контролем) 0,062 ± 0,003 5% (по сравнению с контролем) 3% (по сравнению с правой лапой)
Примечание: * - достоверных различий с контрольной группой животных не выявлено (р > 0,05).
Как показали исследования, внутри-кожная сенсибилизация мышей линии ВАЬВ/С патринией по изменению (разнице) в уровне жидкости при погружении опытной лапы существенно не отличалась от такового при погружении контрольной лапы (не иммунизированной) по абсолютному показателю ТОЛМ (7%; р>0,05 и 3%; р>0,05 у самцов и самок соответственно).
Результаты проведенного эксперимента на мышах линии ВАЬВ/С показали, что БАД к пище «Патриния» с учетом статистической значимости среднегрупповых показателей аллергологического тестирования (ТОЛМ) в опыте по сравнению с контролем по ^критерию Стьюдента, а также по частоте положительных тестов аллергодиагностики относится к IV классу аллергенной активности (слабым аллергенам) [9].
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
В работе впервые изучены токсикологические свойства биологически активной добавки к пище на основе патринии средней белорусской интродукции в виде
твердых желатиновых капсул. Результаты, полученные в остром, субхроническом и хроническом опыте на двух видах лабораторных животных обоего пола: мышах JCR и крысах Wistar при двух путях введения разрабатываемой БАД к пище - интрага-стральном и внутрибрюшинном, позволяют отнести её к относительно безвредным средствам (VI класс токсичности по классификации OECD), которое не вызывает токсических дегенеративных изменений лимфоидных и других важнейших органов, не проявляет местно-раздражающего, сенсибилизирующего и аллергизирующе-го действия.
Морфологические исследования внутренних органов крыс контрольной и экспериментальной группы, которая подвергалась воздействию максимальной дозы, не выявили различий гистологического строения.
Таким образом, БАД к пище «Патри-ния» в дозах, превышающих СТД (до 150 раз) (per os; однократно), не вызывает летальности у мышей ICR и крыс Wistar; при дозах 40, 400 и 800 мг/кг (per os; 2 мес.) не вызывает функциональных и морфоло-
гических нарушений органов и систем у крыс Wistar, не обладает местно-раздра-жающим и аллергизирующим действием.
Результаты изучения субхронической и хронической токсичности свидетельствовали об отсутствии местного и системного токсического действия при многократном интрагастральном введении.
SUMMARY
U.M. Nasek, D.I. Demid, E.U. Sanko-Schyslionоk, O.V. Vinnikova, P.T. Petrov
PRECLINICAL TOXICOLOGICAL STUDY OF BIOLOGICALLY ACTIVE
FOOD SUPPLEMENT «PATRINIA»
Preclinical toxicological study of safety of biologically active food supplement «Patrin-ia» were carried out (ТС BY 1001185129.1312014). The studied preparation has been obtained on the basis of fine-grain roots and rhizomes of Patrinia intermedia of Valeri-anoideae family of Belarus introduction. It does not cause lethality in male and female rats and mice at a single introduction both intragastric (per os) and intraperitoneal (i/p) at doses up to 5,0 g/kg (VIth OECD toxicity class), and it does not cause any pathological changes in organs and tissues of rodents including local irritant and allergenic effects.
Keywords: Patrinia intermedia, introduction, acute toxicity, sub-chronic and chronic toxicity, allergenicity, immunotoxicity, sensi-bilization.
ЛИТЕРАТУРА
1. Збуржинский, В.К. Исследования седативного действия валерианы / В.К. Збуржинский // Фармакология и токсикология. - 1964. - №3. - С. 305 - 309
2. Машковский, М.Д. Лекарственные средства / М.Д. Машковский. - Москва: Медицина, 1986. - Т.1. - 624 с.
3. Титок, В.В. Опыт интродукции Па-тринии средней (Patrinia intermedia) в Беларуси/ В.В. Титок, Л.В. Кухарева, И.М. Савич, И.Н. Тычина // Весщ НАН Беларуси. Сер. бiял. навук- 2013. № 4. - С.19 - 23.
4. Пат. 2189241 Российская Федерация. Средство «ПАТРИМИН», обладающее седативным, гипотензивным, антико-
агулянтным, антиагрегационным и гипо-липидемическим действием [текст] / Кол-хир В.К.; Воскобойникова И.В.; Тужилкин В В.; Быков В.А.; опубликован 20.09.2002.
5. Иванова, В.М. К вопросу о химическом составе подземных органов патринии средней и хроматографическом способе выделения ее сапонинов. / В.М. Иванова // Изучение и использование лекарственных растительных ресурсов СССР: труды Всесоюзной научной фармацевтической конференции. - Медицина, 1964. - С. 328 - 331.
6. Хорлин, А.Я. К вопросу о выявлении и изучении химического состава действующих веществ патринии средней. / А.Я. Хорлин, В.Н. Иванова // Аптечное дело. - 1963. - изд. 12, №6.
7. Кочетков, Н.К. Олигозиды - новый тип растительных гликозидов / Н.К. Кочетков, А.Я. Хорлин // Доклады АН СССР. -1963. Т. 150. - №6.
8. Бухаров, В.Г. О тритерпеновых гли-козидах Patrinia intermedia / В.Г. Бухаров, В.А. Талан, В.В. Карлин // Химия природных соединений. - 1967. - изд. 3-е. - №1.
9. Технический кодекс установившейся практики «Надлежащая лабораторная практика». Основные положения: ТКП 125-2008 (02040). - Введ. 01.05.08. -Минск, 2008. - 35 с.
10. Требования к постановке экспериментальных исследований для первичной токсикологической оценки и гигиенической регламентации веществ. Инструкция 1.1.11-12-35-2004: утв. Главным гос. санитарным врачом Республики Беларусь 14.12.2004: - Минск, 2004. - 44 с.
11. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая. - М.: Гриф и К, 2012. - С. 13 - 17, 25 - 43.
Адрес для корреспонденции:
220141, Республика Беларусь, г. Минск, ул. акад. Купревича, 5, кор. 2, ГНУ «Институт биоорганической химии Национальной академии наук Беларуси», тел. 8 (017) 263-62-72, е-mail: petr_petrov@tut.by, Петров П.Т.
Поступила 19.06.2014 г.
Рисунки к статье В.М. Насек, Д.И. Демид, Е.В. Санько-Счисленок, О.В. Винниковой, П.Т. Петрова «Доклиническое токсикологическое исследование биологически активной добавки к пище «Патриния»» (С. 74-80)
а - контрольная группа животных; б - первая подопытная группа животных; в - вторая подопытная группа животных; г - третья подопытная группа животных. Рисунок 1 - Слизистая желудка без признаков альтеративных, экссудативных и продуктивных изменений.
Окраска гематоксилином и эозином. Об. х 10
а - контрольная группа б - первая подопытная группа а - вторая подопытная группа б - третья подопытная группа
животных животных животных животных
Рисунок 2 - Слизистая тонкой кишки без признаков Рисунок 3 - Слизистая тонкой кишки без признаков
альтеративных, экссудативных и продуктивных альтеративных, экссудативных и продуктивных
изменений. Окраска гематоксилином и эозином. Об. х 10 изменений. Окраска гематоксилином и эозином. Об. х 10
а - контрольная группа животных; б - первая подопытная группа животных; в - вторая подопытная группа животных;
г - третья подопытная группа животных. Рисунок 4 - Слизистая двенадцатиперстной кишки без признаков альтеративных, экссудативных и продуктивных изменений. В подслизистой определяются бруннеровы железы. Окраска гематоксилином и эозином
а - контрольная группа животных; б - первая подопытная группа животных; в - вторая подопытная группа животных;
г - третья подопытная группа животных. Рисунок 5 - Складки слизистой толстой кишки. В выстилающем эпителии определяется большое количество
бокаловидных клеток. Окраска гематоксилином и эозином
а - контрольная группа животных; б - первая подопытная группа животных; в - вторая подопытная группа животных;
г - третья подопытная группа животных. Рисунок 6 - Печеночные дольки с центральными венами. Умеренно выраженное полнокровие синусоидов.
Окраска гематоксилином и эозином
